P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Terpenoid Dari Fraksi M 17

Ekstrak Metilena Klorida Kulit Batang Tumbuhan Kasturi
(Mangifera casturi)

(Isolation and Identification Terpenoide from The M 17 Fraction Of Methylene

Chloride Bark Extracts of Kasturi)

Budi Prayitno1*; Kholifatu Rosyidah2; & Maria Dewi Astuti2

1STKIP PGRI Banjarmasin

2Kimia FMIPA Universitas Lambung Mangkurat
Jl. Sultan Adam Komp H Iyus 18 , Banjarmasin 70121

*Corresponding email: budi11@mhs.chem.its.ac.id

ABSTRAK

Penelitian tentang isolasi senyawa terpenoid dari fraksi M 17 ekstrak metilen klorida telah
dilakukan. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengisolasi dan karakterisasi struktur senyawa hasil
isolasi berdasarkan spekstroskopi UV, IR dan 1H- NMR. Pemisahan fraksi M 17 menggunakan
Kromatografi Vakum Cair (KVC) menghasilkan 16 vial yang digabung berdasarkan pola noda yang sama
menjadi enam fraksi, yaitu A, B, C, D, E, dan F. Fraksi E dipilih dan diuji kemurniannya dengan KLT tiga
sistem eluen dan KLT dua dimensi, diperoleh 20 mg senyawa murni berupa padatan berwarna putih. Data
spektrum inframerah menunjukkan adanya gugus OH, CH alifatik, C=O, C=C dan CO. Spektrum 1H-
NMR menunjukkan pola triterpenoid sikloartan yang positif dibuktikan dengan uji Liebermann-Burchard.
Hasil analisis diduga senyawa 1 adalah senyawa (23-E)-27-nor-3-hidroksisikloart-23-en-25-on.

Kata kunci: Mangifera casturi, triterpenoid, sikloartan

PENDAHULUAN menyumbangkan satu atau lebih elektron

Keanekaragaman tumbuhan di Indonesia sangat kepada radikal bebas, sehingga radikal bebas
memungkinkan untuk ditemukannya beraneka tersebut menjadi tidak aktif (Gordon, 1990).
jenis senyawa kimia berupa metabolit sekunder Penelitian tentang senyawa antioksidan eksogen
seperti alkaloida, flavonoida, terpenoida, alami terus berkembang. Antioksidan alami
saponin, dan sebagainya. Tumbuhan-tumbuhan dalam makanan yang sudah dikenal,seperti
tersebut potensial untuk diteliti dan asam askorbat, -karoten dan -tokoferol
dikembangkan oleh para peneliti Indonesia mampu mencegah perkembangan berbagai
dalam rangka pencarian obat atau bahan baku penyakit (Reynertson, 2007). Salah satu
obat (Fitrya et al., 2010). Salah satu penelitian tumbuhan yang kaya akan senyawa-senyawa
yang banyak dilakukan adalah penelitian untuk yang aktif antioksidan adalah genus Mangifera.
mencari senyawa antioksidan yang efektif. Penelitian pada kulit batang Mangifera indica
Antioksidan adalah senyawa kimia yang dapat menunjukkan kandungan senyawa aktif

