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DIVERSIDAD CELULAR. CLULAS PROCARIOTAS:

TINCION Y SU OBSERVACIN.

Laura Marcela Gmez Narvez *

Ivonne Yessenia Henao Betancourth **
Laura Vanesa Henao Escobar ***

RESUMEN

INTRODUCCIN: La tincin de Gram y la tincin simple son tecnicas de laboratorio que permite
identificar distintos tipos de bacterias segn se colore su superficie. Despus de eso puede que el
colorante permanezca en la pared bacteriana o que se haya ido. En el primer caso
permanecera el color morado, y se tratara de bacterias Gram positivas y, en el segundo, la
pared tendra un color rosado, y seran Gram negativas, o podran colorearse de una
tonalidad azul las estructuras ya que sera la tincin simple La utilizada.

MTODOS: Se realiz una prctica con distintos materiales para identificar el tipo de colorante y
forma en la bacteria, segn lo propone la teora de Gram; principalmente se us yogurt y un frotis
bucal.

RESULTADOS: Identificamos las distintas coloraciones en cada muestra fijada y a partir de ah

identificamos si eran Gram positivas o Gram negativas. De la misma forma reconocer las distintas
clases de bateras, en este caso bacilos, cocos, espirilos, entre otros.

DISCUSIN: En este aspecto se determina la importancia de conocer perfectamente la tcnica de

Gram, haciendo comparaciones con otras muestras en tincin simple, es decir, sin colorantes para
ms adelante crear argumentos segn lo observado en el laboratorio.

PALABRAS CLAVES: clulas procariotas, tincin, teora de Gram, bacterias.

* Estudiante medicina 1er semestre, facultad de ciencias de la salud, Universidad del Magdalena, Santa
Marta, Colombia. Cdigo estudiantil: 2017261022.

** Estudiante medicina 1er semestre, facultad de ciencias de la salud, Universidad del Magdalena, Santa
Marta, Colombia. Cdigo estudiantil: 2017261026

*** Estudiante medicina 1er semestre, facultad de ciencias de la salud, Universidad del Magdalena, Santa
Marta, Colombia. Cdigo estudiantil: 2017261027
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ABSTRACT

INTRODUCTION: The Gram stain and staining of laboratory techniques ploughs simple to
identify different types of bacterium seize color its surface. After that you khan the dye remains in
the bacterial wall or that have gone. In the first marries would remain the color purple, and it would
be of Gram positive bacterium, and in the second, the wall would have to pink color, and would be
Gram negative, or could be colored to shade of blue structures because it would be the simple
staining used.

METHODS: A practice was done with different materials to identify the type of dye and form in the
bacteria, as proposed by Gramm's theory; mainly yogurt and an oral smear.

RESULTS: We identified the different colorations in each fixed sample and from there we
identified if they were Gramm positive or Gramm negative. In the same way recognize the different
kinds of batteries, in this case bacilli, coconuts, spirils, among others.

DISCUSSION: In this regard, the importance of knowing the Gramm technique perfectly, making
comparisons with other samples in simple staining, that is, without dyes, is used to later create
arguments as observed in the laboratory.

KEY WORDS: prokaryotic cells, staining, Gramm theory, bacteria.

de laboratorio para diferenciar caractersticas

INTRODUCCIN
Hace muchas dcadas el pulidor de lentes
holands Antonio Van Leewuenhoeck
mezclo pimienta con agua y transcurrido un
tiempo determinando pudo observar una
gota de esta infusin en el microscopio
simple.
A lo largo de los aos, por esta tcnica se ha
podido ayudar en grandes avances
investigativos en diferentes ramas de la
salud. Gracias a este descubrimiento
podemos utilizar tinciones en cada prctica
particulares en cada muestra y as poder,
reconocerlas en el microscopio.
Un colorante se define como una sustancia
capaz de dar color a sus clulas, tejidos etc.
La tincin se ha transformado en una de las
tcnicas ms utilizadas debido a su
caracterstica, ya que la finalidad de cada
laboratorio celular es diferenciar sus
caractersticas. La tincin de Gram,
tambin conocida como coloracin de Gram,
es una tcnica de laboratorio que se utiliza
rutinariamente en los estudios
microbiolgicos de las bacterias. Fue
diseada por Christian Gram, un cientfico

