SINALIZAO CELULAR

As respostas que a clula esta dando, a partir das alteraes de

comportamento, se iniciam com a ligao de uma molcula que chamada de
Ligante ou Molcula Sinalizadora. A partir dessa interao com a molcula e o
receptor, a clula desenvolve uma cascata de sinalizao de diferentes
maneiras, dependendo do sinal e do tipo celular.
O ligante que ir se ligaro receptor da clula pode ser hidrossolvel ou
lipossolvel. Caso seja hidrossolvel, o ligante no ir cruzar a bicamada
lipdica livremente, dessa forma ter que interagir com receptores na superfcie
da clula. J os ligantes lipossolveis tem a capacidade de cruzar a bicamada
lipdica, por isso podem interagir com receptores que esto dentro da clula, os
quais podem estra no citosol ou no ncleo.
Vocs acham que qual dos dois tipos de molcula sinal de ligante a
clula esta mais exposta e consequentemente respondendo mais? Os ligantes
hidrossolveis pois a clula est em meio aquoso ento na maioria das vezes a
clula estimulada pela ligao de algum ligante hidrossolvel aos seus
receptores de membrana. Todos os receptores so transmembrana no pode
ser simplesmente integral, ele deve ter uma poro voltada para o lado de fora
(onde o ligante ira se ligar) e uma outra poro voltada para dentro da clula
que vai estimular em cascata varias molculas at que a clula altere seu
comportamento. O ligante pode se ligar a um receptor na superfcie a uma
protena transmembrana ou ele pode se ligar a um receptor que esteja dentro
da clula, para isso a molcula tem que ser lipossolvel (por ser lipossolvel
no fica em meio aquoso e por isso sempre carreada por uma protena).
Esse sinal entre clulas pode acontecer a partir de interao de uma
molcula ligante que est presa a membrana de uma clula e a para esse
sinal passar para a clula alvo tem que haver um contato clula clula (caso
o ligante esteja preso a membrana) resposta comum no perodo embrionrio
ou quando uma clula produz uma molcula, secreta, essa molcula cai no
meio e se liga ao receptor de uma clula alvo.
Toda alterao de comportamento depende da ligao de um ligante ao
receptor da clula, o qual pode estar na superfcie ou dentro da clula, existem
casos em que o ligante est preso na clula sinalizadora e para interagir com a
clula alvo tem que haver interao entre as clulas, mas na maioria das vezes
o ligante secretado de uma clula e se liga ao receptor da clula alvo,
dependendo da distancia que esse ligante secretado percorra at interagir com
a clula alvo existe uma classificao que so os tipos de sinalizao:
autcrina, parcrina ou endcrina.
Na sinalizao parcrina a clula produz o ligante, o ligante foi
secretado e interagiu com clulas que esto nas proximidades, nas clulas que
so vizinhas daquela que produziu e secretou esse ligante. Normalmente esse
tipo de ligante tem uma meia vida curta, ou ele degradado ou ele recaptado
pela clula ou ele convertido em outra molcula, normalmente a sinalizao
parcrina rpida e em local. A sinptica uma particularidade da SP, o
ligante secretado, cai na fenda sinptica e interage com o receptor da clula
ps sinptica, ou seja, percorre uma distncia muito pequena a partir do
momento que secretado. Um exemplo de SP o xido ntrico que uma
molcula microbicida produzida por macrfagos estimulados por citosinas que
clulas endoteliais produzem naturalmente sem estmulo. O Ox. Ntrico um
gs, ento ele produzido e lanado para fora da clula por difuso, mas ele
rapidamente convertido em nitrito e nitrato, ento se ele no tiver uma ao
local no ter ao mais nenhuma.
Na sinalizao autcrina a clula produz um ligante, secreta e o ligante
se liga ao prprio receptor da clula que o produziu. Um exemplo de
sinalizao autcrina so clulas cancerosas, tais clulas produzem fatores de
crescimento que se ligam aos seus prprios receptores induzindo a proliferao
celular.
O que caracteriza a Sinalizao Endcrina a passagem do ligante
atravs da corrente sangunea e a ao desse ligante numa clula alvo que
est distante.