390
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015
antioksidan seperti asam askorbat, -karoten
dan senyawa fenolat (Ribeiro, 2007). Selain itu
M. indica juga mengandung polifenol, triterpen,
flavonoida, fitosterol, serta elemen-elemen kecil
lainnya, seperti glukosilsanton, yang berfungsi
sebagai antiviral, antitumor, antidiabetes dan
antioksidan (Rivera et al., 2008).
Kasturi (M. casturi) memiliki kekerabatan
dengan M. indica, sehingga diharapkan kasturi
juga mengandung metabolit sekunder yang
sama atau hampir sama. Penelitian sebelumnya
yang telah dilakukan, serbuk kasar batang
kasturi dimaserasi dengan metilena klorida
(MTC). Ekstrak MTC tersebut, kemudian
dilakukan pemisahan dengan KVC menggunakan
eluen n-heksana: etilasetat (EtOAc) dalam
berbagai perbandingan, sehingga diperoleh 24
fraksi yaitu fraksi M1-M24. Senyawa dari fraksi
M6 dan M15 diduga sebagai
terpenoida, dan senyawa dari fraksi gabungan
M12 dan M13 diduga sebagai golongan fenolat
(Rosyidah &Ariyani, 2009). Penelitian ini akan
melakukan isolasi senyawa aktif fraksi M 17
ekstrak MTC kulit batang kasturi
mengkarakterisasinya.
METODE PENELITIAN
Alat
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini
adalah spektofotometer UV Varian Conc. 100,
seperangkat alat gelas, alat destilasi, penguap
putar vakum merk Buchi, oven merk Mammert
type U 40, neraca analitik Ohaus Item no. E 121
40, chumber, tabung reaksi dan kolom KVC
(diameter kolom = 2 cm), erlenmenyer, lampu
UV, IR, dan 1H-NMR.
Bahan
Bahan-bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah Fraksi M 17 dari penelitian
sebelumya, pelarut organik teknis n-heksana,
metilena klorida (MTC), aseton,
(MeOH), dan etil asetat (EtOAc). Pelarut organik
pro analitik (pa) yaitu kloroform (CHCl3) dan
metanol. Alumunium foil, kertas saring
Whatman 40, plat KLT silika gel Merck 60
GF254 0,25 mm ukuran 20 x 20 cm dengan
alumunium sebagai penyangga fasa diam, silika
gel Merck 60 GF254, silika gel G 60 (60-70
mesh), larutan penampak noda 1,5% serium
sulfat, DPPH, dan vitamin C.
Pelaksanaan Penelitian
a) Fraksinasi dan Pemurnian Senyawa
Proses pemisahan senyawa dilakukan
dengan menggunakan KVC yang berdiameter 2
cm. Sebanyak 20 gram silika gel yang
sebelumnya dioven selama 1,5 jam dimasukkan
kedalam KVC dan divakum, kemudian dilakukan
elusi dengan n-heksana sebanyak tujuh kali agar
padat dan tidak retak. Fraksi M 17 dibuat
senyawa impreg dengan cara dilarutkan dalam 2 ml
pelarut aseton, kemudian diteteskan ke dalam 1
gram silika gel 60 diaduk sampai homogen dan
kering. Impreg dimasukkan di atas kolom KVC
yang telah siap pakai, kemudian dielusi dengan
dan pelarut yang sesuai. Elusi diawali dengan
pelarut non polar sebanyak 30 ml kemudian
dihisap dengan pompa vakum. Elusi dilanjutkan
dengan kombinasi pelarut dengan polaritas
meningkat, sesuai hasil KLT.
Semua fraksi yang diperoleh setelah
proses elusi pada KVC diamati dengan KLT.
Setiap fraksi ditotolkan pada plat KLT sesuai
urutan, kemudian dielusi dengan eluen yang
digunakan untuk KVC. Setelah kering dapat
diamati di bawah lampu UV. Setelah itu
disemprot dengan larutan serium sulfat.
Selanjutnya dipanaskan dalam oven.
Penggabungan fraksi dilakukan berdasarkan
pola kromatogram KLT.
Uji kemurnian dilakukan dengan KLT
metanol sampai tampak satu noda pada minimal tiga
391
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015
