UNIVERSIDAD

SAN PEDRO

FACULTAD : CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA : LABORATORIO C. ANATOMIA P.

CURSO : INMUNOLOGIA

DOCENTE : LIC. MAYURI

TEMA : AG - AC

CICLO : V CICLO

ALUMNO(A) : JANDER VELA MONTENEGRO

HUACHO PER

PRACTICA N 02
IMNUNLOGIA
REACCIN AG-AC
OBJETIVOS:

Observar las reacciones Ag-Ac correctamente, diferenciando el procedimiento correcto y las fallas
que pueden ocurrir.
Realizar la extraccin de sangre venosa utilizando jeringa o equipo vacutainer.
Aprender las bases tericas de la reaccin en forma prctica.
Conocer el procedimiento correcto de realizar una Prueba Rpida HCV.

INTRODUCCION

El virus de la hepatitis C (VHC) es un virus ARN monocatenario pequeo con envoltura y de sentido
positivo. Actualmente se sabe que el VHC es la principal causa de la transmisin por va parenteral de la
hepatitis que no es del tipo A ni B. El anticuerpo del VHC se encuentra en ms del 80% de los pacientes
con hepatitis correctamente demostrada de tipo diferente a A y B. Con los mtodos convencionales no se
ha conseguido aislar el virus en el cultivo celular ni visualizarlo con un microscopio electrnico. La
clonacin del genoma viral ha permitido desarrollar ensayos serolgicos que emplean antgenos
recombinantes. En comparacin con los principales inmunoensayo (EIA) comerciales para VHC de
primera generacin que empleaban antgenos recombinantes sencillos, se han incorporado mltiples
antgenos que emplean pptidos sintticos y/o protenas recombinantes a los nuevos anlisis serolgicos
para evitar la reactividad cruzada no especfica y aumentar la sensibilidad a las pruebas de anticuerpos
del VHC. La Prueba Rpida HCV en Cassette (Suero/Plasma) es una prueba rpida para detectar
cualitativamente la presencia de anticuerpos de HCV en una muestra de suero o plasma. La prueba
utiliza un conjugado de oro coloidal de protenas HCV recombinantes para detectar selectivamente
anticuerpos de HCV en suero o plasma. Las protenas recombinantes HCV utilizadas en el kit de la
prueba estn codificadas por genes para ambas protenas estructurales (nucleocpside) y no
estructurales.
PARTE TEORICA
La interaccin entre antgenos-anticuerpos se
estabiliza mediante enlaces dbiles como puntes de
hidrogeno, fuerzas de vander wals e interacciones
electroestticas e hifrofobicas. la suma de todos
estos enlaces genera una interaccin estable entre
el lugar de unin del anticuerpo (paratopo) y el lugar
de unin del antgeno (epitopo). La suma de estas
fuerzas de atraccin y de repulsin se conoce como
afinidad del anticuerpo.

Las molculas de inmunoglobulina presentan un

mximo de 10 (igm) y un mnimo de 2 brazos de unin con el antgeno. En el caso de que este ltimo
tambin sea multivalente, presentara un mnimo de dos puntos de anclaje para el anticuerpo
correspondiente. Esta interaccin multivalente entre antgeno y anticuerpo permita introducir el concepto
de avidez o afinidad funcional.

Caractersticas De La Reaccin Antgeno-Anticuerpo

Especificidad: Es la capacidad de los anticuerpos para distinguir entre dos ligados de estructura similar.
La unin dada por la especificidad es muy precisa y permite distinguir entre grupos qumicos con
diferencias mnimas.

Rapidez: Es la velocidad con la que ocurre la primera etapa de la reaccin y est limitada nicamente
por la difusin. La segunda etapa que es ms larga incluye todas las manifestaciones que se presentan
como consecuencia de la interaccin tales como precipitacin, aglutinacin, neutralizacin etc.

Espontaneidad: La reaccin agac no requiere energa adicional para poder efectuarse.

Reversibilidad: Dado que la reaccin se debe a fuerzas no covalentes es reversible y por lo tanto se ve
afectada por factores como la temperatura, la proporcin agac, el ph y la fuerza inica.

