UNIVERSIDAD MAYOR DE SAN SIMON

FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGIA

DEPARTAMENTO DE QUIMICA
LABORATORIO DE INGENIERIA BIOQUIMICA

PRACTICA N 6

BIOMASA
MICROBIANA
NOMBRES:
MERIDA ALMENDRAS JASMINE
MONTES FABRICA RAMIRO
DOCENTE:
LIC. ORLANDO MERCADO DEHEZA
AUXILIAR:
ING. ABDIEL ADRIAZOLA MURIEL
UNIV. BEATRIZ EUGHENE SILES ALMANZA
HORARIO:
JUEVES 14:15 - 18:45
FECHA:
30 JUNIO - 2017

COCHABAMBA BOLIVIA
 BIOMASA MICROBIANA

OBJETIVO GENERAL
Conocer el desarrollo tecnolgico del conteo visual de la biomasa de
microorganismos con hematocito-metro o cmara de Neubauer.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
Estudiar las partes de la cmara de Neubauer.
Conocer otros mtodos de obtencin de las llamadas protenas unicelulares
(biomasa).
Conocer la preparacin y enfoque del microscopio de la cmara de Neubauer
Evaluar los usos de la biomasa en el campo industrial
Conocer la concentracin de las muestras

FUNDAMENTO TEORICO
BIOMASA MICROBIANA.
La biomasa microbiana (BM) define el componente funcional de la microbiota del suelo,
responsable principalmente de la descomposicin de la materia orgnica y el reciclaje de
nutrientes. Adems, se ha considerado que puede ser usado como un indicador
ecolgicosensible a los cambios ambientales.

La biomasa de microorganismos es una excelente fuente de nutrientes (protenas, grasa,

vitaminas, minerales y otros factores). Por lo tanto, siempre ha existido un inters de
incorporarla al sistema alimentario humano tanto en forma directa como indirecta (a
travs de animales). Entre ellas, es la proveniente de levaduras la que posiblemente se ha
estudiado con mayor profundidad.
Se conoce bastante respecto al crecimiento de levaduras en medios ricos en azcares
(como melazas de caa), en donde los niveles de oxgeno disuelto y de azcares en el
medio regulan el metabolismo celular de manera que se produzca exclusivamente masa
celular y dixido de carbono o, por al contrario, se minimice la produccin de biomasa y se
favorezca la produccin de metabolitos, como por ejemplo el etanol. Cuba es el pas que
produce ms biomasa de levadura a partir de melazas en el mundo; las dedica
exclusivamente a la alimentacin de animales monogstricos.

Se han recomendado, cono las mejores estrategias para procesos que emplean el cultivo
slido de microorganismos, las dos alternativas siguientes:

a. Sistemas mixtos para la produccin simultnea de alimento humano y para animales, y

b. Sistemas dirigidos para la produccin simultnea de metabolitos.

La idea bsica de transformar residuos agroindustriales en productos enriquecidos para la

alimentacin animal a travs de una bioconversin controlada mediante el empleo de la
tcnica del cultivo al estado slido, puede resumirse en la forma siguiente:

Para animales monogstricos:

a) enriquecimiento proteico de substratos amilceos;
b) reduccin do los componentes fibrosos de residuos lignocelulsicos;
c) detoxificacin de substratos muy especficos.

Para animales rumiantes:

a) aumento en la digestibidad de componentes fibrosos;
b) detoxificacin de substratos muy especficos.

Puede entonces observarse que cada aplicacin debe evaluarse muy concretamente, de
acuerdo con el animal usuario del producto, el tipo de subproducto y algunas
caractersticas que lo hacen especial, por ejemplo la presencia de componentes txicos y
antifisiolgicos que licitan su incorporacin en las raciones balanceadas.
Uno de los sistema mixtos que se han propuesto para substratos lignocelulsicos, es el de
emplear basidiomicetos fructificantes en matrices lignocelulsicas con requerimientos de
pretratamientosfsico-qumicos mnimos. Los cuerpos fructificantes, para ser empleados
como un excelente alimento para humanos, nutritivo y delicioso. La matriz slida residual,
para ser empleada en la alimentacin de rumiantes.

