LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

INFORME N 1

FACULTAD : INGENIERA INDUSTRIAL

ESCUELA : AGROINDUSTRIAS

CURSO : MICROBIOLOGA GENERAL

PROFESORA: DOROTHY TORRES DE LEON

TEMAS :

- INSTRUMENTOS BASICOS EN LA PRCTICA

MICROBIOLOGICA.
- LIMPIEZA DEL MATERIA DE VIDRIO
- ACONDICIONAMIENTO DEL MATERIAL DE
LABORATORIO

ALUMNO : SAUCEDO GARCIA MAYRA

Piura, 26 de Abril del 2012.

 I. INTRODUCCIN:

Todo laboratorio de microbiologa debe estar implementado con una serie de instrumentos
bsicos de acuerdo con los requerimientos cientficos actuales.

Los materiales pueden ser de vidrio, de plstico, de aluminio y de acero inoxidable.

Los vidrios que se utilizan en un laboratorio de microbiologa, cuentan con propiedades

especiales, de acuerdo a la composicin que posee por ejemplo las marcas KIMAX y PIREX,
utilizan el vidrio de boro-cilicato que soporta temperaturas de hasta 510C y no se deforman;
debido a su composicin de resinas que poseen un sufren la accin de lcalis ni de cidos.

El microscopio (de micro-, , pequeo, y scopio, , observar) es un instrumento que

permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. El tipo
ms comn y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento
ptico que contiene dos o ms lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto
y que funciona por refraccin. La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este
instrumento se llama microscopa.

Los microscopios pueden ser:

Simples, como las lentes de aumento ordinarias (lupas) con la cual se puede observar objetos
pequeos.

Compuestos, presentan sistemas de lentes

Partes de un microscopio compuesto:

1. MECANICA.- el pie y soporte, la columna o brazo, el tubo, el tornillo micromtrico, el

tornillo micromtrico, la platina, las pinzas, el revlver:
2. SISTEMA OPTICO.- el ocular, los objetivos, los objetivos secos, los objetivos de
inmersin
3. SISTEMA DE ILUMINACIN.- fuente de iluminacin, el espejo, condensador, diafragma.

En principio vamos a tener dos tipos de materiales: el contaminado (el que ha tenido contacto
con microorganismos) y el no contaminado. Cuando se trata de material contaminado, se
deber esterilizar en autoclave a 121C, 15 libras de presin, durante 20 a 30 minutos antes
de someterlo al proceso de lavado.

Para llevar a cabo el proceso de lavado, se recomienda el empleo de detergentes biodegrables,

neutros, que no dejen residuos, de manera de no interferir con los resultados de los ensayos
analticos. Se prepara una solucin a la concentracin indicada para remojar el material por el
tiempo necesario, siguiendo las instrucciones del fabricante, posterior a ello se enjuaga con
abundante agua potable hasta eliminar todo resto de jabn, luego se enjuaga 2 3 veces con
agua destilada, se deja secar en la estufa (de secado de material) a 60-70 C por el tiempo
necesario.

Piura, 26 de Abril del 2012.

Si se requiere limpiar material de vidrio que tiene manchas de grasa de difcil remocin, se
recomienda sumergirlo en una solucin de dicromato de sodio o potasio en cido sulfrico
concentrado (mezcla sulfocrmica) durante 24 horas, posterior a ello se sigue el
procedimiento de enjuague sealado anteriormente

La eficiencia del lavado se puede evaluar, observando si el agua escurre en forma continua por
su superficie interior, sin dejar gotas aisladas que sealen un proceso de limpieza deficiente y
hacer pruebas con azul de bromotimol para determinar trazas del detergente. Una vez que el
material est limpio y seco debe ser esterilizado, para ello previamente deber empacarse de
manera que se pueda mantener estril hasta el momento de su uso.

El material que sirve de envoltura final, o que se emplea para su preparacin, debe tener las
caractersticas siguientes:

Ser adecuado para el proceso de esterilizacin. Por ejemplo si va a ser utilizado para envolver
un material que va a ser esterilizado por calor hmedo, debe permitir la circulacin del vapor y
a la vez deber ser resistente a la humedad y la presin.

Ser resistente a pinchazos y abrasiones.

Permitir envolver el material completamente.

Permitir la identificacin del material estril.

Permitir retirar el material estril con facilidad.

Estar libre de colorantes y sustancias txicas

Ser econmico.

Entre los materiales que ms se emplean para envolver el material antes de su esterilizacin,
se encuentran:

Para la esterilizacin por calor hmedo: papel Craft o papel crepado.

Para la esterilizacin por calor seco: papel Craft o papel de aluminio.

Finalmente es importante realizar controles de modo de verificar si el material de vidrio fue

convenientemente sometido a limpieza y esterilizacin.

