1. Clasificacin de la enzima celulasa.

Las celulasas son glicosil hidrolasas, y utilizan dos mecanismos de hidrlisis

del enlace glucosdico que generan dos posibles configuraciones
estereoqumicas finales. Un tipo de enzimas llevan a cabo una reaccin en
la que el carbono anomrico mantiene su posicin (mecanismo de retencin)
y otro tipo en la que se pierde (mecanismo de inversin) (Withers, 2001). Las
glicosil hidrolasas se clasifican en base a su secuencia de aminocidos
(www.cazy.org/fam/acc_GH.html). Este tipo de clasificacin, por familias,
permite identificar caractersticas estructurales de las enzimas, inferir su
mecanismo de accin y determinar relaciones evolutivas entre ellas
(Henrissat & Romeu, 1995). (3)

El sistema de celulasa tpico incluye tres tipos de enzimas: la endo--1,4-

glucanasa (Cx) (1,4--D-glucan glucanohidrolasa E.C.3.2.1.4), la exo--1,4-
glucanasa (C1) (1,4--D-glucan celobiohidrolasa E.C.3.2.1.91) y la -1,4-
glucosidasa (celobiasa) (Cb) (-D-glucsido glucohidrolasa E.C.3.2.1.21)
(Ladisch et al. 1983; Bataille & Toussaint 1985; Marsden & Gray 1986; Lee
1997; Hahn-Hgerdal & Palmqvist 2000). (1)

2. Estructura y funcin de la celulasa.

Muchas celulasas presentan una estructura modular. Tpicamente, un

pptido no cataltico comprende el mdulo con la funcin de unin a
carbohidratos (conocido como CBM). ste se une mediante una bisagra
flexible de aminocidos hidroxilados (Ser y Tre) y altamente glicosilados, al
siguiente mdulo en donde se encuentra el sitio cataltico de la enzima,
aproximndolo ntima y prolongadamente al sustrato y potenciando su accin
(Linder & Teeri, 1996). Tambin se conocen enzimas compuestas de varios
CBM y mdulos catalticos. Los CBM se clasifican a su vez, en familias segn
su secuencia de aminocidos, y los fngicos mayoritariamente constituyen la
 familia uno. Los CBM contienen desde 30 y hasta 200 aminocidos,
localizados hacia los extremos carboxilo o amino terminal, aunque
ocasionalmente se encuentran posicionados en el centro de la cadena
polipeptdica. A pesar de que cada familia de CBMs tiene caractersticas
nicas se sabe que su afinidad por la celulosa se debe en parte a su
superficie plana compuesta de aminocidos aromticos que le proporcionan
cualidades hidrofbicas (Hilden & Johansson, 2004). Se sabe tambin que
mediante un mecanismo no cataltico el CBM de la endoglucanasa III de T.
reesei altera la estructura de la celulosa cristalina (Xiao et al., 2001). Otra
evidencia del papel del CBM en la modificacin de la estructura de la
celulosa, es que sus homlogos en plantas, las expansinas (involucradas en
la expansin de la pared celular durante el crecimiento), tienen actividades
no hidrolticas sobre las interacciones entre la celulosa y la hemicelulosa
(Cosgrove, 2000). (3)

3. Fuente de obtencin de la celulasa.

Las enzimas celulolticas son producidas por diferentes microorganismos,

bacterias y hongos, incluyendo aerobios, anaerobios, mesfilos, termfilos y
extra mesfilos (Immanuel et al., 2006). Las bacterias y hongos aerbicos
producen generalmente celulasas extracelulares. Dentro de los principales
hongos mesfilos aerbicos encontramos Trichoderma viride, T. reesei, T.
koningii, Penicillium pinophilum, Sporotrichum pulverulentum, Fusarium
solani, Talaromyces emersonii (Grigelmo & Belloso, 1998). Las bacterias
anaerbicas (Clostridium thermocellum, C. cellulovorans, Ruminococcus
albus, R. flavsfaciens, Fibrobacter succinogenes y Acetivibrio cellulolyticus)
y hongos anaerbicos (Neocallimastic frontalis, N. patriciarum y Piromyces
equi) producen celulasas en la forma de complejos multienzimaticos (Gilbert
& Hazlewod, 1993; Begun & Lemaire, 1996; Bhat & Bhat, 1997). En las dos
dcadas pasadas, se ha evaluado que otros microorganismos tales como
hongos termfilos (Sporotrichum thermophile, Thermoascus aurantiacus,
 Chaetomium thermophile y Humicola insolens), hongos mesfilos
anaerbicos (Neocallimastix frontalis, N. patriciarum, Piromonas communis,
Sphaeromonas communis, Piromyces equi y Orpinomyces sp.), bacterias
aerbicas mesfilas y termfilas (Cellulomonas fimi, Pseudomanas
fluorescens sub sp. Cellulosa, Cellvibrio sp., Microspora bispora, Clostridium
cellulolyticum, C. cellulovorans y otras) y bacterias anaerbicas mesofilas y
termfilas (Acidothermus cellulolyticus, Bacteroides cellulosolvens,
Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus albus, R. flavefacions, Clostridium
thermocellum y C. stercorarium), tambin como actinomicetes
(Thermomonospora fusca), producen sistemas enzimticos celulticos muy
activos (Beguin & Lemaire, 1996, Claeyssens et al., 1998). (2)