dans, en el ao 1884. El objetivo de Gram
era conseguir una prueba con la que fuera
posible diferenciar diferentes grupos de
bacterias para as poder estudiarlas y
clasificarlas. Para este informe, se utiliz
sta ya que nos permite preservar la
arquitectura estructural y qumica de las
clulas, aportando un color que sirve para
dar informacin muy til para orientar el
tratamiento de antibitico.
Los colorantes tien la pared de las bacterias
de color morado y, tras unos minutos, se
realiza un lavado del colorante. Despus de
eso puede que el colorante permanezca en la
pared bacteriana o que se haya ido. En el
primer caso permanecera el color morado, y
se tratara de bacterias Gram positivas y, en
el segundo, la pared tendra un color rosado,
y seran Gram negativas. En este
laboratorio se utilizaron muestras de yogurt
y frotis bucal.
Finalmente, el propsito del siguiente
informe investigativo es reconocer las
distintas formas de bacterias que
encontramos en cada una de las muestras y
saber el uso correcto de la tcnica de Gram
ya que servir para determinar qu tipo de
antibitico se le podr medicar a una persona
dependiendo de su color, sea Gram+ O
Gramm-.
MATERIALES Y METODOS
El estudio se realiz con el fin de observar
algunas caractersticas de las bacterias que se
encuentran en bebidas lcteas, en este caso
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en el yogurt, por otra parte, tambin se
observaron las bacterias que se encuentran
en la boca. Para llevar a cabo este
laboratorio se necesit: palillos de cocina,
toallas absorbentes, yogurt, microscopio,
caja Petri, portaobjetos, mechero, asa
bacteriolgica, agua destilada y soluciones
(azul de metileno, cristal violeta, lugol,
decolorante de Gram y Fuscina de Gram).
Primeramente se procedi a realizar el frotis
del yogurt, para esto, se aplic un poco del
mismo en la caja Petri se le adicion agua
destilada y se mezcl con el asa
bacteriolgica, luego se introdujo el asa en
un beaker con agua destilada y se flame
hasta el rojo vivo para esterilizarla,
consiguiendo esto, nuevamente se introdujo
el asa en el agua destilada para enfriar,
entonces, se tom la muestra con el asa y se
aplic el yogurt sobre dos portaobjetos en
forma de zigzag. En el caso del frotis bucal,
se utiliz un palillo de cocina para remover
el sarro bucal y se aplic con el mismo a los
2 portaobjetos en forma de zigzag, al tener
las 4 muestras aplicadas en los portaobjetos
se dejaron secar al aire libre, pero para
acelerar el secado se coloc en la mano y se
pas a una distancia de 15 cm por la mecha.
Luego, cuando ya se encontraron secas las
muestras se fijaron, y esto se logr pasando
la muestra por el mechero tres veces
rpidamente. Por ltimo, se hicieron las
tinciones de las muestras (coloracin simple
y coloracin diferencial), para la coloracin
simple se colocaron los portaobjetos sobre
un soporte para tinciones y se aplicaron de 3
a 4 gotas de azul de metileno, se dej
aplicado 60 segundos, luego se lav con
agua y se sec con cuidado encima del

mechero. Para la tincin diferencial, se
colocaron los portaobjetos sobre el soporte
de tincin, primeramente se cubri con
solucin de Cristal Violeta y se dej actuar
por 60 segundos, se lav con cuidado, luego,
se cubri con lugol el cual tambin se dej
actuar por 60 segundos, se lav de la misma
manera, posteriormente, se cubri con
Decolorante de Gram y se dej actuar por 30
segundos, se enjuag hasta que no arrastr
ms colorante, por ltimo se cubrieron las
muestras con Fuscina de Gram, dejando
actuar esta solucin por 60 segundos,
finalmente se hizo su respectivo lavado y se
secaron con ayuda del mechero, quedando
as listas para poder ser observar a travs del
microscopio.
RESULTADOS
FIG. 1.1 - extendido mucosa bucal simple
40X
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Posterior a la tincin de nuestra placa con la
coloracin de azul de metileno (tincin
simple), pudimos observar mejor algunas
estructuras importantes de la clula como lo
es el ncleo, citoplasma y la membrana
celular. Observamos el ncleo con una
coloracin azul un poco ms intensa a
diferencia del citoplasma, el cual se puede
observar alrededor del ncleo y da un
aspecto granuloso, la membrana celular se
observa en forma lineal, delgada y fina.
FIG. 1.2 - extendido mucosa bucal simple
100X
En este montaje logramos evidenciar los
ncleos y las clulas un poco conjuntas entre
s, los ncleos se pudieron observar en un
tamao ms grande a lo cual se logra
observar en forma de 3d por el uso del aceite
de inmersin y un poco oscuras por el
reactivo utilizado.
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simple), pudimos observar algunas bacterias

tipo cocos ya que estas se evidencian en
forma esfrica y estn aislados unos de otros,
y tambin pudimos observar los
estresptococos ya que estn en forma
alineada, en esta tincin se observan las
bacterias de colocacin azul oscura ya que
solo se utiliza un colorante.

FIG. 1.3 - extendido mucosa bucal

diferencial 40X

Posterior a la tincin de nuestra placa con la

coloracin de Gram (tincin diferencial),
pudimos observar las diferentes coloraciones
a lo cual se someten las clulas de nuestra
placa, pudimos observar bacterias gram
positiva la cual se tio de color violeta y se
observ en gran tamao, tambin pudimos
observar las bacterias gram negativa la cual FIG. 2.2 - extendido muestra de yougur
se tio de color rosado y se pudo observar de simple 100X
igual manera en gran tamao, tambin
pudimos observar algunos ncleos en forma En este montaje podemos observar en mayor
circular y definida. tamao una bacteria tipo coco, a lo cual est
teido de un colorante azul oscuro por su el
tipo de tincin utilizada.

