Objetivos generales

Desarrollar la biodegradacin de los hidrocarburos

Objetivos especficos

Definir que microorganismos actan en la biodegradacin de hidrocarburos

Conocer el funcionamiento y caractersticas de microorganismos en la degradacin de

hidrocarburos

Marco teorico

CARACTERSTICAS DEL PETRLEO

El petrleo est conformado por una mezcla compleja de hidrocarburos. Los cuales se pueden
dividir en 4 clases (figura 1): saturados, aromticos, asfltenos (fenoles, cidos grasos, cetonas,
esteres y porfirinas) y resinas (piridinas, quinolinas y amidas) (Leahy & Colwel, 1990). Estos
compuestos estn formados principalmente por carbono e hidrogeno en una proporcin del
90%, mientras que otros componentes que estn en menor proporcin, son el oxigeno, azufre
y nitrgeno que se encuentran en asfaltenos, mercaptanos y piridinas respectivamente (Salleh
et al., 2003).

El petrleo que se extrae de la sonda de Campeche, presenta una alta concentracin de

asfaltenos dado que es del tipo pesado. Estos hidrocarburos son un riesgo potencial Golfo de
Mxico. contaMinacin e iMpacto aMbiental: Diagnstico y Tendencias644Microbiologade
toxicidad en caso de derrame, debido a que por su estabilidad qumica son recalcitrantes y se
pueden disolver en el tejido adiposo generando en algunos casos bioacomulacin ( )
(figuras 1 y 2). Por tal motivo se ha estudiado en el mar la degradacin del petrleo y y en
particular la llevada a cabo por los microorganismos los cuales son los responsables de
consumir alrededor del 90% del petrleo.

BIODEGRADACIN Y BIORREMEDIACIN
El consumo de petrleo por microorganismos como nica fuente de carbono y energa
se conoce desde fines de los 40s (ZoBell, 1946). Es esta capacidad metablica de
consumir los hidrocarburos que se aprovecha para la biorremedicacin de ambientes
terrestres y acuticos. Actualmente la biorremediacin consiste en el uso de diferentes
mtodos para favorecer la tasa de consumo del petrleo (tabla 1) y con eso mitigar el
efecto nocivo en el ambiente. Entre los mtodos utilizados estn: la aplicacin de enzi-
mas, nutrientes y el uso de microorganismos previamente adaptados al consumo de pe-
trleo entre otros (Salleh et al., 2003; Das & Chandran, 2011). A diferencia de los
mtodos qumicos de uso frecuente (como dispersantes), los procesos de
biorremediacin ofrecen varias ventajas como, un bajo costo, un manejo
seguro, adems de que no generan impacto ambiental. Durante el derrame ocurrido en
el 2010 por la plataforma Deepwater Horizon, sin embargo, se aplicaron alrededor de
6.6 millones de litros de dispersantes qumicos (Corexit 9500) para mitigar la contami-
nacin por petrleo. No obstante, debido a que estos compuestos estn formulados con
detergentes como es el propanol pueden incrementar la toxicidad del petrleo en los
organismos marinos y adems de tener un efecto letal en las comunidades microbianas
(Mascarelli, 2010). Por lo tanto, su uso aun se encuentra en debate por la comunidad
cientfica internacional, ya que faltan ms estudios sobre toxicidad a diferentes niveles
(microorganismos y organismos superiores) para evaluar si existen efectos secundarios
tomando en cuenta los probables escenarios que se generan por su uso y la presencia del
petrleo.