Um mesmo ligante pode induzir diferentes respostas em diferentes tipos
celulares. A cascata de resposta pode rpida ou lenta, se esse ligante ao ligar
esse receptor vai induzir atravs de uma cascata de sinalizao a ativao de
uma protena que j est l, que s precisa ser fosforilada para agir, a clula
vai responder rapidamente ao sinal que se ligou ao seu receptor, mas se a
ligao desse ligante ao receptor vai induzir a ativao da transcrio de um
gene especfico, essa resposta pode levar at dias para a que a clula altere
seu comportamento, pois nesse caso o ligante vai promover a ativao de um
gene que vai transcrito no RNA, vai ser processado, vai sair do ncleo para o
citosol e vai ser traduzido por um ribossomo, at que a protena seja produzida
e que fique funcional.
Os processos de sinalizao que envolvem ativao transcricional geral
uma resposta lenta da clula, aquele processo de sinalizao que envolve a
alterao de uma protena que j est l, a a resposta rpida, praticamente
imediata. Exemplos: o oxido ntrico, a acetilcolina ao se ligar ao receptor da
clula endotelial vai induzir a ativao de uma enzima que vai produzir a partir
da arginina o Ox. Ntrico. A partir do aminocido arginina, a enzima que
NOsintetase, vai produzir Ox. Ntrico, vai se difundir pela membrana e agir na
clula do msculo liso, como que age? A ligao do Ox. Ntrico a enzima
GuanidilCiclase na clula muscular vai fazer com que ela produza GNPcclico e
essa produo vai levar ao relaxamento muscular, o relaxamento muscular vai
ser uma consequncia do efeito do GNPcclico ativando bombas de clcio (que
funcionam tirando o clcio do citosol) na membrana. Dessa forma vai haver
uma diminuio da concentrao de clcio nessa clula muscular porque ele
vai entrar no retculo e ser bombeado para fora da clula e a clula ento vai
relaxar.
O viagra funciona: essas clulas aqui produziram e liberaram acetilcolina
que vai se ligar ao receptor dessa clula endotelial, ao se ligar ocorre a
ativao de uma enzima que produz Ox. Ntrico, essa enzima NOsintetase,
essa enzima ativada vai pegar um aminocido e na quebra desse aminocido
vai ser gerado citrimina e NO (Ox. Ntrico). Esse NO produzido na clula
endotelial vai se difundir e vai agir nas clulas do msculo. Qual o mecanismo
de ao do NO na clula vizinha? Ao Parcrina na clula muscular, dessa
forma vai induzir a celular a relaxar, como? O NO que vai se difundir pela
membrana da clula muscular vai ativar uma enzima que chamada
GuanidilSintase que vai produzir GNPcclico que vai agir na clula muscular
ativando bombas de clcio, essas bombas vo funcionar bombeando clcio
para fora da clula ou para dentro do Retculo Endoplasmtico. Quando baix a
concentrao de clcio a clula vai relaxar ou contrair? Relaxar! Onde que
entra o viagra a.. Esse GNPcclico depois de produzido e agir no relaxamento
dessa clula ele degradado por uma fosfodiasferase e a clula volta ao
estado anterior, mais contrada, o viagra age inibindo a ao dessa enzima
fosfodiasferase que degrada o GNPcclico o qual induz o relaxamento da clula
pois ele faz com que baixe a concentrao de clcio na clula pois ativa
bombas de clcio. Consequentemente o GNPcclico vai ficar mais tempo
agindo e vai ter uma concentrao de clcio durante mais tempo baixa no
citosol, mantendo mais tempo as clulas do msculo relaxadas, isso faz com
que o fluxo de sangue dos corpos cavernosos fiquem mais tempo e isso
provoca a ereo peniana, o relaxamento das clulas desses vasos,
provocados pela no degradao do GNPcclico. Porm a ao desses
medicamentos no seletiva apenas para as clulas penianas, por isso
pacientes cardiopatas tem que ter muito cuidado com o uso de viagra.
Todo sinal que dado para a clula ele tem que ser removido pois a
clula precisa ser capaz de responder a novos sinais que chegam se ela fica
no responsiva. Esse GNPcclico foi produzido e induziu o relaxamento por
ativao das bombas de clcio, ele tem que ser degradado se no a
musculatura vai ficar o tempo todo relaxado, e a fosfodiasferase vai degradar
esse GNPcclico do meio.
