PREGUNTAS PRELABORATORIO

1. Qu efecto tiene el calor sobre los microorganismos?

RTA=

El uso de calor tiene efecto mortal y de crecimiento en los microorganismos dependiendo a la

temperatura a la que son sometidos los mismos.

A temperatura corporal 37C se propicia el crecimiento de microorganismos de una manera ptima.

A una temperatura de 121C se logra ESTERILIZAR el medio de estos organismos: hongos , bacterias,
virus y por supuesto Esporas que son resistentes a temperaturas inferiores a la ya mencionada por estar
envuelta en una capsula que repele el calor en ciertos puntos pero que a los 121C logra ser destruida
y eliminar la espora.

Tiempo Trmico Mortal: Es el tiempo mnimo requerido para que mueran todas las bacterias de una
determinada suspensin a una determinada temperatura.

Tiempo De Reduccin Decimal: es el tiempo requerido para reducir al 10% la densidad de la suspensin, a
una determinada temperatura (tambin llamado valor D).

Punto Trmico Mortal: es la temperatura mnima que mata a todas las bacterias en un tiempo determinado
(normalmente el tiempo de referencia empleado es de 10 min).

Ejemplos

punto trmico Especies

mortal
55oC Escherichia coli
60oC Mycobacterium tuberculosis
120oC endosporas de especies muy
resistentes de Bacillus.
Tabla N.2
Microorganismo condiciones
La mayora de clulas vegetativas, 80oC , 5-10 min
de bacterias, levaduras y hongos
Bacilo tuberculoso 58oC , 30 min
Bacilo tuberculoso 59oC , 20 min
Bacilo tuberculoso 65oC , 2 min
Staphylococcus aureus, 60oC , 60 min
Enterococcus faecalis
La mayora de esporas de bacterias 100oC , pocos min
patgenas
esporas del patgeno Clostridium 100oC , 5,5 horas
botulinum
esporas 100oC , muchas
de Clostridium y Bacillus saprofito horas
s
esporas 120oC , 15 minutos
de Clostridium y Bacillus saprofito
s
TABLA N.3
 2. Qu efecto tiene el mtodo de calor seco en la clula (microorganismos)?.
RTA:

El calor seco es un mtodo trmico de esterilizacin y su efecto en los microorganismos es equivalente al

horneado. El calor cambia las protenas microbianas por las reacciones de oxidacin y crea un medio interno
rido, as quema a los microorganismos lentamente. Una simple analoga es la lenta carbonizacin de papel
dentro de un horno caliente, aunque la temperatura permanezca por debajo del punto de ignicin del papel.

3. Qu efecto tiene la luz ultravioleta sobre la clula (microorganismos)?.

RTA:

La radiacin UV tiene un efecto letal y mutagnico, que depende de su longitud de onda. Ello se debe a la
absorcin selectiva de longitudes de onda por parte de ciertas molculas biolgicas:

Las protenas tienen dos picos (es decir, mximos) de absorcin: uno a 280 nm, debido a los aminocidos
aromticos (Trp, Tyr, Phe), y otro a 230 nm, debido a los enlaces peptdicos .

El ADN y el ARN absorben a 260 nm, debido al enlace doble entre las posiciones 4 y 5 de las bases pricas y
pirimidnicas.

Los rayos UV no tienen actividad ionizante, pero provocan cambios qumicos en las molculas absorbentes,
de modo que aparecen molculas alteradas denominadas genricamente fotoproductos. Los fotoproductos
originan la inactivacin de macromolculas, aunque, como veremos enseguida, el ADN dispone de mecanismos
para paliar o eliminar estas modificaciones potencialmente lesivas.

