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CITOLOGIA 2016
Arlindo Ugulino Netto.

RIBOSSOMOS

Ribossomos so organelas citoplasmticas encontradas em procariotos e eucariotos. Eles so amplos

complexos de protenas (protenas ribossomais) e molculas de RNAs ribossmicos (rRNAs), sendo 3 molculas de
RNAr nos procariotos e quatro nos eucariotos. Esses complexos de protenas [RNAr] so chamados subunidades e so
produzidos no nuclolo. A principal funo dos ribossomos servir de stio de traduo, ou seja, sntese de protenas
(reunio de aminocidos em protenas) uma vez que 2 subunidades (uma grande e uma pequena) so unidas pelo
mRNA em uma sequncia especifica de aminocidos ou uma cadeia polipeptdica.
So encontrados nas clulas sob duas formas: livres ou associados ao
retculo endoplasmtico.
Livres: encontrados no citoplasma, pode ocorrer com um nico
ribossomo ou em grupos conhecidos como polissomos. Responsvel
por protenas que esto em soluo no citoplasma.
Associados ao reticulo: encontrados associados membrana exterior
do retculo endoplasmtico. Responsveis pelas protenas que formam
membranas, que so estocadas em vesculas no citoplasma ou
exportadas para o exterior da clula.

A composio qumica do RNA difere do DNA em diversos aspectos:

ele contm o acar ribose no lugar da desoxirribose e a base uracila (U) ao
invs da timina (T); dobra-se, adquirindo diversas formas importantes na sua
funo. O DNA composto por fita dupla enquanto o RNA composto por uma
fita simples.
As clulas produzem vrios tipos funcionalmente de RNAs tais como o mRNA, que transporta instrues de
como fazer protenas, tRNA que atua como molcula adaptadora de sntese de protena e o rRNA que um dos
componentes dos ribossomos.

TIPOS DE RIBOSSOMOS
Os ribossomos apresentam componentes que so
designados pelos seus valores S, ou seja, sua taxa
sedimentao em uma ultracentrifugao. Embora os ribossomos
tanto dos eucariotos como dos procariotos apresentem
semelhana na estrutura e na funcionalidade, eles diferem no
tamanho e no nmero dos seus componentes proteicos.
Essas estruturas so compostas por duas subunidades
uma grande e outra pequena de RNAs-ribossomais (rRNAs) que
se encaixa entre si para formar um ribossomo completo. O
ribossomos 70S procaritico formado por uma subunidade 50S
(grande) que consiste nos rRNAs 5S e 23S de 34 protenas e
uma subunidade 30S (pequena) constituda pelo rRNA 16S de 21
protenas. O ribossomo 80S eucaritico contm uma subunidade
60S apresentando rRNAs 5S, 5,8S e 28S com 49 protenas e
uma subunidade 40S tendo rRNA 18S de 33 protenas.

FORMAO DOS RIBOSSOMOS

O processamento de RNAs ribossomais em clulas procariticas e eucariticas acontece de forma similar. No
procarionte Escherichia coli, por exemplo, para cada rRNA disperso no genoma existem sete operons (unidade de
expresso gnica procaritica que inclui genes estruturais coordenadamente regulados, e elementos controladores que
so reconhecido por produtos de genes reguladores) diferentes, e essa unidade contm uma cpia de cada sequncia
de rRNA 5S, 16S e 23S.
O pr-rRNA (estrutura longa que normalmente tem vida curta) das clulas procariticas em sua clivagem inicial
sofre a ao RNA Polimerase III (RNase III), levando a cortes na estrutura do transcrito primrio gerando precursores
distintos para cada um dos trs rRNAs. Esse por sua vez sofrero mais um processo de clivagem efeito da ao das
RNases M5, M16 e M23, liberando as molculas dando origem aos rRNAs finais 5S, 16S e 23S.
Nas clulas eucariticas, como j foi discutido, apresentam quatro rRNAs 5S, 5,8S, 18S e 28S representados por
uma cpia. Os rRNAs 5,8S, 18S e 28S so sintetizados atravs de modificaes qumicas e clivagem a partir de um
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nico precursor longo, que sofre a ao da RNA polimerase I (RNase I), j o rRNA 5S sintetizado a partir de um grupo
separado de genes por uma polimerase diferente, a RNase III, no necessitando de modificaes qumicas. No se sabe
por que esse RNA transcrito separadamente.
O transcrito primrio dos eucariotos sofre vrias clivagens, primeiramente nos espaadores externos transcritos
(ETS), aps vrios ciclos de modificaes, os espaadores internos transcritos (ITS) sofre tambm ao de enzimas
liberando o pr-rRNA 20S a partir do precursor 32S. Este ambos precursores sero aparados, e a regio 5,8S faz par
com rRNA 28S atravs de pontes de hidrognio, antes que sejam produzidas as molculas finais. Tudo o que foi descrito
ocorre no nuclolo.
Modificaes qumicas ocorrem no precursor antes que o rRNAs sejam clivados a partir deste, e montados sobe
a forma de ribossomos. Essas modificaes incluem metilaes das posies 2-OH nos acares nucleotdeos e
isomerizaes de nucleotdeos uridina para pseudo-uridina, mas as funes destas modificaes no so
compreendidas em detalhes, sabe-se que elas provavelmente ajudem no dobramento e na unio dos rRNAs finais e
podendo tambm alterar sensivelmente a funo dos ribossomos.

