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FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE CIENCIAS QUMICAS
Prctica No 4
DATOS GENERALES
Alumnos:
Objetivos Generales.-
Objetivos Especficos.-
TEORA
PROTENAS
Las protenas son biomolculas formadas bsicamente por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno.
Pueden adems contener azufre y en algunos tipos de protenas, fsforo, hierro, magnesio y cobre
entre otros elementos.
Las protenas son cadenas de aminocidos que se pliegan adquiriendo una estructura tridimensional
que les permite llevar a cabo miles de funciones. Las protenas estn codificadas en el material
gentico de cada organismo, donde se especifica su secuencia de aminocidos, y luego son
sintetizadas por los ribosomas.
Las protenas desempean un papel fundamental en los seres vivos y son las biomolculas ms
verstiles y ms diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre ellas
funciones estructurales, enzimticas, transportadora, entre otras. (Luque, V. 2017)
Estos factores son: a) la fuerza inica, b) el pH, c) la temperatura, y d) la constante dielctrica del
solvente. Naturalmente, la hidrlisis de los enlaces peptdicos para valores extremos de pH tambin
modifica la estructura primaria.
2. REACCIONES DE COLORACIN
Las reacciones de coloracin se deben a la presencia de determinados aminocidos o de ciertos
grupos amnicos en la molcula proteica. Por este motivo son tambin llamadas reacciones
estructurales
El ensayo recibe el nombre del griego xanthos (amarillo). Tratando una disolucin de protena con
cido ntrico concentrado, la protena precipita (color blanco) y al calentar se disuelve dando color
amarillo. El color amarillo se debe a la formacin de nitrocompuestos aromticos; por tanto, se
forma debido a la presencia de anillos aromticos en la molcula proteica. Si se neutraliza con un
lcali el color pasa aanaranjado oscuro En las protenas los constituyentes responsables para la
reaccin son la tirosina, el triptfano y la fenilalanina.
El reactivo Millon es una mezcla de nitrato y nitrito mercrico, obtenido disolviendo mercurio
metlico en cido ntrico. Aadido a una disolucin de protena, sta precipita y al calentar el
precipitado toma color rojo ladrillo.
Si se aade a una disolucin de protena unas gotas de disolucin de cido glioxlico, seguidamente
se lleva al fondo una capa de cido sulfrico concentrado, se forma un anillo violeta en la unin de
los dos lquidos, si existe triptfano en la protena investigada puesto que el grupo indol es el
determinante del resultado positivo del ensayo al condensarse al cido glioxlico.
El azufre de la molcula proteica, por la accin del lcali y del calor, se convierte en sulfuro, que,
por la presencia de la sal de plomo, da como resultado el sulfuro de plomo (precipitado de color
negro). Los aminocidos responsables son cisteina, cistina, metionina.
Esta reaccin la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la
presencia del enlace peptdico -CO-NH-.
El reactivo del Biuret (sulfato de cobre(II) + NaOH), se coordina con los enlaces peptdicos
formando un complejo de color violeta (Biuret), cuya intensidad de color depende de la
concentracin de protenas. Cuando una protena se pone en contacto con el lcali concentrado, se
forma una sustancia compleja denominada Biuret, que en contacto con una solucin de sulfato
cprico diluido, da una coloracin violeta caracterstica.
La reaccin debe su nombre por el hecho de haber sido verificada, inicialmente, con Biuret,
producto de condensacin de la urea. El pigmento responsable por el color producido en la reaccin
es un complejo de cobre.