sistem eluen. Selain itu, uji kemurnian juga
dilakukan dengan KLT dua dimensi yang apabila
murni akan menampakkan satu noda.
b) Penentuan Struktur Senyawa Murni
Analisis struktur senyawa
dilakukan dengan analisis hasil spektoskopi UV,
IR dan 1H-NMR. Hasil analisis akan didapatkan
bebarapa spektra sehingga dapat dilakukan
pengolahan data untuk menentukan struktur
dugaan senyawa murni.
HASIL DAN DISKUSI
a. Fraksinasi, Isolasi dan Pemurnian Senyawa
Penelitian sebelumnya oleh Rosyidah dan
Ariyani (2009), sebanyak 2,5 kg serbuk kasar
batang kasturi dimaserasi langsung dengan
MTC. Hasil maserasi disaring dan dievaporasi
sehingga diperoleh ekstrak MTC sebanyak 37
gram. Ekstrak MTC dilakukan
dengan KVC menggunakan eluen n-heksana: etil
asetat (EtOAc) sehingga diperoleh 24 fraksi
yaitu fraksi M1-M24. Pada penelitian ini akan
dilakukan isolasi senyawa aktif dari fraksi M 17.
Fraksinasi dilakukan
menggunakan kromatografi kolom cair (KVC).
Hal pertama kali yang dilakukan adalah mencari
eluen yang sesuai untuk KVC. Pencarian eluen
yang sesuai diawali dengan menggunakan
metanol, kloroform, etil asetat,
aseton, dan MTC , kemudian dilakukan variasi
perbandingan berbagai pelarut tersebut untuk
mendapatkan pola pemisahan yang paling baik.
Pola pemisahan senyawa dari fraksi M 17 dilihat
dari pola pemisahan noda pada KLT.
Pola kromatogram KLT fraksi
menunjukkan pola pemisahan yang terbaik
adalah n-heksana:etil asetat (7:3)
menunjukkan pola pemisahan senyawa yang
lebih banyak. Oleh karena itu, eluen yang
digunakan untuk elusi senyawa pada KVC
adalah pelarut dengan perbandingan tersebut.
Proses elusi dilakukan dengan sistem elusi
bergradien, sehingga mula-mula yang digunakan
untuk elusi adalah n-heksana hingga etil asetat.
murni Elusi dilanjutkan dengan kepolaran meningkat
mulai dari campuran n-heksana:etil asetat,
kemudian etil asetat. Perbandingan campuran
yang digunakan untuk elusi, yaitu 9,5:0,5; 9:1;
8,5:1,5; 8:2; 7,5: 2,5; 7:3 dan 6:4.
Fraksi hasil KVC kemudian dianalisis dengan
menggunakan KLT dengan eluen n-heksana:etil
asetat (8:2). Fraksi yang sama digabungkan
berdasarkan pola kromatogram.
Berdasarkan pola kromatogram maka
fraksi yang digabungkan, yaitu fraksi A yang
terdiri atas vial 1 sampai 5 dengan Rf 0,7, fraksi
B yang berasal dari vial 6 dengan Rf 0,6, fraksi C
terdiri atas vial 7 dan 8 dengan Rf 0,5, fraksi D
pemisahan terdiri atas vial 9 dan 10 dengan dua noda,
masing-masing memiliki Rf 0,3 dan Rf 0,2, fraksi
E terdiri atas vial 11 dan 12 dengan Rf 0,2 dan
fraksi F terdiri atas vial 13, 14, 15, dan 16
dengan Rf 0,07. Fraksi A, B dan C memiliki
dengan massa yang sedikit yaitu 5 mg, fraksi D
memiliki massa 152,7 mg, fraksi E bermassa
100 mg dan fraksi F sebesar 604,8 mg. Fraksi
yang dianalisis selanjutnya adalah fraksi E, hal
ini karena fraksi E memiliki pola noda yang
n-heksana, lebih sederhana dan massa yang cukup untuk
pemisahan selanjutnya. Fraksi E menghasilkan
endapan putih pada wadah vialnya.
Fraksi E terbagi dua yaitu yang berasal dari vial
11 dan vial 12 yang selanjutnya vial 11 disebut E
1 dan vial 12 sebagai E 2. Endapan tersebut
M 17, berupa bubuk putih yang dapat terbentuk
kembali jika dilarutkan dalam n-heksana:etil
karena asetat (7:3), atau yang lebih polar. Endapan
tersebut dicuci dengan aseton untuk
meminimalisasi senyawa yang ikut terikat pada
392
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

