Magister Cromatografia 2013

Analisis Instrumental 1 Universidad de Santiago de Chile
CROMATOGRAFIA
Dr. Rodrigo Segura S.

QUIIMICA ANALITICA
1
Universidad de Santiago de Chile
1.1 DEFINICION
(IUPAC) La Cromatografaes un mtodo fsico de separacin
en el que los componentes de una muestra a separar se
distribuyen entre dos fases segn sus afinidades, una de las
fases es un lecho estacionario de gran superficie (fase
estacionaria) y la otra es un fluido en movimiento (fase
mvil) que atraviesa el lecho estacionario.
Analisis Instrumental 1
2
3
Por qu se llama Cromatografa

KHROMATOS GRAPHOS
(Color) (Escritura)
MIGUEL TSWEET (BOTANICO RUSO-1906). REALIZO LA PRIMERA

CROMATOGRAFA EN COLUMNA.
Eter de Eter de
Eter de
petrleo petrleo
petrleo
Mezcla de
pigmentos
vegetales
CaSO4
Inicios de la Cromatografa
Es una tcnica de separacin basada en la diferente

velocidad con que se mueven los solutos a travs de un medio estacionario
mediante el flujo en un disolvente llamado eluente o fase mvil
F. F. Runge qumico alemn, describi el proceso de

separacin que actualmente se conoce como
cromatografa en papel.
El ruso Mijail Tswett corresponde el haber establecido las ventajas de la

cromatografa y la adopcin parcial de la terminologa, tambin fue
quien sent las bases de los principales procedimientos experimentales
relativos a sta tcnica.

Mtodos:
MTODOS CROMATOGRFICOS
SIMPLES INSTRUMENTALES
PAPEL PLACA COLUMNA GASES LQUIDOS

ELEMENTOS BSICOS DE LA
CROMATOGRAFA
Fase estacionaria Fija

Slida: Slica gel, almina, etc.
Lquida: Solventes polares, no polares, y mixtos.
Fase mvil Se desplaza

Lquida: Solventes polares, no polares y mixtos.
Gaseosa: Gas inerte (Nitrgeno, helio, etc. )
CLASIFICACION DE LA
CROMATOGRAFIA
Fase mvil:
Gas Cromatografa de Gases
Liquido Cromatografa Liquida
Fluido supercrtico SFC
Fase estacionaria
Columna Relleno
Capilar (CG)
Soporte Plano Papel

Capa Fina
8
TIPOS DE CROMATOGRAFA
CROMATOGRAFIA
Plana Columna
Liquido Gas Fluido Supercrtico
Particin Gas - Liquido
Adsorcin Gas - Slido
Intercambio inico
Exclusin
9

10
Clasificacin de la cromatografa
Esta tcnica analtica se clasifica de acuerdo a su

mecanismo de separacin en cromatografa de:
Reparto o particin
Adsorcin
Exclusin.
Intercambio inico
Cromatografa de afinidad
PARTICIN O REPARTO:
El soluto se equilibra entre el lquido de la fase estacionaria y la fase
mvil, por diferencia de solubilidad. Hasta llegar a un equilibrio
El soluto se disuelve en la fase

lquida con que est recubierta el
soporte slido
Fase estacionaria: Lquido sostenido

o adsorbido en un slido inerte.
Fase mvil: Lquido (CLL) o Gas (CLG)
Nota: Los lquidos de las 2 fases deben ser

inmiscibles entre s.
12
ADSORCIN
Usa una fase estacionaria slida y una fase mvil lquida o gaseosa.
CROMATOGRAFA DE ADSORCIN
Fase estacionaria: slido. Fase mvil: Lquido ( CSL); Gas (CSG)
El soluto se adsorbe en la superficie de las partculas slidas de la fase

estacionaria. Es un fenmeno superficial, aumentado con la formacin de
puentes de hidrgeno.
13
14
INTERCAMBIO INICO:
Los aniones o cationes se unen covalentemente a la fase estacionaria
slida.
En este tipo de cromatografa existen

aniones como: -SO3- ,o cationes como: -
N(CH3)3
Iones covalentemente unidos a la fase
estacionaria slida, que ordinariamente es
una resina.
Los iones en disolucin de carga opuesta