Aparte de su empleo como fuente de nutrientes, la biomasa microbiana tiene tambin

otras aplicaciones de mucho inters e importancia para Centroamrica. Especficamente
deben tenerse en cuenta las interacciones entre planta y microorganismos, interacciones
que pueden ser altamente beneficiosas, tales como las bacterias rizognicas fijadoras de
nitrgeno y las raicorrizas, y/o dainas para la planta, es decir los microorganismos
fitopatgenos.

USOS DE LA BIOMASA
Biocombustibles
La produccin de biocombustibles tales como el etanol y el biodiesel tiene el potencial de
sustituir cantidades significativas de combustibles fsiles en varias aplicaciones de
transporte. El uso extenso del etanol en Brasil ha demostrado que los biocombustibles son
tcnicamente factibles en gran escala. La produccin de biocombustibles en los EE.UU. y
Europa (etanol y biodiesel ) est aumentando, siendo la mayora de los productos
utilizados en combustible mezcla, por ejemplo E20 est compuesto por 20% de etanol y
80% de gasolina y se ha descubierto que es eficaz en la mayora de los motores de ignicin
sin ninguna modificacin. Actualmente la produccin de biocombustibles es apoyada con
incentivos del gobierno, pero en el futuro, con el crecimiento de los sembrados dedicados
a la bioenerga, y las economas de la escala, las reducciones de costos pueden hacer
competitivos a los biocombustibles.
Produccin elctrica
La electricidad puede ser generada a partir de un nmero de fuentes de biomasa y al ser
una forma de energa renovable se la puede clasificar como "energa verde". La
produccin de electricidad a partir de fuentes renovables de biomasa no contribuye al
efecto invernadero ya que el dixido de carbono liberado por la biomasa cuando es
quemado, (directa o indirectamente despus de que se produzca un biocombustible) es
igual al dixido de carbono absorbido por el material de la biomasa durante su
crecimiento.
Calor y Vapor
La combustin de la biomasa o de biogs puede utilizarse para generar calor y vapor. El
calor puede ser el producto principal, en usos tales como calefaccin de hogares y cocinar,
o puede ser un subproducto de la produccin elctrica en centrales combinadas de calor y
energa. El vapor generado por la biomasa puede utilizarse para accionar turbinas de
vapor para la produccin elctrica, utilizarse como calor de proceso en una fbrica o
planta de procesamiento, o utilizarse para mantener un flujo de agua caliente.
Gas Combustible.
Los biogases producidos de la digestin o de la pirolisis anaerobia tienen un nmero de
aplicaciones. Pueden ser utilizados en motores de combustin interna para accionar
turbinas para la produccin elctrica, puede utilizarse para producir calor para
necesidades comerciales y domsticas, y en vehculos especialmente modificados como
un combustible.
Ventajas de la biomasa.
La biomasa es una fuente renovable de energa y su uso no contribuye al
calentamiento global. De hecho, produce una reduccin los niveles atmosfricos del
bixido de carbono, como acta como recipiente y el carbn del suelo puede aumentar.
Los combustibles de biomasa tienen un contenido insignificante de azufre y por lo
tanto no contribuyen a las emisiones de dixido de azufre que causan la lluvia cida. La
combustin de la biomasa produce generalmente menos ceniza que la combustin del
carbn, y la ceniza producida se puede utilizar como complemento del suelo en granjas
para reciclar compuestos tales como fsforo y potasio.
La conversin de residuos agrcolas, de la silvicultura, y la basura slida municipal
para la produccin energtica es un uso eficaz de los residuos que a su vez reduce
significativamente el problema de la disposicin de basura, particularmente en reas
municipales.
La biomasa es un recurso domstico, que no est afectado por fluctuaciones de
precio a nivel mundial o a por las incertidumbres producidas por las fuentes de
combustibles importados. En pases en vas de desarrollo en particular, el uso de
biocombustibles lquidos, tales como biodiesel y etanol, reduce las presiones econmicas
causadas por la importacin de productos de petrleo.
Los cultivos para energa perennes (las hierbas y los rboles) tienen consecuencias
para el medio ambiente ms bajas que los cultivos agrcolas convencionales.

