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de Ingeniera Qumica
Academia Mexicana de Investigacion y Docencia en Ingeniera Qumica, A.C.
ISSN 1665-2738
MIRAVALLES, PUEBLA
BACTERIOLOGICAL QUALITY
213 Derivation and application GOAT RAW
of the Stefan-Maxwell MILK PRODUCED IN MIRAVALLES,
equations
PUEBLA
(Desarrollo y aplicacin de las ecuaciones de Stefan-Maxwell)
R. Morales-Pablo1 , D.A. Avalos de la Cruz2 , G. Leyva-Ruelas3 y Ma. C. Ybarra-Moncada3
Stephen Whitaker
1
Depto. de Graduados e Investigacion en Alimentos, ENCB-IPN, Prolongacion de Carpio y Plan de Ayala S/N.
Col. Santo Tomas. CP, 11340, Mexico, D.F.
2 Biotecnologa / Biotechnology
Colegio de Postgraduados, Campus Cordoba. Carr. Federal Cordoba-Veracruz. Km 348. Congregacion Manuel
Leon 94946 Amatlan de los Reyes, Veracruz, Mexico, C.P. 94500.
3 245 Modelado de la biodegradacin en biorreactores de lodos de hidrocarburos totales del petrleo
Depto. de Ensenanza e Investigacion de Ing. Agroindustrial. Universidad Autonoma Chapingo. Km 38.5
intemperizados en Carretera Mexico-Texcoco. Chapingo, Mexico, C.P. 56230.
suelos y sedimentos
Recibido 22 de Junio 2011; Aceptado 13 de Septiembre 2011
(Biodegradation modeling of sludge bioreactors of total petroleum hydrocarbons weathering in soil
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sulfato de sodio con MUG (BD bioxon ). R Los hierro (Difco ) R para la identificacion bioqumica de
cultivos se incubaron a 44.5 C por 24-48 horas en Salmonella. Los cultivos inoculados se incubaron a 37
un incubador para coliformes (Precision
).
R El NMP C por 24 horas, despues de este tiempo, se revisaron
mL1 de celulas de E. coli se calculo en las tablas los tubos para establecer el resultado de estas pruebas.
correspondientes (NOM-112-SSA1-1994).
Adicionalmente, de los tubos positivos de caldo 3 Resultados y discusion
E.C., se sembraron placas con medio de CHROMagar
(BBLT M ) exclusivo para E. coli, con el proposito 3.1 Bacterias mesofilas aerobias (BMA)
de confirmar la morfologa colonial y microscopica
(Tincion de Gram) de este microorganismo. La prueba de Tukey ( = 0.05) mostro diferencias
significativas entre los efectos de los tratamientos,
considerando la variable BMA (Tabla 2). Los
2.8 Deteccion de Salmonella resultados muestran cuentas elevadas de estas
bacterias en las muestras de leche de cabra.
La deteccion de Salmonella se realizo de acuerdo a Las normas oficiales mexicanas e internacionales
la metodologa planteada en la NOM-243-SSA1-2010. no contemplan referencia alguna sobre lmites
Esta metodologa se describe a continuacion: microbiologicos para leche de cabra, sin embargo,
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para efectos practicos, estos resultados se comparan de la leche de cabra de los productores que manejan
con lo especificado por normas establecidas en el ganado estabulado fuera mejor que la leche de
la Comunidad Economica Europea (92/46/EEC) y aquellos cuyo manejo es de pastoreo. Sin embargo,
la NMX-F-COFOCALEC-2007 para leche cruda, las altas cuentas de BMA en leche cruda de los
encontrando que todas las muestras de leche de cabra primeros productores, pueden explicarse porque el
analizadas, no excedieron los lmites microbiologicos sistema de manejo de cabras estabulado es de reciente
(5 104 UFC mL1 y 1 105 UFC mL1 , introduccion en la region de estudio, observandose un
respectivamente). desconocimiento de dicho sistema por parte de los
productores, aunado a un elevado numero de cabezas
Tabla 2. Promedio de bacterias mesofilas en el hato, que dificulta la implementacion apropiada
aerobias de los tratamientos. de BPH. Al garantizar que en la parte de produccion de
Agrupamiento Media de BMA Tratamiento la materia prima las BPH esten bien implementadas,
de Dunn (UFC mL1 ) asegura que los productos derivados como el queso,
cumplan con las normas oficiales a pesar de que se
a 662.2 4 elaboran con leche sin pasteurizar.