MICROORGANISMOS QUE DEGRADAN HIDROCARBUROS

Ahora se sabe que durante el proceso de degradacin del petrleo intervienen varias
especies de bacterias y que gracias a la participacin y combinacin de los diferentes
procesos metablicos de las bacterias presentes en ambientes marinos pueden alcanzarse
tasas de consumo hasta del 100% (Das & Chandran, 2011). La variabilidad de espe-
cies y gneros, se debe a que diferentes bacterias tienen afinidad por ciertos hidrocarbu-
Golfo de Mxico. contaMinacin e iMpacto aMbiental: Diagnstico y Tendencias
646Microbiologaros, como se ha observado en Acinetobacter sp., Pseudomonas sp. y
Mycobacterium sp. las cuales degradan alcanos, mono-aromticos
y poli-aromticos respectivamente (Salleh et al., 2003). Sin embargo, tambin se ha
visto que pueden participar en sintrofa. En condiciones anaerobias durante la
degradacin de alcanos, se a observado la participacin de bacterias sulfatorreductoras y
metanognicas (Morris et al., 2013). Otros factores importantes que determi-
nan a las poblaciones microbianas durante la degradacin del petrleo son los factores
abiticos de la zona (pH, temperatura, salinidad, oxido-redox, etc.), as como las pro-
piedades fsico-qumicas del petrleo (ligero o pesado). La combinacin de ambos
factores pueden favorecer o afectar la diversidad bacteriana (Das & Chandra, 2011).
Hazen et al. (2010) reportaron un cambio de las comunidades microbianas, entre las
zonas contaminadas y las de sus alrededores en estudios de ecologa microbiana a 1 500
metros de profundidad, realizados a lo largo de la pluma de contaminacin durante el
derrame de petrleo en el Golfo de Mxico por el Deepwater horizon. Estas variaciones
fueron asociadas principalmente a las diferencias en la concentracin de oxigeno y
alpetrleo, ya que observaron un gradiente de concentracin y de transformacin del
petrleo a lo largo de la pluma de contaminacin. Efectos similares se observaron en
las poblaciones microbianas en chapopoteras (Campeche), en donde la estratificacin
de las bacterias en los sedimentos es debido al petrleo y la baja concentracin de O
2(Schubotz et al., 2011).Existen varios reportes de las bacterias que participan en la
degradacin del petrleo (tabla 2) (ZoBell, 1946; Bartha & Atlas, 1977). En el caso del
Golfo de Mxico se ha encontrado una gran diversidad microbiana, como se ha
observado en estudios llevados a cabo en zonas de las costas de Florida, Cam-
peche, Veracruz y en el delta del ro Mississipi que han sido afectadas por derrames de
petrleo. En estos sitios se han detectado alrededor de 24 especies de bacterias distribui-
das en 14 gneros. Entre los que se encontraron: Gammaprotobacteria, Marinobacter,
Pseudomonas y Acinetobacter (Kostka el al.,2011), as como algunos gneros de bacte-
rias hidrocarbonoclastas como Alcanivorax, Marinobacter, Thallassolituus,
Cycloclasticus y Oleispira (Mortazavi et al. 2013).Las bacterias hidrocarbonoclastas es
un grupo de bacterias que se ha descubierto recientemente que tiene la particularidad de
alimentarse exclusivamente de petrleo, este lo utilizan como nica fuente de carbono
y energa. Se ha observado que juegan un papel muy importante en la biodegradacin
del petrleo ya que conforman hasta un 90% de las especies encontradas en las zonas
contaminadas (Yakimov et al., 2007).Es por eso que este tipo de bacterias son
utilizadas para evaluar zonas perturbadas por petrleo, al calcular la tasa bacteriana hi-
drocarbonoclastas/hetertrofas (Hi/He) como un ndice de impacto. Este ndice se
utiliz en reas afectadas por el derrame del , en donde se observ una elevada
concentracin de bacterias hidrocarbonoclastas (Lizrraga-Partida et al.1983). Al igual
se han encontrado lugares afectados por hidrocarburos en el oeste del caribe mexicano,
donde debido al arrastre de estos compuestos por las corrientes marinas se concentran
en ciertas reas favoreciendo el crecimiento de estas bacterias (Lizrraga-Partida et al.,
1990). En la zona sur del Golfo de Mxico y parte de la pennsula de Yucatn, durante
los monitoreos llevados a cabo por Aguirre-Macedo et al. (2011), para evaluar las
comunidades microbianas en agua de superficie y sedimentos (figura 3), se observ que
las zonas con los mayores ndices de Hi/He podranestar asociadas a las corrientes
marinas y a la presencia de hidrocarburos. Particularmente en relacin a sedimentos de
la zona del complejo lagunar Carmen-Pajonal-Machona y en las chapopoteras
localizadas a 71 km al norte de la ciudad de Coatzacoalcos en donde se presentaron los
valores mayores del ndice Hi/He. En tanto que, algo. Distribucin del ndice de
bacterias hidrocarbonoclastas / hetertrofas (Hi/He) en sedimento (a) y superficie (b) de
la regin sur del Golfo de Mxico. 1; Complejo lagunar Carmen-Pajonal-Machona, 2;
Chapopoteras, 3; Desembocadura ro Coatzacoalcos).similar se observ en superficie,
en donde la zona de chapopoteras presento un valor de Hi/He=2.6. Este valor fue 7
veces superior al encontrado en el sedimento (Hi/He=0.35).Esta diferencia se podra
deber a la concentracin de nutrientes en las zonas fticas as como la densidad del
petrleo que emana de las chapopoteras las cuales afectan directamente a las munidades
microbianas. Por otra parte tambin se observ en superficie niveles altos de Hi/He
cerca de la desembocadura del ro Coatzacoalcos (figura 3b), estos niveles se podran
deber a dosfactores; la alta actividad martima petrolera de la zona y la segunda las
corrientes marnas que en la mayor parte del ao corren de este a oeste, con lo que los
hidrocarburos podran ser acarreados y concentrados en esa zona.
dioles, posteriormente los intermediarios dihidroxilados pueden sufrir un ataque
nzimtico en las posiciones orto o meta para formar catecol o protocatecuato, para
finalmente entrar al ciclo de los cidos tricarboxilicos (Das & Chandran, 2011).
Golfo de Mxico. contaMinacin e iMpacto aMbiental: Diagnstico y Tendencias

