Resumen LYTC3

Ultracentrifugacin por gradiente

Centrifugacin en gradiente de densidad: se utiliza para separar partculas biolgicas

con un tamao similar pero con una diferente densidad. Se utiliza un mtodo con
ultracentrfugas con un rotor de swinging-bucket y un gradiente de densidad. Se coloca
una preparacin con diferentes tipos de partculas sobre un lquido con un gradiente de
densidad. En este caso la densidad del gradiente debe superar a la densidad de la
partcula ms densa y se utiliza sacarosa ultra pura libre de DNasas, RNasas y proteasas.
Para obtener un enfoque cuantitativo en cuanto a la medicin de nuestra protena,
debemos realizar una curva de calibracin. La misma est asociada con el mtodo ya
que se valora la sensibilidad y el rango de linealidad de la misma (mnimos y mximos
de concentracin de una determinada protena que puede el mtodo puede medir con
igual rendimiento). En cuanto al grfico de la curva buscamos un valor aproximado a 1
para poder establecer una funcin lineal entre la lnea de regresin de nuestros controles
y una concentracin desconocida de protena (y poder hacer una regla de tres).
Al realizarse el protocolo se debe tener en cuenta que los volmenes de agua deben de
ser diferentes dependiendo de la cantidad de reactivo y muestra que se tenga (+
reactivo/muestra volumen de agua). Debido a que, si se disminuye el volumen total, se
disminuye el valor de la absorbancia equitativamente y se pierde sensibilidad. Hay
menor absorbancia porque menos reactivo que entre en contacto con la muestra, por lo
tanto, hay menos desarrollo de color.

Inmunohistoqumica (IHQ)

Se dice que en cuanto a la IHQ hay falta de criterios uniformes para interpretar e
informar los resultados, esto se refiere a la falta de reproducibilidad que tiene la tcnica
en cuanto al anlisis cualitativo, hay falta de homologacin, ya que en todos los pasos
de su protocolo hay dispersin metodolgica.

Protocolo:
1. Toma de la muestra.
2. Fijacin: se utiliza para evitar la degradacin del tejido. El fijador usual es el formol
10%, obtenido de una dilucin (con agua destilada o con buffer fosfato en donde se
denomina formol-buffer) de formol 40% (es un fuerte fijador y econmico), el tiempo
de incubacin es de 24 a 36 horas. Existen ventajas de usar un solo fijador, entre ellas
estn. (a) Simplificacin de la IHQ; (b) Te permite utilizar material de archivo del
laboratorio; (c) Reproductibilidad de la tcnica en otros laboratorios.
La relacin entre lo que quiero fijar y el volumen de fijador tiene un mximo de 1 a 10
y mnimo de 1 a 5.
A su vez, puede existir un exceso de fijacin que puede llevar al enmascaramiento del
antgeno (conlleva a que no exista una unin entre antgeno y anticuerpo y d como
resultado una inmunomarcacin negativa). El fenmeno ocurre por la unin del fijador
con la estructura terciaria de la protena que produce un enrollamiento de la misma. De
esta forma, el epitope del antgeno que antes estaba expuesto deja de estarlo y el
anticuerpo no tiene acceso al epitope, alteracin antignica.
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3. Se deshidrata el tejido y se realiza una inclusin en parafina.
4. Se realizan cortes con un micrtomo (m) o un criostato (en donde el tejido es tratado
con crigeno).
5. Desparafinacin/deshidratacin: se realiza lo que comnmente se denomina tren, en
donde se pasa el tejido por concentraciones de solutos orgnicos y luego
concentraciones decrecientes de alcoholes hasta llegar a agua destilada, para llegar a
desparafinarlo y deshidratarlo.
6. Pre-tratamiento o (retrival): es la recuperacin antignica por exceso de fijacin. La
tcnica ideal es una combinacin de horno-microondas con Buffer citrato (pH=6).
7. Bloqueo de interferencias: es el bloqueo de lo que podra causar la coloracin de
fondo, se bloquean las uniones de poca afinidad cruzadas inespecficas. En el caso de
la peroxidasa (forma parte del tejido), si no se realizara el bloque de la misma habra
coloracin de peroxidasa endgena.
8. Bloqueo de protenas: se realiza para que el los anticuerpos estn forzados a realizar
uniones con los epitopes especficos (slo con los que poseen una unin por alta
afinidad), ya que se pueden establecer uniones de menos afinidad, que quedan
interferidas por el bloqueante.
9. Colocacin de anticuerpos: Se debe diferenciar entre un enfoque cuantitativo y
cualitativo.
Enfoque cuantitativo: Para este enfoque se utiliza un anticuerpo primario
monoclonal con una marca fluorescente (la unin es mol a mol con el epitope
que se uni). El mismo, al ser monoclonal (especfico de un antgeno), tiene la
ventaja de ser especfico pero poco sensible ya que se une a un solo epitope. Por
falta de sensibilidad de este anticuerpo se pueden dar falsos negativos. Para
realizar un anlisis estadstico y no descriptivo se complementa con un ELISA.
Enfoque cualitativo: Para este enfoque se utiliza un anticuerpo secundario
policlonal (se encuentra biotinilado y se utiliza con un complejo ABC). El
mismo, tiene alta sensibilidad pero baja especificidad ya que marca varios
epitopes de varias familias de protenas, que se encuentra conjugado con marca
anti-especie. Primero se coloca un anticuerpo primario monoclonal (que se une
al antgeno) y luego se coloca el anticuerpo secundario policlonal (que al poder
unirse a varios epitopes puede unirse a cualquier epitope que haya quedado libre
del antgeno anteriormente capturado por el anticuerpo monoclonal primario).
Control positivo: control de laboratorio interno artificial, estrategia de evaluacin global
de la tcnica. Se evala sensibilidad (ms sensibilidad ms positivo) Se evalan falsos -.
Control negativo: se realiza poniendo todo menos el anticuerpo primario monoclonal.
La correcta titulacin del anticuerpo marcado est relacionado con la sensibilidad del
mtodo (-marcacin, -sensibilidad). A su vez, tambin est relacionado con el tiempo de
incubacin ( = + ). Si mayor es el tiempo de incubacin hay una mayor marcacin
(mayor energa cintica y estabilizacin de uniones de menor afinidad) se sacrifica la
especificidad. Esto mismo ocurre con altas temperaturas, se sacrifica la especificidad.