Las consecuencias de inactivar protenas o ARN no se dejan sentir a efectos de letalidad, ya que existen muchas
copias de cada uno de estos tipos de macromolculas, y se pueden volver a sintetizar. En cambio, la inactivacin
del nico cromosoma de la bacteria tiene efectos letales primarios y efectos mutagnicos secundarios. Por lo
tanto, el espectro de accin biolgica de la luz UV equivale al de absorcin del UV por el ADN (260 nm).

radiacin l (longitudes de onda, en nm)

electromagntica
ultravioleta 13,6-380
(UV)
TABLA N.4

4. Defina desinfectante, antisptico, bactericida.

RTA=

DESINFECTANTE: Es un producto que permite eliminar las bacterias, los virus o los microorganismos. La
utilizacin de un desinfectante permite limitar o, incluso, hacer desaparecer completamente, los riesgos de
contaminacin de una enfermedad. En medicina un desinfectante sirve para limpiar o dar asepsia a todo lo que
est en contacto con un paciente como el material mdico, las camas, los suelos, las camillas o los pomos de
las puertas. Entre los desinfectantes ms utilizados encontramos la cal viva, el etanol, el yodo y el cloruro de
sodio.

ANTISEPTICO: Un antisptico es un producto que puede eliminar o prevenir el crecimiento de bacterias o

virus. Los antispticos se utilizan en la superficie del cuerpo, se llama desinfectantes para uso en dispositivos
mdicos u otros. El antisptico puede ser fungicida contra los hongos bactericida contra las bacterias, virucida
contra los virus, esporicidas contra las esporas , pero generalmente se combina todas sus funciones. Los
antispticos se aplican de forma local en la zona afectada. Una antisepsia cerrada particularmente es necesaria
antes de una intervencin quirrgica lo que requiere un protocolo y precauciones particulares para evitar que
un germen penetre en el cuerpo.

BACTERICIDA: Un efecto bactericida es aquel que produce la muerte a una bacteria. Un efecto bactericida
est producido por sustancias bactericidas. Estas sustancias son secretadas por los organismos como medios
defensivos contra las bacterias. antimicrobianos de efecto lsico o ltico (Lisis) en las bacterias, provocan una
reduccin en la poblacin bacteriana en el husped o en el uso de sensibilidad microbiana.

PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

Haga un esquema de la autoclave con sus partes y su funcin.

Figura 28

Figura 29

Figura 30

Asadera (1)
Permite retirar la parte superior del equipo.

Figura 31

Vlvula de control (2)

Vlvula de apertura y cierre de purga que permite controlar la presin dentro del autoclave.
 Figura 32

Tubo de purga (3)

Conducto por donde es liberado vapor.

Figura 33

Contenedor de aluminio (4)

Chasis del autoclave.

Figura 34

Asadera completa ( lado ) (5)

Asadera en la parte lateral para levantar el autoclave.

Figura 35

Tuerca de tapa superior (6)

Dispositivo parte del mecanismo de aseguramiento.

Figura 36

Soporte de contenedor (interno) (7)

Base de aluminio del contenedor.

Figura 37
Grasa sintetica (8)
Permite lubricar la empaquetadura de la puerta.

Figura 38
Tornillo asegurador (9)
Dispositivo parte del meacnismo de aseguramiento.

Figura 39

Fijador del tornillo asegurador (10)

Sujetador que evita el movimiento del tornillo asegurador.

Figura 40

Tapn de sobrepresin (11)

Tapn liberador de presin excesiva.

Figura 41

Manometro de vapor (12)

Indicador de presin dentro de la camara.

Figura 42

Esquematice etapas de esterilizacin en autoclave (en clase).

RTA=

ETAPAS
ESTERILIZACION EN
AUTOCLAVE

PREPARACION

CALENTAMIENTO

ESTERILIZACION

DESVAPORIZACION

SECADO

FINALIZACION DEL
PROCESO
 Fuente: Autores

Mencione los dos tipos principales de esterilizacin y explique cada uno de ellos.
RTA=

MTODOS FSICOS:
Dentro de los fsicos podemos mencionar a los que usan calor y a los que usan radiaciones.

Mtodos con calor:

Calor hmedo: Se utiliza el vapor de agua como agente esterilizante. Este es producidos por un aparato
llamado autoclave. El autoclave es un dispositivo que consta de un tambor cilndrico en cuyo interior se genera
calor gracias a una caldera que contiene agua. El vapor generado asciende y atraviesa una malla metlica porosa
que tiene en su parte superior a los materiales a esterilizar.
Los 2 parmetros importantes a regular son el tiempo y la temperatura. La temperatura que se maneja es de
unos 121 C a 1 atmsfera de presin. A esta temperatura se eliminan todos los microorganismos. Se pueden
variar los tiempos dependiendo de los materiales que se coloquen. Por ejemplo algunos requieren 15 minutos y
otros 45 minutos.
Los materiales se envuelven en papel tratando de hacerlo lo ms hermtico posible. De esta manera el vapor
penetrara ms y actuara mejor en los materiales. El vapor de agua daa el metabolismo del microorganismo y
lo destruye por las altas temperaturas.