EFECTO DE LA TEMPERATURA, NUTRIENTES Y SALINIDAD

EN LA BIODEGRADACIN DE HIDROCARBUROS
La temperatura juega un papel importante en la biodegradacin de hidrocarburos,
puesto que afecta directamente la fisiologa y diversidad de los microorganismos as
como la qumica del petrleo. A temperaturas bajas el petrleo incrementa su
viscosidad, se reduce la volatilidad de los compuestos de bajo peso molecular y se ve
elevada la solubilidad, que consecuentemente aumenta la toxicidad en icroorganismos.
En el Golfo se han aislado bacterias a profundidades de 1 000 hasta 1 200 m que tie-
nen la capacidad de degradar el petrleo a temperaturas alrededor de 4C (Redmond
& Valentine, 2012), por otra parte se ha observado que conforme se eleva la tempera-
tura se incrementa la actividad microbiana,encontrndose la mayor actividad enzim-
tica en bacterias mesofilicas y termofilicas (Das & Chandran, 2011).
Los ambientes marinos son deficientes en nutrientes inorgnicos, por tal motivo du-
rante un derrame, las relaciones C/N o C/P se incrementan drasticamente, dando como
resultado que el crecimiento microbiano se vea afectado. Es por esto que durante un
deGolfo de Mxico. contaMinacin e iMpacto aMbiental: Diagnstico y Tendencias
650Microbiologarrame petrolero en el mar es necesario restablecer la relacin C:N:P a
120:10:1 aproximadamente, para mantener la actividad bacteriana y favorecer el
consumo de hidrocarburos (Salleh et al., 2003). Es por eso que durante el derrame del
Deepwater Horizon se adicionaran fertilizantes como fuente de N y P para restablecer
las relaciones antes mencionadas (DeLaune & Wright, 2011).Los hidrocarburos en
ambientes salinos como es el agua de mar (3.5% de NaCl) presentan altas tasas de
consumo, estas velocidades tambin se han observado en un rango entre 0.6 a 11.7% de
NaCl, sin embargo, a concentraciones por arriba del 2.4% ya seve inhibido el consumo
de compuestos aromticos (Salleh et al., 2003).

BIOSURFACTANTES
Las bacterias que crecen en presencia de hidrocarburos, producen una serie de ustancias
con propiedades tenso-activas llamadas biosurfactantes capaces de solubilizar impuestos
no polares, como los contenidos en el petrleo, adems estas molculas tienenla
propiedad de estimular el crecimiento microbiolgico ayudando as a acelerar la
biorremediacin en las zonas contaminadas. Existen dos tipos de biosurfactantes, los de
bajo peso molecular que estn compuestos regularmente por glicolipidos con cadenas
largas de lipopeptidos o de cido aliftico y los de alto peso molecular compuestos de
polisacridos, protenas, lipopolisacaridos, lipoprotenas o una mezcla de dos o ms
polmeros (Ron & Rosenberg, 2002). Los biosurfactantes son ms efectivos que los
surfactantes qumicos en incrementar la biodisponibilidad de los compuestos
hidrofobicos, por otra parte son mas amigables al ambiente, como lo demostraron
Edwards et al. (2003) al evaluar la toxicidad de varios biosurfactantes y surfactantes
sintticos en moluscos y peces del Golfo de Mxico.
CONCLUSIN
A pesar de que se han llevado a cabo estudios en el Golfo de Mxico para identificar las
comunidades microbianas, hacen falta mas trabajos en superficie y aguas profundas, con
la ayuda de las nuevas tcnicas en biologa molecular para generar bibliotecas metage-
nmicas y as generar estudios ms completos en ecologa microbiana e identificar
bacterias que son de inters ecolgico y biotecnolgico, bacterias que degradan hidro-
carburos, que por tcnicas convencionales no se pueden detectar, a su vez identificar
las de inters industrial como son aquellas que producen biosurfactantes o enzimas
como son las celulasas y lipasas, las cuales tienen una amplia aplicacin industrial
.