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MALAJOVICH M.A. e MANN V.S. Micropropagacin. Gua 80: El laboratorio de enseanza; Gua 85:
La desinfeccin de los instrumentos; Gua 90: La desinfeccin de los explantes y Gua 96: Los medios
de cultivo. http://www.bteduc.bio.br
PEAT G. AND JONES M. A protocol for rapid, measurable plant tissue culture using stem disc meristem
micropropagation of garlic (Allium sativum L.). SSR 93(345), 2012.
ACTIVIDAD PRCTICA
OBJETIVO
MATERIAIS
Un diente de ajo, bistur o cuchillo afilado, azulejo, frasco desinfectante con agua sanitaria diluida al
medio, 3 frascos con agua destilada estril, pinzas, papel toalla, una placa de Petri con papel toalla
estril, 4 frascos con medio nutritivo estril *, palitos estriles, alcohol 70, mechero Bunsen
(opcional).
* El medio nutritivo es una solucin de sales minerales a las que se adiciona sacarosa (1 a 5%), agar
(0,7%) y agua de coco, como se indica en las Guas 111: Micropropagacin: medios clsicos y 112:
Micropropagacin: medios alternativos.
PROCEDIMIENTO
Pelar el bulbillo (diente de ajo) y cortar justo en la parte seca de la base, como se observa en la
figura de abajo.
Esterilizar el bulbillo por inmersin, durante 20 minutos, en agua sanitaria diluida a La mitad y con
una gota de detergente.
o En condiciones aspticas, poner los dientes de ajo en una placa de Petri que contiene papel toalla
estril.
o Con un bistur afilado, separar una lmina de 2 mm del disco basal y corarlo al medio.
o Transferir los dos explantes al frasco con medio de cultivo estril, manteniendo la polaridad de
uno de los fragmentos e invirtiendo la del otro.
5. Seguimiento
En relacin con la bibliografa citada, respetamos la indicacin de colocar los dientes de ajo en la
heladera durante al menos una semana antes de iniciar la actividad prctica. No agregamos el
antifngico Nipagin (metilparabeno) en los lavados, como recomiendan los autores, pero realizamos
los tests del procedimiento.
La ventaja de comenzar con la esterilizacin del diente de ajo reside en conseguir eliminar los
contaminantes. A pesar de que el proceso daa los tejidos externos, esto no parece afectar la lmina
caulinar basal que est dentro del bulbillo.
Esta actividad exige tiempo de preparacin, porque demanda bastante material estril, pero el
resultado es excelente. Luego de algunas semanas, observamos el crecimiento de los explantes de
ajo, a partir de la regin meristemtica del disco basal del bulbillo (Figura 2).