son atrados a la fase estacionaria por
fuerzas electrostticas.
La fase mvil es un lquido.
15
EXCLUSIN MOLECULAR, FILTRACIN O PERMEACIN
EN GEL:
Separa molculas por su tamao, las molculas grandes pasan ms rpido que
las pequeas, no hay una interaccin entre la fase estacionaria y el soluto.
El tiempo de elusin es proporcional al

peso molecular de los mismos, lo que
provoca ser no muy usada con compuestos
de alto peso molecular.
Los poros pequeos dejan pasar a las

molculas grandes y las molculas pequeas
tardan ms tiempo en pasar a travs de la

columna
Se emplean geles no inicos de partculas
uniformes y porosos, como fase estacionaria.
16
CROMATOGRAFA DE AFINIDAD
Es la ms selectiva, emplea interacciones de molculas de un soluto en

particular y una segunda molcula que est unida covalentemente
(inmovilizada) a la fase estacionaria.
La molcula inmovilizada podra ser un anticuerpo unido a una

protena determinada.
Solo la protena que reacciona con el anticuerpo se fija en la columna.

Cromatografa de Afinidad
Todas las dems molculas se eliminan

U n a c l a s e
especfica de
molculas, se une a
la fase estacionaria
DISOLVENTES COMNMENTE UTILIZADOS
Pentano
Ciclohexano
Dioxano
Benceno
ter etlico POLARIDAD
Cloroformo
Cloruro de metileno
Acetona
Etanol
Metanol
Agua
VENTAJAS DE LA CROMATOGRAFIA
Anlisis rpido (unos minutos)
Eficiente, presenta una alta resolucin
Sensible, fcilmente detectable ppm y ppb
No destructiva , hace posible acoplamiento on line Ej:
Espectrofotmetro de masas.
Alta exactitud en anlisis cuantiaos, RSD de 1-5%
Requiere pequeas cantidad de muestra, tpicamente L
Altamente confiable y simple
No es caro
20

21
1.7 USOS DE LA CROMATOGRAFA DE GASES
Mtodos analticos
Mtodos de investigacin
Mtodos preparativos
22
1ASPECTOS INSTRUMENTALES
Elucin: Es un proceso en el cual los
solutos son arrastrados a travs de una
fase estacionaria por el movimiento de
una fase mvil.
La fase mvil que sale de la columna se
conoce como el eluato.
Eluyente: Es un disolvente que se usa
para transportar los componentes de una
mezcla a travs de una fase estacionaria.
Cromatograma: Es una grafica de

alguna funcin de la concentracin de un
soluto frente al tiempo de elucin o
volumen de elucin
23
Tiempo muerto (tm): Es el tiempo que una especie no retenida tarda en pasar a
travs de una columna cromatogrfica.
Volumen de retencin (Vr): Es el volumen de fase mvil necesaria para eluir un
soluto determinado de la columna.
Tiempo de retencin (tr): es el tiempo transcurrido entre la inyeccin de una muestra y
la aparicin de un pico de soluto en el detector de la columna cromatogrfica.

Tiempo de retencin ajustado de un soluto (t`r): es la diferencia entre el tiempo que
tarda un soluto y un disolvente no retenido.
Anchura de base: Anchura de la banda cromatogrficas de un soluto

medida sobre la lnea base (w)
Dr. Rodrigo Segura S. 24

Resolucin cromatogrfica
Resolucin: es una medida cuantitativa del grado de separacin entre
dos picos cromatogrficos A y B
tr , B tr , A
2tr
R= =
0.5(wB + wA ) wB + wA
25
Factor de capacidad
El factor de capacidad Medida con que tr - tm
Factor de capacidad = k =
la fase estacionaria retiene a un soluto tm
dado
Retencin relativa , coeficiente de retencin o factor de

selectividad ().
Es el cociente de los factores de capacidad de dos solutos q muestran
la selectividad de la columna para uno de ellos.
26
Ejemplo
Se inyecta en un cromatgrafo de gases una mezcla de benceno, tolueno y metano.
El metano dio un pico muy agudo a los 42 s, mientras que el benceno tarda 241 s en
aparecer y el tolueno 333 s. Hallar el tiempo de retencin ajustado y el factor de
capacidad de cada soluto y la retencin relativa.
Benceno : t r = t r t m = 251 42 = 209s