3. TERMOCOAGULACIN
MATERIALES Y REACTIVOS
MATERIALES
REACTIVOS
- Casena
- Sosa cal (mezcla fundente)
- Sol. HCl 6 N
- Sol. Acetato de plomo 0.1 M
- Sol. NaOH 6 N
- Sol. de casena al 1%
- Sol. Na2CO3 al 0.5 %
- Sol. HCl 0.2%
- Vaso de precipitacin - HNO3
- H2SO4 1N
- Sol. NaOH 1%
- Sol. CH3COOH 1,5%
- Sol. NaOH 10%
- Agua
- Reactivo de Millon
- Reactivo Glioxlico
- H2SO4
- Sol. Acetato de plomo al 10%
- Sol. Sulfato de cobre al 1%
GRFICOS
Reaccin Xantoprotica.
Reaccin de Biuret.-
PROCEDIMIENTO
A. ANLISIS
2. PRESENCIA DE AZUFRE
Se calienta 0.2 g de casena con 1 g de sosa cal (mezcla fundente) en un tubo de ensayo. Se deja
enfriar el tubo, luego se aade de 5 mL de HCl 6N al residuo. Se coloca un papel filtro impregnado
de acetato de plomo 0.1 M sobre la boca del tubo. Si hay aparicin de una mancha caf obscura de
PbS formado, se determina la presencia de azufre.
3. PRESENCIA DE NITRGENO
Se rotulan cuatro tubos de ensayo y se colocan en cada tubo 1 mL de solucin de casena al 1%, se
aade en orden respectivo 2 mL de: NaOH al 10%, Na2CO3 al 0.5%, HCl al 0.2% y agua. Observe
y anote. La mayor solubilidad de las muestras se sealan con: (-) insoluble; () parcialmente
insoluble y (+) soluble.
D. TERMO COAGULACIN
E. REACCIONES DE COLORACIN
REACCIN XANTOPROTEICA
REACCIN DE MILLON
Se coloca en un tubo de ensayo 2 mL de solucin de protena, y se aade 5 gotas del reactivo de
Millon. Se forma un precipitado blanco que al calentar se vuelve rojizo. Evite realizar la reaccin en
medio fuertemente alcalino (hay la precipitacin de xido mercrico) o con exceso de reactivo (hay
decoloracin).
REACCIN GLIOXILICA
REACCIN DE BIURET
Se coloca en un tubo de ensayo 2 mL de una solucin de protena, aadir 5 gotas de NaOH al 10% y
3 gotas de sulfato de cobre al 1%. La reaccin es positiva cuando aparece una coloracin rosa, o,
ms, frecuentemente, violeta o lila.
REACCIONES
REACCIN XANTOPROTEICA
REACCIN DE BIURET
RESULTADOS
SOLUBILIDAD
Solvente Sustancia
Casena
NaOH +
+/-
HCl +/-
Agua -
+ = soluble
-= insoluble
OBSERVACIONES
Anlisis
CASENA
PRESENCIA DE Se determin la presencia de
CARBONO, carbono mediante la
HIDRGENO, OXGENO coloracin negra del fondo
del tubo de ensayo que es
smbolo de la combustin, y
se verifico la existencia de
oxgeno e hidrgeno por el
vapor presente en las
paredes del tubo.
Se evidenci la presencia de
PRESENCIA DE AZUFRE azufre por la aparicin de
una mancha color caf en el
papel filtro.
Se evidenci el cambio de
PRESENCIA DE color del papel tornasol de rojo
NITRGENO a morado, y se pudo notar el
olor caracterstico del
amoniaco
SOLUBILIDAD
CASENA GRFICO
REACCIONES DE Se observ la formacin de dos
COAGULACIN fases en la disolucin, de las
(DESNATURALIZACIN) cuales, una era amarillenta y la
otra blanquecina.
CASENA GRFICO
REACCIN DE Se observ la aparicin de
TERMOCOAGULACIN cogulos blancos que indican
la desnaturalizacin.
REACCIONES DE COLORACIN
CASENA GRFICO
REACCIN Se evidenci la formacin de
XANTOPROTEICA un precipitado de color blanco
en un principio, el cual luego
se torn de color amarillo en su
totalidad.