endapan. Endapan tersebut kemudian Spektrum UV menggunakan prinsip

dipisahkan dan dianalisis selanjutnya. antaraksi gelombang elektromagnetik dengan
Analisis selanjutnya dilakukan uji kemurnian molekul senyawa yang berhubungan dengan
dengan menggunakan sistem tiga eluen dan KLT energi transisi antara transisi elektron *
dua dimensi. Pemilihan eluen dilakukan dan n *. Panjang gelombang UV bergantung
berdasarkan kepolarannya, selain itu jika pada mudahnya promosi elektron dari suatu
senyawa tersebut telah murni akan memberikan senyawa. Tipe-tipe transisi elektron akan
noda tunggal dalam eluen apapun. Sistem tiga menimbulkan spektra UV. Senyawa 1 dianalisis
eluen yang berbeda yang dipilih, yaitu eluen n- dengan spektrofotometer UV menggunakan
heksana:etil asetat (7:3), n-heksana:aseton (7:3) pelarut metanol. Pelarut ini dipilih karena
dan metilen klorida:aseton (8:2). Hasilnya metanol merupakan pelarut organik yang dapat
menunjukkan noda tunggal. Hasil kromatogram melarutkan senyawa baik polar maupun
KLT dua dimensi menggunakan pelarut n- nonpolar walaupun dalam jumlah terbatas
heksana:etil asetat (8:2) dan n-heksana:aseton terhadap kelarutan senyawa tertentu.
(7:3) juga menunjukkan noda tunggal. Spektrum UV Senyawa 1 menunjukkan adanya
Senyawa dari endapan fraksi E 1 tersebut puncak maksimum pada panjang gelombang ()
kemudian disebut Senyawa 1 pada analisis 216 nm dalam pelarut metanol. Puncak
selanjutnya. Senyawa yang diperoleh memiliki maksimum (max) pada 216 nm merupakan
berat 20 mg. Hasil KLT dua dimensi dan puncak khas untuk karbonil-,- tak jenuh (-
sistem tiga eluen menunjukkan bahwa senyawa C=C-C=O) dan diena terkonjugasi (-C=C-C=C-)
pada endapan tersebut tampak sebagai noda dengan adanya transisi elektron *
tunggal. Oleh karena itu, senyawa tersebut telah (Silverstein, 1991). Puncak serapan pada
murni dan dapat dilakukan analisis struktur spektrum UV ini menunjukkan bahwa Senyawa
dengan menggunakan spektrometer UV, IR dan 1 terdapat gugus karbonil-,-tak jenuh (-C=C-
H-NMR dan uji antioksidan dengan radikal C=O) atau diena terkonjugasi (-C=C-C=C-) dan
DPPH. gugus karbonil (-C=O) (Sastrohamidjojo, 2001).
b. Penentuan Struktur Senyawa 1 Puncak-puncak spektrum UV dapat dilihat pada
a) Analisis ultraviolet (UV) Gambar 3.

a O
b
C C C C
C

b R

Gambar 3. Spektrum UV Senyawa 1

393
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

b) Analisis spektroskopi inframerah
Spektrum IR Senyawa 1 menunjukkan
adanya pita serapan pada bilangan gelombang
3382 cm-1; 2939 cm-1; 2872cm-1; 1688 cm-1;
1642 cm-1; 1457 cm-1; 1373 cm-1; 1258 cm-
1;1031 cm-1; dan 668 cm-1. Pola spektrum IR
Senyawa 1 dapat dilihat pada Gambar 4 di
bawah ini.