Objetivos:

Reconocimiento y utilidad de los instrumentos de uso frecuente en el

laboratorio de microbiologa.
Dar a conocer al estudiante los procedimientos para la limpieza dell material
de vidrio.
Familiarizar al estudiante con las tcnicas de preparacin del material de vidrio
para su esterilizacin.

Piura, 26 de Abril del 2012.

II. MATERIAL Y METODO:

A diferencia de un laboratorio de anlisis general de alimentos en el laboratorio de

microbiologa se encuentran equipos y materiales de uso especfico que son necesarios
para realizar dicho anlisis, entre esos materiales se encuentran:

Porta objetos: Son laminas de vidrio rectangulares de 70 mm de largo, por 26mm de

ancho y de 1mm de espesor, los bordes estn generalmente biselados, los excavados
en gota pendiente.

Cubre objetos: Son delgadas laminas de vidrio de forma cuadrada o redonda de

medidas variables, comprendidas generalmente entre 15mm a 22mm, o ms de
dimetro o lado, por 0.17 a 0.20mm de espesor.

Limpieza: Los porta objetos y cubre objetos generalmente se encuentran engrasados

por el contacto de las manos, antes de usarlos convienen desengrasarlos, por el cual se
lavan con agua y se sumergen en alcohol o en una mezcla sulfocromica.

Tubos de ensayo: Existen de varios tamaos, el tipo utilizado habitualmente mide

16cms de largo por 18mm de dimetro, los de tamao pequeo miden 11cms. Tiene
mltiple aplicaciones en el Laboratorio especialmente como recipiente de medios de
cultivos. Este debe obturarse su boca con un tapn de algodn, al fin de conservar su
esterilizacin.

Placas de petri: Son recipientes en forma cilndrica, compuesto de caja y de tapa de

vidrio, los hay de varios tamaos, las de uso mas corriente miden 10cm, de dimetro
por 20mm de altura y de menos tamao 8cms por 15 mm o de 6cms por 15mm. Se
utiliza para obtener una amplia superficie de siembra en los medios slidos.

Tubos de fermentacin durham: Son pequeos tubos de 70 x 10 mm, que se coloca al

fondo de un tubo de ensayo y que se utiliza para evidenciar la produccion de gas de
una bacteria al fermentar determinados azucares.

Tubos de centrifuga: Se emplean para contener lquidos de los que quiere separar por
la fuerza centrifuga, partculas, clulas o microbios que se encuentren en suspensin.
Son de diversos tamaos, formas y medidas, las cuales desde 5ml de capacidad hasta
300ml.

Frascos kitasato: Son matraces de forma igual a los Erlen Meyer, de vidrio ms grueso
y con una tubuladora lateral. Se utiliza para filtrar al vaco.

Vasos cnicos: Son probetas de forma cnica con el vrtice truncado hacia abajo. Las
hay graduales y sin graduar.

Piura, 26 de Abril del 2012.

Asa de platino, agujas de inoculacin, mangos de kolle: Estos son instrumentos muy
usados en microbiologa. Los primeros son alambres de platino o de niquel-cromo, de
unos 6 a9cm de longitud por 1mm mas o menos de grosor, que van insertadas en el
extremo de una varilla con dispositivo de rosca en el extremo. MANGO KOLLE. Se llama
asa cuando el extremo libre se dobla en forma de anillo bien cerrado y con el dimetro
de mas o menos 4mm /asa normal y se utiliza para sembrar en la superficie de los
medios slidos o para tomar pequeas porciones de cultivo liquido para su traspaso a
otro medio o para su examen microscpico.

Aguja de inoculacin: Cuando es recta sin anillo y se usa par sembrar en picadura en
la profundidad de un medio slido de tubo o para tomar pequeas porciones de un
cultivo sobre medio slido como por ejemplo para tomar con precisin un fragmento
de colonia en la superficie de un medio de cultivo. Se usa para sembrar o tomar
picadura pequeas porciones de un cultivo sobre medio slido.

Esptulas de Drigalsky: Se utiliza para la diseminacin del material sobre la superficie

de los medios de cultivo, corrientemente se fabrican en el mismo laboratorio.

Pipetas: Son tubos que terminan en una extremidad afilada, se emplean en el trasvase
de lquidos y se cargan aspirando por el extremo romo. Las hay graduadas indicando el
volumen que contienen.

Pipetas Pasteur: Tienen dimetro de 4 a 8 mm, una de sus extremidades est muy
alargada y de calibre muy disminuido. Se utilizan cuando hay que manejar una
cantidad de medio cultivo que resulta grande para el asa de platino. Toda pipeta lleva
cerca del extremo por donde se absorbe un trozo de algodn que impide que los
lquidos puedan llegar a la boca del operador adems asegura la esterilidad en su
interior.

Autoclave: Es esencial en cualquier laboratorio de microbiologa, la mayora de los

medios de cultivo y materiales contaminados son rutinariamente esterilizados en l.