Tolueno : t r = t r t m = 333 42 = 291s
los factores de capacidad son :
t t 251 42
Benceno : k = r m = = 5 .0
tm 42
t r t m 333 42
Tolueno : k = = = 6.9
tm 42
La retencin relativa :
t (tolueno) 333 42
= r = = 1.39
t r (benceno) 251 42

27
Ejemplo
En un anlisis cromatogrfico de cido de bajo peso molecular, el cido
butrico eluye con un tiempo de retencin de 7.63 min. El tiempo muerto
de la columna es de 0.31 min. El tiempo de retencin del acido isobutrico
es 5.98 min. Calcular el factor de capacidad de los cidos isobutrico y
butrico y factor de selectividad,
t r t m 7.63 min . 0.31 min

k `= = = 23.6
tm 0.31 min
t r t m 5.98 min . 0.31 min

k `= = 18.3
=
tm 0.31 min
28
Ejemplo
En un anlisis cromatogrfico de cidos de bajo peso molecular, el cido

butrico eluye con un tiempo de retencin de 7.63 min. El tiempo muerto
de la columna es de 0.31 min. Calcular el factor de capacidad de los cidos
isobutrico y butrico.
t r t m 7.63 min . 0.31 min

k `= = = 18.3
tm 0.31 min
29
Selectividad
La selectividad relativa de una columna cromatogrfica para un par de
solutos viene dado:
k `B t r . A t m
= =
k `A t r . B t m
Ejemplo: En el mismo anlisis cromatogrfico de cidos de bajo peso molecular, el

tiempo de retencin de cido isobutrico es de 5.98 min. Cul es el factor de
selectividad para cido isobutrico y butrico.
30
Teoras
Platos Tericos (Martn y Synge).
Cintica (Van Deemter, Zuiderweg, Klinkenberg y Sjenitzer)

31
Teora de los platos tericos

Plato terico: Medio cuantitativo para evaluar
la eficacia de una columna y que consiste en
tratar la columna como si estuviera compuesta
de pequeas zonas o platos las que tienen
lugar el reparto entre FM y FE
Dr. Rodrigo Segura S. 32

Ecuacin de van Deemter
Indica como influye la columna y la velocidad de flujo en la altura del
plato.
B
H = A + + Cu x Ec. de Van Deemter.
ux
u x esla velocidad lineal de flujo
33
Caminos mltiples.
Termino A
34
Difusin longitudinal B/ux
Al aumentar la velocidad
menor tiempo de
permanencia en la columna
menor tiempo para la
difusin
Es mayor en cromatografa
de gases que en
cromatografa liquida, ya que
los coeficiente de difusin
son mayores en gases
35
Transferencia de masa en FE (Csu)
Transferencia de masa Contribucin al ensachamiento de la banda debido
al tiempo necesario para que un soluto se desplace desde las FM y FE a la
interfase entre las dos fases.
Htransferencia de masa= Cux= (Cs+Cm)ux
2k d 2
transferencia de masa en FE Cs =
3(k + 1) 2 Ds
1 + 6k + 11k 2 r 2
transferencia de masa en FM Cm =
24(k + 1) 2 Dm
Donde k` es el factor de capacidad , d espesor de FE y Ds coeficiente de difusin en FE

Al disminuir el grosor de FE (d) disminuye la altura de plato debido a la transferencia de

masa, y aumenta la eficacia, debido a que el soluto puede difundir mas rpidamente desde
la FE a FM .
Al disminuir el radio de la columna (r) se reduce la altura del plato por que disminuye la
distancia que debe recorrer el soluto por difusin hasta alcanzar la FE
H disminuye con el aumento de la temperatura, por que aumenta el coeficiente de
difusin del soluto en FE
36
II SISTEMA CROMATOGRAFICOS
La instrumentacin en GC ha estado continuamente evolucionando desde su introduccin en 1954.. Los componentes

