Controle de qualidade dos

Aula 5 testes de floculao

A qualidade dos resultados fundamental na prtica laboratorial.

Para ter a garantia de execuo correta do trabalho, importante adotar medidas de controle de
qualidade que permitam realizar uma avaliao de cada etapa.

Nesta aula voc ver procedimentos que devem ser adotados para que os resultados produzidos
sejam confiveis e possam ser reproduzidos.

Soros controles
Voc dever utilizar soros controles produzidos no laboratrio disponvel ou adquiridos de fonte
idnea, e no somente os soros controles que so fornecidos com os conjuntos diagnsticos
(kit).

Nem todos os conjuntos diagnsticos vm com controles positivos e negativos. Se voc estiver
iniciando agora o diagnstico da sfilis em seu laboratrio e ainda no dispuser desse tipo de
amostra, solicite a algum laboratrio tecnicamente reconhecido que lhe envie amostras de soro
controle para que voc possa utiliz-las como padro para produzir os seus prprios controles a
partir das amostras de sua rotina.

Os controles que acompanham os kits nem sempre tm volume suficiente para voc realizar o
teste quantitativo todas as vezes em que prepara a suspenso antignica e testa suas amostras.

Verifique a validade da suspenso antignica e dos outros insumos

em cada conjunto diagnstico. Siga rigorosamente as instrues
de cada fabricante.

Diagnstico da Sfilis - Aula 5 1

Prepare seus prprios controles

Os soros controles positivos que voc deve utilizar em sua rotina devem ter pelo menos trs
ttulos distintos: um baixo (at 1/4), um mdio (1/8 a 1/16) e outro alto (acima de 1/32).

Armazene amostras reagentes obtidas da sua rotina. Para confirmar o ttulo das amostras da sua
rotina, teste-as em paralelo a amostras com ttulos conhecidos.

Se os soros com reatividade conhecida reproduzirem o ttulo esperado, os ttulos das suas
amostras sero considerados verdadeiros e elas podero ser utilizadas como soros controles.

Prepare alquotas desses soros com ttulos conhecidos sem os diluir, tendo o cuidado de
identific-los com data, ttulo e o nmero de alquotas armazenadas.

Utilize uma planilha prpria para registrar e controlar a utilizao e

o estoque dos soros.

Faa tambm alquotas de amostras no reagentes. Lembre-se de preparar alquotas dos

controles em volume suficiente para apenas uma reao.

Estoque-as em freezer a menos 20C e descongele diariamente apenas a alquota necessria, que
no dever ser novamente congelada.

Ao descongelar os controles, no se esquea de homogeneiz-los antes de fazer a inativao ou

a reinativao, e no misture amostras de soros positivos.

!
O procedimento de congelar e descongelar vrias vezes um soro
faz com que o ttulo diminua.

Diagnstico da Sfilis - Aula 5 2

 Cuidados com os soros controles

Determine o ttulo do soro controle positivo antes de iniciar uma rotina com testes de floculao.
A obteno do ttulo esperado para o soro controle o que garante que a suspenso antignica
foi corretamente preparada e os equipamentos e insumos utilizados apresentam a qualidade
desejada.

Nos casos das suspenses antignicas prontas para uso, a titulao garante que esto estveis e
adequadas para uso.

Nos casos em que o ttulo dos soros controles no corresponde ao esperado, se voc no obtiver
os ttulos previamente definidos para os controles, e j tiver descartado a possibilidade de que o
problema seja na qualidade da suspenso antignica, verifique se:

a velocidade de agitao da reao estava em 180 2 rpm;

o tempo de agitao da reao foi o preconizado pelo fabricante do kit;
a calibrao da agulha ou da pipeta utilizada para dispensar a suspenso antignica estava
correta;
a leitura foi feita imediatamente aps o trmino da agitao;
os procedimentos de lavagem do material empregado para fazer a reao foram
adequados, pois resduos de sabes e detergentes podem alterar os resultados da reao.

Teste do controle negativo em cada rotina com testes de floculao

Ao testar o soro controle negativo, certifique-se de que a suspenso antignica no apresenta

flocos (grumos) grosseiros, que podem ser confundidos com reatividade da amostra no teste.
Observe primeiro o controle negativo para estabelecer o parmetro de negatividade da reao
antes de fazer a leitura dos resultados das amostras da sua rotina.

Instrues para lavagem dos materiais utilizados nos testes no

treponmicos, como o VDRL

Aps a leitura do teste de VDRL, as lminas devem ser colocadas em soluo de lcool a 70%
(p/p) ou hipoclorito de sdio a 1/5 (uma parte de hipoclorito de sdio comercial e quatro partes
de gua), para descontaminao. Lembre-se de que a suspenso antignica composta por
lipdeos (cardiolipina, colesterol e lecitina).

Por isso, a lavagem das lminas do VDRL, da seringa calibrada e do Erlenmeyer deve seguir os
procedimentos descritos no passo a passo a seguir.

Diagnstico da Sfilis - Aula 5 3

Procedimentos para lavar materiais

1 Lave as vidrarias com gua e sabo neutro, utilizando uma escova.

2 Enxgue pelo menos 10X com gua corrente.

3 Enxgue de 5 a 10X com gua destilada.

4 Enxgue 1X com lcool absoluto.

5 Enxgue 1X com acetona.

6 Deixe secar at que no haja qualquer resduo de acetona.

7 Guarde o material em local adequado para evitar poeira e arranhaduras nas lminas de vidro.

Adiante esto listadas outras orientaes para garantir a qualidade dos testes.
No use reagentes fora do prazo de validade estabelecido pelo fabricante.
No use testes sem registro na Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA).
Prepare o protocolo de trabalho com ateno.
Anote a data e a hora dos ensaios.
Siga rigorosamente as instrues do fabricante e nunca altere os volumes estabelecidos.
Use sempre soros controles positivos e negativos.
Monitore diariamente a temperatura ambiente e registre-a em formulrio prprio.
Monitore diariamente a temperatura do banho-maria e registre-a em formulrio prprio.
Providencie as manutenes preventivas e corretivas dos equipamentos disponveis.
Participe de um programa de Avaliao Externa da Qualidade, conforme estabelecido na
RDC n 302, de 13 de outubro de 2005.

Aprenda mais sobre esse tema realizando o curso Equipamentos

utilizao e monitoramento em unidades hemoterpicas e
laboratrios de sade pblica da srie TELELAB.

Diagnstico da Sfilis - Aula 5 4

 Referncias

LARSEN, S.A., POPE, V., JOHNSON, R.E., KENNEDY, JR., E.J. A Manual of Tests for Syphilis.
Washington: APHA, 1998, 361p. 9 edio

MLLER, I.; BRADE, V.; HAGEDORN, H.J.; STRAUBE, E.; SCHRNER, C.; FROSCH, M. et al.
Is serological testing a reliable tool in laboratory diagnosis of syphilis? Meta-analysis of eight
external quality control surveys performed by the german infection serology proficiency testing
program. J Clin Microbiol. 2006;44:1335-41.

Diagnstico da Sfilis - Aula 5 5