Gambar 4. Spektrum IR Senyawa 1

Pita serapan pada bilangan gelombang 3382 cm- (C=C), karbonil (C=O), gugus metilena (CH2),
1 menunjukkan adanya vibrasi ulur gugus gugus metil (CH3) dan tidak memiliki bilangan
hidroksi (OH). Kedua serapan tersebut gelombang untuk (=C-H) aromatik pada 3000-
mengindikasikan adanya gugus hidroksi (OH) 3100 cm-1.
yang terikat pada atom karbon. Munculnya
vibrasi ulur C-H alifatik pada 2939 cm-1 dan c. Analisis spektroskopi 1H-NMR
2872 cm-1 memberi petunjuk kemungkinan
Spektroskopi 1H-NMR berguna untuk
adanya gugus metil (CH3) dan metilena (CH2).
menunjukkan posisi proton (H) pada struktur
Data ini diperkuat dengan adanya vibrasi tekuk
Senyawa 1. Spektrum 1H-NMR ini menunjukkan
C-H pada bilangan gelombang 1457 cm-1 dan
adanya enam metil muncul pada H 1,84 (3H, s),
1373 cm-1 yang mengindikasikan adanya gugus
0,96 (6H, s), 0,80 (3H, s) dan 0,90 (3H, t, J= 6.45)
gem dimetil sebagai ciri khas senyawa
ppm, terdapat proton yang ciri khas untuk
triterpenoid. Adanya karbon ikatan rangkap
metilen siklopropana, yaitu pada H 0,33 dan
(C=C) seperti ditunjukkan oleh spektrum UV
0,55 (2H,d, J=3,9) ppm. Puncak dengan geseran
diperkuat oleh data spektrum IR dengan adanya
kimia H 3,33 (1H, m) ppm menunjukkan
vibrasi ulur (C=C) pada bilangan gelombang
adanya proton metin karbinol. Spektrum ini
1642 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil (C=O) pada
memiliki kesamaan dengan beberapa contoh
1688 cm-1. Spektrum IR adanya vibrasi ulur
senyawa triterpenoid, seperti 27-nor-3-
(C=C) dan vibrasi ulur karbonil (C=O) ini mirip
hidroksi-25-oksosikloartan, (22-E)-25,26,27-
seperti senyawa (22-E)-25,26,27-trinor-3-
trinor-3-hidroksisikloart-22-en-24-al (Chiang,
hidroksisikloart-22-en-24-al yang memiliki
et al., 2001) dan (23-E)-27-nor-3-
vibrasi ulur (C=C) pada bilangan gelombang
hidroksisiklo-23-en-25-on (Zhang, et al., 2002).
1635 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil (C=O) pada
Spektrum 1H-NMR Senyawa 1 dapat dilihat
1695 cm-1 yang berdekatan (Chiang, et al.,
pada Gambar 5 di bawah ini.
2001). Data UV dan IR menunjukkan Senyawa 1
memiliki gugus hidroksil, karbon ikatan rangkap

394
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

Gambar 5. Spektrum 1H-NMR Senyawa 1

Kemiripan spektrum 1H-NMR
dengan beberapa struktur triterpenoid di atas
perlu dilakukan uji untuk membuktikan apakah
Senyawa 1 juga termasuk senyawa triterpenoid.
d. Uji Liebermann-Burchard
Uji Liebermann-Burchard dilakukan dengan
melarutkan sampel dalam kloroform hingga
larut sempurna. Larutan tersebut kemudian
ditambahkan asam asetat anhidrat dan asam
sulfat pekat, dikocok dan didiamkan selama 15
Senyawa 1 menit. Uji ini positif untuk triterpenoid jika
terbentuk warna merah (Kristanti, et al., 2004).
Uji kualitatif Senyawa 1 dengan pereaksi
Liebermann-Burchard menunjukkan bahwa
senyawa tersebut adalah triterpenoid dengan
terbentuknya senyawa warna merah jingga
seperti pada Gambar 6.

(a) Sebelum (b)Setelah penambahan

penambahan pereaksi
pereaksi Liebermann- Liebermann-
Burchard
Burchard

Gambar 6. Hasil uji Liebermann-Burchard

395
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

e) Struktur dugaan Senyawa 1 27-nor-3-hidroksi-25-oksosikloartan, (22-E)-

Data hasil analisis spektrum UV, IR dan 25,26,27-trinor-3-hidroksisikloart-22-en-24-al
1H-NMR serta dilanjutkan dengan uji (Chiang, et al., 2001) dan (23-E)-27-nor-3-
Liebermann-Burchard menunjukkan bahwa hidroksisikloart-23-en-25-on (Zhang, et al.,
Senyawa 1 adalah senyawa triterpenoid. 2002), karena memiliki pola spektrum 1H-NMR
Triterpenoid ini mengandung gugus karbonil- dan IR yang hampir sama, selain itu juga
,-tak jenuh, hidroksil dan siklopropana yang didukung oleh spektrum UV. Struktur ketiga
terdapat pada Senyawa 1. Hasil studi literatur, senyawa tersebut seperti pada Gambar 7.
senyawa ini diduga salah satu dari triterpenoid