basicos de un cromatografo de gases seran discutido en forma individual.: Estos son (1) gas portador o carrier; (2)
control de flujo (3) muestreo inteccion de muetra; (4)columnas ;Control de temperatura (horno) detector analisis
37
HP
VARIAN
AGILENT
SHIMAZU
CARLOS ERBA
PERKIN ELMER
38
2.1.2 GAS DE ARRASTRE (GAS CARRIER)
Su funcin es transportar los componentes voltiles de la muestra a travs de la

columna.
Normalmente se utiliza He o N, tambin Ar, H:
Debe ser inerte, de alta pureza, y no reaccionar ni con la muestra ni

con la FE
Debe ser barato

Debe ser compatible con el detector, es decir, debe permitir una
respuesta adecuada del mismo
39
1.- El gas de acarreo o portador o fase mvil, es el que transporta a

los compuestos a travs de la columna.
40

PUREZA
El gas Carrier debe ser de alta pureza (>99%), impurezas como oxigeno
y agua pueden atacar qumicamente la fase liquida en la columna y
destruirla.
Trazas de agua pueden adsorber otros contaminares y producir un alto

ruido en el detector o producir picos fantasmas.
Altas concentraciones de hidrocarburos en el gas causa un ruido alto en

el detector
Debe ser qumicamente inerte, puro (>99%), seco y se aconseja colocar un

filtro de carbn activo y una trampa para humedad antes de la entrada del
gas al instrumento.
41
Cilindro de Helio (49 litros) a (2400 psi)

El uso de gases de alta pureza es de un alto costo.

La practica mas comn en los laboratorios es
comprar gases de grado High purity.
42
Universidad de Santiago de Chile 2.1.2 GAS DE ARRASTRE (GAS CARRIER)
El agua e hidrocarburos pueden ser fcilmente removidos colocando un
filtro con tamiz molecular de 5 A entre el cilindro e instrumento. (El filtro
puede ser regenerado calentando por 3 horas a 300 C)
La remocin de oxigeno es mas difcil de remover, requiere de filtros

especiales como BTS (BASF), Ludwisgshaven am Rhein, Ox isorb from
Supelco o Do w Gas Purifier de Alltech.
43
CONTROL DE FLUJO
El control de flujo del gas portador es esencial para la

eficiencia de la columna y para el anlisis cuantitativo.
La eficiencia de la columna es dependiente de la
velocidad lineal del gas , la cual es determinada
variando la velocidad de flujo hasta que se alcanza al
numero mximo de platos tericos.
En anlisis cuantitativos , es esencial mantener constante
y reproducible un velocidad de flujo para que los

tiempos de retencin sean reproducibles.
44
Control de flujo
El primer punto de control de flujo corresponde al manmetro

del cilindro : reduce presin (2500 a 20-60 psi). Los cuales
pueden incluir una vlvula de seguridad y un filtro que retiene
el material particulado.
Se recomienda la conexiones de acero inoxidable.
45
Medicin de flujo:
v
Velocidad lineal de flujo = u =
tM
v = volumn de la columna (mL)
t M = Tiempo
46
Universidad de Santiago de Chile Muestras gaseosas
Muestreo de gases Muestras lquidas
Muestras solidas.
2.1.2 Sistema de inyeccin de muestra

La muestras que se pueden inyectar en GC incluyen gases, lquidos, y slidos
deben ser rpidamente y cuantitativamente introducidos en el gas portador.
Idealmente , la muestra es instantneamente introducida dentro de la columna. En

la practica esto es imposible.
Ej 1 L de benceno, vaporizando a 600 l (vapor). En el caso de una columna
capilar (1mL/min) , requiere de 36 s en ser introducida en la columna.
El muestreo y tamao de muestra es critico en proceso cromatografico. 47
JERINGAS
48
Inyectores
En el puerto de inyeccin se lleva a cabo la

introduccin de la muestra
49
Sistema de inyeccin
El modo estndar es la inyeccin directa,

la muestra es inyectada con una jeringa a
travs de un septum de goma a un
alineador de vidrio (lainner) donde es
vaporizada y transportada por el gas al
interior de la columna.
El bloque de inyeccin, se mantiene a
una temperatura tal que permita convertir
prcticamente de forma instantnea la

muestra lquida en un tapn de vapor.
Existen jeringas especiales para
muestras gaseosas. Tambin se puede
emplear un lazo o bucle para incorporar
las muestras gaseosas al flujo de gas
portador
50
SEPTA
Molded Thermogreen LB-2

