UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERA QUMICA Y METALURGIA

ESCUELA DE FORMACIN PROFESIONAL DE INGENIERA QUMICA

Laboratorio de Fisicoqumica
ASIGNATURA: QU - 343 FISICOQUMICA II

PRCTICA N 10
CATALISIS ENZIMATICA: ACCION DE LA CATALAZA SOBRE EL PEROXIDO DE
HIDROGENO

PROFESOR DE TEORA: Ing. QUISPE MISAICO, Hernn

PROFESOR DE PRCTICA: Ing. QUISPE MISAICO, Hernn
ALUMNO:
MESA: n 02
DA DE PRCTICA: mircoles
HORA: 10:00 a 1:00 pm
FECHA DE ENTREGA: 13/07/2016

AYACUCHO PER
2016

CATALISIS ENZIMATICA: ACCION DE LA CATALAZA SOBRE EL PEROXIDO DE

 HIDROGENO

I. OBJETIVOS:

II. REVISION BIBLIOGRAFICA:

III. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS.

Materiales:
2 soportes universales.
2 portaburetas dobles de Fisher.
2 buretas de 10 o 25 mL
2 beakers de 50 mL.
2 embudos de vstago corto.
2 termmetros. 0-50C.
2 Erlenmeyer de 150 mL.
4 capsulas de Petri con tapa.
Equipos:
2 equipos gasomtricos y accesorios.
1 balanza analtica digital.
2 termostatos
2 cronometros.
1 molde circular de 1 2 cm.
Reactivos:
50 mL de H2O2 al 30% w/v.
1 L de agua destilada
100 g de papa

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

a) Instalar los equipos gasomtricos tal como se muestra.
 b) Regular y mantener las dos cubas termostticas a la temperatura establecida.
c) Preparar en cuatro Erlenmeyer las muestras del sustrato, perxido de hidrogeno,
utilizando 5.0, 10.0, 12.5 y 15.0 mL de H2O2 al 30% w/v y aadir agua destilada
para que el volumen total sea 15 mL. Etiquetar y tapar. Anotar en la tabla 1.1.
d) Termostatizar los Erlenmeyer por 7-12 min, dos en cada cuba del termostato.
e) Pesar cuatro muestras con una masa constante de la fuente de catalasa (papa),
de forma cuadrada con una altura de 1-2 mm y cuya masa constante debe estar
entre 0.80 y 0.85 g.(emplear una masa constante: +/- 0.001 g). guardarla en la
respectiva capsula de Petri. Registrar las masas en la tabla n 1.1, la forma y
tamao del enzima debe ser uniforme.
f) Asegurarse de la hermeticidad de ambos equipos. Nivelar el volumen de agua
en cero. Ensayar sucesivamente la dinmica de la medicin del volumen de
oxigeno cada 30 y 60 s.
g) Colocar en el Erlenmeyer y el trozo de papa e instantneamente cerrar la llave y
la tapa, estando el nivel de agua en la bureta en cero.
h) Registrar cada minuto (durante 6 minutos) el volumen de oxigeno liberado, en
mL. Anotar los volmenes ledos en la tabla n 1.2. los dos primeros volmenes
son los ms importantes.
i) Repetir los pasos anteriores (6-8) con los otros Erlenmeyer.