Produccin de levaduras y bacterias forrajera

Se realiza la simulacin de una planta de levadura forrajera a partir de las vinazas de
destileras, con el objetivo de contribuir a elevar las disponibilidades de protena para la
formulacin de piensos como alimento animal. Esta simulacin es de gran inters ya que
permite realizar un anlisis de eficiencia y la evaluacin de diferentes alternativas
tecnolgicas con vistas a reducir los costos de inversin, as como los volmenes de
residuales a enviar al medio ambiente. La simulacin se lleva a cabo con la ayuda del
software SuperPro Designer, por su flexibilidad en la construccin del diagrama de flujo
del proceso y poseer mltiples herramientas. Se define una alternativa en la produccin
de levadura forrajera utilizando como materias primas fundamentales los residuales
alcohlicos y el jugo de caa proveniente de una planta moledora. La alternativa
desarrollada estuvo dirigida a reducir los elevados costos de inversin que presentan las
centrifugas en este tipo de plantas y los efluentes que se generan. Los resultados que se
obtuvieron al realizar la simulacin fueron significativos, y se logr disminuir los efluentes
de la planta a un 75% y $ 912 000,00 USD al sustituir las centrfugas por evaporadores y
por lo tanto se lograron menores costos de inversin en el tratamiento posterior de los
residuales de la planta de torula. Aunque econmicamente esta alternativa muestra
buenos resultados hay aspectos tecnolgicos y principalmente nutricionales que se deben
estudiar, para poder tomar una decisin final en las modificaciones planteadas. Palabras
clave: SuperPro Designer, simulacin, levadura forrajera, residuales, vinazas.

SEPARACION DE BIOMASA
Procesos de separacin

El Servicio dispone de un clarificador WESTFALIA Separator CSA 1-06-475 con

programador TVE 6 - OP 76/0.

Este clarificador permite la separacin de clulas y medio mediante la centrifugacin

continua, con una fuerza de sedimentacin de hasta 6.000xg y una capacidad aproximada
(en funcin del contenido en slidos) de 50 litros por hora.

El separador permite recoger la muestra clarificada (tal y como sucede con los procesos de
obtencin de productos extracelulares, reaprovechamiento de medios, etc.) y/o la
recoleccin de los cultivos y de las partculas en suspensin.

Entre los usos ms frecuentes del separador figuran los siguientes:

Concentracin de biomasa microbiana, tanto la generada durante el proceso de

fermentacin como la procedente de muestras ajenas al Servicio.
Separacin de fracciones de cultivos por centrifugacin con diferentes fuerzas de
sedimentacin.
Clarificacin de muestras.

Preparacin de sustrato
La preparacin de sustrato para levaduras y bacterias tiene que cumplir los siguientes
requisitos:

Rico en nutrientes (almidn, azucares, amilasa, melaza, y dextrinas)

Tiene que ser asimilable
Libre de microorganismos perjudiciales
Condiciones de asimilacin
Las condiciones de asimilacin para levaduras y bacterias dependen del tipo de levadura y
bacteria con la que deseamos trabajar:

pH
Concentracin de azucares
Relacin carbono nitrgeno
Presin
Aeracin
Agitacin
Relacin fosforo nitrgeno
Condiciones para levaduras:

pH 4.5 7.5
Concentracin de azucares 2.6 6
C/N 10-20
Presin menor a 1.5 atm.
Aeracin de 1.2 a 2
Agitacin cero
P/O 1.5 - 2

BIODEGRADACION (Descomposicin orgnica)

Es el resultado de los procesos de digestin, asimilacin y metabolizacin de un

compuesto orgnico llevado a cabo por bacterias, hongos, protozoos y otros organismos.
En principio, todo compuesto sintetizado biolgicamente puede ser descompuesto
biolgicamente. Sin embargo, muchos compuestos biolgicos (lignina, celulosa, etc.) son
difcilmente degradados por los microorganismos debido a sus caractersticas qumicas. La
biodegradacin es un proceso natural, ventajoso no slo por permitir la eliminacin de
compuestos nocivos impidiendo su concentracin, sino que adems es indispensable para
el reciclaje de los elementos en la biosfera, permitiendo la restitucin de elementos
esenciales en la formacin y crecimiento de los organismos (carbohidratos, lpidos,
protenas). La descomposicin puede llevarse a cabo en presencia de oxigeno (aerbica) o
en su ausencia (anaerbica). La primera es ms completa y libera energa, dixido de
carbono y agua, es la de mayor rendimiento energtico. Los procesos anaerbicos son
oxidaciones incompletas y liberan menor energa.