TRANSCRIO
A transcrio o processo de formao do RNA a partir do DNA. Ela comea com a
abertura e a desespirilao de uma pequena poro da dupla hlice do DNA, para expor as
as bases em cada fita de DNA. Uma das duas fitas da dupla hlice do DNA, ento, reage
como um molde para a sntese de uma molcula de RNA. A sequencia de nucleotdeos da
cadeia de RNA determinada pela complementariedade do pareamento de bases entre os
nucleotdeos a serem incorporados e o DNA-molde.
Imediatamente aps a regio onde os ribonucleotdeos foram adicionados, a cadeia
de RNA deslocada, e a hlice do DNA se reassocia.
As enzimas que realizam a transcrio so denominadas de RNA polimerases. Elas
catalisam a formao de pontes fosfodister que ligam os nucleotdeos entre si para formar
uma cadeia linear.

SPLINCING DO RNA
As sequncias codificantes de genes eucariticos so
caracteristicamente interrompidas por sequncias intervenientes no-
codificantes (ntrons).
Descoberta em 1977, esta caracterstica dos genes eucariticos foi
uma surpresa para os cientistas, que estavam familiarizados apenas com
genes bacterianos, os quais, caracteristicamente, consistem em uma poro
contnua de DNA codificante que diretamente transcrita em mRNA. Em
contraste extremo, os genes eucariticos so encontrados sob forma de
pequenos pedaos de sequncias codificantes (sequncias expressas ou
xons) intercaladas por sequncias intervenientes ou ntrons.
Tantos as sequncias de ntrons como as sequncias de xons so
transcritas em RNA. As sequncias dos ntrons so removidas do RNA pelas
ribonucleoprotenas pequenas e nucleares (SNURPS), enquanto que os xons
so reunidos entre si. Esse processo o chamado splicing de RNA
Numa primeira etapa, o pr-RNAm clivado na extremidade 5 do
ntron, que ento unida a um nucleotdeo de adenina dentro do ntron (perto
da sua extremidade 3). O intermedirio resultante tem uma estrutura em forma
de lao. Depois, ocorre clivagem na extremidade 3 do ntron e a ligao entre
os dois xons.
Este RNA resultante chamado de mRNA funcional, o qual sai do
ncleo em direo ao citoplasma para o incio da traduo pelo ribossomo.
Algumas doenas, como a talassemia, podem ser causadas pela
mutao em regies intrnicas (nesse caso a mutao criou um novo local de
corte para o ntron, produzindo um sinal de parada precoce da protena).
A talassemia um tipo de anemia hereditria causada pela reduo ou
ausncia da sntese da cadeia de hemoglobina, uma protena situada no
interior dos glbulos vermelhos e que tem a funo de transportar o oxignio.

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TRADUO E SNTESE PROTEICA NOS EUCARIOTOS

A sntese proteica feita no ribossomo, uma mquina cataltica complexa feita a partir de mais de 50 diferentes
protenas (as protenas ribossomais) e diversas molculas de RNA, os RNAs ribossomais. O ribossomo composto de
duas subunidades: uma grande e uma pequena. A subunidade pequena fornece uma regio sobre a qual os tRNAs
podem ser eficientemente pareados sobre os cdons do mRNA, enquanto a subunidade grande catalisa a formao das
cadeias peptdicas que ligam os aminocidos (aa) entre si.

Uma vez que a sntese de protena foi iniciada, cada aminocido novo adicionado cadeia em extenso em
um ciclo de reaes contendo trs etapas:

A Iniciao
A traduo inicia-se com um cdon de iniciao AUG que corresponde a um tRNA iniciador que transporta
sempre a metionina (no-formilada). Este tRNA iniciador liga-se pequena subunidade ribossomal. H tambm
a ligao de fatores de iniciao.
A pequena subnidade ribossomal liga-se extremidade 5 do mRNA e percorre-o at encontrar o primeiro AUG.
A grande subunidade ribossmica liga-se pequena subunidade, formando um ribossomo funcional.
O tRNA iniciador encontra-se no stio P (peptidil) deixando o stio A (aminoacil) vazio, pronto para que outra
molcula de aminoacil- tRNA o ocupe, iniciando a sntese proteica.