Aqui tem dois exemplos de ligantes que esto se ligando a receptor que
est dentro do ncleo, mas no ligado ao DNA e receptor que est j no ncleo
ligado a DNA, mas na forma inativa, s vai ativar quando o ligar se ligar a ATP.
Nos dois casos vai haver ativao transcricional, a diferena s para mostrar
que as vezes o receptor no est indo ligado ao DNA e para se ligar ao DNA
precisa que o ligante se associe a ele e, a partir disso, ele se liga ao DNA e
ativa a transcrio daquele gene especfico. E, s vezes, o receptor j est
ligado ao DNA, mas no est ativo, s vai ficar ativo quando o ligante se ligar a
ele.
Essa ativao da transcrio genica, at que a clula responda pode
demorar um pouco mais, quando o gene for ativado e houver a transcrio dele
pra a partir da o RNA produzido gerar uma protena, essa protena j pode ser
a protena efetora que vai mudar o comportamento da clula, mas em alguns
casos o ligante se liga ao receptor, o receptor vai ativar a transcrio de genes
especficos, esses genes vo gerar protenas e essas protenas vo atuar
como ativadores transcricionais de outros genes, outras protenas sero
produzidas e essas sim que sero as protenas efetoras que vo levar a
alterao do comportamento da clula.
Olhem quantas alteraes intracelulares ocorrem na clula at que ela
responda com alterao do seu comportamento. O ligante se ligou, o receptor
se ativou, ativou vrias protenas internas (inclusive uma enzima) essa enzima
produziu pequenas molculas, nesse momento ocorre amplificao do sinal,
at que finalmente haja, a partir da transcrio genica, a produo de uma
protena que pode ser a efetora ou ainda pode ser uma protena que vai atuar
ativando novos genes para produo das protenas efetoras. Ento, existe uma
complexidade, mas em geral a clula est recebendo vrios e diferentes sinais
e ela faz uma compilao desses sinais, onde h uma predominncia para que
haja aquele tipo de resposta.
Dentre essas molculas que esto aqui, transduzindo sinal at que a
clula responda, tem aquelas que so chamadas de comutadores moleculares
que para ficarem ativadas esto fosforiladas e quando elas so desfosforiladas
ela entra em estado inativo. Tanto tem esse tipo de comutador molecular como
tem aqueles outros que vocs j conhecem que so aquelas pequenas
molculas, pequenas protenas G que quando ativadas elas esto ligadas a
GTP e se esse GTP hidrolisado e convertido em GDP elas ficam inativas, pra
que isso acontea essa troca de GTP por GDP ou hidrlise do GTP a GDP tem
que haver o funcionamento das IAPS e as GEFS, ento tem que ter protenas
que vo induzir a troca de GDP por GTP para ativar essa protena G e outras,
depois que o sinal passado adiante vo promover hidrlise desse GTP a
GDP para que a protena fique novamente no funcional, ento o sinal
bloqueado na clula.
A maioria dos ligantes hidrossolvel ento a resposta das clulas
ento as respostas que as clulas do, na sua maioria, em muitos dos casos
envolvem esses receptores de superfcie que quando ativados pelo ligante
desencadeiam essa ativao interna e com diversas protenas que esto no
citosol ou no ncleo que d as respostas s clulas ou respostas rpidas, s
com a ativao de protenas j pr-existentes, como protenas do
citoesqueleto, que vai induzir rpida polimerizao de filamentos de aquitina,
que a clula muda o comportamento emitindo pseudpodes, uma resposta
rpida ou uma enzima que est inativa mas para ficar ativada tem que se
juntar com outra para formar um complexo ou tem que ser fosforilada, por
exemplo, a resposta tambm rpida. E aquele outro tipo de resposta que
demora mais para a clula d que vai envolver regulao da expresso genica,
ativao de genes especficos.
Vamos ver agora os receptores de superfcie, quem so e como eles
funcionam, quais so as vias de sinalizao que esto relacionadas aos
receptores de superfcie celular. Esses receptores esto distribudos em 3
grandes classes, receptores associados a canais inicos (acetilcolina um
canal inico que se abre a partir da ligao de um ligante, acetilcolina se liga a
ele e ele quando aberto vai induzir a passagem de um sdio que est dentro da
clula e um receptor), os receptores associados a enzimas e os receptores
associados a protena G.