V. CLCULO REQUERIDOS PARA EL INFORME.

1. Construir las figuras N 1.1, 1.2, 1.3, y 1.4 para cada concentracin de sustrato
frente a los tiempos ledos.
2. Hallar la velocidad inicial, Vo, de cada concentracin de sustrato, [S]. anotar.
3. Calcular 1/Vo y 1/[S].
4. Construir la figura N 1.5 (grafica de Lineweark Burk) aplicando el mtodo de
los mnimos cuadrados hallar la pendiente, m, la ordenada, b, y el coeficiente de
determinacin, R2.
5. Ubicar los puntos corregidos (0) y trazar la recta corregida con lnea
entrecortada. Extrapolar hasta interceptar el eje X.
6. Formular la ecuacin de la recta corregida y escribirla sobre la recta. Sealando
el valor de R2.
7. Leer el valor de 1/Vmax y compararlo con b. calcular Vmax.
 8. Calcular en la figura N 1.5 el valor de KM luego de leer -1/KM. compararlo con el
valor obtenido luego igualar 1/Vo = 0 y despejar [S] de la ecuacin de la recta
corregida.
9. Construir la figura N 1.6 (grafica de Michaelis Menten).
10. Con los valores de Vmax y KM, formular la ecuacin de Michaelis Menten.
11. Calcular los valores corregidos de Vo para cada [S], anotarlos en la tabla N 1.4.
y ubicarlo en la figura N 1.6 con (0). Para continuar la curva en dicha figura es
necesaria una terna de Vo para valores mayores de [S].
12. Trazar con lnea entrecortada la ubicacin de Vmax y de KM.
13. Escribir la ecuacin de Michaelis - Menten debajo de la curva.
14. Rotular los ttulos, membretar los ejes x e y, sealar las ecuaciones.

TABLAS DE DATOS EXPERIMENTALES, CALCULOS, GRAFICAS Y

RESULTADOS
TABLA N 1.1. Preparacin de cuatro muestras: sustrato (H2O2) y enzima
(catalasa)

H2O2 H2O + 1/2O2

Ensayo VH2O2 al 3% V H2O, mL % w H2O2/v m tfdec, g
w/v, mL
1 15 0 3 0.8075
2 12 3 2.4 0.8019
3 9 6 1.8 0.8046
4 6 9 1.2 0.7978

a). determinar el nmero de moles iniciales de H2O2, luego la concentracin molar

inicial de H2O2:
100 mL3.0 g VT = depende de cada ensayo: VH2O2 + VH2O
15 mL..?
? = 0.45 g
0.45
n H2O2 = = 0.01323 moles
34.016 /
0.01323 moles
CH2O2 = = 0.8819 mol/L
0.015
El mismo procedimiento para los dems ensayos:
VH2O2 al 3% w/v, n H2O2 ,moles C H2O2, mol/L,
Ensayo V H2O, mL
mL iniciales iniciales

1 15 0 0.01323 0.8819
2 12 3 0.01058 0.7056
3 9 6 0.00794 0.5292
4 6 9 0.00529 0.3528

TABLA N 1.2. Determinacin de los volmenes de oxigeno liberado durante cada

tiempo t y para cada concentracin de sustrato (H2O2) a tO2 = 19C.

S+E SE E+P
H2O2 (ac) + catalasa H2O2.catalasa catalasa + O2 (g) + H2O (l)
volumen de oxgeno, ml
tiempo, ensayo N 1 ensayo N 2 ensayo N 3 ensayo N 4
min [H2O2] = [S]1 = 3%w/v [H2O2] = [S]2 = 2.4%w/v [H2O2] = [S]3 = 1.8%w/v [H2O2] = [S]4 = 1.2%w/v
0 0.00 0.00 0.00 0.00
1 1.00 1.00 0.80 0.80
2 1.90 1.60 1.60 1.50
3 2.60 2.10 2.25 2.15
4 3.20 2.70 2.80 2.70
5 3.80 3.15 3.30 3.20
6 4.30 3.55 3.70 3.65

Determinar el nmero de moles de oxigeno formados, luego determinar el

nmero de moles de H2O2 que reaccionan:

2 mol H2O2 2 mol H2O + 1mol O2

PV = nRT
0.72105 0.001
n = PV/RT =
(0.08205 /)289,15

n = 0.00003039 moles de O2

El mismo procedimiento para los dems ensayos:

 # de moles de oxgeno, mol
tiempo, ensayo N 1 ensayo N 2 ensayo N 3 ensayo N 4
min [H2O2] = [S]1 = 3%w/v [H2O2] = [S]2 = 2.4%w/v [H2O2] = [S]3 = 1.8%w/v [H2O2] = [S]4 = 1.2%w/v
0 0.0000000 0.0000000 0.0000000 0.0000000
1 0.0000304 0.0000304 0.0000243 0.0000243
2 0.0000577 0.0000486 0.0000486 0.0000456
3 0.0000790 0.0000638 0.0000684 0.0000653
4 0.0000973 0.0000821 0.0000851 0.0000821
5 0.0001155 0.0000957 0.0001003 0.0000973
6 0.0001307 0.0001079 0.0001125 0.0001109

2 22
nRxH2O2 = 0.00003039 moles de O2 *( )= 0.00006078 moles de H2O2
1 2
nt1H2O2 = n H2O2 - nRxH2O2
nt1H2O2 = 0.01323 - 0.00006078 = 0.01317
Los dems estn en el cuadro:
nRxH2O2
tiempo, ensayo N 1 ensayo N 2 ensayo N 3 ensayo N 4
min [H2O2] = [S]1 = 3%w/v [H2O2] = [S]2 = 2.4%w/v [H2O2] = [S]3 = 1.8%w/v [H2O2] = [S]4 = 1.2%w/v
0 0.0000000 0.0000000 0.0000000 0.0000000
1 0.0000608 0.0000608 0.0000486 0.0000486
2 0.0001155 0.0000973 0.0000973 0.0000912
3 0.0001580 0.0001276 0.0001368 0.0001307
4 0.0001945 0.0001641 0.0001702 0.0001641
5 0.0002310 0.0001915 0.0002006 0.0001945
6 0.0002614 0.0002158 0.0002249 0.0002219

ntH2O2 = n H2O2 - nRxH2O2

tiempo, ensayo N 1 ensayo N 2 ensayo N 3 ensayo N 4

min [H2O2] = [S]1 = 3%w/v [H2O2] = [S]2 = 2.4%w/v [H2O2] = [S]3 = 1.8%w/v [H2O2] = [S]4 = 1.2%w/v
0 0.013229 0.010583 0.007937 0.005292
1 0.013168 0.010522 0.007889 0.005243
2 0.013114 0.010486 0.007840 0.005200
3 0.013071 0.010456 0.007801 0.005161
4 0.013035 0.010419 0.007767 0.005128
5 0.012998 0.010392 0.007737 0.005097
6 0.012968 0.010367 0.007713 0.005070
1. Construir las figuras N 1.1, 1.2, 1.3, y 1.4 para cada concentracin de
sustrato frente a los tiempos ledos.

Grafica N 1.1: [P]1 vs t, min

[P]1 vs t, min
5.00
4.50 y = 0.7071x + 0.2786
R = 0.9846
4.00
3.50
3.00
[P]1

2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
t, min

y = 0.7071x + 0.2786ec de la grafica

Vo = [s]

Vo = 0.7071*(3) = 2.1213

Grafica N 1.2: [P]2 vs t, min

[P]2 vs t, min
4.00
y = 0.5732x + 0.2946
3.50
R = 0.9804
3.00
2.50
[P]2

2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
t, min

y = 0.5732x + 0.2946.ec. de la grafica.

Vo = [s]

Vo = 0.5732*(2.4) = 1.3757

Grafica N 1.3: [P]3 vs t, min

Chart Title
4.50
4.00 y = 0.6179x + 0.2107
R = 0.9848
3.50
3.00
Axis Title

2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
Axis Title

y = 0.6179x + 0.2107..ec. de la grafica

Vo = [s]

Vo = 0.6179*(1.8) = 1.1122

Grafica N 1.4: [P]4 vs t, min

Chart Title
4.50
4.00
y = 0.6054x + 0.1839
3.50
R = 0.9899
3.00
Axis Title

2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00
0 1 2 3 4 5 6 7
Axis Title

y = 0.6054x + 0.1839ec. de la grafica

Vo = [s]

Vo = 0.6054*(1.2) = 0.7265

2. Calcular 1/Vo y 1/ [S].

Vo [S] 1/Vo 1/[S]
2.1213 3.0 0.4714 0.3333
1.3757 2.4 0.7269 0.4167
1.1122 1.8 0.8991 0.5556
0.7265 1.2 1.3765 0.8333

3. Construir la figura N 1.5 (grfica de Lineweark Burk) aplicando el mtodo

de los mnimos cuadrados hallar la pendiente, m, la ordenada, b, y el
coeficiente de determinacin, R2.