b a 651.8 10
El promedio de BMA mL1 encontrado en los
b a 589.4 6
tratamientos evaluados en esta investigacion, esta muy
b a 552.8 7
por debajo a lo reportado por Roman y col. (2003), de
b a c 517.8 8
3.6 107 UFC mL1 para leche almacenada en fro.
b a c 516.0 2
De la misma manera, en su estudio de caracterizacion
b c 476.0 9
fisicoqumica y microbiologica de la leche de cabra,
d c 363.8 1
Ludena y col. (2006) reportaron 3.8 104 UFC mL1
d 281.2 5
de BMA. Martnez y col. (2002) reportaron que el
d 247.2 3
promedio de BMA en todas las muestras analizadas
UFC mL1 : unidades formadoras de colonias por fue de 656 UFC mL1 en un grupo de rebanos caprinos
mililitro. Valores con la misma letra no son lecheros en Valencia, encontrando que estos relativos
significativamente diferentes Tukey = 0.05.
bajos recuentos tambien podra deberse a que en las
citadas explotaciones existe una elevada proporcion de
Las muestras de leche cruda de cabra de los animales de primer parto (alrededor del 30-35%). De
tratamientos 1, 3, y 5 (grupo 1), presentaron menor acuerdo a las investigaciones antes citadas, se observa
cantidad de BMA que las muestras de leche de los que existe una diferencia con respecto a los valores
tratamientos; 2, 4, 6, 7, 8, 9 y 10 (grupo 2), donde el obtenidos en este estudio. Martnez y col. (2002)
promedio de BMA para leche cruda del primer grupo atribuyen un recuento elevado de BMA a factores
fue de 297.3 UFC mL1 y para el segundo grupo fue como: la epoca de muestreo, edad, raza, sistema de
de 566.5 UFC mL1 . El grupo 1 de productores de manejo y numero de cabras por productor. Estos
leche se caracterizo porque el sistema de explotacion mismos autores mencionan que los bajos recuentos de
de ganado caprino fue de pastoreo y en promedio BMA podran deberse a que en la fase de produccion
tenan menor numero de cabezas. La mayor parte de leche, un alto numero de cabras estan al final de la
de los tratamientos del grupo 2, a excepcion del lactacion, que influye en las bajas cuentas de BMA.
2 y 4, manejaba el ganado estabulado, con mayor
numero de cabezas. Lo anterior, podra explicar los 3.2 Bacterias Coliformes Totales (BCT)
resultados reportados para BMA, ya que productores
que manejan el ganado en pastoreo y con menor La prueba no parametrica de Kruskal-Wallis mostro
numero de cabras, tienen mejores medidas de higiene diferencias estadsticas significativas entre los efectos
durante la ordena y manipulacion de la leche, tales de los tratamientos para la variable BCT ( =
como: limpieza de utensilios y equipo de ordena, 0.05). El 50% de las muestras (tratamientos del 1
lavado de las ubres antes de la ordena, limpieza del al 5) cumplio con la NOM-243-SSA1-2010 para esta
area de ordena, entre otras, no obstante, esta forma variable. Las muestras de leche del tratamiento 8,
de manejo no todos los productores la practican, presentaron el mayor contenido de BCT con 210 NMP
requiriendose mayor comunicacion y capacitacion mL1 (Tabla 3). El productor que corresponde a
para difundir la importancia de las BPM y BPH de la este tratamiento maneja un sistema estabulado y posee
leche de cabra. Se esperara que la calidad sanitaria el mayor numero de cabras. Sin embargo, se ha
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establecido que la presencia de un numero elevado los cuales fueron elaborados con leche de vaca
de BCT constituye una evidencia de inadecuado sin pasteurizar, indicando que la presencia de estos
manejo higienico-sanitario de la leche, ademas de ser microorganismos patogenos fue causada por carencia
indicativo de la probable presencia de cepas patogenas de BPH en las instalaciones, equipo, personal e
(Higgins y col., 2007). No obstante, Silanikove y col. insumos.
(2010), mencionan que recuentos elevados de BMA, Tabla 4. Promedio por tratamiento de bacterias
BCT y bacterias psicrotrofas revelan que la leche coliformes fecales
puede ser una fuente de transmision de enfermedades
Tratamiento Promedio (NMP mL1 )
alimenticias. Estos autores recomiendan que mediante
el establecimiento de un programa de prevencion 1 0*
eficaz que determine BMA y BCT posterior a la 2 0*
ordena, puede disminuirse el riesgo de contraer 3 0*
enfermedades al consumir productos derivados de la 4 0*
leche de cabra. 5 0*
Tabla 3. Promedio por tratamiento de bacterias 6 9
coliformes totales 7 24
8 29
Tratamiento Promedio (NMP mL1 )
9 12
1 3* 10 5
2 4* NMP mL1 : numero mas probable por mililitro.