El perfeccionamiento de una tcnica inmunohistoqumica se realiza con una alta

incubacin, a bajas temperaturas y con un bajo ttulo del anticuerpo.

10. Sistema de revelado.

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Elisa

El ELISA (Enzyme-Linked-Immunosorbent Assay) es un inmunoensayo enzimtico

se basa en que los anticuerpos en la muestra reaccionan y forman un complejo con los
antgenos adsorbidos a la fase slida, y son detectados por un conjugado que es una
enzima. La cantidad de enzima enlazada indica la cantidad de anticuerpos en el suero y
puede ser medida por la degradacin de su substrato.
Se apoya en tres caractersticas biolgicas fundamentales: la especificidad de los
anticuerpos, el elevado poder cataltico y la alta especificidad de las enzimas. Mediante
la combinacin de la reaccin inmunolgica con un indicador altamente sensible, el
dbil efecto inmunolgico se ve reforzado por la amplificacin enzimtica, de forma
que se consigue una elevada sensibilidad y detectabilidad.
La reaccin antgeno-anticuerpo se detecta generalmente mediante un sistema de
cambio de color (cromognico) y es cuantificable y proporcional a la intensidad de la
luz, ya que la absorbancia es directamente proporcional al desarrollo de color.
La tcnica ELISA se fundamenta en la premisa de que luego de acoplar antgenos
solubles o anticuerpos a una matriz slida insoluble, stos retienen la actividad
inmunolgica y en que estas biomolculas tambin pueden unirse a una enzima,
reteniendo el conjugado resultante, tanto la actividad enzimtica como inmunolgica.
El ensayo de ELISA doble sndwich es un tipo de ensayo heterogneo no competitivo
indirecto en cul es el ejemplo clsico de mtodos para la deteccin de antgenos, el
primer anticuerpo captura el antgeno de la muestra que es detectado a travs del
conjugado anticuerpo-enzima o amplificado con un conjugado dirigido contra el
segundo anticuerpo. En la primera incubacin se establece el binding entre el antgeno-
anticuerpo, el mismo es un anticuerpo monoclonal.
La detectabilidad de todos los ensayos puede incrementarse usando mtodos de
amplificacin inmunolgicos como el sistema peroxidasa-antiperoxidasa

Protocolo:

Se utiliza una fase slida que consiste en un anticuerpo primario de captura

fijado en el fondo del soporte, luego de colocar este anticuerpo primario se lava
para eliminar anticuerpos fijados deficientemente o no fijados.
Se coloca la muestra que contiene los antgenos que se unirn al anticuerpo de
captura. Se lava para eliminar los antgenos que no hayan reaccionado.
Se aade un anticuerpo secundario de deteccin o reconocimiento conjugados
con una enzima, que son especficos del antgeno a detectar. Se lava para
eliminar el complejo enzima-anticuerpo que no ha sido unido.
Se aade un sustrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora y la
colorea mediante reacciones de redox.
Se analizan los datos mediante espectrofotmetro y se determina la presencia del
antgeno y se realiza una curva de calibracin para cuantificar los datos.

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Cromatografa de capa delgada (TLC)

La cual consiste que el eluyente es un solvente orgnico (mezcla de etanol y alcohol

isopropilo) y la fase fija es un papel. La misma se realiza sembrando en banda la
muestra en la parte inferior del papel y luego se coloca el eluyente, esperando que por
capilaridad y diferentes afinidades (entre los compuestos y las diferentes fases) los
separe en tramos distintos de la banda.

