Seminario : Metabolismo de

Glúcidos II
Temario:

Regulación de Glucólisis

Regulación de Gluconeogénesis
Vía de las pentosas fosfato
Metabolismo del glucógeno
Regulación del metabolismo del glucógeno

Dr. Juan Toledo – Dra. Vanesa Herlax

Cátedra de Bioquímica y Biología
Molecular -2010
1ra. mitad
 Regulación y control metabólico
Los seres vivos son sistemas abiertos que mantienen el estado estacionario

Se demostró que un sistema en estado estacionario produce la maxima cantidad

de trabajo útil para una energía dada. Por tanto es un estado de máxima eficiencia
termodiámica

El flujo ( velocidad de la corriente) de los intermediarios a través de una vía

metabólica es constante. Esto es que las velocidades de síntesis y degradación
del intermediario lo mantienen a concentración constante

Perturbaciones leves en el estado estacionario originan cambios en los flujos que

las contrarrestan

El estado estacionario de un sistema abierto como las células, es análogo al estado

de equilibrio de un sistema aislado, ambos son estables

Regulación metabólica es el proceso por el cual se mantiene el estado estacionario

de la corriente de metabolitos a través de una vía

Control metabólico es la influencia que se ejerce sobre las enzimas de una vía, en
respuesta a señales externas, para alterar el flujo de los metabolitos
 Mecanismos de control de flujo

Las reacciones de una vía que estan próximas al equilibrio (son reversibles),
pequeñas aumentos en la concentraciones de sus sustratos permiten un
cambio de flujo.

Las reacciones alejadas del equilibrio (irreversibles) necesitan grandes

cambios en las concentraciones de sus sustratos para responder con un
cambio de flujo

Por consiguiente el flujo en el estado estacionario a través de una vía

metabólica solo puede regularse por una reacción de no equilibrio. Estas
reacciones son sus pasos determinante(s) de la velocidad, que por definición
son mucho mas lentos que los pasos siguientes

El flujo a través de un paso determinante puede alterarse por varios

Mecanismos: control alostérico, modificación covalente, ciclos de sustrato y
control genético. Los 3 primeros responden rápidamente a señales externas en
seg o min y el último es un control a largo plazo en hs .o días
 Controles metabólicos
Compartimentalización Asociación con proteínas
reguladoras

Transcripción Traducción Degradación

DNA RNA ENZIMA aa

Degradación

nucleótidos Regulación alostérica Modificación covalente

Variando la cantidad de enzima (por acción de hormonas)

Alterando la actividad de enzimas preexistentes

Compartimentación
Regulación de glucólisis
Hexoquinasa

PFK-1 catalizan reacciones alejadas del equilibrio

Piruvato quinasa

Regulación de la actividad de la Hexoquinasa:

Posee inhibición alostérica por el producto de la reacción, glu 6-P
 Regulación de la actividad de la Glucoquinasa:
no es inhibida por el producto de la reacción= glu 6-P, sino por la fru 6-P
que siempre se encuentra en equilibrio con la glu 6-P por acción de la
glucosa isomerasa.|

Regulación por isoenzimas:

Glucoquinasa:Km 10mM

No se satura por [glu] sanguínea(5mM)

Contribuye a la función del hígado=

mantener la glucemia

Hexoquinasa: Km 0.1mM

se encuentra saturada y funciona a

Vmáx
Regulación de la glucoquinasa por compartimentalización

En hígado
Regulación de la actividad de la PFK-1:
Cataliza la reacción limitante de la velocidad de la vía ya que los metabolitos
en este punto se comprometen a seguir la vía glucolítica.

Regulación de la PFK-1 por efectores alostéricos:

A pesar que PFK-1 es la principal enzima reguladora de la vía glicolítica

Se demostro que la sobreexpresión de PFK-1 en levaduras no aumenta la
velocidad de la glicólisis.”in vivo”

Su actividad catalítica “in vivo” esta controlada por la concentración de los

efectores que reflejan las necesidades de la demanda de sus productos,
ajustando la actividad de FPK-1 solo a las necesidades de la célula
Principios de la regulación por modificación covalente:
Bajo control hormonal
Principios de la regulación hormonal