Nessa classe de receptores que ns vamos ver os principais
mecanismos de sinalizao que levam a produo de AMPcclico e levam ao
aumento da concentrao citoslica clcio. A protena G uma protena que
funciona em dois estados, ativo quando ligada a GTP e inativa quando ligada a
GDP. OBS: Tanto a alfa quanto beta tubulina tem stios para a ligao de GTP
e ficam ligados ao GTP, no caso da Beta tem esse GTP hidrolisado.
Receptor ligado a canal inico quando o prprio canal um receptor o
prprio canal se abre a partir da ligao de um ligante especfico a ele,
permitindo a passagem do on, seja pra dentro ou pra fora da clula sempre
obedecendo ao gradiente de concentrao.
O receptor associado a enzima ele prprio uma enzima ou tem uma
enzima associada a ele s que essa ativao enzimtica s ocorre quando o
ligante com dois domnios de ligao se liga e dimeriza (forma uma molcula
com dois monmeros que so pequenas molculas) esse receptor na
membrana, ento ai ocorre a ativao e ai a gente vai ver consequencias
dessa ativao desse tipo de receptor, enzimtico quando ele prprio a
enzima ou associado a enzima quando existe uma enzima associada ao
receptor, mas inicialmente vamos ver receptor associado a protena G.
A protena G uma protena (receptor) transmembrana e que faz sete
passagens pela membrana, todos os receptores tem que ser transmembrana,
mas ele no funciona sozinho, ele funciona com a protena G que uma
protena que alteram os estados ativos ligados a GTP e inativo ligado a GDP,
s que diferente das outras protenas G que so monomricas, ela uma
protena que tem trs unidades a alfa, a beta e a gama e essas subunidades se
dissociam (cada uma vai para uma lado) quando o GTP se liga a essa protena
e ela que vai transduzir o sinal adiante. O ligante quando se liga ao receptor,
esse receptor com o ligante ativa a protena G e faz ela trocar o GDP por GTP,
ela se ativa tambm e vai ativar um alvo que pode ser uma enzima ou um canal
inico. Quando o ligante se liga ao receptor ele faz com que essa protena G
libere esse GDP e o GTP se associa a ela, assim ela fica ativada e vai
transmitir o sinal adiante interagindo ou com canal inico ou com uma enzima.
Nesse caso o stio para a ligao do nucleotdeo que o GTP na subunidade
ALFA da protena G. A protena G (que est do lado citoplasmtico, est
ancorada com um lipdio a membrana) pode ativar enzimas e muitas dessas
enzimas ativadas produzem pequenas molculas dentre elas o AMPcclico (um
nucleotdeo que no tem guanina tem adenina e produzido a partir do ATP)
ou um gene especfico.
A clera um exemplo clssico de uma consequncia da no inativao
da clula. A toxina colrica age impedindo que protena G quebre esse GTP e
fique inativa novamente, a clula epitelial intestinal fica produzindo AMPcclico
o tempo inteiro e esse AMPcclico (que produzido pela enzima adenil ciclase
a partir do ATP), nesse tipo celular, age ativando os canais de on cloreto que
ficam abertos, ento ocorre sada de on cloreto, o sdio vai atrs do cloreto
para haver equilbrio de ons, a gua vai atrs dos dois e ocorre o influxo de
gua na forma de diarria intensa. A adenil ciclase vai ser ativada pela protena
G, a protena G vai ser ativada pelo receptor quando o ligante se ligar a ele, o
ligante se liga ao receptor, ele ativa a protena G, essa ativao envolve a troca
de GDP por GTP, quando o GTP se associa a subunidade alfa da protena G
h uma separao dessa subunidade, essa protena G com subunidade alfa
ativada vai ativar a adenil ciclase que vai produzir o AMPcclico (age como
molcula sinalizadora, segundo mensageiro) que no epitlio intestinal vai agir
induzindo a sada de cloreto. importante que o sinal seja removido para que a
clula possa responder novamente a sinais.