Pyrosep
Se recomienda cambiar septa despues de 100 inyecciones

51
Inyector { linner }
Shimadzu, Split/Splitless
PerkinElmer, On-Column
PerkinElmer, Split/Splitless
52
Inyeccin de muestra (con y sin divisin. Split)
Split Splitless
Modo con divisin para columnas capilares

Modo sin divisin para columnas empacadas
Inyeccin sobre la columna
On-column
Se utiliza bsicamente para aquellos solutos que son

termolbiles y para los que tienen puntos de ebullicin altos.
SISTEMA DE INYECCIN
Para el anlisis de compuestos

orgnicos voltiles en muestras
slidas y lquidas, se han
desarrollado algunas tcnicas
auxiliares:
Espacio de cabeza (Head space)
Purga y trampa (Purge and trap)
55
PURGA Y TRAMPA (PURGE AND TRAP)
Es aplicable solo a muestras lquidas.

Consiste en la continua renovacin del
gas en equilibrio con la muestra, con lo
que se consigue el desplazamiento
dinmico de los compuestos voltiles de
la muestra lquida a la fase gaseosa.
Los vapores se arrastran a una trampa
donde quedan retenidos y se van
concentrando.
Finalizado el proceso se calienta la

trampa y se arrastran los vapores al
1) Gas portador interior del cromatgrafo.
trampa 2) Gas portador trampa A la columna
T baja T alta
T T 56
ESPACIO DE CABEZA (HEAD SPACE)

Se analiza la fase de vapor en
equilibrio termodinmico con la
muestra en un sistema
cerrado.
Para ello se procura un
equilibrio estable, mediante el
control de la temperatura del
vial que contiene la muestra.
Posteriormente, se arrastra la
fase vapor al interior del

cromatgrafo.
T equilibrio Gas portador A la columna
57
PREPARACIN DE MUESTRAS
AUTO SAMPLER
59
COLUMNAS CROMATOGRFICAS
Columnas capilares Columnas

Empacadas
60
Columnas tubulares abiertas
Columnas tubulares abiertas

Al disminuir el grosor de la FE aumenta la resolucin, disminuye tiempo de

retencin y tambin disminuye la capacidad de carga
Polietilenglicol
Polidimetilsiloxano
Fases estacionarias
2.1.4 Zonas Temperaturas

Inyeccin on-port
El puerto de inyeccin debe tener un temperatura para
que la muestra rpidamente pase a la fase gaseosa.
Debe ser menor que la temperatura de descomposicin
o evitando algn cambio qumico.
Siempre se recomienda una temperatura de 50 C por
sobre la temperatura de ebullicin de la muestra.
Si el tiempo de retencin, altura de pico, rea de pico o
forma del pico cambia drsticamente, la temperatura

puede ser muy alta o podra estar ocurriendo la
descomposicin o reaccionar.
67
Temperatura de la columna.
La temperatura de la columna debe ser mayor que la
temperatura de los componentes de la muestra que
pasan a un velocidad razonable.
No necesita ser mayor que la temperatura de
ebullicin, solo que este a una temperatura en que
presin vapor sea considerable.
A altas temperaturas los tiempos de retencin
disminuyen
Isotrmico o temperatura programada (gradiente de temperatura)
Una muestra de hidrocarburos a 75, 110 y 130 C.

A 75 C la presin vapor de los componentes de la
muestra son bajos y se mueven lentamente en la
columna. Los dos ismeros de octanos (C8) tienen
buena resolucin. A altas temperaturas el tiempo
de retencin decrece. El tiempo de retencin del
C12 a 110 C es de 8 min y a 130 C el anlisis
completo demora 4 min. pero la resolucin
decrece.
68
TEMPERATURA DEL DETECTOR
DEPENDE DEL DETECTOR EMPLEADO.