Reaccin de Hill

La fotosntesis es la capacidad que poseen los organismos fotoauttrofos de sintetizar

compuestos orgnicos a partir de energa lumnica y sustancias inorgnicas. Se forman
hidratos de carbono a partir de CO de la atmsfera. La energa lumnica sirve para que se
forme nitrgeno amoniacal a partir del nitrato absorbido y para que el sulfato se transforme
en sulfito. El C, N y S se reducen gracias a los electrones que provee el agua. Durante la
reaccin lumnica de la fotosntesis, se absorbe luz (fotones) en centros de reaccin
fotosintticos que estn en la membrana y se liberan electrones de la clorofila que se
transfieren a travs de una cadena de transporte de electrones hasta la ferredoxina. Esta
ltima es utilizada para reducir nucletidos como el NADP formndose NADPH + H. El
transporte fotosinttico de electrones est acoplado a un transporte vectorial de iones de H
por la membrana fotosinttica, que se aprovecha para la sntesis de ATP. El dficit de
electrones se equilibra mediante el donador de electrones agua. EL ATP formado en la
reaccin lumnica y el NADPH se aprovechan para la asimilacin del C. La etapa lumnica
tiene dos fotosistemas.
El complejo plastoquinona puede ser reducido mediante dos transferencias sucesivas de un
electrn. Ciertas sustancias como iones frricos, benzoquinonas, y algunos colorantes como
el 2,6 diclorofenolindofenol son capaces de ser reducidos por la plastoquinona a una
velocidad superior a la del citocromo. Si se aade al sistema fotosinttico puede
desacoplarlo actuando como aceptor de electrones. La reaccin de Hill se basa en este
hecho, el indicador redox cambia de color al reducirse.
La estequiometria de la reaccin es la siguiente:
2 A + 2 H2O 2 AH2 + O2
Esta reaccin permite el estudio del mecanismo de accin de diversas sustancias que afecten
el transporte de electrones, como herbicidas derivados de la urea. La reaccin de Hill se ve
tambin inhibida por detergentes, calor, ausencia de iones en el medio (Cl, Mn2+).

Histologa

El primer paso consiste en la toma de la muestra. La misma la podemos obtener mediante

un proceso de biopsia o necropsia. La calidad y fidelidad que una clula o tejido posean,
van a dependen del tiempo que se tarde en tomar la muestra y la habilidad del personal
que opere con la misma.
En un segundo paso fijamos la muestra con el objetivo de: (1) mantener el tejido en su
estado natural y evitar su desintegracin o su autolisis; (2) endurecer el material para
conseguir una mejor capacidad de corte; (3) eliminar bacterias u otro agentes etiolgicos
de enfermedades preexistentes en la muestra. El proceso consiste en la alteracin de las
estructuras proteicas, de modo tal, que se altera el estado celular inicial, obtenindose
una imagen de equivalencias de caractersticas constantes.

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Existen dos tipos de fijaciones: (1) Fijacin de inmersin, en donde el tejido se sumerge
en las soluciones fijadoras; (2) Fijacin por perfusin, mediante la cual el rgano que
debe fijarse se infiltra con el medio de fijacin a travs de su sistema vascular, y de esta
forma se fija. Ejemplos de soluciones fijadoras son formaldehido 5%, cido pcrico,
alcohol, entre otros.
En un tercer paso realizamos la inclusin del tejido anteriormente fijado. Las muestras
se colocan en un disolvente adecuado, el cual consiste en una serie gradual de alcoholes
de concentracin creciente que deshidrata al tejido, lo endurece y disuelve la mayor
parte de los lpidos de las clulas y los tejidos. El medio de inclusin ms utilizada es la
parafina, el paraplast o resina sinttica (p. ej. metacrilato). Tambin puede realizarse un
proceso de criomicroscopia, en donde se logra el endurecimiento de la muestra
mediante nitrgeno lquido.
En un cuarto paso efectuamos el corte de la muestra mediante la utilizacin de un
micrtomo (espesor 5-8 m). As se cuenta con micrtomos de deslizamiento,
micrtomo Tetander, micrtomo de parafina tipo Minot (cuchilla fija), el ultra
micrtomo, critomo, entre otros. El de cuchilla fija o tipo Minot es el ms utilizado.
Luego, se adhiere al portaobjetos.
En un ltimo paso, teimos la muestra. El proceso consiste en la desparafinacin del
tejido, mediante un solvente adecuado, y la rehidratacin del tejido, ambos en pasos
intermedios como se realiz la deshidratacin. Inmediatamente del procedimiento, se
colocan los colorantes, en donde los diversos elementos celulares e hsiticos captan los
colores por afinidad. Los componentes con cargas elctricas negativas (ADN), captan 2
colorantes bsicos (p. ej. hematoxilina). En cambio, los componentes con cargas
elctricas positivas (eritrocitos y colgeno), captan colorantes cidos (p. ej. eosina).

