IDENTIFICACION CUALITATIVA DE ALCALOIDES Y GLICOSIDOS

ESTEROIDES DE Hyptis capitata

Alexander Puentes Parra

Departamento de Qumica, Estudiantes de la Universidad de la Amazonia

Florencia, Caquet, Colombia

Resumen

Se realiz un anlisis cualitativo para la determinacin de glucsidos cardiotnicos y

alcaloides presentes en el extracto metanolico de Hyptis capitata una especie perteneciente a
la familia de las lamiaceae conocida como botn negro, usada principalmente como
antisptico y cicatrizante en ulceras varicosas, eczema y afecciones cutneas de tipo
inflamatorio y alrgico. Se realizaron diferentes pruebas, dragendorff, mayer, Wagner para
identificacin de alcaloides y baljet, keller killiani, tollens para glucosidos cardiotnicos
entre otras.

Palabras claves: Hyptis capitata, glucosidos cardiotnicos, alcaloides, lamiaceae, anlisis

cualitativo.

Abstract

A qualitative analysis was performed for the determination of cardiac and alkaloid
glycosides present in the ethanol extract of Hyptis capitata, a species belonging to the
lamiaceae family known as the black button, used mainly as an antiseptic and cicatrizant in
varicose ulcers, eczema and cutaneous conditions of Inflammatory and allergic type.
Different tests were performed, dragendorff, mayer, Wagner for identification of alkaloids
and baljet, keller killiani, tollens for cardiotonic glucosides among others.

Key words: Hyptis capitata, cardiotonic glucosides, alkaloids, lamiaceae, qualitative

analysis.

INTRODUCCION

Desde tiempos antiguos los recursos metabolitos secundarios que poseen las
vegetales han sido utilizados por el plantas y han que han constituido un
hombre principalmente para usos punto de partida para descubrir nuevas
alimenticios. Esto se debe al contenido de sustancias bioactivas.1-5 Son muchas las
poblaciones en el mundo que dependen
en gran manera del uso de plantas
medicinales, tanto es as, que la
Organizacin Mundial de la Salud (OMS)
estima que cerca de 80 % de la poblacin
mundial utiliza plantas medicinales para
atender sus principales problemas de
salud.6-9
Tambin es sabido que Colombia es un
pas con una incalculable riqueza natural;
ocupa el segundo lugar entre los doce
pases con mayor diversidad biolgica del
mundo, con 10 % de la poblacin mundial
vegetal despus de Brasil.10-11 Colombia
posee cerca de 50 000 especies de plantas,
de las cuales en la regin del Caribe se
encuentran alrededor de 3 400; muchas
son utilizadas por poblaciones de esta
regin en la medicina popular, por sus
propiedades medicinales.8
Hyptis es un gnero tropical en una
familia que crece principalmente en
lugares templados, las Lamiaceae. Son
especies que tienen flores pequeas en
cabezuelas; adems son aromticas, como
muchas especies de la familia.
Figura 1. Hyptis capitata
Hyptis es un gnero de 300 especies de las
regiones calidad del nuevo mundo,
especialmente Brasil, con unas pocas
especies representativas en el viejo
mundo.12 Hyptis capitata es una maleza
muy comn en los trpicos de Amrica,
desde Mxico hasta Colombia y
Venezuela y el oeste del Per y ecuador.
Est distribuida ampliamente en toda
Colombia
Esta planta se usa como antisptico y
cicatrizante en ulceras varicosas, eczema y
afecciones cutneas de tipo inflamatorio y
alrgico. La decoccin de las hojas se
emplea para limpiar heridas.13-14
La diversidad estructural y la variedad en
la actividad biolgica, de los alcaloides y
los antibiticos, hacen de estos dos
grupos, los ms importantes entre las
sustancias naturales de inters
teraputico.
Un gran nmero de medicamentos se han
obtenido de plantas que contienen
alcaloides, estos se han aislado
principalmente en plantas superiores y se
han encontrado en ms de 100 familias de
Fanergamas (aquellas plantas que se
reproducen por semillas producidas en
sus inflorescencias), en menor proporcin
en Criptgamas (Plantas que tienen sus
rganos reproductores ocultos) del tipo
licopodios, tambin en microorganismos
(ergot) y animales como peces y ranas del
gnero Phyllobates cuyos alcaloides
constituyen algunas de las sustancias ms
venenosas para el hombre15. Su actividad
biolgica a nivel del sistema nervioso, dio
pie a las primeras investigaciones, siendo
los alcaloides las primeras sustancias
naturales estudiadas.
No existe una definicin exacta para los
alcaloides, pero se puede considerar
como: Un compuesto orgnico de origen
natural (generalmente vegetal),
nitrogenado (el nitrgeno se encuentra
generalmente intracclico), derivados
generalmente de aminocidos, de carcter
ms o menos bsico, de distribucin
restringida, con propiedades
farmacolgicas importantes a dosis bajas
y que responden a reacciones comunes de
precipitacin15-16
Grafica 1 Morfina, alcaloide extrado de la amapola.
Las saponinas esteroides son glicsidos
esteroides con un ncleo espirostano
(Figura 2) que tienen la propiedad de
hemolizar los glbulos rojos y forman
espuma abundante y estable al agitar sus
soluciones acuosas17-18.
Grafica 2 Estructura general de un
cardiotnico.
Son sustancias amargas, derivadas de los
esteroides, que actan sobre el corazn
fortaleciendo el trabajo cardiaco. La
fraccin de hidratos de carbono que
constituyen los glicsidos, contiene de tres
a cinco monosacridos, por lo general
desoxiazcares o azucares especiales.
METODOLOGIA
Pruebas para glucsidos cardiotnicos
Para la identificacin de estos metabolitos
se utiliz el extracto etanlico de la planta:
Prueba de Baljet: Se adicionaron 0,5 ml de
extracto en un tubo de ensayo,
posteriormente se adiciono unas gotas del
reactivo de Baljet. La prueba se considera
positiva si se torna de un color
anaranjado/rojo oscuro.
Prueba de Keller Killiani: A 0,5 mL de
extracto, se le adicionaron unas gotas del
reactivo de Keller-Killiani. El cambio de
coloracin a verdoso al cabo de 5-20
minutos significa prueba positiva para la
presencia de dos desoxiazcares.
Prueba de tollens: Se adiciono 1 mL de
extracto en un tubo de ensayo,
posteriormente se adicionaron de 5 a 8
gotas de piridina y se aadi
posteriormente de 4 a 6 gotas de reactivo
de Tollens. Se calent el tubo de ensayo.
La prueba se considera positiva cuando se
observa la formacin de una pelcula de
plata en el tubo de ensayo.
Pruebas para saponinas
Para la identificacin de estos metabolitos
se utiliz el extracto etanlico de la planta.
Prueba de Vainillina-Acido
glucsido
ortofosfrico (VAO): A 0,5 ml del extracto
metanlico, se le adicionaron unas gotas
de la solucin de vainillina. El resultado se
considera positivo cuando se produce una
coloracin de azul a violeta para la
determinacin de saponinas.
Prueba de Antrona: Se adicion en un
tubo de ensayo una gota de agua y 1 mL
de extracto, posteriormente se adicion
por las paredes del tubo de ensayo
solucin de recientemente preparada de
Antrona. La aparicin de un anillo
verdoso o azul en la interface significa que Vainilla-cido
la prueba es positiva. ortofosforico - grafica 6
Antrona +
Reaccin de la espuma: Se adicion 1,5 Reaccion de - Grafica 7
mL de extracto en un tubo de ensayo con espuma
solucin de HCl a pH 1 y se agit Rosenthaler -
vigorosamente. La prueba se considera
positiva cuando hay aparicin de espuma.
La prueba es tambin realizada con NaOH
a pH 13.