H
O

OH
OH

(a) 27-nor-3-hidroksi-25-oksosikloartan (b) (22-E)-25,26,27-trinor-3-

hidroksisikloart-22-en-24-al

HO

(c) (23-E)-27-nor-3-hidroksisikloart-23-en-25-on

Gambar 7. Beberapa triterpeniod sikloartan

Ketiga senyawa di atas memperlihatkan bahwa karbon yang membentuk cincin utama. Sistem
triterpenoid tersebut terdiri atas 30 atom penomorannya seperti Gambar 8.

21 22 24
27
18 20 25
12 23
17
19 11
13 26
1 16
14
2 9 15
10 8
H 5
3 4 7 30
6
HO
29 28

Gambar 8. Sistem penomoran pada triterpenoid sikloartan

396
P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

Perbandingan pola spektrum 1H-NMR ketiga bawah ini.

senyawa di atas dapat dilihat pada Tabel 1 di

Tabel 1. Perbandingan 1H-NMR ketiga sikloartan dengan Senyawa 1

H 27-nor-3-hidroksi-25- (22-E)-25,26,27-trinor-3- (23-E)-27-nor-3- Senyawa 1
oksosikloartan (1) hidroksisikloart-22-en-24-al hidroksisikloart-23-en-
(1) 25-on (2)

3 3.26 (1H,dd, J= 10.8, 4.0) 3.27 dd (1H,m, 10.8, 44) 3.26 (dd, J=11, 4.2) 3.23 (1 H, m)

6 1.28a) 1.28a)

8 1.48a) 1.52a)

10

11 1.95a), 1,20a) 2.02 (1H,m), 1.14a) 2.12 (1H, m)

12 1.60a) 1.64a)

13

14

15 1.30a) 1.31a)

16

17 1.55a) 1.74a) 1.75a)

18 0,93 (3H,s) 1.01 (3H,s) 0.97 (3H,s) 0.96 (3H,s)

19 0.31 (1Ha,d, J=4) 0.33(1Ha,d,J=4, Ha) 0.32 (1Ha, d, J=4.2) 0.33 (1Ha,d, J=3.9)

0.51 (1Hb, d, J=4) 0.55 (1H,d,J=4, Hb) 0.54 (1Hb,d, J=4.2) 0,55 (1Hb ,d, J=3,9).

20 1.20-1,40a) 2,4 (1H, m) 2.25 (1H,m)

397
 P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

21 0.85(3H, d, J=5.2) 1.07 (3H.d, J=6.4) 0.88 (3H, d, J=6.5) 0.90 (3H, t, J= 6.45)

22 1.20-1.40a) 6.07 (1H,dd, 15.6, 8.8)

23 1.58a) 6.04 (1H, dd, J=15.6, 7.6) 6.78 (1H, ddd, J=15.6, 6.90 (1H, t, J= 7.75, 6.9)
8.7, 6.2)

6.05 (d, J=15.8)

24 2.37 (1H, m) 9.46 (1H, d, J=7,6)

25
2.33 (3H,s)
26 2.11 (3H,s) 1.84 (3H, s)

27
0.95 (3H,s)
28 0.94 (3H,s) 0.95 (3H,s) 0.96 (3H, s)
0.79 (3H,s)
29 0.78 (3H,s) 0.79 (3H,s) 0.80 (3H, s)
0.87 (3H,s)
30 0.86 (3H,s) 0.89 (3H,s) 0.89 (3H, s)

a) =overlap, s=singlet, d=doblet, t=triplet dan m=multiplet. (1)Chiang, et al. (2001) dan (2) Zhang, et al. ( 2002)