No msculo esqueltico, a adrenalina estimulou o receptor, o receptou
ativou a protena G e fez com que ela trocasse o GDP por GTP (subunidade
alfa ativada), que vai agir na adenil ciclase que vai produzir AMPcclico a partir
do ATP. Nesse tipo celular o AMPcclico vai ter outra ao, ele vai agir ativando
a protena cinase A, que quando ativada vai agir fosforilando outras protenas,
que vai agir na degradao do glicognio no msculo esqueltico. Outra forma
de ao do AMPcclico ativar a transcrio gnica de genes especficos na
clula. Ento o AMPcclico produzido ativa a protena cinase, a protena cinase
(uma parte dela) translocada para o ncleo, fosforila protenas que vo atuar
como ativadoras transcricionais em outros tipos celulares.
Uma outra via importante de sinalizao que envolve receptor associado
a protena G, s que a protena G vai ativar uma outra enzima chamada
fosfolipase C que vai gerar um outro produto da ativao dela. O receptor se
ativa pela ligao do ligante,ele ja induziu a troca de GDP por GTP na protena
G, e a subunidade alfa da protena G vai interagir ativando a fosfolipase C. A
fosfolipase uma enzima que vai agir em lipdios. Ela vai agir na molcula de
membrana, no lipdio que um fosfatidilnuzitou (um lipdio de membrana) e ele
vai clivar esse lipdio de membrana convertendo ele em duas molculas, o
diacilglicerol que estava ligado membrana e vai permanecer associado a
membrana, e uma pequena molcula chamada de IT3 (inuzitol trifosfato), esse
IT3 quando houver essa clivagem pela ao da enzima fosfolipase C vai se
deslocar, vai ficar livre e vai at a membrana do retculo endoplasmtico, se
liga ao canal de clcio e induz a abertura desse canal na membrana do retculo
endoplasmtico, ou seja vai servir como um ligante que vai abrir a protena
canal. A consequncia da abertura de um canal de clcio na membrana do
retculo endoplasmtico vai ser a liberao (se for em clula do msculo induz
a contrao) o clcio vai sair do retculo e vai haver uma concentrao de
clcio aumentada no citosol, esse clcio vai se ligar a uma PKC (protena
cinase, que uma protena que fosforila alvos, normalmente proteicos) e vai
agir fosforilando vrios alvos intracelulares.
O clcio no citosol, nesse caso, vai servir como uma molcula
sinalizadora, a clula vai responder ao aumento da concentrao de clcio, e o
clcio tem que voltar a concentrao normal da clula no ativada para que
assim a clula possa continuar respondendo aos sinais e induzindo a abertura
de canais de clcio. Como esse clcio sai do citosol? sai de vrias maneiras,
ele usa anti-portador clcio - sdio, bombas de clcio que esto tanto na
membrana plasmtica como esto na membrana do retculo, se a clula no
der conta de baixar a concentrao de clcio no citosol usando todos esses
artifcios, a mitocndria usa o gradiente de prtons gerado para produo de
ATP, para jogar clcio fora do citosol. Nesse caso vai ter um prejuzo na
produo de ATP que melhor para a clula do que morrer em funo de no
responsividade ou exausto porque a concentrao de clcio est alta no
citosol.
J os receptores enzimticos ou receptores associados a enzimas eu s
vou d o exemplo do receptor tirosina-cinase, o que significa esse tirosina-
cinase? Significa que o prprio receptor uma cinase. A tirosinocinase uma
protena transmembrana que quando ativada pela ligao do ligante vai
fosforilar esses aminocidos, dele mesmo e de outras protenas que se
associam a ele. Um receptor de citocina um exemplo de receptor associado a
enzima. Os receptores tirosina e cinase, como os outros receptores so
protenas transmembrana, e normalmente esses receptores tirosina-cinase
esto envolvidos na proliferao celular. Eles so ativados pela ligao de um
ligante que tem dois stios de ligao e acaba aproximando esses receptores e
isso provoca a dimerizao do receptor, com a aproximao desses
receptores, como eles so tirosina-cinase esses receptores so cinase, a
aproximao vai ativar essas protenas cinase e eles como so cinases vo
fazer fosforilao, tanto autofosforilao como fosforilao cruzada. A ativao
desses receptores tirosina-cinase eles sero ativados quando um ligante se
liga aos dois ao mesmo tempo promovendo a dimerizao do receptor, ou seja,
uma aproximao, e fosforilao deles, com essa fosforilao so criados stios
ou domnios, regies que vo ser reconhecidos por protenas citosolicas, ento
essas protenas tem domnios chamados SH2 que reconhecem essas pores
fosforiladas dos receptores e ligam a essas regies.