Reaccin de Rosenthaler: A 1 mL de
extracto se adicion reactivo de
Rosenthaler, la prueba se considera
positiva cuando se torna de color violeta,
y es considerada negativa cuando se torna
de color verde.
Grafica 3 Prueba de Baljet
Prueba alcaloides
Para las pruebas de alcaloides se tomaron
aproximadamente 0,5 mL del extracto
metalonico, a cada una de ellas se le
adiciono su respectivo reactivo.

Prueba dragendorff

Prueba dragendorff modificada

Prueba mayer
Grafica 4 Prueba Keller Killiani
Prueba Erhlich

Prueba Wagner

Prueba hager

Prueba marne

Prueba bouchardat

ANALISIS Y RESULTADOS Grafica 5 Prueba Tollens

Tabla 1 Resultado anlisis cualitativo de glicsidos

esteroides

Prueba resultado Grafica

Baljet - Grafica 3
Keller killiani + Grafica 4
Tollens + Grafica 5
 Grafica 6 Prueba Vainilla

Prueba de Keller Killiani:

Mediante el ensayo de Keller-Killiani. Se

reconocen los carbohidratos ligados
incluyen generalmente a la D-glucosa, LR
Grafica 7 Reaccin de espuma hamnosa y desoxiazcares. Muestra la
presencia de carbohidratos en la molcula
de los diversos heterpsido cardiotnicos,
El ensayo de Baljet, permite reconocer en como la 2-desoxiazucares20.
un extracto la presencia de compuestos
con agrupamiento lactnico, en particular
coumarinas, aunque otros compuestos
lctonicos pueden dar tambin positivo
este ensayo. El reactivo de Baljet est
constituido por acido pcrico y NaOH,
dicho reactivo tiene interaccin qumica Prueba de tollens:
directa con el anillo lactonico de los
Se utiliza como reactivo una disolucin
glucsidos cardiotnicos, la apertura del
amoniacal de plata, con presencia de un
anillo lactonico se realiza en medio bsico.
aldehdo se produce un precipitado de
En si se basa en la obtencin de un
plata elemental en forma de espejo de
complejo formado entre el cido pcrico y
plata21.
la lactona , y insaturada, dicho
complejo presenta coloracin rojo claro o
Reaccin:
anaranjado a rojo oscuro19