FIG. 2.1 - extendido muestra de yougur

simple 40X

Posterior a la tincin de nuestra placa con la FIG. 2.3 - extendido muestra de yougur
coloracin de azul de metileno (tincin diferencial. 40X

Posterior a la tincin de nuestra placa con la
coloracin de Gram (tincin diferencial),
logramos observar bacterias las cuales se
tieron de color violeta, observamos varios
cocos ya que estn organizados en forma de
cadena y lineales unidos entre s a lo cual los
conocemos como estreptococos, y tambin
observamos en forma de racimos, todas
estaban aglomeradas, unidas entre s a lo
cual se les da el nombre de estafilococos.
DISCUSIN
Los datos obtenidos en el presente informe
demuestra la capacidad que tiene el
microscopio en conjunto con los colorantes y
los diferentes mtodos de tincin para
ayudarnos a ver e identificar, y aumentar el
contraste entre la clula y el medio que lo
rodea para ayudar a diferenciar con el tipo de
coloracin los tipos de bacterias (cocos,
bacilos, espirilos, vibrin, estreptococo,
estafilococos).
De esta manera, debemos usar los diferentes
tipos de colorantes para observar los
microorganismos ya que esto nos mejora el
contraste en la imagen vista en el
microscopio, los cuales los utilizamos para
resaltar estructuras en los tejidos o muestras
biolgicas las cuales sern observadas,
debido a estos colorantes podemos aumentar
sus definiciones y grosores, o resaltar
organelas dentro de una clula individual.
Asimismo pudimos observar en nuestra
practica de laboratorio como acta el
colorante azul de metileno (tincin simple)
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en nuestras muestras de extendido de
mucosa bucal y extendido de yougur,
encontramos que el colorante azul de
metileno acta sobre las clulas bacterianas
rpidamente y produce un color que
oscurece los detalles celulares, gracias a lo
anterior, pudimos observar mejor algunas
estructuras importantes de la clula como lo
es el ncleo, citoplasma y la membrana
celular y describir sus caractersticas por
medio del microscopio ptico, (fig. 1.1),
tambin pudimos evidenciar bacterias tipo
cocos de forma esfricas y algunos bacilos
en forma conjunta a lo cual los pudimos
observar con una colocacin azul ya que
solo se estaba utilizando un tipo de
colocacin ya antes mencionado, (fig. 2.1).
Tambin pudimos observar y aprender en
nuestra practica de laboratorio, la
composicin y manejo de la tincin
diferencial (colocacin de Gram), esta se
utiliza para diferenciar la morfologa
bacteriana (cocos, bacilos, bacterias Gram
positivas y bacterias Gram negativas), las
tcnicas como la tincin de Gram se utilizan
para separar las bacterias en Gram positivos
y Gram negativos. Estas diferencias se
atribuyen a la composicin qumica distinta
de las paredes de ambos grupos bacterianos
debemos tener en cuenta que algunos
organismos bacterianos de acuerdo a sus
composiciones Gram positivas no se
decoloran con el decolorante de Gram,
mientras que las bacterias Gram negativas si
lo hacen. La diferencia entre las bacterias
gran positivas y Gram negativas se encuentra
en el tipo de resistencia a las decoloraciones.
Asimismo en nuestra practica de laboratorio
con la coloracin de Gram, pudimos destacar

la importancia del uso de las coloraciones ya
que las bacterias Gram positivas se pueden
teir de color violeta y las bacterias Gram
negativas de color rosado, ambas en gran
tamao (fig. 1.3), tambin pudimos observar
como tie esta coloracin de forma violeta
las diferentes estructuras bacterianas que
posea nuestro yougur tales como cocos,
bacilos, etc. y estas a su vez formando sus
estructuras como los estafilococos y los
estreptococos, (fig. 2.3).
La pared celular bacteriana est hecha de
peptina zacarosa (tambin denominado
murena), que est formado por cadenas de
polisacrido entrecruzadas por pptidos
inusuales que contienen aminocidos D. La
pared celular es esencial para la
supervivencia de muchas bacterias.
La cpsula bacteriana es la capa rgida con
borde definido formada por una serie de
polmeros orgnicos que en las bacterias se
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2014/ir141b.pdf
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deposita en el exterior de su pared celular.
Generalmente contiene glicoprotenas y un
gran nmero de polisacridos diferentes,
incluyendo polialcoholes y
aminoazcares. Las diferencias en la
estructura pueden producir diferencias en la
susceptibilidad antibitica, por ejemplo, la
vancomicina puede matar solamente a
bacterias Gram-positivas y es ineficaz contra
patgenos Gram-negativos, tales como
Haemophilus influenzae o Pseudomonas
aeruginosa. Las penicilinas pueden matar
multitud de bacterias tales como
estreptococos, meningococos, estafilococos,
entre otros, para las bacterias Gram
negativas encontramos antibiticos tales
como la gentamicina y la amikacina que
sirve para las infecciones graves de bacterias
Gram negativas.
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