Perbandingan antara 1H-NMR Senyawa 1
dan ketiga senyawa di atas menunjukkan bahwa
pola spektrum Senyawa 1 memiliki kemiripan
dengan ketiganya. Hal ini menunjukkan bahwa
senyawa satu termasuk golongan triterpenoid
sikloartan. Ciri khas golongan ini adalah adanya
geseran kimia H 0,33 dan 0,55 ppm, masing-
masing doblet dan terdiri satu proton, untuk
proton-proton C-19. Kesamaan adanya lima
gugus metil (CH3) yaitu proton-proton dari C-
18, C-21, C- 28, C-29 dan C-30, yaitu pada
geseran kimia H 0,81; 0,89; 0,90; 0,96 (15H,
5X3); 1,84 (3H, s) ppm. Senyawa 1 juga memiliki
kesamaan yaitu adanya gugus hidroksil yang
terletak pada C-3 dengan ditandai oleh adanya
geseran proton tunggal (proton metin karbinol)
dan multiplet pada H 3,2 ppm.
Spektrum UV menunjukkan bahwa Senyawa
1 mengandung gugus karbonil-,-tak jenuh.
Hal ini dibenarkan oleh spektrum IR adanya
vibrasi ulur (C=C) pada bilangan gelombang
1642 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil (C=O) pada
1688 cm-1 seperti pada senyawa (22-E)-
25,26,27-trinor-3-hidroksisikloart-22-en-24-al
mengandung gugus karbonil-,-tak jenuh,
memiliki vibrasi ulur (C=C) pada bilangan
gelombang 1635 cm-1 dan vibrasi ulur karbonil
(C=O) pada 1695 cm-1 (Chiang, et al., 2001).
Spektrum IR menunjukkan Senyawa 1 juga
memiliki gugus hidroksil dengan bilangan
gelombang 3382 cm-1, karbon ikatan rangkap
(C=C), karbonil (C=O), gugus metilena (CH2),
gugus metil (CH3). Oleh karena itu, dari ketiga
senyawa pembanding di atas, senyawa yang
memiliki gugus karbonil-,-tak jenuh adalah
(22-E)-25,26,27-trinor-3-hidroksisikloart-22-
en-24-al dan (23-E)-27-nor-3-hidroksisikloart-
23-en-25-on. Spektrum 1H-NMR Senyawa 1
tidak menunjukkan adanya geseran kimia untuk
proton aldehida dari senyawa (22-E)-25,26,27-
trinor-3-hidroksisikloart-22-en-24-al (H
9,46), selain itu juga senyawa (22-E)-25,26,27-

398
 P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

trinor-3-hidroksisikloart-22-en-24-al, tidak g/ml (5,9 M). Keaktivan ini lebih tinggi

memiliki proton-proton untuk C-26, sedangkan daripada asam betulinat, asam ursolat dan asam
pada spektrum 1H-NMR Senyawa 1 betulonat yang memiliki CC50 berturut-turut
menunjukkan adanya geseran kimia untuk sebesar 16,4 g/ml (36,0 M), 7,2 g/ml (15,8
proton C-26 (H 1,84,s, ppm). M)) dan 47,7 g/ml (105,1 M) dan IC50
Hasil analisis Senyawa 1 berdasarkan berturut-turut sebesar 14,8 g/ml (32,5 M),
spektrum UV, IR dan 1H-NMR memiliki 6,7 g/ml (17,7 M) dan 9,7 g/ml (21,4 M)
kesamaan dengan senyawa (23-E)-27-nor-3- (Zhang, et al., 2002).
hidroksisikloart-23-en-25-on. Oleh karena itu,
dapat disimpulkan Senyawa 1 diduga KESIMPULAN
merupakan senyawa (23-E)-27-nor-3- Kesimpulan yang dapat diperoleh dari
hidroksisikloart-23-en-25-on yang memiliki penelitian ini adalah hasil isolasi dan
struktur seperti pada Gambar 7c. Hasil karakterisasi dengan spektrum UV, IR dan 1H-
penelitian ini menunjukkan bahwa pada NMR menunjukkan senyawa tersebut diduga
tanaman M. casturi diduga mengandung (23-E)-27-nor-3-hidroksisikloart-23-en-25-on
senyawa (23-E)-27-nor-3-hidroksisikloart-23- yang termasuk kedalam golongan terpenoid.
en-25-on seperti pada Vatica cinera (Zhang, et
al.,2002) dan Ficus microcarpa (Chiang, et al., UCAPAN TERIMAKASIH
2001). Ucapan terimakasih diberikan kepada laboran
Studi literatur terhadap senyawa (23-E)-27- dari lab instrumentasi Kimia FMIPA Unesa dan
nor-3-hidriksisikloart 23-en-25-on LIPI puspitek Serpong untuk analisis
menunjukkan bahwa senyawa ini memiliki spektroskopi UV-Vis dan NMR.
aktivitas sitotoksik (CC50) yaitu sebesar 5,4
g/ml (12,7 M) dan memiliki aktivitas anti-HIV
(IC50) sebesar 21% penghambatan pada 2,5