Reaccin:

Prueba de Vainillina-Acido
ortofosfrico (VAO):
Prueba especfica para esteroides y glucosidico, para |obtener el aglicon el
triterpenoides, con el fin de detectar el cual disminuye la tensin superficial
ncleo esteroidal de los cardiotnicos. generando espuma, sin embargo esto no
Las -lactonas - insaturadas producen requiere decir que todas las saponinas
coloraciones violeta que desaparecen produzcan espuma23.
rpidamente. De esta manera, slo
aquellas manchas que revelan Reaccin de Rosenthaler:
considerarse cardiotnicos pues poseen el
ncleo esteroidal adems de la lactona La formacin de las saponinas se indica
insaturada. Esto se evidencia claramente por el cido cianhdrico al benzaldehdo
con un patrn de digitoxina. en presencia de una mezcla de enzimas
conduce exclusivamente al nitrilo, que por
hidrolisis se transforma en el cido
Prueba de Antrona: mandlico23.
La Antrona forma un compuesto verde en Alcaloides
medio cido fuerte (cido sulfrico) con
ciertos carbohidratos y sacridos, en
especial con azcares y almidones. La Tabla 2 Resultado anlisis cualitativo de alcaloides
reaccin de la Antrona (9.10 dihydro 9
Prueba resultado Grafica
ketoantraceno) en medio sulfrico
Dragendorff - Grafica 7
produce un derivado del furano que tiene
Dragendorff Grafica 8
su mximo de absorcin en 620 nm22.
modificado
Wagner - Grafica 9
Reaccin
Marne Grafica 10
Bouchardat - Grafica 11
Mayer - Grafica 12
Erlich - Grafica 13

Para las pruebas de identificacin de

alcaloides se utilizaron dos controles
positivos: cafena, cocana.

Grafica 7 Prueba Dragendorff

Reaccin de la espuma (saponinas):

Consiste en la adicin de cido al extracto

etanlico con el fin de romper enlace
 Grafica 9 Prueba Erlich

Grafica 8 Prueba Dragendorff

Prueba dragendorff

Grafica 9 Prueba Wagner

Las pruebas de identificacin de

Grafica 10 Prueba Marne
Grafica 11 Prueba Bouchardat
alcaloides positivas en las que se deba
observar la formacin de un precipitado,
se basan en una reaccin del alcaloide con
el reactivo, el nitrgeno presente en la
molcula reacciona con una especie inica
presente en el reactivo, se generan otras
reacciones que finalmente dan como
resultado la formacin de una sal del
reactivo que es la que finalmente
precipita, estas pruebas en general no son
del todo seguras debido a que pueden
ocurrir los conocidos falsos positivos
entre ellos algunos metabolitos presentes
en el extracto como protenas, -pironas,
cumarinas, hidroxiflavonas, lignanos, por
tal motivo es necesario realizar anlisis
espectroscpicos para determinar con
certeza que se trata de alcaloides.

Grafica 8 Prueba Mayer COLCLUSIONES

Se concluye que las pruebas

evidentemente permiten la identificacin
cualitativa de alcaloides y glicsidos
esteroides, se evidencia la presencia de
estos en el extracto metanolico de hyptis
capitata, sin embargo para mayor certeza,
debido a los falsos positivos que se
pueden presentar en las pruebas, se
recomienda hacer las pruebas por
duplicado o utilizar otros mtodos para
identificarlos como un anlisis
espectroscpico.
AGRADECIMIENTOS
Agradecer a la universidad de la
amazonia de la ciudad de Florencia
Caquet por permitir realizar estas
pruebas en sus laboratorios y por
equiparnos con todos los materiales y
reactivos necesarios para tal fin, a las
auxiliares del laboratorio que estn
siempre pendientes y disponibles ante
cualquier necesidad y principalmente al
Doctor Jhon Ironzi Maldonado quien es la
persona encargada de dirigir dichas
actividades y de despertar en nosotros un
inters demasiado grande en la ciencia y
sobre todo en la parte de productos
naturales, haciendo ver de esta una
materia demasiado hermosa e importante
para entender ciertos fenmenos
naturales y su importancia en el futuro del
planeta.
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