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Alejandro C Olivieri
Facultad de Ciencias Bioqumicas y Farmacuticas,
Universidad Nacional de Rosario
Gustavo A Rivas
Facultad de Ciencias Qumicas,
Universidad Nacional de Crdoba
La qumica analtica
en el siglo xxi
L
a qumica analtica desarrolla y aplica mto- mediciones de componentes en concentraciones cada vez
dos e instrumentos para obtener informacin ms bajas, por ejemplo, contaminantes ambientales o me-
confiable sobre la composicin y naturaleza tabolitos de frmacos, y de hacerlo en muestras de alta
de muestras. Tiene innumerables aplicaciones complejidad, como las naturales o biolgicas. Otra de las
prcticas, desde los anlisis clnicos hasta las causas de los cambios experimentados es el avance del ins-
determinaciones forenses, pasando por la conservacin de trumental cientfico, incluido el progreso de las ciencias
obras de arte, la ciencia de materiales, el control de calidad de la computacin, que proveen herramientas metodol-
de frmacos y alimentos, y la contaminacin ambiental. gicas y tcnicas para lograr los mencionados objetivos.
La qumica analtica contempornea enfrenta el gran Entre los avances tecnolgicos cabe mencionar la ge-
desafo de determinar de manera sensible, precisa y se- neracin de los llamados instrumentos acoplados o en tndem,
lectiva los compuestos de inters o analitos en muestras que consisten en acoplar en forma sucesiva equipos di-
complejas, como tambin el de encontrar mtodos que ferentes, de modo que cada uno proporcione una venta-
permitan confirmar la presencia de determinados analitos ja comparativa, como mayor sensibilidad (capacidad de
en muestras de modo rpido y eficiente, conocidos como detectar componentes en concentraciones bajas) o mayor
mtodos de screening o de respuesta binaria (s-no). selectividad (capacidad de distinguir entre componentes
En los ltimos aos, la qumica analtica ha experi- de estructura qumica similar). Con ello, el equipo resul-
mentado importantes cambios debido a una variedad de tante posee mejores caractersticas analticas que cada uno
causas, entre las que se cuentan la necesidad de realizar de sus componentes.
De qu se trata?
Qu es la quimiometra? Qu son los sistemas microfludicos, que en la jerga de uso cotidiano de los
qumicos se conocen por lab-on-a-chip? La utilizacin de modelos matemticos para realizar anlisis
virtuales y la aplicacin de la electrnica para crear instrumentos miniaturizados de anlisis qumicos
se cuentan entre las herramientas de la qumica analtica del siglo XXI.
Quimiometra
La quimiometra puede definirse como la aplicacin de
mtodos matemticos y estadsticos a la comprensin y
solucin de problemas qumicos. Es un captulo de la
gran disciplina qumica que se caracteriza por una sim-
Intensidad
450
ms avanzados que una simple regresin lineal.
n
isi
350
(
(excit
300 ca analtica y definido nuevas reas de investigacin en
acin) 250 350
(nm) 200 tres aspectos relevantes: (1) el diseo y la optimizacin
de experimentos; (2) el anlisis descriptivo, y (3) el an-
Figura 2. Superficie tridimensional que muestra la intensidad de emisin de fluores- lisis predictivo.
cencia de un antibitico urinario en funcin de las longitudes de onda de excitacin El objetivo del diseo y la optimizacin de experi-
y de emisin. A partir de estos datos multidimensionales es posible cuantificar la con-
mentos es encontrar condiciones ptimas para llevar a
centracin del antibitico en un fluido biolgico como la orina, aun en presencia de
potenciales interferentes. cabo un anlisis qumico, por ejemplo, establecer par-
metros como el pH, la temperatura o la concentracin de
reactivos auxiliares que conduzcan a la mejor respuesta
posible, con el consecuente aumento de la sensibilidad
y la disminucin del lmite de deteccin. Se procura de-
terminar esas condiciones ptimas en forma confiable y
con el mnimo esfuerzo.