El origen de la materia orgnica que se encuentra en una masa de agua puede ser
autctono o alctono. El primero consiste en cadveres de organismos, mudas,
excreciones, productos de la senescencia y muerte de plantas acuticas, secreciones de
algas y plantas acuticas. En las aguas dulces, frecuentemente la materia orgnica
proviene de fuentes alctonas o litorales, transportadas hasta el cuerpo de agua por
accin del viento o por la escorrenta y consiste fundamentalmente en hojas, ramas,
frutos, polen y materia orgnica disuelta de muy diversos orgenes (fertilizantes, aguas
residuales, etc.).

Por el contrario, son volcados a los medios compuestos que no pueden ser degradados
por los organismos, ya que estos no poseen la batera enzimtica capaz de hacerlo, son los
compuestos no biodegradables (metales pesados, plaguicidas, compuestos del petrleo).
Estos compuestos se acumulan en los tejidos de reserva de los organismos, aumentando
su concentracin a medida que avanzamos en la red trfica hacia eslabones superiores.
Distintos txicos actuando simultneamente pueden atenuar (efecto antagnico) o
contrariamente acentuar su efecto (efecto sinrgico) sobre los organismos afectados.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

MATERIALES REACTIVOS
Cmara de Neubauer Muestra (levadura diluida en H2O)
Matraz aforado de 25ml, 50ml,100ml Alcohol hidratado
Pipeta graduada desde 0.1ml (micro pipeta) Agua destilada
Piceta
Atomizador
Microscopio ptico (equipo)
Gotero
Vaso precipitado 100ml, 80ml, 250ml
Cubre objetos
Pera de goma
Probeta

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
PREPARACION DE DILUCIONES DE 0.5 CON 25, 50, 100 MILILITROS

Aadimos con una micro pipeta 0.5

ml de muestra en un matraz aforado de 25
ml, luego aforamos con agua destilada
Repetimos el procedimiento con
todas las concentraciones dadas en
matraces aforados de 25, 50, 100ml.
PREPARACION DE LA MUESTRA

Limpiamos, desinfectamos con

alcohol hidratado la cmara de Neubauer
antes de aadir nuestra muestra a observar.
Aadimos nuestra muestra a la
cmara de Neubauer con un gotero luego
procedimos a cubrir la muestra con un cubre
objeto, para su posterior observacin.

Introducimos la muestra ya preparada

en la cmara de Neubauer al
microscopio y procedimos a observar.
Enfocamos el microscopio para q
visualmente podamos observar a los
microrganismos presentes en la rejilla
Tomamos una foto y procedemos a
contar los microorganismos

DATOS, CALCULOS Y RESULTADOS

CONCENTRACION 0.5 CON 25 MILILITROS

Concentracin =0.5/25
CONCENTRACION 0.5 CON 50 MILILITROS

Concentracin =0.5/50

CONCENTRACION 0.5 CON 100 MILILITROS

Concentracin =0.5/100

CALCULOS

# 10000
=
#

6(10000)
= = 6104 [ ]
1
OBSERVACIONES
Solo contamos los microorganismos de las muestra q la auxiliar nos mando ya q
nuestras fotos q tomamos fueron tomadas desde angulos no muy nitidos y se es
imposible de contarlo
Pudimos apreciar que la concentracion 0.5 ml de muestra con 25 ml de agua aun
es muy concentrada para su observacion
Apreciamos q la camara de Neubauer tiene dos lados superior y inferior y
podemos trabajar en cualquiera de los lados.

CONCLUCIONES
Logramos conocer y aprender las tecnologas acerca del conteo visual de la
biomasa de microrganismos con hematocito-metro o cmara de Neubauer asi
tambin calculando la concentracin de la misma y el conocimiento a profundidad
de las partes de la cmara de Neubauer donde se realiz el conteo, est dividida
en tres parte con un grosor de 30x70mm y unos 4 mm de grosor.

BIBLIOGRAFIA
http://biotecnologiaequipo5.blogspot.com/p/produccion-de-biomasa-
microbiana.html
Technical note Neubauer chamber cell counting oscar bastidas