4. Sustrato o grupo funcional sobre el cual trabaja.

Los microorganismos encargados de la degradacin de sustratos celulsicos

producen mltiples enzimas que actan en sinergismo directamente sobre la
celulosa (Murashima et al., 2003; Nidetzky et al., 1994). (3)

5. Mecanismo bajo el cual trabaja la celulasa.

La hidrlisis de la celulosa se realiza mediante un complejo enzimtico

llamado celulasas, constituido principalmente por tres enzimas:
endoglucanasa, exoglucanasa y -glucosidasas, las cuales son producidas
por algunos hongos y bacterias en condiciones normales; generando
glucosa, principal producto que puede ser utilizado como fuente de carbono
y energa por otros microorganismos fermentadores (Ponce y Prez 2002).
Estas enzimas se emplean actualmente como insumos para la industria textil,
alimentaria y papelera entre otras (Vilchez 2002). (4)

El mecanismo propuesto en la literatura para la degradacin de la celulosa

puede resumirse en tres etapas: Primero la endo -1,4-glucanasa acta al
 azar sobre los enlaces -1,4 glucosdicos internos presentes entre las
unidades de glucosa que forman la molcula de la celulosa, y convierte las
cadenas largas a oligosacridos, los cuales mantienen la configuracin de
su estructura. La accin de esta enzima es sobre las regiones amorfas de la
molcula de celulosa o sobre la superficie de las microfibrillas, y tiene como
resultado la disminucin de la longitud de la cadena de celulosa y la creacin
de nuevos extremos reactivos que sirven de sustrato para la posterior accin
de C1 (Ryu & Mandels 1980; Chou et al. 1981; Philippidis & Smith 1995; Lee
1997). En la segunda etapa acta la exo -1,4- glucanasa, la cual es una
enzima que corta la cadena 1,4 -D-glucano a partir del extremo no reductor
de la molcula de celulosa y de las celodextrinas, lo que provoca la remocin
de unidades de celobiosa o glucosa (Ryu & Mandels1980; Marsden & Gray
1986; Philippidis & Smith 1995; Bhat & Bhat 1997; Lee 1997). Ambas
enzimas endoglucanasa y exoglucanasa son inhibidas por uno de los
productos de la hidrlisis enzimtica, la celobiosa, lo que disminuye la
eficiencia de la hidrlisis (Lee 1997; Hahn-Hgerdal & Palmqvist 2000). Una
vez degradada las zonas amorfas de la celulosa, tiene lugar la tercera etapa
de la hidrlisis, en donde la regin cristalina comienza a ser hidrolizada, como
resultado de la accin sinergstica de la endoglucanasa y la exoglucanasa
(Beldman et al. 1988). Finalmente, una etapa que limita la degradacin de la
celulosa es la hidrlisis de la celobiosa a glucosa mediante la accin de la -
1,4- glucosidasa Cb, porque las glucanasas son inhibidas por la celobiosa
(Ladisch et al. 1983; Ljungdahl & Eriksson 1985; Philippidis & Smith 1995;
Lee 1997). (1)

6. Condiciones de trabajo de la celulasa

Las celulasas de T. reesei tienen la ventaja de que estas son resistentes a

inhibidores qumicos y estables en reactores agitados bajo condiciones de
pH 4.8 a 50 C durante 48 h (Ryu & Mandels 1980). (1)
Los termoflicos son de inters por su capacidad para producir enzimas
celulolticas termoestables, las cuales son en general estables bajo
condiciones severas, incluso en niveles de pH altamente cidos o alcalinos
as como temperaturas de hasta 90 C (Lamed & Bayer 1988; Sugden & Bhat
1994). (1)

Referencias
1. Ovando Chacn, SL; Waliszewki, KN. Preparativos de celulasas
comerciales y aplicaciones en procesos extractivos. Universidad y
ciencia. 2005; vol. 21, nm. 42: pp. 113 122
2. F. Palma Parodi et al. Enzimas fibrolticas: una alternativa para
incrementar la utilizacin de la pared ruminal en rumiantes. Revista FAVE
Ciencias Veterinarias. 2012. Vol. 11, Nm. 1 y 2: pp. 71 81
3. Martnez Anaya C et al. Celulasas fngicas: Aspectos biolgicos y
aplicaciones en la industria energtica. Rev Latinoam Microbiol. 2008.
Vol. 50, Nm. 3 y 4: pp. 1119 131
4. L. Gutirrez et al. Evaluacin in vitro de celulasas producidas por cepas
nativas de Trichoderma reesei, Cladosporium herbarum y Aspergillus
niger. Journal of agriculture and animal sciences. 2012. Vol. 1, Nm. 1:
pp. 7 - 15