Sangre

Durante el desarrollo del experimento utilizamos como mtodo de objetivacin a la

hemoaglutinacin indirecta (HAI). La tcnica de HAI se basa en la propiedad de los
anticuerpos de producir una aglutinacin especfica en presencia de glbulos rojos
sensibilizados con los antgenos correspondientes. Pueden existir en suero anticuerpos
inespecficos, denominados heterfilos, que son capaces de aglutinar glbulos rojos de
distintas especies, por esta razn se los enfrenta tambin con glbulos rojos no
sensibilizados. Los anticuerpos interferentes se eliminan por tratamiento con 2-
mercaptoetanol.
A su vez manipulamos otra tcnica como mtodo de objetivacin, la cual se denomina
RPR Slide Test. La misma se fundamenta en que las reaginas se detectan en suero por la
reaccin con un antgeno de cardiolipina, lecitina y colesterol adsorbido sobre partculas
de carbn. La reaccin produce una aglutinacin visible macroscpicamente favorecida
por las partculas de carbn. Esta tcnica puede ser cualitativa o cuantitativa
dependiendo de cmo se manipule. En nuestro caso era de inters la forma cualitativa
de la tcnica, ya que lo que buscbamos era presencia o ausencia del vector de T. cruzi.
Las infecciones transmisibles por trasfusin es la transmisin de un agente infeccioso a
travs de un hemocomponente (componente de la sangre) hacia un hesped suceptible.
Puede ser endgena cuando es a travs de un donante o exgena cuando ocurre
contaminacin durante el procesamiento, La gran mayora se originan a partir de virus,
pero pueden ser parsitos, bacterias o priones (protenas con una mala conformacin).

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Pueden causar infecciones inaparentes, que evolucionan a enfermedades graves y por
ltimo a la muerte.
Entre las caractersticas de las ITT se encuentra: (1) Presencia en sangre; (2) Estabilidad
a temperatura de almacenamiento; (3) Perodo de incubacin asintomtico.
La relevancia de las ITT radica en su patogenicidad y en la prevalencia en donantes de
sangre que pueden generar.
Se busca la prevalencia de la sensibilidad (capacidad de una tcnica de detectar los
positivos) por sobre la especificidad (capacidad de una tcnica de identificar los
negativos), en el Banco de Sangre se buscan los falsos positivos por sobre los falsos
negativos, por lo tanto se prevalece la alta sensibilidad, para la eleccin de una prueba
de sangre. Tambin posee otras caractersticas como: ser reproducibles, en tiempos
cortos, til para resolver gran nmero de muestras entre otras.
Caractersticas de las pruebas para tamizaje hay que tener en cuenta estos aspectos:
Sensibilidad:
o Ventana inmunolgica: periodo en donde una persona es capaz de
infectar pero no puede ser reconocido.
o Bajas concentraciones de Ag/Ac.
o Variantes virales.
Especificidad.
o Descarte de unidades.
o Asesoramiento al donante.
La prueba diagnstica es aquella que permite discriminar a la persona que presenta una
patologa de la que no la presenta: Se debe tener en cuenta que:
Existe una variabilidad inherente a todo test.
Las personas con la enfermedad presentan variaciones.
Las personas sin la enfermedad presentan variaciones.
En cuanto a la variabilidad del test se debe tener en cuenta la precisin (confiabilidad),
que es la capacidad de una prueba de brindar siempre el mismo resultado al ser
reproducido y en cuanto a los sesgos, se debe tener en cuenta la exactitud (validez), que
es la capacidad de una prueba de medir en forma correcta la variable en estudio.
En cuanto al anlisis de las muestras se pueden presentar los siguientes casos:
I. Verdaderos negativos: aquellos en quienes el test resulta negativo y la
enfermedad no est presente.
II. Verdaderos positivos: aquellos en quienes el test resulta positivo y la
enfermedad est presente.
III. Falsos negativos: aquellos en quienes el test resulta negativo y la enfermedad
est presente. Mientras ms de estos hay menos sensible es la prueba.
IV. Falsos positivos: aquellos en quienes el test resulta positivo y la enfermedad no
est presente.
La sensibilidad va a estar determinada por la proporcin de personas cuyo test da

positivo y la enfermedad est presente sobre el total de enfermos. = (+) 100.
La especificidad va a estar determinada por la proporcin de personas cuyo test da

negativo y la enfermedad no est presente sobre el total de los sanos. = (+) 100
Dependiendo de la prevalencia de estos, existe:
Valor predictivo positivo: proporcin de personas cuyo test da positivo que
realmente padecen la enfermedad.
Valor predictivo negativo: proporcin de personas cuyo test da negativo que no
padecen la enfermedad.

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Existen los siguientes riesgos de transmisin:
o Perodo ventana (NAT es una prueba que acorta estos perodos).
o Donantes asintomticos portadores crnicos con resultados negativos.
o Infecciones por mutantes o variantes no detectables por las pruebas utilizadas.
o Errores tcnicos en el laboratorio.

Potencial de membrana

El potencial de membrana es la velocidad de flujo (cantidad de molculas que

atraviesan la membrana por unidad de tiempo y rea de membrana) el cual genera un
movimiento de cargas. El mismo depende del potencial electroqumico (el potencial
qumico hace referencia a la concentracin de las polaridades de las molculas, mientras
que el potencial elctrico hace referencia a las molculas cargadas en movimiento que
se mueven en el espacio). Se establece que las molculas no cargadas atraviesan la
membrana con una mayor facilidad que las cargadas.
El potencial de equilibrio del in se establece cuando ambos potenciales son iguales en
[]
donde se establece que el flujo es neto. : log []).
El potencial de accin es la perturbacin generado por la despolarizacin de la
membrana (ej. neuronas), no se extingue en el tiempo.
El potencial electrotnico es una perturbacin que se extingue en espacio y tiempo,
genera un campo que disminuye a medida que nos alejamos del lugar de la perturbacin
original. Es el movimiento de iones que genera un potencial elctrico.

