18/07/2017 Amplificao isotrmica e deslocamento de fios | NEB

Incio > Produtos > PCR qPCR e Amplification Technologies > Amplificao isotrmica e deslocamento da corda > Amplificao isotrmica e deslocamento da corda

Lista de produtos Resumo do Produto

Amplificao isotrmica e deslocamento da corda

A Reao em Cadeia de Polimerase (PCR) uma abordagem bem conhecida e um Vdeos
mtodo para replicar uma sequncia de DNA especfica. O PCR envolve o ciclo
1 de 2
iterativo de um cocktail de reao entre diferentes temperaturas para alcanar a
amplificao. To rotina como a PCR em biologia molecular e laboratrios de
diagnstico molecular, existem outros mtodos de amplificao de DNA especfica de
seqncia. Essas abordagens alternativas muitas vezes no exigem a alterao da
temperatura da reao e so, portanto, muitas vezes referidas como protocolos de
amplificao isotrmica especficos de seqncia. Os protocolos de amplificao
isotrmica so variados e, portanto, apresentam vantagens variadas. No entanto,
algumas vantagens comuns so que as tcnicas isotrmicas so extremamente
rpidas e no exigem os setores de eletricidade.

Quatro exemplos de tecnologias de amplificao de DNA isotrmico

especficas de seqncia incluem:
Atrs do papel: Deteco visual de
amplificao de cido nucleico
isotrmico usando corantes sensveis A amplificao isotrmica gera m
ao pH uma sequncia alvo em um curto
tempo, a uma temperatura consta
Um pequeno prton poderia mudar a forma como
processo usa enzimas de corte p
os cientistas detectaram a amplificao do DNA
nick de uma nica linha, o que pe
no campo e as configuraes de ponto de
ampliao do alvo.
atendimento. Nathan compartilha os detalhes de
www.neb.com/IsothermalAmplifica
seu artigo recente.

A amplificao isotrmica mediada por Loop (LAMP) usa 4-6 iniciadores reconhecendo 6-8 regies distintas do DNA alvo. Uma
polimerase de DNA que desloca a ligao inicia sntese e 2 dos iniciadores formam estruturas de lao para facilitar rodadas de amplificao
subseqentes. A LAMP rpida, sensvel e a amplificao to extensa que o pirofosfato de magnsio produzido durante a reao pode
ser visto por olho, tornando a LAMP bem adaptada para diagnsticos de campo.
A amplificao do deslocamento da cadeia (SDA) depende de uma polimerase de DNA que se desloca , tipicamente Bst DNA
polymerase, Large Fragment ( NEB # M0275 ) ou Klenow Fragment (3 ' 5' exo), para iniciar a replicao em nicks criados por uma cadeia,
Endonuclease de restrio limitada ou enzima de corte em um local contido em um iniciador. O local de corte regenerado com cada
passo de deslocamento da polimerase, resultando em amplificao exponencial. O SDA tipicamente usado em diagnsticos clnicos.
A amplificao dependente de Helicase (HDA) emprega a atividade de desenrolamento de ADN de cadeia dupla de uma helicase para
separar os fios, permitindo o recozimento e a extenso do iniciador por uma polimerase de DNA que desloca o deslocamento. Como PCR,
este sistema requer apenas dois primers. A HDA tem sido empregada em vrios dispositivos de diagnstico e testes aprovados pela FDA.
A reaco de amplificao da enzima de enxerto (NEAR) emprega uma replicao iniciadora de ADN-polimerase que desloca a
ligao em um nick criado por uma enzima de corte, produzindo rapidamente muitos cidos nucleicos curtos a partir da sequncia alvo.
Este processo extremamente rpido e sensvel, permitindo a deteco de pequenos valores alvo em minutos. NEAR j est sendo usado
comumente para deteco de patgenos em aplicaes clnicas e de biossegurana.

https://www.neb.com/products/pcr-qpcr-and-amplification-technologies/isothermal-amplification-and-strand-displacement/isothermal-amplification-and-stra 1/3
18/07/2017 Amplificao isotrmica e deslocamento de fios | NEB

A am plificao isotrm ica m ediada por Loop (LAMP)

A amplificao isotrmica mediada por Loop (LAMP) usa 4-6 iniciadores reconhecendo 6-8 regies distintas do DNA alvo.
Uma polimerase de DNA que desloca a ligao inicia sntese e 2 dos iniciadores formam estruturas de lao para facilitar
rodadas de amplificao subseqentes.

Viso geral de Strand Displacem ent Am plification (SDA)

IsoAmp uma marca registrada da BioHelix Corp.

Saber mais produtos em destaque

Bst 2.0 DNA Polymerase WarmStart LAMP Kit (DNA & RNA)

https://www.neb.com/products/pcr-qpcr-and-amplification-technologies/isothermal-amplification-and-strand-displacement/isothermal-amplification-and-stra 2/3
18/07/2017 Amplificao isotrmica e deslocamento de fios | NEB
Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix
(DNA e RNA)
BST 3.0 DNA Polymerase
WarmStart RTx Reverse Transcriptase

Veja toda a lista

Qual a diferena entre Bst DNA Polymerase, Large Fragment e Bst 2.0 DNA Polymerase?
Por que eu usaria Bst 2.0 WarmStart DNA Polymerase?
FAQs Quando a Bst DNA Polymerase deve ser a enzima de escolha?
Protocolos A Bs DNA Polymerase pode ser usada nas reaes de rotulagem e reaes de preenchimento parcial?

Publicaes
Grfico de seleo de
DNA Polymerase

Outro Contedo Relacionado

Polbase

https://www.neb.com/products/pcr-qpcr-and-amplification-technologies/isothermal-amplification-and-strand-displacement/isothermal-amplification-and-stra 3/3