Uma outra protena pequena ligadora de GTP a RAS que na forma
inativa est ligada a GDP e para que se ative ela tem que ter o GDP trocado
para GTP, quem faz isso a protena ativadora de RAS que recrutada por
essa protena adaptadora que reconheceu aquela regio fosforilada do
receptor. Quando essa troca acontece e a RAS ativada ela vai transmitir esse
sinal para uma via chamada de MAPcinase que vai levar a proliferao celular,
seja rpida pro alterao em uma protena existente ou lenta a partir da
ativao de genes especficos envolvidos na proliferao celular. Porque
importante falar dessa RAS? Porque muitos tipos de cncer de diferentes
tecidos esto relacionados a um defeito da RAS, na incapacidade dessa RAS
ter o seu GTP hidrolizado para GDP, dessa forma ela vai ficar ativada o tempo
inteiro e ativando a via de proliferao que pode desencadear na formao de
um tumor.
Outro receptor que eu vou d como exemplo, que um receptor de
citocina um receptor que ele prprio no uma protena cinase mas tem uma
protena cinase associada a ele. Com a ligao de um ligante, que nesse caso
vai ser uma citocina que tem que ter dois stios de ligao pois vai se ligar a
dois receptores ao mesmo tempo que vo se aproximar dimerizando e vai
haver a ativao desses receptores, as protenas cinases vo se ativar, vo se
fosforilar e fosforilar tambm o receptor e a partir da fosforilao do receptor
vo ser criados os domnios para as protenas citoplasmticas que vo
reconhecer e se ligar a esse stio, quando elas se ligam a esse stios elas
tambm so fosforiladas e nesse momento de fosforilao ela se dissocia e
forma esse dmero que vai translocar para o ncleo e ativar a transcrio de
genes especficos em resposta a essa citocina.
A apoptose um tipo de morte celular programada e tem algumas
caractersticas prprias que a difere de um outro tipo diferente de morte que a
necrose. Na apoptose algumas clulas impedem uma disseminao da
infeco, por exemplo: macrfagos infectados com vrus eles entram em
contato com um tipo determinado de linfcito, uma clula Natural Killer (NK) e
recebe uma sinalizao para morrer, e considerada uma morte limpa pois so
formados corpos apoptticos, como so chamados, que so vesculas com
contedo celular e esse contedo celular, portanto, no jogado para fora, no
extravasado para o meio e portanto no h recrutamento de clulas
inflamatrias e aqueles sintomas todos de um processo inflamatrio que leva a
necrose (morte com extravasamento celular) inchao, dor, vermelhido no
ocorre na apoptose pois o contedo interno no despejado j que so
formadas vesculas contendo esse material e as vesculas so fagocitadas por
macrfagos. Na apoptose ocorre uma condensao do material gentico, o
DNA todo compactado, fragmentado em tamanhos bem definidos e so
formadas as vesculas que so reconhecidas por macrfago atravs
translocao da fosfatilserina na monocamada intracelular que faz com que os
macrfagos reconheam essa clula estando num processo de morte celular
programada e fagocita essa clula em processo de morte.