Sistema deltaico

Un sistema deltaico se puede definir como una zona formada por la sedimentacin del
material arrastrado por los ros al producir una disminucin brusca de la velocidad de
flujo, causada por las desembocaduras en el mar, lago u otro rio.
Los factores formadores de suelo son agentes, fuerzas, condiciones o una combinacin
de ellos que afecta, ha afectado o afectar a un material original del suelo con potencial
para cambiarlo. El relieve es la conformacin de la superficie terrestre sobre la que se
desarrolla el suelo. Los principales elementos de relieve se relacionan con la pendiente
cuyos parmetros son: (1) gradiente (ngulo de la pendiente), mientras ms grande es
mayor es el escurrimiento y la erosin; (2) longitud; (3) forma (cncava o convexa); (4)
disposicin (regular, irregular o simtrica); (5) orientacin, la cual crea microclimas. Se
pueden clasificar en:
o Suelos zonales: son resultado de las caractersticas climticas del ambiente,
abarcan grandes extensiones. Evolucionan a lo largo del tiempo con
condiciones climticas similares en zonas extensas. El factor de formacin de
suelos es el clima. Suelos maduros en equilibrio con su ambiente. Ej. molisol.
o Suelos interzonales: son suelos locales sufrieron accin de la napa fretica
que crea condiciones de suelos hidro-holomrficos. Impacta un factor de
formacin ms importante que el clima. Son suelos con poco desarrollo. Ej.
suelo gley (arcillas plsticas y adhesivas, de color gris verdoso a gris verdoso
oscuro presentndose parcial o totalmente edafizados y con rasgos
hidromrficos).

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Climatologa

La seleccin de un instrumento adecuado en funcin de sus caractersticas e

incertidumbre es vital, ya que es necesario que ambos sean representativos del
fenmeno que se pretenda medir y para que las observaciones sean exactas y precisas.
No es bueno utilizar un instrumento que sea bueno para observaciones a grandes escalas
para algo que sucede a una escala chica en un perodo de tiempo corto.
Comprender las caractersticas del instrumento y aplicarlas de manera apropiada juega
un papel vital en la observacin precisa de los cambios en el entorno fsico.
Los instrumentos meteorolgicos y los sistemas de observacin son necesarios porque
queremos ser capaces de comprender el fenmeno que estaban estudiando. Y para saber
si el valor que medimos es cercano al valor real.
Para la seleccin de instrumentos o sistema de observacin se necesitan analizar los
siguientes parmetros:
Rapidez con que se puede realizar una medicin (necesidad en pensar en la
respuesta del instrumento).
Resolucin espacial (que rea va a medir ms).
La calibracin es el proceso de correlacin de una observacin del instrumento con una
observacin de otro instrumento de calidad conocida (estndar), la misma revela errores
e incertidumbres que pueden ser inherentes a la medicin. La misma debe de realizarse
antes, durante y despues de la investigacin o recopilacin de datos.

Tipos de observaciones

Las mediciones tienen como objetivo determinar el estado de un sistema. Existen dos
tipos de observaciones:
1. Medicin directa: son aquellas que miden la masa, longitud y el tiempo
directamente. (Ej. balanza).
2. Medicin indirecta: es una tcnica que emplea un dispositivo para realizar una
medicin que luego se interpreta. (Ej. anemmetro para medir la velocidad del
viento). Casi todas las mediciones meteorolgicas son indirectas.
A su vez existen dos tipos de detecciones de las observaciones:
1. Deteccin in situ: se obtienen del contacto directo entre el dispositivo de
deteccin y el medio, material u objeto. Las mediciones in situ exactas requieren
de sensores diseados para minimizar su influencia sobre la sustancia, tambin,
debe de responder a cambios en la frecuencia temporal. (Ej. Una radiosonda
mvil soportada por un globo).
2. Deteccin remota (teledeteccin): Las observaciones se obtienen sin contacto
directo entre el dispositivo de deteccin y la sustancia. Puede ser utilizada para
obtener perfiles atmosfricos, escaneos e imgenes de una variedad de
longitudes de onda, etc. Existen dos tipos de teledeteccin, que utilizan
diferentes dispositivos:

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 o Dispositivos activos: dispositivos electromagnticos que se basan en un
impulso transmitido y una seal de retorno retrodispersada, que se
convierte en una variable meteorolgica durante el acondicionamiento y
procesamiento de seales. (Ej. radar, sodar).
o Dispositivos pasivos: no hay transmisin de seal, se basa en la emisin
o reflejo de la radiacin electromagntica de una fuente, que es
detectada por un sensor, procesada y visualizada. Los mismos facilitan
la medicin a distancia sin contacto con el medio ambiente a medir. (Ej.
sonda de temperatura infrarroja).
Las "variables de estado" son los parmetros bsicos que especifican las propiedades de
un sistema, en este caso una parcela de aire. El nmero requerido de variables de estado
depende de los componentes a considerar en la parcela. En el nivel ms simple, las
variables de estado "intensivas" (que no dependen del volumen) de una parcela de aire
son: presin y temperatura. Pueden necesitarse un subconjunto de variables de estado
adicionales para describir otras propiedades del sistema como los constituyentes de
gases traza de la atmsfera, etc. Tambin existen otras variables adicionales como el
albedo de las nubes o la tasa de precipitacin que requieren una medicin
independiente.
La atmsfera es un fluido en movimiento en donde la evolucin de las variables de
estado depende de la media, o del estado estacionario, y turbulento, o fluctuaciones, de
los intercambios de masa, la energa y el momento que fuerzan los cambios locales en
estos parmetros.
Existen las siguientes variables meteorolgicas:
a) Temperatura: es una propiedad intensiva que indica que el calor fluir de un
objeto ms caliente a otro ms fro y que la igualdad de temperatura es un
requisito para que dos objetos estn en equilibrio trmico. La energa cintica
media de las molculas en un gas es proporcional a la temperatura. Las
temperaturas ms altas conducen a una menor densidad (Ley de Charles) lo que
impulsa la flotabilidad e inicia la circulacin atmosfrica. La misma puede ser
medida in situ (temperatura de bulbo seco) o por teledeteccin (dropsonde).
b) Presin: la medicin de la presin atmosfrica se conoce como barometra. La
presin es la fuerza perpendicular a la superficie ejercida sobre una superficie
unitaria expuesta a la atmsfera. En una parcela en reposo, la presin es
isotrpica (direccionalmente uniforme) o presin "esttica". La energa cintica
por volumen de una parcela de aire en movimiento se denomina "presin
dinmica". Para un fluido compresible como el aire el aumento ser igual a la
presin dinmica. Un barmetro de mercurio de vidrio es un instrumento
estndar para medir la presin esttica.
c) Humedad: la higrometra es la medida de la cantidad de vapor de agua en la
atmsfera. La presin de vapor de agua, es la fuerza ejercida sobre un rea
unitaria nicamente por molculas de agua en el estado gaseoso. Tiene unidades
de presin (Pa) y la relacin entre la presin de vapor de agua ambiental y la
presin de vapor de agua de saturacin, (ecuacin Clausius-Clapeyron), da la
humedad relativa.

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 La diferencia entre la temperatura del aire ambiente y la temperatura del punto
de roco o la temperatura del bulbo, son mtodos usados para medir el vapor de
agua atmosfrico. La teledeteccin es un mtodo para obtener perfiles verticales
de vapor de agua. Los higrmetros pticos detectan la absorcin de la radiacin
electromagntica a longitudes de onda selectivas para determinar el contenido de
vapor de agua y los psicrmetros permiten calcular el vapor de agua en el aire.
d) Viento: es el movimiento del aire relativo a la superficie de la Tierra. Es un
vector con direccin y magnitud. El viento puede ser medido mediante un
anemmetro con una combinacin de paleta de viento (las cuales se alinean con
la menor resistencia del aire paras determinar la direccin del viento),
anemmetro de copa y hlice (miden la velocidad escalar del viento). Los mapas
de medidas de viento proporcionan informacin sobre cmo se mueve la
atmsfera y son utilizados para modelos de pronstico del tiempo. Los vientos
medidos tambin indican la estructura de los sistemas meteorolgicos y por lo
tanto se utilizan a menudo en los estudios de campo de los sistemas de tormentas
u otras caractersticas meteorolgicas.
e) Precipitacin: las mediciones de precipitacin pueden incluir el estado, tipo de
evento, tamao, cantidad (tasa de hidrometeoros) y duracin. La misma se
comunica en mm, en l/m, mientras que los mm/h se utilizan para medir la
velocidad de precipitacin. Se puede medir en un lugar fijo mediante el uso de
un pluvimetro o un medidor de nieve. Los medidores tambin utilizan tcnicas
electrnicas, pticas o gravimtricas o pueden ser totalizadores (recogen la
lluvia o nieve durante un periodo de tiempo). Se utilizan tcnicas de
teledeteccin como radares y sensores a borde de satlites, as tambin como
medidores de lluvia y otros medidores en tierra.
f) Radiacin: son el flujo del potencial electromagntico entrante y saliente
(balance de calor de la Tierra). La medicin del mismo se utilizan para estudiar
las variaciones espacio-temporales de la transformacin de energa dentro del
sistema Tierra-atmsfera, para analizar las propiedades y distribucin de los
constituyentes atmosfricos, para estudiar los cambios en la radiacin entrante,
saliente y neta, y para probar mediciones y algoritmos de radiacin de satlites.
Los datos obtenidos de las mediciones son utilizados para comprender la
relacin entre el balance energtico de la Tierra y otras variables meteorolgicas.
La heliofana es el estudio relativo de la determinacin del tiempo durante el
cual un lugar ha recibido radiacin directa. Existen diferentes tipos de
heliofanias:
Heliofana efectiva (d): Es el perodo de tiempo (expresado en horas)
durante el cual el lugar de observacin ha recibido radiacin solar directa
(es decir, que no ha sido interceptada por obstculos) y que ha sido,
adems, registrada por el instrumental de medicin.