Cambios en Unión a Cascada de

hormona
[glucosa] receptor señalización

Inducción Fosforilación
de la de proteínas
expresión

Las hormonas involucradas en la regulación del metabolismo de la glucosa

son:
Glucagón En respuesta a disminución de la glucemia
Adrenalina En respuesta a stress-actividad intensa
Insulina En respuesta a aumento de la glucemia
Efectos de la adrenalina:
Producción de
Degradación del glucógeno (músculo e hígado) Glucosa como
Síntesis de glucógeno (músculo e hígado) combustible

Gluconeogénesis (hígado)
Glucólisis ( músculo)
Producción de ATP

Efectos del Glucagón (en hígado):

Degradación del Glucógeno + glucógeno fosforilasa
Síntesis de Glucógeno - glucógeno sintasa
Glucólisis - PFK-1
+ FBPasa 2
Gluconeogénesis - Piruvato quinasa
+ PEP carboxiquinasa
Efectos de la insulina:
captación de Glucosa Músculo y Tej. adiposo GLUT 4

Hígado Glucoquinasa (+ expresión)

Síntesis de Glucógeno
Degradación de Glucógeno + Glucógeno sintasa

- Glucógeno fosforilasa
Glucólisis + PFK-1 (x activación de PFK-2)
 Fru 2,6biP
Responde a los niveles de glucagón e insulina que reflejan los niveles de
glucosa en sangre. Es sintetizada por la enzima bifuncional PFK-2/Fru 2,6 bi-
Pasa.
 Regulación de la PFK-2/Fru 2,6biPasa por modificación
covalente:
Hígado: Glucosa

insulina
Insulina promueve actividad fosfodiesterasa disminuyendo AMPc y inhibe además la
actividad de PKA
El músculo posee una isoforma diferente que es activa cuando está
fosforilada
 Regulación de la actividad de la Piruvato quinasa:
Posee regulación alostérica y por modificación covalente.

También es una enzima inducible.

Regulación de la Piruvato quinasa por efectores alostéricos:

Acetil-CoA,
AG de cadena larga
 Regulación de la Piruvato quinasa por modificación
covalente :

sólo en hígado

Alta glucosa Baja glucosa

en sangre en sangre

Piruvato quinasa
fosforilada
(menos activa)

Fosfoproteína PKA
fosfatasa

Piruvato quinasa
desfosforilada
(mas activa ) Glucagón
 Regulación de la gluconeogénesis

Cuando la glicólisis esta activa, la gluconeogenesis se

inactiva, las dos vías tienen un control recíproco para
disminuir ciclos futiles

Cuando el nivel de energía de la células es alto, la glucólisis

se inactiva y el piruvato, etc… debe ser utilizado para la
síntesis y almacenamiento de glucosa

Cuando el nivel de energía de las células es bajo, la

glucosa debe ser rápidamente degradada para obtener
energía

¿Que reacciones de las vías espera que sean reguladas

reciprocamente ?
Regulación de glucólisis Regulación de gluconeogénesis
 Enzimas participantes. Su regulación

Piruvato carboxilasa

PEP carboxiquinasa

Fru 1,6 bifosfatasa

 La enzima adenilato quinasa o mioquinasa cataliza la siguiente reaccion

2 ADP ATP + AMP

K= [ATP] [AMP] / [ADP]2
Esta enzima resintetiza ATP a partir del ADP, al mismo tiempo genera AMP,
que es un mejor indicador de la falta de energía .

Una disminución del 10 % de ATP produce un aumento de 4 veces en [AMP]

El flujo metabólico en la glucólisis puede variar 100 veces en función de la

demanda de ATP, sin embargo mediciones de ATP “in vivo” demostraron que la
[ATP] varia menos del 10 % entre el estado de reposo y el ejercicio intenso

No hay mecanismo alostérico conocido que pueda ser responsable de un cambio

de 100 veces en el flujo de una reacción que no esta en equilibrio, con solo 10 %
de cambio del efector. Otros mecanismos deben ser responsables de semejante
cambio
Eric Newshome propuso que los ciclos de sustratos no eran fútiles,sino que
cumplían una función regulatoria. El ciclo de sustrato F-6P a F1,6 BiP por un
camino y F1,6BiP a F-6P por otro camino diferente, puede justificar la variación del
flujo glucolítico.

Un aumento de 4 veces la [AMP] a consecuencia de adenilato quinasa causa un

aumento de actividad de PFK-1 de 10 a 90 % de su valor máximo y una disminución
de la actividad FBPasa del 90 al 10 % de su velocidad máxima.