Las conexiones (fitting) entre la columna y el detector deben esta a un
temperatura adecuada para evitar la condensacin de la muestra o fase
liquida.
El detector de conductividad la temperatura debe ser controlada en

0.1 C o en un factor menor para obtener una lnea base estable y un

mximo de detectabilidad.
En detectores de ionizacin T >125 C
69
SISTEMAS DE DETECCIN
Caractersticas ideales de un detector para Cromatografa de Gases:

Sensibilidad alta y estable; tpicamente 10-8 g soluto/s
Bajo nivel de ruido
Respuesta lineal en un amplio rango dinmico
Tiempo de respuesta corto
Buena respuesta para toda clase de compuestos
orgnicos
Insensibilidad a las variaciones del flujo y la temperatura
Estabilidad y robustez
Simplicidad en su operacin
Identificacin de compuestos positiva
Tcnica no destructiva
Pequeo volumen en prevencin del mezclado de
componentes
70
Detector de Conductividad trmica, TCD
Utiliza un filamento caliente colocado en

el flujo de gas emergente.
La cantidad de calor por conduccin que

pierde el filamento hacia las paredes del
detector depende de la conductividad
trmica de la fase gaseosa.
Es til para determinar la presencia

incluso de pequeas cantidades de

materiales orgnicos que producen una
reduccin relativamente grande en la
conductividad trmica del eluyente de la
columna.
71
Detector de Conductividad trmica, TCD
Utilizado particularmente con columnas empacadas, detecta H2O, CO,

CO2 e H2. Mide la conductividad trmica de un analito en un gas
acarreador.
La velocidad de prdida de calor de un cuerpo caliente hacia un cuerpo
ms fro es proporcional a la conductividad trmica del gas que
separa estos cuerpos. 72
Detector de Ionizacin de Flama (FID)

Consiste de una llama de hidrgeno Aire
y una placa colectora.
El efluente de la columna pasa a travs

de la llama, que ioniza las molculas
orgnicas. Los iones se recogen en un
electrodo de polarizacin negativa y
producen una seal elctrica.
El FID es extremadamente sensible y es el

detector ms ampliamente utilizado, su

desventaja es que destruye la muestra.
Empleado para hidrocarburos, poco sensible a compuestos muy oxidados
73
Detector de Azufre-Fsforo, FPD
Fotomtrico de flama
Adaptado para utilizarse con una

flama de un FID. Sensible a
compuestos con azufre (394 nm)
y con fsforo (526 nm)
75
DETECTOR DE NITRGENO FSFORO, NPD
Es bsicamente el mismo FID, lo que sucede es

que se le adiciona un metal alcalino (Rubidio o
Cesio),tambin se le ha llamado:
Detector de ionizacin (TID)

Detector termoinico de flama (FTD)
Detector especfico termoinico (TSD).
Al calentar el material alcalino en la zona de la

llama este detector presenta una gran
sensibilidad por compuestos que contienen
fsforo y nitrgeno.
76
Detector de Captura de electrones, ECD
Utiliza un emisor beta radioactivo

(electrones) para ionizar parte del
gas portador y para producir una
corriente entre un par de
electrodos. Cuando las molculas
orgnicas que contienen grupos
funcionales electronegativos, tales
como halgenos, fsforo y
grupos nitro, pasan por el
detector, capturan algunos de los

electrones y reducen la corriente
medida entre los electrodos.
Empleado frecuentemente para compuestos halogenuros

Detector de Espectrmetra de Masas, MSD
*El espectrmetro de masas usa la

relacin masa-carga (m/z) de
molculas ionizadas.
*Es una tcnica muy poderosa
que permite cuantificar,
identificar y da informacin
acerca de la estructura de
compuestos desconocidos.
Espectrmetro de Masas Analizadores de masa
*La operacin general del espectrmetro de masas es:
a) crea iones en fase gaseosa
b) separa los iones en base a su relacin (m/z).
c) mide la cantidad de iones de cada relacin (m/z).
Una vez ionizadas las molculas, estas pasan al analizador de iones el cual los transporta
hacia el detector: Existen diferentes tipos de analizadores los que son utilizados de acuerdo
a las necesidades. Dentro de los analizadores podemos citar, la trampa de iones, el sector
magntico, el tiempo de vuelo, el cuadrupolo, etc.