Figura 43

Calor seco: En este caso el calor se propaga a travs del aire. No es tan penetrante como en el caso anterior.
Por lo tanto se debe esterilizar a temperaturas mayores a 120C para lograr la misma eficacia. No es
recomendado para esterilizar soluciones que tengan contenido acuoso como algunos productos de farmacia o
alimentos. Pero si se puede esterilizar productos secos o material de metal ya que a diferencia del calor hmedo,
al no haber vapor de agua no hay riesgos de oxidacin. Para este mtodo existen las estufas. Tienen dispositivos
para regular la temperatura y tambin algunos tienen para mantener una conveccin interna de aire para
homogeneizar la transmisin del calor.
Otros mtodos usados con calor son el flameado directo y la ebullicin. En el caso del flameado directo se usa
para esterilizar las ansas de microbiologa. Se calienta el ansa hasta el rojo y luego se coloca la siembra del
cultivo previo enfriado. La ebullicin se usaba antiguamente colocando por ejemplo las jeringas de vidrio en
una olla con agua hervida, es decir a 100C. Sin embargo al no llegar a 121C no asegura la destruccin de
todos los microorganismos.

Esterilizacin por Radiacin:

La radiacin permite esterilizar mediante la transmisin de ondas que generan la destruccin de los
microorganismos. Existen distintos tipos de radiaciones.
Radiacin ionizante: Este tipo de radiacin genera sustancias que son un veneno para el metabolismo
bacteriano. Como los radicales oxhidrilo y radicales perxidos entre otros. Estos radicales atacan a las protenas
y enzimas afectando su estructura de forma inmediata deteriorando definitivamente su metabolismo.

Radiacin ultravioleta: Esta radiacin no es tan penetrante. Afecta en la superficie y ataca principalmente a
las molculas de ADN. Estas molculas tienen mucha absorbancia justamente dentro del rango del UV por eso
son tan sensibles. Es ideal para esterilizar material de quirfano.
Radiacin Gama: La radiacin gamma es muy penetrante a diferencia de la anterior. Es ideal para esterilizar
contenidos enlatados como alimentos o productos de farmacia que estn cerrados. En estos casos el calor los
puede destruir por eso son ms aconsejables este tipo de procedimientos.

Mtodos Mecnicos:

Dentro de los mtodos mecnicos podemos citar a la Filtracin. Existen muchos tipos de filtros en el mercado.
El xito depender del tamao del poro, ya que segn el tamao podrn quedar retenidos los microorganismos
en el filtro. Algunos combinan el proceso de adsorcin junto con el de filtracin para hacerlos ms efectivos.
Son ideales para aquellos productos termosensibles que no resistiran el proceso de calor. Antiguamente
podemos citar un caso del brote del Clera a finales del siglo 19 en Europa. Donde una poblacin fue afectada
seriamente por el agua que llegaba portando a la bacteria. Pero la misma agua que pasaba por otra red en otro
pueblo, paso por un filtro de arena y el organismo patgeno quedo retenido. En este caso casi no hubieron
infectados.

MTODOS QUMICOS:
En este caso existen productos biocidas, es decir, que eliminan a todo microorganismo por envenenamiento de
un producto qumico con o sin intervencin del calor.
Algunos muy usados son el Glutaraldehdo, los aldehdos, la formalina, la lavandina al 10%, etc. En el caso del
glutaraldehdo no hay necesidad de aplicar calor sino que se puede hacer en fro sumergiendo los materiales en
una solucin al 2% y dejarla actuar un buen tiempo.
Los mtodos qumicos son efectivos para la desinfeccin de manos y el lavado de mesadas por ejemplo ya que
son casos en los que obviamente no se podra esterilizar por otros mtodos. No son aplicables para alimentos
ya que seran envenenados.
Podemos concluir que no existe un mtodo ideal para todo. Pero depender de lo que queramos esterilizar.