Tipos De Reacciones Antgeno Anticuerpo

Neutralizacin: Mediante anticuerpos especficos se pueden neutralizar toxinas, virus o enzimas. Los
anticuerpos neutralizantes requieren un solo tipo de combinacin con el antgeno para poder actuar y as
puedan ser univalentes aunque anticuerpos divalentes y multivalentes pueden neutralizar tambin, un
antisuero que contiene anticuerpos neutralizantes contra una toxina se denomina "antitoxina".
Precipitacin: La reaccin de precipitacin ocurre cuando se
combina un anticuerpo por lo menos divalente, con un antgeno
soluble y esto conlleva a la formacin de agregados que
precipitan. Como las reacciones de precipitacin son fcilmente
observables in vitro estas resultan pruebas serolgicas muy
tiles, especialmente para medir concentraciones de
anticuerpos. Para que la precipitacin ocurra de manera mxima se
necesita que tanto el antgeno como el anticuerpo estn en
buenas concentraciones optimas, cuando cualquiera de los
reaccionantes estn en exceso no se pueden formar grandes agregados
antgeno-anticuerpo.

Aglutinacin: Cuando un antgeno articulado reacciona con su

anticuerpo especifico (divalente por lo menos) se observa la formacin de
grumos a agregados que precipitan esto se conoce como aglutinacin. En
estas reacciones el determinante antignico esta sobre la superficie de
una partcula o de una clula. Estas reacciones son ms sensibles que las
de precipitacin para detectar pequeas cantidades de anticuerpos debido a
que relativamente pocas molculas de anticuerpo pueden unir
efectivamente un gran nmero de partculas de
antgeno en grumos gruesos macroscpicamente visibles.

Opsonizacion: Producida por unos anticuerpos especiales

(opsoninas) que se fijan sobre la superficie del antgeno facilitando
la accin de clulas fagocitarias y clulas asesinas naturales (nk)
PARTE PRCTICA

A. MATERIALES QUE SE UTILIZAN EN LA PRACTICA

MATERIAL BIOLOGICO: Suero

MATERIAL EXTRACCIN VENOSA: Tubos y agujas vacutainer, capuchn, ligadura o torniquete,
esparadrapo, Torundas.
EQUIPOS: Microscopio, centrifuga