1/Vo vs 1/ [S].
1.6000
1.4000 y = 1.728x - 0.0556
R = 0.9854
1.2000
1.0000
1/Vo

0.8000
0.6000
0.4000
0.2000
0.0000
0.0000 0.1000 0.2000 0.3000 0.4000 0.5000 0.6000 0.7000 0.8000 0.9000
1/ [S]

y = 1.728x - 0.0556..ec. de la grafica

y = mx + b
m = 1.728
b = -0.0556
R = 0.9854

4. Ubicar los puntos corregidos (0) y trazar la recta corregida con lnea
entrecortada. Extrapolar hasta interceptar el eje X.
1 1
1/Vo = ( )+
[]
 1
1/Vo = 1.728([]) + (-0.0556)

1/Vo 1/[S] corregida: 1/Vo = y

0.4714 0.3333 0.5204
0.7269 0.4167 0.6644
0.8991 0.5556 0.9044
1.3765 0.8333 1.3844

1/Vo(correg.) vs 1/ [S]
1.6
1.4 y = 1.728x - 0.0556
R = 1
1.2
1
1/Vo

0.8
0.6
0.4
0.2
0
0.0000 0.1000 0.2000 0.3000 0.4000 0.5000 0.6000 0.7000 0.8000 0.9000
1/[S]

y = 1.728x - 0.0556..ec. de la recta corregida en la grafica.

R = 1

5. Leer el valor de 1/Vmax y compararlo con b. calcular Vmax.

y = 1.728x - 0.0556

1
1/Vo = (x) +

1
= -0.0556, Vmax = -17.9856

6. Calcular en la figura N 1.5 el valor de KM luego de leer -1/KM. compararlo

con el valor obtenido luego igualar 1/Vo = 0 y despejar [S] de la ecuacin
de la recta corregida.
y = 1.728x - 0.0556..ec. de la grafica 1.5.
 1
1/Vo = (x) +


= 1.728, KM = 1.728*(-17.9856) = -31.0791

-(1/KM )= 0.0322
1 1
1/Vo = ([]) +

1
0 = 1.728([]) 0.0556

[S] = 1.728/0.0556 = 31.0791

B) Determinar el valor de XA para cada ensayo usando la relacin: XA = Cc/2CA.
CaVa CbVb CcVc
Hallando CA = , CB = , CC =
Vt Vt Vt
Los resultados se muestran en el cuadro

concentraciones iniciales
XA = Cc/2CA
CA3 = 0.0050
CA4 = 0.0050 ensayo 3 0.0100

CA7 = 0.0100 ensayo 4 0.0100

CB3 = 0.0600 ensayo 7 0.0050
CB4 = 0.0800
CB7 = 0.0600
CC3 = 0.0001
CC4 = 0.0001
CC7 = 0.0001

C). Determinar el valor de (1 XA) para cada ensayo.

1 - XA
ensayo 3 0.9900
ensayo 4 0.9900
ensayo 7 0.9950

D). Construir la grfica n 1: - Ln(1-XA)/CB vs t cuya pendiente = K2 para 20C.