3 3* *Tratamientos estadsticamente diferentes al
4 3* tratamiento 8, Dunn = 0.05.
5 3*
6 54 Las muestras de leche de cabra con contaminacion
7 62 fecal se caracterizaron por tener un sistema de
8 210 explotacion estabulado as como rebanos numerosos
9 50 (40 y 120 cabras), comparado con el promedio de
10 12 cabezas en las explotaciones de la comunidad. Al
NMP mL1 : numero mas probable por mililitro. respecto, Garca y col. (2009), al determinar la
*Tratamientos estadsticamente diferentes al calidad bacteriologica de la leche de cabra mencionan
tratamiento 8, Dunn = 0.05. que durante la identificacion de BCF observaron
que Escherichia coli fue la bacteria predominante
3.3 Bacterias Coliformes Fecales (BCF) (40%). La mayora de las cepas de E. coli son
inofensivas y viven en el intestino de animales y
Con relacion a la variable coliformes fecales en humanos sanos (Higgins y col., 2007), no obstante,
las muestras de leche cruda, el analisis estadstico algunas cepas producen infecciones severas, por ello,
mostro diferencias significativas entre los efectos el Centro para Prevencion y Control de Enfermedades
de tratamientos ( = 0.05), como se muestra en reconocen a las enfermedades producidas por E. coli
la (Tabla 4). El 50% de las muestras de leche como emergentes transmitidas por algunos alimentos
cruda de cabra analizadas no cumplieron con la (Allerberger y col., 2001). As mismo, Araya y col.
norma (NOM-243-SSA1-2010) para esta variable. Las (2008), en su estudio de evaluacion bacteriologica de
muestras sobrepasaron los lmites microbiologicos de la leche y queso de cabra, reportan la presencia de BCF
la norma correspondiente a productores del grupo 2, mayores a 1 105 UFC mL1 para una muestra de
coincidiendo con el comportamiento descrito antes leche cruda, indicando que solo el 24% de las muestras
para las variables de BMA y BCT. La NOM-243- fue negativo, valores que son superiores a lo reportado
SSA1-2010 establece el lmite maximo de BCF en la normativa establecida por el Reglamento
en leche cruda utilizada como materia prima para Centroamericano de Criterios Microbiologicos de los
la elaboracion de quesos 3 NMP mL1 , lmite Alimentos Procesados, que establece un valor maximo
microbiologico que fue superado por las muestras de permitido para coliformes totales de 5.0102 UFC g1
los productores del grupo 2 en esta investigacion. y de 1.0 102 UFC g1 para coliformes fecales. En
Romero-Castillo y col. (2009) reportaron recuentos contraste Monsalve y Gonzalez (2005), encontraron
elevados de BCF en el 80% de sus tratamientos, valores de 1.2103 UFC mL1 de BCF en leche cruda,
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senalando que esta carga microbiana se debio a que no y ausencia de BCF. En estas explotaciones se tenan
existieron las condiciones higienicas necesarias en la pocas deficiencias en la salud e higiene de las cabras, 2
recoleccion de las muestras. Sin embargo, diversos regulares practicas de manejo y buen control de las
informes mencionan que los brotes de intoxicacion enfermedades transmisibles al hombre. La letra (B)
relacionados con el consumo de leche cruda de cabra, formo el conglomerado 2 (similitud de 99.76%) con
37 Tabla 3. Promedio por tratamiento de bacterias coliformes totales.
son provocados por agentes patogenos, senalando a E. calidad microbiologica media: un recuento -1}$ maximo
Tratamiento Promedio (NMP mL$^{ )
coli como el principal (Espie y col., 2006) incluyendo de 540 UFC1 mL1 para BMA, de3 3* a 7 NMP mL1
a BCF que producen la toxina Shiga (Cortes y col., para BCT y 2ausencia de BCF, presentando 4 un sistema
2005; Muehlherr y col., 2003; Picozzi y col., 2005), de manejo estabulado
3 y el mayor numero 3* de cabras de
ademas de Salmonella (Desenclos y col. ,1996). 4
todos los tratamientos. Se observo 3que * los productores
con un sistema 5 de explotacion3 estabulado * y un
numero de cabras 6 elevado, las BPH 54 eran deficientes,
3.4 Salmonella principalmente 7 al momento de la ordena. 62 Ademas, la
8
explotacion de caprinos en establos es una actividad 210
Los resultados mostraron la ausencia de Salmonella
en todas las muestras de leche cruda de cabra y al reciente en 9la region. Los conglomerados 50
3 y 4
10 12
comprobar la morfologa celular y38la respuesta a la (similitudNMP demL$^{
71.02 -1}$ y 69.48%, respectivamente) se
: nmero ms probable por mililitro
39 caractersticas
tincion de Gram, se encontro que estas * Tratamientos
conformaron estadsticamente
por lasdiferentes
letras al(D, tratamiento
F, G,8, IDunny J$\alpha
para= 0.05$.