CASENA GRFICO
REACCIN DE Se observo la presencia de un
GLIOXILICA anillo color violeta que
separaba las dos sustancias, es
decir se dio la separacin del
cido con la casena.
CASENA GRFICO
REACCIN DE BIURET Se presenci un cambio de
coloracin de transparente a
violeta, que evidencia la
presencia de protenas.
CONCLUSIONES
CUESTIONARIO
1. Describa la casena
Polvo fino o granular de color blanco ligeramente crema, olor y sabor caractersticos de un
compuesto nitrogenado y tiene una solubilidad casi nula en agua.
Propiedades fsicas
Propiedades qumicas
Las protenas cuando se hidrolizan con agentes alcalinos da lugar a la hidrlisis de ciertos
aminocidos como arginie, cistena, serina, etc., se pierde tambin la actividad ptica de los
aminocidos.
Las protenas con reaccin con alcoholes dan sus correspondientes steres. Este proceso se
conoce como esterificacin.
Los aminocidos reaccionan con aminas para formar amidas.
Cuando los aminocidos libres o protenas se dice que reaccionar con los cidos minerales
como HCl, se forman las sales de cido.
La reaccin del Sanger Las protenas reaccionan con el reactivo para producir FDNB
derivado de color amarillo, DNB aminocido.
Prueba Xanthoproteic En hirviendo protenas con HCl conc. HNO3, color amarillo se
desarrolla debido a la presencia de un anillo de benceno.
La prueba de Folin Esta es una prueba especfica para el aminocido tirosina, donde el
color azul se desarrolla con cido phosphomolybdotungstic en solucin alcalina debido a la
presencia de grupo fenol. (Admin, 2017)
Se conoce como desnaturalizacin a la Perdida por parte de las protenas de su estructura de orden
superior (Secundaria, Terciaria, cuaternaria), y queda una cadena polipeptidica reducida a un
polmero estadstico sin ninguna estructura tridimensional fija. En una protena cualquiera, la
estructura nativa y la desnaturalizada solo tienen en comn la estructura primaria, es decir la
secuencia de aminocidos que la componen, los dems niveles de organizacin estructural
desaparecen si se desnaturalizada. La desnaturalizacin trae diversas consecuencias como: el
cambio en las propiedades hidrodinmicas es decir el aumento de la viscosidad, a la vez que
disminuye el coeficiente de difusin, por otro lado, se produce una disminucin de su solubilidad,
debido a que los residuos hidrofbicos del interior aparecen en la superficie, y finalmente se
produce la perdida de las propiedades biolgicas. Una protena desnaturalizada cuenta nicamente
con su estructura primaria, por este motivo, en muchos casos el proceso de desnaturalizacin es
reversible, ya que es la estructura primaria la que contiene la informacin necesaria y suficiente
para adoptar niveles superiores de estructuracin. (Jimnez, D. 2014)
Los agentes desnaturalizantes son aquellos factores qumicos o fsicos que producen la
desnaturalizacin de las protenas. Entre los ms comunes podemos citar:
Temperatura
pH
polaridad del disolvente
Fuerza inica
R. de Milln: Solucin de mercurio y cido ntrico; contiene nitrato y nitrito de los iones mercurio
(I) y mercurio (II), es decir, Hg(NO2)
En esa posicin hay mayor estabilidad por la fuerte atraccin que sufre el nitrgeno por los
electrones deslocalizados del oxgeno. Este mecanismo tambin sucede en la sntesis de hormonas
tiroideas.
Luego, debido al calentamiento, el precipitado blanco se vuelve rojo gradualmente por la reaccin
entre el mercurio (1) con el grupo , de la tirosina. (Snchez, L. 2017)
Los Aminocidos azufrados como Metionina, Cisteina y Cistina se reconocen por la formacin de
precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman cuando reacciona con
Acetato de Plomo en medio alcalino. (Tadeo, J. 2013)
Bibliografa
ANEXOS
Equipo 1
Equipo 2