TECNICAS DE ESTERILIZACION

Y DESINFECCION

CURSO:
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

PROFESOR:
Mg. GISELA YUPANQUI SICCHA

INTEGRANTE:
LUCIANO ORTEGA BECERRA
OBJETIVOS

Objetivo general
Adiestra en el fundamento y la metodologa aplicados en la actualidad para
destruir o controlar poblaciones microbianas.

Objetivos especficos
Preparar correctamente el material que se someter a esterilizacin.
Aplicar algunas metodologas para esterilizar material.
Comprobar la efectividad del proceso de esterilizacin.
INTRODUCCION

Los procesos de esterilizacin y/o desinfeccin son diariamente llevados a cabo,

no solamente en el laboratorio, donde son fundamentales para evitar la
contaminacin de medios, cultivos, placas etc., sino tambin en otros mbitos
tales como los hospitales, donde fallas en estos procedimientos aumentan la
morbimortalidad de los pacientes.

Al trabajar con microorganismos se sabe que el nmero de variables y factores

que pueden afectar los resultados de las prcticas son mayores que cuando se
realizan experimentos con elementos sin vida. Es por esto que se deben llevar a
cabo ciertos protocolos de limpieza, esterilizacin y desinfeccin tanto en los
materiales, como en el rea de trabajo.
MARCO TERICO

La esterilizacin se define como el proceso validado, en el cual se obtiene un

producto final libre de microorganismos viables (Pommerville, 2007). Es necesario
tener en cuenta que no existe la esterilidad absoluta, y que el nivel de esterilidad
se puede medir por la cantidad de microorganismos que se encuentren en el
material. Los diferentes tipos de esterilizacin son: fsicos y qumicos.
Los mtodos fsicos no utilizan sustancias qumicas para eliminar a los
microorganismos; el principal agente utilizado es el calor. Hay distintas maneras
de transmitirlo, como: calor hmedo, calor seco, incineracin, pasteurizacin,
ebullicin, tindalizacin y radiacin. La pasteurizacin es un proceso fsico
peculiar, ya que, despus de que el lquido es sometido al calentamiento, se enfra
rpidamente y se sella de manera hermtica. Este proceso no elimina las esporas,
ni a los microorganismos termoflicos en su totalidad. (Gutirrez, 2001)

CALOR HUMEDO:
La utilizacin del calor y su eficacia depende de dos factores: El tiempo de
exposicin y la temperatura. Todos los microorganismos son suceptibles en
distinto grado a la accin del calor. El calor provoca desnaturalizacin de
protenas, fusin y desorganizacin de las membranas y/o procesos
oxidativos irreversibles en los microorganismos. El calor hmedo produce
desnaturalizacin y coagulacin de protenas.
Dentro del Calor Hmedo tenemos:
EBULLICIN: Se requiere un recipiente con agua. Es la aplicacin
del calor mediante la ebullicin del agua a presin atmosfrica
(100C). Mediante este mtodo se esterilizan agujas e instrumentos
de ciruga menor. No es confiable este mtodo por cuanto quedan
las esporas.
PASTEURIZACIN: Es la aplicacin de una temperatura inferior a
110C por 30 minutos. La aplicacin del calor va seguida de un
rpido enfriamiento. Se usa para prevenir las infecciones de origen
lcteo y retrasar la descomposicin de la leche, ya que las bacterias
de la leche no forman esporas (bacilo tuberculoso, salmonella,
streptococo y brucela).
VAPOR A PRESIN (AUTOCLAVE): Se realiza la esterilizacin por
el vapor de agua a presin. El modelo ms usado es el de
Chamberland. Esteriliza a 121C a una atmsfera de presin, estas
condiciones pueden variar y se deja el material de 15 a 30 minutos.
El vapor a presin proporciona temperaturas altas con penetracin y
humedad en abundancia que facilitan la coagulacin de las
protenas.
Equipo: Consta de una caldera de cobre sostenida por una
estructura metlica que en la parte inferior recibe calor por
combustin de gas o una resistencia elctrica, esta se cierra en la
parte superior con una tapa de bronce.
Funcionamiento: Se coloca agua en la caldera, procurando que su
nivel no alcance los objetos que se disponen sobre una rejilla de
metal. Se cierra asegurando la tapa sin ajustar los bulones (tornillos
grandes de cabeza redondeada) y se da calor dejando abierta la
vlvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la
salida de vapor en forma de chorro continuo y abundante.
 CALOR SECO:
La esterilizacin por calor seco se produce por la destruccin de los
microorganismos por oxidacin de sus componentes celulares.
Entre los mtodos que utilizan el calor seco como medio de esterilizacin
tenemos:
FLAMEADO: Exposicin directa del instrumento a una flama
AIRE CALIENTE: El aire caliente es uno de los mtodos de
esterilizacin por calor seco ms utilizado. Se lleva a cabo en hornos
especiales que permiten la distribucin uniforme del calor en su
interior donde el material se expone a temperaturas de 170C
durante dos horas.
El tiempo de esterilizacin se debe determinar para cada material por
ejemplo en el caso de materiales muy resistentes al calor se pueden
usar temperaturas ms altas por tiempos ms cortos.

Para la esterilizacin qumica se utilizan distintos compuestos tales como el

etanol, formol, formol, perxido de hidrgeno, entre otras sustancias letales para
los microorganismos. Tambin existen sustancias bacteriostticas que no matan al
organismo, pero impiden su reproduccin. La efectividad de los diferentes
mtodos se puede ver afectada por las caractersticas microbianas, el tiempo de
exposicin, el ambiente y la cantidad de microbios. (Gutirrez, 2001).

Fenol y compuestos fenlicos.

Alcoholes.
Halgenos agentes oxidantes.
Metales pesados.
Colorantes.
Detergentes.
Agente alquilizante.
cidos y lcalis.
CUESTIONARIO

1. Dibuje los principales equipos del laboratorio usados en

Esterilizacin.

AUTOCLAVE

HORNO PASTEUR

ESATUFA DE CULTIVO
2.- Seale 4 ejemplos de muestras usadas en los diferentes mtodos de
esterilizacin.

PLACA PETRI

PIPETA
3.- Qu mtodos de esterilizacin utilizara para caldo urea?
CONCLUSIONES
Se desarrollaron habilidades para esterilizar el material de laboratorio por los
mtodos de calor seco y calor hmedo, tomando en cuenta que el mtodo
escogido corresponde a las necesidades de esterilizacin que se desean cubrir,
teniendo como variantes: el tipo de material, tiempo disponible para esterilizar,
naturaleza de los microorganismos que se desea erradicar, etc.

Resaltamos, adems, la importancia de la limpieza que se le tiene que dar al

espacio de trabajo en donde se preparan los materiales para la esterilizacin, as
como el manejo de ste despus de pasar por el autoclave o estufa de
esterilizacin. Materiales como los tapones de algodn son una parte fundamental
para que no exista oportunidad de contaminacin, es decir, que sirven como
barreras contra la contaminacin.