B Alongamento ou Elongao
Aps o complexo de iniciao ter sido formado, a traduo continua pelo alongamento da cadeia polipeptdica.
O stio A, at ento vazio, ocupado por um aminoacil- tRNA correspondente ao segundo cdon do mRNA.
A metionina solta-se do tRNA iniciador e liga-se por ligao peptdica aos aa recm-chegado no local A,
formando um peptidil- tRNA.
De seguida, ocorre a translocao, em que o ribossomo se move 3 nucleotdeos ao longo do mRNA,
posicionando o prximo cdon num stio A vazio. Assim, o peptidil- tRNA translocado do stio A para o P e o
tRNA iniciador do stio P para o E (exit - sada).
A ligao de um novo aminoacil- tRNA ao stio A, induz a libertao do tRNA iniciador do stio E, deixando o
ribossomo pronto para a insero do prximo aa na cadeia polipeptdica em formao.
O alongamento da cadeia polipeptdica prossegue at que um cdon de STOP (parada) seja translocado no stio
A do ribossomo.

C Terminao
Aps vrios ciclos de alongamento surge um cdon STOP (UAA, UAG, UGA) no local A. Estes cdons no so
reconhecidos por nenhum RNAt.
Liga-se um fator de terminao ao cdon STOP.
Esta ligao altera a atividade da peptidil transferase, que catalisa a adio de H2O (em vez de um aa) ao
peptidil- tRNA.
D-se a hidrlise da ligao entre o peptdeo e o tRNA, com consequente libertao do peptdeo e do tRNA do
ribossomo.
O ribossomo liberta o mRNA e dissocia-se nas suas 2 subunidades.

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POLIRRIBOSSOMOS
As molculas de mRNAs que esto sendo traduzidas so, consequentemente, de modo geral encontradas sob
forma de polirribossomos - grades arranjos citoplasmticos compostos de vrios ribossomos separados por cerda de 80
nucleotdeos sobre uma nica molcula de mRNA.

Estas iniciaes mltiplas significam que muitas molculas de protena podem ser produzidas em um mesmo
tempo determinado do que seria possvel se cada ribossomo tivesse que completar o processo antes que o prximo
ribossomo o iniciasse.

SNTESE PROTEICA: EUCARIONTES VS PROCARIONTES

Etapa Eucariontes Procariontes

Transcrio Tm 3 RNAs polimerases que sintetizam diferentes Os genes so transcritos por uma nica
RNAs: RNA polimerase.
Polimerase I: sintetiza rRNA de grande
dimenso. A RNA polimerase liga-se diretamente s
Polimerase II: sintetiza o RNAnh (que origina sequncias promotoras.
o mRNA) e o RNAsn.
Polimerase III: sintetiza rRNA de pequena
dimenso e tRNA.

As RNAs polimerases requerem fatores de

transcrio para se ligarem s sequncias
promotoras.

Processamento Os transcritos primrios de mRNA sofrem Os ribossomos tm acesso imediato ao

do mRNA processamento por splicing, antes de serem usados mRNA e a traduo iniciada enquanto a
como moldes para a sntese proteica. transcrio ainda est em progresso.
Traduo Iniciao A sntese proteica iniciada com metioninas no- A sntese proteica iniciada com um
modificadas. resduo de metionina modificada: N-formil-
Fatores de iniciao: eIF-1, eIF-1A, eIF-2, eIF-2B, metionina.
eIF-3, eIF-4A, eIF-4B, eIF-4E, eIF-4G, eIF-5. Fatores de iniciao: IF-1, IF-2, IF-3.
Alongamento Fatores de alongamento: eEF-1, eEF-1, eEF-2. Fatores de alongamento: EF-Ta, EF-Ts,
EF-G.
Finalizao Fatores de terminao: eRF-1, eRF-3. Fatores de terminao: RF-1, RF-2, RF-
3.

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ANTIBITICOS COMO INIBIDORES DE SNTESE PROTEICA PROCARITICA

Muitos dos mais eficientes antibiticos utilizados na medicina moderna so compostos produzidos por fungos
que inibem a sntese proteica bacteriana. Algumas dessas drogas exploram as diferenas estruturais e funcionais entre
os ribossomos bacterianos e eucariticos de forma a interferir preferencialmente com o funcionamento dos ribossomos
bacterianos.
Consequentemente, alguns desses compostos podem ser ingeridos em altas doses sem que ocorra uma
toxicidade indesejada nos seres humanos. Tendo em vista que diferentes antibiticos se ligam a diferentes regies dos
ribossomos bacterianos, eles frequentemente inibem passos distintos no processo sinttico. Alguns antibiticos mais
comuns esto listados na tabela abaixo:

Antibitico Clulas-alvo Efeito

Estreptomicina Procaritica - Inibe a iniciao
- Provoca erro na leitura do mRNA
Tetraciclina Procaritica - Inibe a ligao do aminoacil-tRNA ao stio A do ribossomo
Cloranfenicol Procaritica - Inibe a atividade da peptidil transferase
Eritromicina Procaritica - Liga-se subunidade 50S do ribossomo e inibe a translocao
Puromicina Procaritica e - Provoca a terminao prematura da cadeia, atuando como um anlogo do
Eucaritica aminoacil-tRNA
Cicloheximida Eucaritica - Inibe a atividade da peptidil transferase