el
40 conglomerado 3 y H para el conglomerado 4). Estos
no correspondieron para este microorganismo
41 Tabla 4. Promedio
dos por tratamiento demostraron
conglomerados bacterias coliformes una menor fecales.
calidad
patogeno. Adicionalmente, a los medios comunes Tratamiento Promedio (NMP mL$^{-1}$)
agar sulfito bismuto (Difco
),R xld (Difco
), R enterico microbiologica (recuentos que oscilaron de 210 a 870
1 0*
hektoen (Difco
), para el aislamiento de Salmonella, UFC mL1 para BMA, de 3 a 240 NMP mL1 para
R 2 0 *
se probo el crecimiento de esta bacteria en medio BCT y de3 3 a 43 NMP mL1 para 0 *BCF). El sistema
de CHROMagar (BBLT M ), donde las caractersticas de manejo4 que predomino en estos0 conglomerados * fue
coloniales no correspondieron a Salmonella. el estabulado 5 y en promedio un 0elevado * numero de
La NOM-243-SSA1-2010, indica que las muestras 6
cabras. Desafortunadamente, en la 9 mayora de estas
no deben tener Salmonella para leche pasteurizada explotaciones,7 se carece de adecuados 24 esquemas de
y deshidratada. Las muestras evaluadas en este alimentacion,8 se observaron deficiencias 29 en la salud e
estudio no presentaron este microorganismo patogeno. higiene de9 las cabras, fallas en las 12 practicas de manejo,
falta de NMP 10
control de las enfermedades 5 transmisibles
Resultados similares fueron reportados42 por Araya y mL$^{-1}$: nmero ms probable por mililitro
col. (2008), en su estudio realizado43en leche y queso al hombre
* Tratamientos y deficiente
estadsticamente capacitacion
diferentes al tratamientodel personal
8, Dunn $\alpha =del
0.05$.
de cabra comercializado en San 44 Jose, Costa Rica. establo. Por lo tanto, estas explotaciones mostraron
45 Listado de figuras. los recuentos mas elevados de BMA, BCT y BCF.
Adicionalmente, Morgan y col. (2003), al determinar
46
las caractersticas microbiologicas 47
y bioqumicas
Fig. 1. de
leche de cabra, reportan una calidad microbiologica
Dendrograma
baja, sin embargo, indican la ausencia de Salmonella Enlace completo, Distancia de Pearson cuadrada
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deben encaminar sus esfuerzos al mejoramiento Cortes, C., De la Fuente, R., Blanco, J., Blanco, M.,
continuo de la calidad e inocuidad de la leche cruda Blanco, J.E., Dhabi, G., Mora, A., Justel, P.,
de cabra. Justel, P., Contreras, A., Sanchez, A., Corrales,
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Todas las muestras de leche cruda de cabra, Veterinary Microbiology 110, 67-76.
cumplieron con la norma 92/46/EEC y NMX-F-
COFOCALEC-2007, en lo que se refiere al numero Desenclos, J.C., Bouvet, P., Benz-Lemoine, E.,
de BMA, sin embargo, el numero de BCT y BCF Grimont, F., Desqueyroux, H., Rebiere, I.
excedieron ampliamente los lmites microbiologicos y Grimont, P.A. (1996). Large outbreak
establecidos en la norma mexicana (NOM-243- of Salmonella enterica serotype paratyphi
SSA1-2010). Estos resultados muestran deficiencias B infection caused by a goats milk
sanitarias en el proceso de ordena y manejo de la leche cheese, France, 1993: a case finding and
de cabra. Por otro lado, no se detecto la presencia de epidemiological study. British Medical Journal
Salmonella en la totalidad de las muestras. 312, 91-94.
Se observaron diferencias en la calidad sanitaria
de la leche, en funcion al numero de cabras de Ekici, K., Bozkurt, H. y Isleyci, O. (2004). Isolation
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