El cuadrupolo consiste de cuatro cilindros metlicos paralelos, en donde dos de ellos

tienen un potencial (U + Vcos(wt)) y los otros dos (U + Vcos(wt)), lo que le da un
rango de frecuencia, los iones con cierta relacin (m/z), pasan a travs del cuadrupolo,
los que no son eliminados. En este sistema se necesita un alto vaco, para el transporte de
los iones a travs del analizador (10-9 torr).
GC-MS
Comparacin de Detectores
Detector Lmite de Rango lineal Comentarios Tratamiento
deteccin g analito
TCD 10-5-10-6 103-104 Detector No destructivo

universal
FID 10-12 106-107 Detector Destructivo
universal
ECD 10-14 102-103 Detector No destructivo
selectivo
NPD 10-8-10-14 105-107 Detector Destructivo

Selectivo N,P
MSD 10-12 Segn tipo Detector Destructivo

detector universal
Derivatizacin en cromatografia de gases.
Los compuestos a analizar deben transformarse en otros que tengan un

menor punto de ebullicin y puedan transformarse en gases sin
someterlos a una temperatura muy alta y causar su descomposicin.
La reaccin de derivatizacin tiene como objetivo principal modificar

la molcula tratada para evitar la formacin de puentes de hidrgeno,

responsables de uniones intermoleculares.

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Analisis Instrumental 1 Universidad de Santiago de Chile

Dr. Rodrigo Segura S.

Por qu se llama Cromatografa

MIGUEL TSWEET (BOTANICO RUSO-1906). REALIZO LA PRIMERA

Es una tcnica de separacin basada en la diferente

F. F. Runge qumico alemn, describi el proceso de

El ruso Mijail Tswett corresponde el haber establecido las ventajas de la

PAPEL PLACA COLUMNA GASES LQUIDOS

Fase estacionaria Fija

Fase mvil Se desplaza

Soporte Plano Papel

Adsorcin Gas - Slido

Dr. Rodrigo Segura S.

Esta tcnica analtica se clasifica de acuerdo a su

El soluto se disuelve en la fase

Fase estacionaria: Lquido sostenido

Fase mvil: Lquido (CLL) o Gas (CLG)

Nota: Los lquidos de las 2 fases deben ser

Fase estacionaria: slido. Fase mvil: Lquido ( CSL); Gas (CSG)

El soluto se adsorbe en la superficie de las partculas slidas de la fase

En este tipo de cromatografa existen

Los iones en disolucin de carga opuesta

La fase mvil es un lquido.

El tiempo de elusin es proporcional al

Los poros pequeos dejan pasar a las

tardan ms tiempo en pasar a travs de la

Es la ms selectiva, emplea interacciones de molculas de un soluto en

La molcula inmovilizada podra ser un anticuerpo unido a una

Solo la protena que reacciona con el anticuerpo se fija en la columna.

Todas las dems molculas se eliminan

DISOLVENTES COMNMENTE UTILIZADOS

Dr. Rodrigo Segura S.

1.7 USOS DE LA CROMATOGRAFA DE GASES

Cromatograma: Es una grafica de

la aparicin de un pico de soluto en el detector de la columna cromatogrfica.

Anchura de base: Anchura de la banda cromatogrficas de un soluto

Dr. Rodrigo Segura S. 24

Retencin relativa , coeficiente de retencin o factor de

Benceno : t r = t r t m = 251 42 = 209s

t r t m 7.63 min . 0.31 min

t r t m 5.98 min . 0.31 min

En un anlisis cromatogrfico de cidos de bajo peso molecular, el cido

t r t m 7.63 min . 0.31 min

Ejemplo: En el mismo anlisis cromatogrfico de cidos de bajo peso molecular, el

Platos Tericos (Martn y Synge).

Cintica (Van Deemter, Zuiderweg, Klinkenberg y Sjenitzer)

Teora de los platos tericos

Dr. Rodrigo Segura S. 32

son mayores en gases

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