El anlisis descriptivo intenta elaborar modelos mate-
mticos de las propiedades de un sistema qumico con el
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ARTCULO
objeto de comprender relaciones que pueden estar ocultas. el fin de bloquear la respuesta de los interferentes. En es-
Trata lo que habitualmente se denomina problemas de clasifica- pectroscopia, se han generado nuevos reactivos derivatizantes,
cin, ya que el resultado de este tipo de anlisis es la capa- es decir, compuestos qumicos capaces de reaccionar con
cidad de asignar distintas muestras a diferentes clases. Por los componentes de una muestra de manera diferencial,
ejemplo, los espectros infrarrojos de muestras de aceite de de modo que los derivados, productos de la reaccin de
oliva permiten establecer dnde se origin el producto, ya dichos componentes con el reactivo derivatizante, pue-
que eso depende, de manera sutil, de la composicin qu- den diferenciarse en cuanto a su espectro de absorcin
mica de la muestra, la que aparece reflejada en pequeas o luminiscencia.
variaciones espectrales. Esas variaciones, no detectables a En muchos casos estas aproximaciones experimen-
simple vista, pueden ser analizadas matemticamente para tales pueden ser inadecuadas, por razones de costo,
permitir discriminar entre las muestras. de tiempo o, simplemente, porque la selectividad del
Por su lado, en los estudios predictivos, la meta es mo- sistema no puede incrementarse por esas vas. La qui-
delar las propiedades de un sistema para predecir su com- miometra provee una camino alternativo, que consis-
portamiento en situaciones nuevas. Por ejemplo, un modelo te en procesar matemticamente datos instrumentales
matemtico de la relacin entre los espectros de infrarro- intrnsecamente poco selectivos, de modo de aislar la
jo cercano de muestras de sangre humana con contenido contribucin del analito deseado de la seal total. La ca-
conocido de glucosa permitira predecir ese contenido en libracin multivariada fue concebida con ese propsito. Se
muestras de sangre de nuevos pacientes. El infrarrojo cerca- trata de un conjunto de tcnicas matemtico-estadsticas
no, representado por NIR (de near infrared), es una de las tres capaces de modelar la relacin entre la concentracin
franjas en que se suele dividir la zona de radiacin infrarroja de los componentes de una muestra y la informacin
del espectro, con longitudes de onda de entre 0,7 y 5 micr- instrumental que puede registrarse, para dicha muestra,
metros (milsimas de milmetro). en forma de mltiples variables (longitudes de onda en
Estas aplicaciones ocupan un lugar preponderante espectroscopia, por ejemplo). Algunos investigadores la
en la qumica analtica, ya que uno de los objetivos llaman cromatografa virtual debido a su semejanza con la
de mayor inters para esta es la cuantificacin de los cromatografa real, en la que los componentes de una
analitos de las muestras que estudia, y uno de los de- muestra se separan fsicamente, mientras que con la cro-
safos ms interesantes de la disciplina es cuantificar matografa virtual, que es parte de la quimiometra, se
componentes de muestras complejas, habitualmente los separa matemticamente.
en presencia de una multitud de otras sustancias (lla- Durante las dcadas de 1960 y 1970, la calibracin
madas forneas o concomitantes) que pueden producir en multivariada recibi un impulso importante por la ne-
los instrumentos de anlisis una respuesta similar a la cesidad de disponer de herramientas para cuantificar
del analito. Ejemplos de esta clase de situaciones son analitos a partir de espectros de absorcin en la zona
la determinacin de glucosa en la sangre humana, im- del infrarrojo cercano. Esta tcnica espectral cuenta con
portante en el caso de diabticos; la de aceite en semi- ventajas interesantes para el anlisis rpido y no invasivo
llas oleaginosas, o la de benzopireno, un hidrocarburo de material que se desea preservar intacto, pero tiene el
considerado cancergeno, en aguas contaminadas. En inconveniente de su baja selectividad. El procesamien-
los tres casos las muestras contendrn compuestos de to matemtico de espectros NIR permite, sin embargo,
estructura y propiedades qumicas similares a las del restaurar esa selectividad. El desarrollo de la regresin por
analito de inters. Si estos impiden el anlisis preciso cuadrados mnimos parciales (PLS, por partial least squares, un
del analito, se denominan componentes interferentes. procedimiento avanzado de anlisis estadstico) acom-
Tradicionalmente, se ha intentado resolver el ubicuo pa en muchas ramas de la industria al avance de la es-
problema de los interferentes mediante procedimientos pectroscopia NIR, que fue verdaderamente espectacular.