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 Heliofana terica astronmica (D): Es el mximo perodo de tiempo
(expresado en horas) durante el cual se podra recibir radiacin solar
directa, independientemente de las obstrucciones causadas por
fenmenos meteorolgicos o relieves topogrficos, para un lugar y fecha
determinada.
Heliofana terica local (D): Es la diferencia entre la heliofana terica
astronmica y el perodo de tiempo (expresado en horas) durante el cual
nicamente los relieves topogrficos obstruyen la radiacin solar directa,
que no puede ser entonces registrada por los instrumentos de medicin.
Heliofana relativa (H): Es el cociente entre la heliofana efectiva (d) y la
heliofana terica astronmica (D).
Heliofana relativa local (H): Es el cociente entre heliofana efectiva (d)
y la heliofana terica (D).
g) Nubes y aerosoles: las propiedades medibles de las nubes incluyen el tipo de
nube, el techo, la altura, la cobertura o la cantidad, la tasa de formacin de
precipitacin y la eficiencia de precipitacin (relacin de precipitacin a
condensado), el contenido de agua lquida, la informacin detallada sobre los
tipos y la distribucin de tamaos de hidrometeoros y el albedo (relacin entre la
energa solar entrante y reflejada). Un aerosol es una suspensin coloidal de
partculas en la atmsfera, lo que significa que las partculas de aerosol
permanecen suspendidas en el aire. Los aerosoles tienen propiedades medibles,
la concentracin de partculas, la distribucin de tamaos y la composicin
qumica. Los instrumentos para medirlos son sensores de aire areos, radares y
sensores radiomtricos por satlite y fotografa desde la tierra o desde satlites.
h) Gases traza: estn compuestos por componentes antropognicos, geotrmicos y
biognicos. La medicin de los gases traza se centra principalmente en los
componentes antropognicos para comprender mejor los cambios actuales en el
sistema terrestre. Las mediciones para estudiarlos incluyen las concentraciones
de ozono, CO, otros gases de efecto invernadero y otros componentes
involucrados en reacciones qumicas en la atmsfera.

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 Los niveles de organizacin son niveles de una complejidad que es superior al
subyacente y es inferior al que emerge de l. El fenmeno emergente es impredecible.
Cabe destacar la diferencia entre los niveles organizacionales estructurales, que son
aquellos que se pueden observar en el microscopio ptico en los rdenes de los
micrmetros (ej. mitocondria) y los niveles de organizacin ultraestructurales que son
aquellos componentes observables con microscopio electrnico, en los rdenes de
nanmetros (ej. cresta mitocondrial). El nivel molecular incluye a las molculas que
estn formadas por la asociacin de tomos que interactan entre s mediante enlaces e
interacciones qumicas.

El trmino compartimiento hace referencia a un lugar en el universo, abierto al entorno,

que posee una composicin, una organizacin fsico-qumica distinta al resto, por lo
cual, es distinguible y estas propiedades se mantienen a lo largo del tiempo distinto al
resto. No es necesario un lmite de membrana para establecerlos. Ej. por debajo de la
MP se encuentra la corteza que es una parte diferenciada del citosol que posee
caractersticas diferentes al resto. Los lmites estn definidos por la intensidad de las
interacciones. Por lo tanto, la compartamentarizacin es el proceso por el cual se
obtienen varios compartimientos de modo que disponiendo de un grupo de sistemas de
interacciones moleculares (redes de interacciones moleculares), pueden operar en
simultneo sin interferirse unos con otros y en consecuencia pueden cumplir al mismo
tiempo diferentes funciones, que se integran en un solo proceso.

La estructura de la membrana se distingue por dos monocapas que se diferencian en: la

interna (sistlica) posee enzimas que degradan la cabeza del fosfolpido (clivaje) y
genera 2 mensajes a partir de la recepcin de una seal. En la monocapa externa posee
fosfolpidos acomplejados con azcares (glucolpidos). Todos los componentes de las
monocapas se producen en el citosol.

Partes de la clula

Membrana plasmtica: define la forma de la clula

o Es semipermeable (acta como barrera entre el medio intra y extra
celular).
o Es dinmica (est en constante interaccin, regeneracin, etc.).
o Responde al modelo de mosaico fluido.
o Composicin:
Bicapa lipdica.
Protenas estructurales.
Hidratos de carbono (no en procariotas).
o Funciones:
Transporte pasivo: a favor de gradiente de concentracin (sin gasto
de energa).
Difusin simple: cosas pequeas. Ej. CO2.
Difusin facilitada: cosas ms grandes a travs de protenas
transportadoras y de canal.