Toda morte celular programada depende de uma famlia de protenas
chamadas de caspases, essas caspases so proteases (enzimas que
degradam protenas), essas caspases ns j temos prontas na forma inativa de
pr-caspases que formam um complexo e esse complexo a forma ativa que
dispara a apoptose . Essas pr-caspases inativas vo formar caspases
ativadas que vo atingir alvos especficos na clula, alvos chave. Que alvos
so esses para induzir uma morte celular? Elementos do citoesqueleto, ento a
lmina nuclear atacada, os filamentos de actina, microtbulos so clivados
pela ao das caspases e as protenas inibidoras das DNAses que ficam no
citosol, no citosol dessas clulas tem um monte de DNAse que a enzima que
degrada o DNA, mas elas ficam inativadas por uma outra protena bloqueando
a ao dessas DNAses. As caspases ativadas, as executoras que o
complexo formado a partir da juno pr-caspases, um dos alvos essa
protena que bloqueia a ao da DNAse, ento a DNAse deixa de ficar inativa e
ataca o DNA e cliva o DNA em pontos especficos, que pontos especficos so
esses? O mecanismo de compactao do DNA envolve protenas chamadas
estonas que so protenas que tem carter bsico, so 4 diferentes protenas
estonas duas cpias de cada uma delas formam um octmero e o DNA se
enrola em torno dela duas vezes, essas estonas tem um percentual grande de
aminocidos carregados positivamente o que atrai o DNA que tem carga
negativa pela presena de grupamentos fosfato, ento isso facilita o
empacotamento, ento as 8 estonas servem de suporte para o DNA d duas
voltas em torno dela, portanto a ao das DNAses bem aqui nos intervalos
das estruturas que so chamadas de nucleossomos. Essas duas voltas
correspondem a um pouco menos de 200 pares de nucleotdeos, ento quando
analisamos o DNA de uma clula que sofreu apoptose os fragmentos de DNA
so do mesmo tamanho indicando que a clula morreu por apoptose e por
ao da DNAse.
Existem duas vias bsicas para a ativao da apoptose , a via extrnseca
que depende de sinais de fora e uma via interna que depende da liberao de
uma moleculazinha que o citocromo C que participa da cadeia transportadora
de eltrons, ento ele fica entre a membrana interna e externa mitocondrial,
no deve ir para o citosol mas quando a clula recebe um estmulo que a via
intrnseca ele sai.
Uma clula que pode est infectada por um vrus tem as pr-caspases
na forma inativa, essa clula um macrfago ele tem receptores que
reconhecem ligantes nessa clula chamada NK (Natural Killer) que um tipo
de linfcito, essa clula por exemplo infectada ela tem um receptor de FAS e
esse linfcito vai sinalizar para essa clula com seu ligante FAS, ento esse
um tipo de sinalizao direta, clula-clula, no tem nada secretado. A ligao
desse ligante com o receptor recruta o adaptador que por sua vez vai recrutar
as pr-caspases, ento existem 3 domnios, esses 3 vo se ligar essa
aproximao das pr-caspases vo provocar uma dimerizao e formao da
caspase que vai desencadear o processo de morte celular. E esse processo
um processo de defesa que impede a proliferao do microorganismo, desse
patgeno e infeco de outras clulas.
Na via intrnseca na apoptose tem os complexos proticos e existe a
passagem de eltrons por cada um desses complexos e essa passagem gera
energia para um prton ser bombeado para o espao intermembrana e o
retorno desse prton pra matriz a favor do gradiente o que vai gerar o ATP,
vai promover a energia para um ADP se ligar a um fosfato e a que a gente
promove a sntese da maior parte do ATP que a gente usa. Os eltrons no
trafegam sozinhos, existem molculas que so carreadoras que passam o par
de eltrons por entre esses complexos enzimticos que ficam na membrana
interna mitocondrial, dentre eles o citocromo C e o citocromo C ento deve
permanecer porque a funo dele aqui no espao entre a membrana interna
e externa da mitocndria, mas um estmulo apopttico pode levar sada do
citocromo C desse espao entre a membrana externa e interna da mitocndria.
Ao sair o citocromo C se liga a protena protena adaptadora PAF1 que tem um
domnio que recrutar as pr-caspases, quando o citocromo C se liga a essa
PAF1 ele acaba formando uma estrutura, um heptmero (7 braos) e cada
brao desse acaba recrutando uma pr-caspase e a aproximao dessas pr-
caspases vai acabar levando a formao da caspase que vai ativar as
executores e vai resultar na morte celular. Como o citocromo C sai da
mitocndria O citocromo C est localizado no espao entre a membrana
interna e externa da mitocndria, existem protenas na famlia BCL2 que so
indutoras da apoptose e tem protenas que previnem a apoptose, dentre as que
previnem a apoptose tem a prpria protena chamada de BCL2. Se a clula for
estimulada a entrar em apoptose o citocromo C vai sair do espao
intermembrana da mitocndria e sai por um poro formado, quando a clula
recebe um estmulo, por um agregado de protenas, dentre essas protenas
que formam esse poro esto a BAC e BAX.