experimentales. Un ejemplo de ellos es la tcnica de sepa- Hoy es rutinario realizar, mediante la combinacin NIR/
racin de componentes conocida como cromatografa, en la PLS, anlisis de, por ejemplo, el contenido de sacarosa
que los diferentes constituyentes qumicos de una mues- en azcar de caa, de materia grasa en alimentos lcteos
tra son separados gracias a la diferente velocidad con la o en carnes, de polifenoles en vino, lo mismo que la
que fluyen, mientras toman contacto con una fase llama- determinacin del octanaje de naftas, la viscosidad de
da estacionaria. Esta ltima interacta de manera diferencial aceites y la procesabilidad de harinas, entre otras tantas
con los compuestos que conforman la muestra, y les pro- situaciones. La figura 1 muestra un conjunto de espec-
porciona a cada uno de ellos una velocidad caracterstica. tros NIR de semillas intactas de girasol, a partir de los
Fases estacionarias capaces de generar mayores diferencias cuales puede cuantificarse exitosamente su contenido de
de velocidad entre componentes poseen una selectividad aceite mediante PLS.
creciente respecto de los componentes a separar. En el mbito de la calibracin multivariada, los ms
En electroqumica, se han modificado los electrodos recientes avances se han dado en la generacin y el pro-
con distintos criterios o estrategias experimentales con cesamiento de datos instrumentales multidimensionales.
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ARTCULO
Electroforesis Electrodos
Cargado Vidrio
de gel Silicio
Reaccin
trmica
Placa madre
Medicin de PC
de gota
Canales de gel
Cargado de
muestra Fotodetectores
Unin de circuitos
Calentadores
Detectores de temperatura
Canales de uidos
Venteo de aire
fluidos en una escala micromtrica, ha sido crucial para proporcionalidad al pasar de una escala a la otra. Adems
el desarrollo de los sistemas analticos miniaturizados. de las ventajas obvias asociadas con el menor volumen
La miniaturizacin de los sistemas de anlisis es, des- de muestra (entre 0,10 y 10 microlitros o millonsimas
de hace tiempo, uno de los objetivos de la qumica ana- de litro) de reactivos y de desechos, en los sistemas mi-
ltica contempornea. A partir de 1990, ese propsito crofludicos se producen fenmenos que ocurren de ma-
llev al diseo de sistemas en los que se integren las nera diferente de los que tienen lugar en las dimensiones
diferentes etapas del procedimiento analtico en un ni- mayores:
co dispositivo electrnico o chip de pequeas dimensio-
nes (figura 3). En las ltimas dos dcadas, esos sistemas, El flujo en los canales (cuyas dimensiones osci-
conocidos como lab-on-a-chip, biochips o micro-total-analysis- lan entre uno y 1000m) tiende a ser laminar, lo
systems (TAS), han recibido gran atencin debido a las que asegura un transporte convectivo solo en la
mltiples ventajas asociadas con la miniaturizacin, la direccin del flujo del fluido.
integracin y la automatizacin. La difusin permite el movimiento de partculas
Los componentes principales del lab-on-a-chip son: y el mezclado de fluidos.
inyector, propulsor del flujo, mezclador, reactor, detec- La sedimentacin puede lograrse sin necesidad
tor y controlador general. El inyector es el encargado de de centrifugado y solo por gravedad, lo que per-
asegurar la insercin de un volumen exacto de muestra mite la separacin de partculas dispersas.
o reactivo, la cual puede hacerse desde fuera o desde Si se selecciona el diseo adecuado, la microes-
dentro del chip. cala permite obtener sistemas de anlisis total
La fuente de inspiracin para el diseo de los actuales (TAS) capaces de realizar todos los pasos del
sistemas microfludicos fue el anlisis por inyeccin en flujo anlisis en el chip: toma de muestra, procesa-
(FIA, por flow injection analysis), tcnica ideada en 1970 por miento, separacin, deteccin y manipulacin
el checo Jaromir Ruzicka, profesor emrito de la Universi- de desechos. Se han logrado diseos con los que
dad de Washington en Seattle. Los primeros dispositivos de es factible, incluso, realizar las etapas previas de
FIA fueron gradualmente reemplazados por diseos cada tratamiento de muestra, como tambin acoplar
vez ms automatizados, integrados y miniaturizados, que etapas de preconcentracin de la muestra y de
permitieron la obtencin de importante informacin derivatizacin (obtencin de un producto deri-
para el desarrollo de los sistemas microfludicos. vado de similar estructura qumica). La precon-
Estos sistemas son descriptos con frecuencia como centracin es esencial debido a los pequeos vo-
versiones en miniatura de sus contrapartidas en escala lmenes de muestra con los que se trabaja y a la
macro. Sin embargo, muchos fenmenos no guardan la baja concentracin del analito en ciertos casos; la
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