Estudios “in vitro” de músculo demostraron que la actividad máxima de FBPasa es

10 veces menor que la actividad PFK-1. Asignando un valor de 100 unidades al
vmax de PFK-1 la vmax de FBPasa sera10 unidades

El flujo a través de la PFK en condiciones de alta [AMP] puede aumentar 90 veces

con respecto a baja [AMP].

Sin el ciclo de sustrato un aumento de 4 veces [AMP] aumentaría el flujo unas 9

veces
En consecuencia por la combinación de adenilato quinasa y ciclo de sustrato, una
disminución del 10 % en [ATP] (4 veces aumento de (AMP), puede estimular el flujo
a través de vía glicolítica 90 veces

El ciclo de sustrato es el “precio energético que el músculo debe pagar para pasar
rapidamente del reposo, donde la ciclizacion del sustrato es máxima, a un estado
de intensa actividad máxima

Muchas veces la velocidad de funcionamiento del ciclo puede estar bajo control
hormonal o nervioso, lo cual aumenta la sensibilidad del sistema metabólico. En
el caso de PFK-1 esto sucede y el efector es el F 2-6 Bi-Fosfato

En algunos tejidos los ciclos de sustrato funciona para producir calor, en particular
cuando hace frío, por ciclos de sustrato en hígado y músculo, mecanismo conocido
como termogénesis sin temblor

Las hormonas tiroideas estimulan los ciclos de de sustrato, generando termogénesis

 Destinos metabólicos de la Glucosa

Glucógeno

almacenamiento

Glucosa 6P
Oxidación vía Pentosas fosfato Oxidación vía Glucólisis

Ribosa 5P Piruvato
 Vía de las pentosas fosfato
¾Vía citosólica presente en todas las
células.
¾Consta de 2 fases: oxidativa y no
oxidativa.

Objetivos:
¾- Producción de NADPH: Biosíntesis reductoras
¾- Producción de Ribosa 5-P: ác. nucléicos, ATP,
CoA, NAD+, FAD

¾Tejidos:
¾adiposo, hígado, glándula mamaria, corteza adrenal: con alta actividad
biosintética

¾En eritrocitos, esta vía se usa casi exclusivamente para la producción de

NADPH utilizado en la reducción del glutatión
 Fase oxidativa: Produce NADPH y Ribulosa 5P
La Glu 6P, punto inicial de la vía proviene de la acción de la
Hexoquinasa o de degradación del glucógeno
Glucosa 6P deshidrogenasa La glu 6P se oxida a lactona (éster
cíclico) y reduce una molécula de NADPH.
6 fosfogluconato deshidrogenasa La decarboxilación oxidativa
produce la 2da molécula de NADPH
Fase no oxidativa:

Transfiere
un grupo
Glicolaldehído
(cetol) 2C

Transfiere
un grupo
Dihdroxiacetona
3C
Transaldolasa
Fase no oxidativa: El flujo de 15 átomos de C
a través de la vía de las pentosas-P.
3 Azúcares 5-C se convierten en 2 fructosas (6-C) y G3-P (3C)

C 5 + C 5 Æ C3 + C 7 (Transcetolasa)
C3 + C7 Æ C6 + C4 (Transaldolasa)
C5 + C4 Æ C6 + C3 (Transcetolasa)
____________________________
3 C5 Æ 2 C6 + C3 (Neto)
3 ribosas se transforman en 2 fructosas (= glucosas) y 1 molec. de
gliceradehído 3-P.
Esta reacción se puede invertir.
 Las reacciones de la fase no oxidativa son reversibles
Los productos de la vía varían según las necesidades de la célula.

Modalidad I: Requerimiento de ribosa 5P- Células en división activa

Glucólisis

Transcetolasa y
transaldolasa
Modalidad II: Requerimiento de NADPH y ribosa 5P

rama oxidativa de la vía

de las Pentosas fosfato
Modalidad III: Requerimiento de NADPH Síntesis de ácidos grasos

Gluconeogénesis

Fase no oxidativa

Transcetolasa y transaldolasa transforman el exceso de ribosa 5P en

intermediarios glucolíticos y finalmente en glucosa 6-P
Modalidad IV: Requerimiento de NADPH-ATP

Glucólisis

Fase no oxidativa