Adems de estos materiales tambin se utilizan instrumentos y equipos que

son de uso general en un laboratorio tales como: Balones, balones aforados, matraces
erlenmeyers o fiolas, frascos lavadores o picetas, cilindros graduados, beakers,
embudos, morteros

ESTERILIZACION: Este concepto denota la destruccin o eliminacin de todos

los organismos vivientes y sus esporas en un determinado material o producto. El
mtodo para alcanzar la esterilidad esta determinado por las caractersticas del
producto. La eleccin del proceso de esterilizacin mas adecuado requiere un
conocimiento del equipo usado y de la estabilidad del material a utilizar.

Piura, 26 de Abril del 2012.

METODOS DE ESTERILIZACION:
A.-AGENTES FISICOS
1.- CALOR
- Calor Hmedo:
a.- Vapor a presin: uso de autoclave a 15 lb de presin a 121C por 15
minutos
b.- Tindalizacin.
c.- Agua Hirviendo
d.- Pasteurizacin

- Calor Seco:
a.- Aire Caliente.
b.- Incineracin

2.-RADIACIONES:

Rayos Ultravioletas
Rayos X
Rayos Catdicos
Rayos Gamma

AGENTES MECANICOS:
1.- Filtracin
a.- Filtros de Profundidad
b.- Filtros de Superficie (membranas filtrantes)

AGENTES QUIMICOS:
1.- Gaseosos: Oxido de etileno, betapropio lactona, formaldehido
2.- No Gaseosos:
a.- Derivados de mercurio
b.- Cuaternaria de Amonio

c.- Compuestos Fenlicos

El proceso de esterilizacin se aplica dependiendo del material a esterilizar, el

procedimiento a seguir es el siguiente:
Pipetas: Con un alambre de grosor adecuado, se les coloca en la boquilla un trozo
pequeo de algodn que acta como filtro, impidiendo la contaminacin del material
absorbido con los microbios del operador, y a la vez acta como protector de este
evitando la llegada del lquido a la boca. A estas pipetas para ser esterilizadas se les
coloca dentro de cajas o estuches metlicos, o envueltas en papel aluminio, y se les
esterilizas por calor seco a 160 C durante 2 horas.

Tubos de ensayo: Se tapan uno a uno con algodn, y se envuelven en grupos o se

colocan en cestas para ser esterilizados. El tapn debe quedar introducido en el tubo
no debe quedar ni muy flojo ni muy apretado.

Piura, 26 de Abril del 2012.

 Placas de Petri: Se envuelven individualmente en papel aluminio o se colocan en los
porta placas.

Otros Materiales: Los matraces, balones, cilindros graduados, fiolas y frascos se

tamponan como los tubos (con algodn) y se cubre el algodn con papel aluminio
antes de ser esterilizados por calor seco a 160- 180C por 2 horas.

Esterilizacin en autoclave:
1.- Coloque los tubos de ensayo contenido cada uno medio de cultivo en cestas
metlicas. Protjalos con una cubierta de papel aluminio.
2.- Esterilizar en autoclave a 15 lbs de presin, 121C por 15 minutos.

III. RESULTADOS

En la prctica de reconocimiento de materiales pudimos observar a los

diferentes instrumentos que se utilizan en laboratorio de microbiologa.
En la practica de limpieza de material de vidrio observamos los que la
profesora encargada hacia, mostrndonos los pasos de como se deben limpiar
los materiales de vidrio.
En la prctica de acondicionamiento del material de laboratorio la profesora
nos dio las pautas que debemos seguir para poder esterilizar los materiales de
vidrio.

IV. DISCUCIONES

De acuerdo con las teoras revisadas despus de la realizacin de la practica de

reconocimiento de materiales notamos que los pasos a seguir son iguale o
similares.
En la limpieza de material de vidrio de acuerdo las teoras hay que ser muy
cuidadosos para evitar cualquier tipo de contaminacin con algn
microorganismo patgeno.
Segn lo ledo en algunos textos el acondicionamiento de material de vidrio se
debe realizar de manera efectiva para poder obtener una buena esterilizacin
del material a utilizar.

Piura, 26 de Abril del 2012.

V. CONCLUSIONES

Podemos concluir que en la en la practica de laboratorio realizada se cumpli

con los distintos objetivos planteados.
Se puede aadir tambin que se debe trabajar con bastante precaucin para
as evitar algn contacto con microorganismos.
Se debe tener cuidado con la manipulacin de los equipos en el laboratorio
para evitar que se malogren.

VI. BIBLIOGRAFA

practicasintegrales.files.wordpress.com/2007/05/practica-1.doc
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_P
rep_de_material_de_vidrio.pdf
http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio
http://www.ucm.es/info/mfar/pdfs/odonto/GuiaMicrobiologiaOdontologia.pdf

Piura, 26 de Abril del 2012.