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 Transporte activo: los iones se mueven en contra de la gradiente de
concentracin (con gasto de energa). Mediado por protenas
carrier.
Bomba de protones.
Bomba de Calcio (Ca).
Bomba de Sodio y Potasio (Na y K).
Transporte en masa de macromolculas.
Endocitosis (fagocitosis y pinocitosis).
Exositosis.
Ncleo: rodeado por una doble membrana (envoltura nuclear) la cual le contina el R.E
y dentro est el nuclolo (encargado de la formacin de las subunidades del ribosoma).
o Funciones:
Aportar la informacin gentica.
Asegurar la sntesis de protenas.
Citoplasma: contenido de la clula delimitado por la MP y en el cual se encuentran las
organelas. Se pueden distinguir:
o Citosol: solucin rica en protenas, iones y otras molculas.
o Organelas.
o Citoesqueleto: red de filamentos proteicos.
Microfilamentos: mantenimiento de la organizacin citoplasmtica
y permite la movilidad celular y el movimiento intracelular. Hay
microfilamentos de actina y miosina.
Microtbulos: cilindros largos y huecos formados por tubulina.
Forman los cilios, flagelos y centriolos (encargados de la divisin
de cromosomas en el huso mittico).
Filamentos intermedios: proporcionan resistencia mecnica.
Vacuolas y vesculas: en cargadas del almacenamiento y transporte de material dentro y
fuera de la clula.
o Ribosomas: son las organelas ms abundantes.
Sitio donde ocurre la traduccin (acoplamiento de aminocidos en
la sntesis de protenas).
Formado por dos subunidades (una mayor y otra menor).
Retculo endoplasmtico: red de sacos aplanados, tubos y canales interconectados.
Especializado en la sntesis y transporte de lpidos y protenas de membrana.
o RE Liso: secrecin de sustancias lipdicas (cuerpo lteo) y glcidas
(clulas hepticas).
o RE Rugoso: secrecin de sustancias proteicas.
Sistema de membranas (ergatoplasma): sistema de membrana nuclear hasta la
plasmtica (une el ncleo y todas las organelas citoplasmticas). Intervienen el RE,
Aparato de Golgi y lisosomas y peroxisomas.

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 Aparato de Golgi:
o Funcin: sntesis y empaquetamiento de molculas destinadas a ser
segregadas por la clula y el transporte de protenas sintetizadas.
Lisosomas: se forman en el AG y contienen enzimas hidrolticas formando un medio
cido.
o Funcin: digestin intracelular de protenas, polisacridos, cidos
nuclicos y lpidos.
Peroxisomas: se forma en el EG y contienen enzimas oxidativas (catalasa).
o Excrecin de cidos grasos y perxido de hidrgeno.
o Tambin presentes en plantas con funciones especficas.
Mitocondria: central energtica de la clula, producen ATP.
o Funcin: Respiracin celular.
o Posee una doble membrana.
Plstidos: slo en algas y plantas
o Leocuplastos: almacenan almidn, protenas o aceites.
o Cromplastos: contienen pigmentos que dan color.
o Cloroplastos: lugar en donde ocurre la fotosntesis (compuesto por sacos
de membranas aplanados que contienen clorofila dispuesta en pilas y
granas).

Para identificar un tipo celular se utilizan los siguientes criterios:

a) Morfolgico: alude a la estructura de la misma.
b) Funcional: alude a las funciones que cumple.
c) Molecular: alude a la composicin de protenas y sus tipos. Proteoma y transcriptoma.
d) Evolucin: aluda al modo que evoluciona en el tiempo.
e) Integracin funcional: alude a la integracin de todos los conceptos anteriores.

El dominio es el conjunto de diferentes tipos estructuras alternadas por regiones

desestructuradas. Es una regin que se puede identificar dentro de una protena. Los
dominios topolgicamente asociados se definen cuando hay ciertos compartimientos
dentro del ncleo en donde hay protenas que estn relacionados funcionalmente y estn
coreguladas (se expresan en simultneo).

Existen los siguientes tipos de transporte epitelial:

a) Transporte transcelular: se atraviesa todo el epitelio.
b) Transporte paracelular: transporte a travs del espacio entre clulas. Los
epitelios cuando entran en contacto forman una zona denominada zona ocludens,
la cual por diferentes permeabilidades evita el transporte lateral manteniendo la
polaridad apico-basal, formando una de restriccin molecular entre clulas
(regulacin del transporte paracelular). Hay zonas adherentes entre clulas en
donde existe espacio intracelular. Cuando la zona ocludens no deja que se
desarrolle el transporte paracelular se dice que el tejido esta sellado.
c) Endocitosis: es el proceso mediante el cual la sustancia es transportada al
interior de la clula a travs de la membrana. Se conocen tres tipos de
endocitosis:

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 Fagocitosis: la sustancia que es transportada al interior de la clula es un
slido.
Pinocitosis: la sustancia que es transportada al interior de la clula es un
slido pequeo cubierto de una solucin.
Mediado por receptores: estos son especficos de lo que va a ser
incorporado por las clulas hasta llegar a una concentracin que produce
la formacin de una vescula.
d) Exocitosis: es el proceso mediante el cual la sustancia es excretada al exterior de
la clula a travs de la membrana.
e) Transcitosis: transporte mediado por vesculas a travs del epitelio implica una
combinacin entre los procesos de endocitosis y exocitosis. El transporte de
macromolculas permite preservar la polaridad funcional de la clula.

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