MATERIALES PARA EXTRACCION DE SANGRE

PROCEDIMIENTO

1. Hay que dirigirse al paciente e informarle sobre el procedimiento a que va a realizar.

2. Preparar el material y equipo, rotular el tubo con el nombre del paciente.
3. Se ha de colocar adecuadamente al paciente, para tener acceso fcil y cmodo a la fosa
antecubital.
4. Hay que preparar todo el material, incluidos los tubos para recogida de la muestra, el torniquete,
los objetos que se emplean para limpiar la piel, las jeringas, cuando sea necesario, la aguja estril
para extraccin de sangre y dispositivo utilizado para fijar la aguja al tubo de extraccin al vaco.
5. Se solicita al paciente que cierre el puo para que las venas resulten ms palpables.
6. Se selecciona una vena adecuada para la puncin. Se prefieren las venas de la fosa antecubital,
en particular la cubital interna y la ceflica.
7. Preparar la cpsula insertando la aguja pero dejando un poco flojo la capucha de la parte externa
de la misma para retirarlo al momento de la puncin.
8. Se aplica un torniquete varios centmetros por encima de la zona de puncin. No hay que dejar
nunca el torniquete ms de 1 minuto.
9. Se limpia la zona de la venopuncin con una torunda embebida en solucin en alcohol.
10. Se comienza en el punto de la puncin y se prosigue la limpieza hacia fuera siguiendo un
movimiento en espiral. Se deje que la zona se seque y no se toca con ningn objeto que no haya
sido esterilizado previamente.
11. Se fija firmemente la vena tanto por encima como por debajo del lugar de puncin, con la ayuda de
los dedos pulgar y medio, o ndice y pulgar.
12. Se penetra a travs de la piel con la aguja formando un ngulo de aproximadamente 15 con el
brazo y con el bisel hacia arriba se sigue la direccin de la vena con la aguja.
13. Se introduce la aguja con suavidad pero con la suficiente rapidez para reducir las molestias del
paciente.
14. Una vez que haya llenado el tubo, se retira, cogindolo por su extremo y tirando suavemente de l.
15. Cuando la sangre comience a fluir, se suelta el torniquete.
16. Una vez que se haya extrado toda la muestra, hay que indicar al paciente que relaje el puo y que
no bombee con la mano.
17. Se coloca suavemente sobre el punto de la puncin una bola de algodn estril. Se extrae la aguja
y a continuacin se ejerce presin sobre la zona.
18. Se venda el brazo, generalmente es suficiente una bola de algodn, para detener la hemorragia.
19. Una vez tomada la muestra retirar el tubo con la sangre y colocarlo en la gradilla para poder llevar
al servicio correspondiente.
20. Se homogeneniza la muestra y se etiqueta los tubos.
21. Se recolecto por venopunsin la muestra en un tubo tapa roja (sin anticoagulantes)
22. Espere la formacin del coagulo.
23. Separe el suero por centrifugacin.
24. Cuando est preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el dispositivo.
25. Colquelo sobre una superficie limpia y plana. Asegrese de marcar el dispositivo con la
identificacin del paciente.
26. Transfiera la muestra con una pipeta que dispense la muestra en el centro del pozo de muestra
asegurndose de que no haya burbujas.
27. Agregamos las 2 gotas de muestra (suero) inmediatamente dentro del pozo en posicin vertical.
28. Agregamos 1 gota de diluyente buffer inmediatamente dentro del pozo en posicin vertical
29. Espere a que aparezca la lnea(s) coloreada. El examen debe ser ledo en 10 minutos.
30. No lea los resultados despus de 20 minutos, evite confusiones descarte el casete despus de
leer el resultado.
RESULTADOS

Para capturar los anticuerpos se obtuvo el suero sanguneo.

Obtuvimos la reaccin del antgeno - anticuerpo en coloracin de las bandas.
Positivo; la presencia de ambas lneas c y t, indica qu anticuerpos de hcv fueron detectados en el
espcimen. cuando el nivel de anticuerpos de hcv es muy bajo la lnea t puede aparecer como una
lnea rosa plido. muestras con resultados positivos deben de ser confirmadas con mtodos ms
especficos antes de hacer una afirmacin positiva.
Negativo; si nicamente la lnea c se desarrolla, la prueba indica que no fueron detectados
anticuerpos de hcv en el espcimen y el resultado es negativo.
Invlido; si la lnea C no aparece en los primeros 5 minutos, repita la prueba con un accesorio
nuevo.

Una lnea que

aparece en la zona de control (C) se considera un control positivo interno del procedimiento. Indica que
se ha aplicado un volumen de muestra suficiente y que el procedimiento se ha realizado correctamente.

La lnea C siempre debe aparecer, independientemente de la `presencia VCH. Si la lnea C no se

desarrolla en 5 minutos, revise el procedimiento y repita el ensayo con un nuevo dispositivo.

CONCLUSIONES

La Prueba Rpida HCV en Cassette (Suero/Plasma) es un inmunoensayo cromatogrfico rpido

para la deteccin cualitativa de anticuerpos del virus de la hepatitis C en suero o plasma.

El resultado de la Prctica dio Negativo, la lnea que aparece en la zona de control (C) lo que

determina que el resultado es Negativo.

 Si el resultado del anlisis es negativo pero los sntomas clnicos persisten, se recomienda realizar

un anlisis adicional con otros mtodos clnicos. Un resultado negativo no excluye en ningn

momento la posibilidad de una infeccin de hepatitis C viral.

D.
ANEXO

Materiales para la Toma de muestra en el Laboratorio Inmunologa

Toma de la Muestra
BIBLIOGRAFIA

http://reaccionantigeno-anticuerpo.blogspot.pe/2010/04/reaccion-antigeno-anticuerpo-la.html

http://monlab.es/document/Muestras%20suero-plasma/IFU%20HCV.pdf

http://www.grupomexlab.com/pdf/rapidas/3001151.pdf

https://microinmuno.files.wordpress.com/2013/07/manual-de-inmunologia.pdf

http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-83762006000200008