-Ln(1-XA)
tiempo, S - Ln(1-XA)/CB
ensayo 3 0.01005
ensayo 3 142.08 0.16751
ensayo 4 0.01005
ensayo 4 95 0.12563
ensayo 7 0.00501
ensayo 7 79 0.08354
 - Ln(1-XA)/CB vs t
0.18000
y = 0.0012x - 0.0041
0.16000
R = 0.9244
0.14000
- Ln(1-XA)/CB

0.12000
0.10000
0.08000
0.06000
0.04000
0.02000
0.00000
0 20 40 60 80 100 120 140 160
tiempo, S

K2 = 0.0012 = m

Para 30C:

tiempo, S - Ln(1-XA)/CB
ensayo 3 99 0.16751
ensayo 4 60 0.12563
ensayo 7 49 0.08354

- Ln(1-XA)/CB vs t
0.18000
y = 0.0015x + 0.0202
0.16000
R = 0.9045
0.14000
- Ln(1-XA)/CB

0.12000
0.10000
0.08000
0.06000
0.04000
0.02000
0.00000
0 20 40 60 80 100 120
tiempo, S

K2 = 0.0015 = m

E). Calcular analticamente el valor de K2 para cada temperatura, usando la

siguiente expresin:
K2 = - Ln (1-XA)/[CB*t]
Para 20C:
K2, M-1 S-1
ensayo 3 0.00118
ensayo 4 0.00132
ensayo 7 0.00106

PARA 30C:
K2, M-1 S-1
ensayo 3 0.00169
ensayo 4 0.00209
ensayo 7 0.00170

F). Calcular la energa de activacin (Ea) de acuerdo a lo sealado en el

experimento anterior.
Construir la grfica: ln k2 vs (1/t) para calcular la energa de activacin (Ea).

Para 20C:
1/t, s-1 lnK2, M-1 s-1
ensayo 3 0.0070 -6.7431
ensayo 4 0.0105 -6.6283
ensayo 7 0.0127 -6.8518

ln k2 vs (1/t)
-6.6000
0.0000 0.0020 0.0040 0.0060 0.0080 0.0100 0.0120 0.0140
-6.6500

-6.7000
lnK2, M-1 s-1

-6.7500

y = -14.226x - 6.5978
-6.8000 R = 0.1304

-6.8500

-6.9000
1/t, s-1
 Donde se puede remplazarse en: Ea = m*R
y = -14.226x - 6.5978.ec. de la grfica.
Ea = -14.226 * 1.9872 cal/mol*K
Ea = -28.2699 cal/mol*K

Para 30C:
1/t, S-1 lnK2, M-1 S-1
ensayo 3 0.0101 -6.3819
ensayo 4 0.0167 -6.1688
ensayo 7 0.0204 -6.3742

ln k2 vs (1/t)
-6.1500
0.0000 0.0050 0.0100 0.0150 0.0200 0.0250

-6.2000
lnK2, M-1 S-1

-6.2500
y = 4.3411x - 6.3765
R = 0.0351
-6.3000

-6.3500

-6.4000
1/t, S-1

Donde se puede remplazarse en: Ea = m*R

y = 4.3411x - 6.3765.ec. de la grfica.
Ea = 4.3411 * 1.9872 cal/mol*K
Ea = 8.6266 cal/mol*K

TABLA N 1.2. CALCULOS Y RESULTADOS EXPERIMENTALES

Ensayo tiempo, s K2 = - Ln (1-XA)/[CB*t], M-1 S-1

XA = Cc/2CA (1-XA) -LN(1-XA) CB , M
N 20C 30C 20C 30C
3 142.08 99 0.0100 0.9900 0.01005 0.0600 0.00118 0.00169
4 95 60 0.0100 0.9900 0.01005 0.0800 0.00132 0.00209
7 79 49 0.0050 0.9950 0.00501 0.0600 0.00106 0.00170
Prom. de k2 en M-1 s-1: 0.00119 0.00183

VI. CONCLUSIONES.
Se determin el orden de reaccin o sea el valor de n y m, y el orden total de la
reaccin.
Se graficaron la constante de velocidad k2 y analticamente para la reaccin de
segundo orden para cada temperatura.
Se obtuvo la energa de activacin de la reaccin de segundo orden para cada
temperatura.

VII. REVISION BIBLIOGRAFICA.

LAIDLER, K.J. -MEISER, J.H=FISICOQUIMICA. Edit. SECSA.Mexico.1997.

LEVITT, B.PQumica Fsica Practica. Novena edicin. Editorial

Reverte.Espaa.1997.