O que a protena BCL2 faz? A BCL2 que antiapopttica ela impede a
agregao dessas protenas que vo formar o poro por onde o citocromo C
sair. Ento essas protenas BCL2 ficam o tempo inteiro perto as protenas que
esto na membrana externa mitocondrial (tem a BAX e BAC que so da
famlia BH123). Ma se ele for inibido, se uma protena acaba sequestrando por
exemplo a protena BCL2 ela vai deixar de agir impedindo a formao do poro,
vai haver a agregao dessas protenas na membrana externa mitocondrial e
com o poro formado o citocromo C vai sair e disparar a formao daquele
apoptossomo que vai recrutar as pr-caspases, e vai haver a ativao da
cascata que vai desencadear o processo de apoptose.
Na via extrnsceca necessrio que haja a atuao de um ligante da
famlia FAS com o receptor FAS, quem tem o receptor? Um macrfago por
exemplo. Quem tem o ligante? Clula Natural Killer (NK) ou linfcito matador.
Ligante FAS na clula NK na membrana, se liga ao receptor FAS (que vai
reconhecer que trimrico) vai reconhecer e a partir dessa ligao so
recrutadas molculas adaptadoras que por sua vez recrutam as pr-caspases,
quando as pr-caspases so atradas para a membrana, vo se associar vai
haver clivagem daquele domnio e vai firmar caspases essa via extrnseca
envolve principalmente as caspases 8 e 10.
A via intrnseca disparada por um sinal apopttico que vai fazer com
que o citocromo C saia da membrana da mitocndria onde ele fica, onde ele
deve atuar, ele sai por um complexo protico formador de poro que
normalmente est sendo impedido de ser formado por ao da protena BCL2,
essas protenas existem na membrana externa mitocondrial mas no formando
um agregado por onde o citocromo C pode sair, mas se a clula receber um
estmulo apoptotico que bloqueia a ao da BCL2 ela vai deixar de inibir a
formao do poro por agregao dessas protenas dentre elas a BAC e a BAX
e o citocromo C vai sair.
 Existem tambm protenas chamadas de IAPS que tambm tem uma
ao anti apoptotica s que ela age diferente da protena BCL2, a IAP se liga a
caspase impedindo a atuao da caspase, s que dentro da mitocndria tem
protenas como a RID e a DIABLO que saem junto com o citocromo C quando
formado o poro pela agregao das protenas e elas agem impedindo,
bloqueando a ao das IAPS que deixa de agir e as caspases ficam ativas
atingir os alvos proteicos chave de funcionamento celular.
Em geral a gente fica respondendo sempre a sinais de sobrevivncia
celular como mitose, e mantendo a via anti apoptotica ativa, por exemplo:
Como as clulas manteram ativa a via de bloqueio da apoptose? Uma forma
de manter ativa essa via de bloqueio da apoptose aumentando sempre
produzindo sempre a protena BCL2 bloqueando a sada do citocromo C.
Outra maneira so protenas que se ligam a BCL2 e impedem a ao dela,
uma das protenas que faz isso chamada de BAD, ela se liga a BCL2 e
bloqueia a ao da BCL2 e ento a clula fica propensa a sofrer apoptose,
dessa forma ter q haver a ativao de protenas cinases que vo fosforilar a
BAD a qual na forma fosforilao incapaz de se ligar a BCL2 assim a BCL2
fica livre para agir bloqueando a apoptose.
Por fim, e essa via mais comum em leveduras por exemplo, a resposta
ao fator de sobrevivncia a ativao de uma via da MAPcinase que vai
fosforilar a RID (que bloqueia a ao da IAP) e a RID fosforilao nao
consegue agir impedindo a ao da IAP.
Se houver um desequilbrio entre a quantidade das clulas que so
produzidas e a quantidade de clula que morre haver por exemplo a formao
de um tumor, da mesma forma se a diviso est normal e diminui o mecanismo
de apoptose o desequilbrio tambm pode provocar a formao de um tumor. A
apoptose um processo vital necessrio mas deve ser balanceado, por isso as
clulas tem que responder sempre a sinais que recebe.