DAFTAR PUSTAKA

Chiang, Y.M., J.K. Su, Y.H. Liu, & Y.H. Kuo. 2001. New
Cyclopropyl-Triterpenoids from the Aerial Roots of
Ficus microcarpa. Journal Chem. Pharm. Bull. 49(5)
581583 (2001).
Fitrya, L. Anwar & E. Novitasari. 2010. Isolasi Senyawa
Fenolat dari Fraksi Etil Asetat Kulit Batang
Tumbuhan Gandaria. Jurnal Kimia. Vol. 13, No. 1.
Gordon, M.H. 1990. The Mechanism of Antioxidants
Action in Vitro. Di dalam: B.J.F. Hudson, editor.
Food Antioxidants. Elsivier Applied Science. London
Hanani, E., A. Munim., & R. Sekarini. 2005. Identifikasi
Senyawa Antioksidan dalam Spons Callyspongia sp
dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian. 2
(3) : 127-133.
NGuessan, J.D.N., A.P.Bidi, B.N.Lenta, B. Weniger, P.
Andr, & F. Gud-Guina. 2007. In vitro Assays for
Bioactivity-guided Isolation of Antisalmonella and
Antioxidant Compound in Thonningia sanguinea
flowers. African Journal of Biotechnology. Vol. 6,
No.14 : 1685-1689.
Reynertson, K.A. 2007. Phitochemical Analysis of
Bioactive Constituents from Edible Myrtaceae Fruit,
Dessertation. The City University of New York. New
York.
Rivera D.G., I.H. Balmaseda, A.A. Leon, B.C.
Hernandez, L.M. Montiel, G.G. Garrido, S.
Cuzzocrea, & R.D. Hernandez. 2006. Anti-allergic
properties of Mangifera indica L. extract (Vimang)
and contribution of its glucosylxanthone mangiferin.
Journal of Pharmacy and Pharmacology 58: 385-
392.
Ribeiro, S.M.R. 2007. Antioxidants in Mango (Mangifera
indica L.) Pulp. Journal Plant Foods for Human
Nutrition 62:13-17.
Rosyidah, K., & D. Ariyani. 2009. Karakterisasi
Senyawa-sennyawa fenolat Berkhasiat Sitotoksik

399
 P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop Pe rkemba ng an Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5 | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

dari Batang Kasturi (Mangifera casturi). Laporan

Penelitian. FMIPA Universitas Lambung Mangkurat.
Banjarbaru.
Siska. 2010. Karakterisasi Struktur dan Uji Aktivitas
Antioksidan Senyawa Fenolat dari Kulit Batang
Tumbuhan Binjai (Mangifera caesia). FMIPA
UNLAM. Banjarbaru.
Zhang, H.J., G.T. Tan, V.D. Hoang, N.V. Hung, N.M.
Cuong, D.D. Soejarto, J.M. Pezzuto, & H. H. S.
Fong. 2002. Natural Anti-HIV Agents. Part IV. Anti-
HIV Constituents from Vatica cinerea. Journal of
Institute of Chemistry, National Center for Science
and Technology.

400