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All content following this page was uploaded by Bianka Mnica Gonzlez Durn on 06 August 2015.
Bianka Mnica Gonzlez Durn (1), Hctor Gordon Nez Palenius (2).
1 [Ingeniera en Biotecnologa, Tecnolgico de Monterrey Campus Quertaro] | Direccin de correo electrnico:
[A01201915@ITESM.mx]
2 [Ex Hacienda El Copal, Divisin Ciencias de la Vida, Campus Irapuato- Salamanca, Universidad de Guanajuato] | Direccin de
correo electrnico: [palenius@ugto.mx]
Resumen
El agave es una de las plantas ms representativas de Mxico. De las 200 especies que existen aproximadamente,
150 se encuentran en nuestro pas. Debido al lento crecimiento de estas plantas y su baja tasa de reproduccin sexual
y asexual es difcil multiplicarla de forma masiva a travs de mtodos convencionales. El Agave durangensis Gentry es
una especie endmica de nuestro pas, es usado principalmente para la produccin de pulque y mezcal de manera
artesanal, razn por la cual las poblaciones silvestres se estn viendo amenazadas debido a la sobreexplotacin para
fines comerciales. Una alternativa para su reproduccin masiva es el uso de cultivo de tejidos vegetales in vitro. En el
presente trabajo se desarroll el establecimiento de Agave durangensis Gentry en un Sistema de Inmersin Temporal,
en diferentes medios lquidos adicionados con reguladores de crecimiento vegetal en distintas concentraciones, IBA y
Cinetina. Se efectuaron 16 tratamientos por triplicado con el objetivo de determinar las concentraciones de IBA y
Cinetina que ms brotes de novo generaran al cabo de cuatro semanas de inmersin. El mejor tratamiento para la
generacin de brotes fue el tratamiento T6 con 0.3 mg/L de IBA y 3 mg/L de Cinetina.
Abstract
The Agave is one of the most representative plants in Mxico. One hundred fifty Agave species, out of 200, exist in
our country. Due to its slow growth and low rate of sexual and asexual reproduction, it is difficult its multiplication in
massive ways through conventional methods. The Agave durangensis Gentry is an endemic plant species from our
country, and it is mostly used as raw material for the production of mescal and pulque in a crafty way, this is the reason
why the wild populations are being extinction-threatened because the commercial overexploitation. One alternative to
the massive reproduction is the use of plant tissue culture in vitro. In this project the establishment of Agave durangensis
Gentry in a Temporary Immersion System was achieved, the experiments included different liquid media with a variety
of plant growth regulator concentrations, IBA and Kinetin. Sixteen treatments were made, in triplicate, with the objective
Palabras Clave Agave durangensis Gentry; Sistema de Inmersin Temporal (SIT); IBA (cido Indol-3-butrico);
Cinetina; in vitro.
1
Micropropagacin in vitro, en diferentes medios
INTRODUCCIN lquidos (Murashige and Skoog, 1962) adicionados
con reguladores de crecimiento vegetal en distintas
El agave es una de las plantas ms concentraciones (cido indol-3-butrico y Cinetina).
representativas de Mxico. La palabra agave Este estudio se efectu con el objetivo de
proviene del griego y significa noble o determinar la concentracin de reguladores de
admirable, dicho nombre fue conferido por el crecimiento vegetal IBA y Cinetina que origine ms
naturista Carlos Linneo. Esta planta tiene diversos brotes de novo en el Agave durangensis Gentry en
usos, mismos que van desde alimento hasta la un Sistema de Inmersin Temporal (SIT) a travs
fabricacin de papel [1]. De las 200 especies que de un anlisis estadstico ANOVA. Al cabo de un
existen aproximadamente, 150 se encuentran en mes del establecimiento se evalu cul de los
nuestro pas, lo que representa el 75%, ms 36 que tratamientos fue el que origin mayor nmero de
pertenecen a categoras infraespecficas, con lo brotes de novo en los explantes de Agave
cual resultan ser un total de 186 taxones. La durangensis Gentry pertenecientes a la Coleccin
distribucin geogrfica de este gnero abarca Nacional de Agaves UG-SAGARPA, accesin # 52
desde el sur de los Estados Unidos de Amrica y se determin la resolucin a la hiptesis planteada
hasta Colombia y Venezuela [2]. Debido al lento para este estudio.
crecimiento de estas plantas, as como de su baja
tasa de reproduccin sexual y asexual es difcil su
multiplicacin de forma masiva por medio de MATERIALES Y MTODOS
mtodos convencionales.
El Agave durangensis Gentry, tambin
conocido como Agave cenizo es una especie
Sistema de Inmersin Temporal (SIT)
endmica de nuestro pas que crece de forma
silvestre en colonias dispersas en suelos rocosos, Se emplearon 48 frascos de vidrio, de jugo
matorrales y pastizales [3]. Esta especie crece del Valle, de 413 ml para el establecimiento del
principalmente en los estados de Durango y Sistema de Inmersin Temporal, en el interior de
Zacatecas, en una regin pequea de la Sierra cada frasco se coloc una malla de polietileno de
Madre Occidental, sin embargo, tambin ha sido 16 cm2 de superficie, de forma cuadrada, a una
encontrada en otros estados como Chihuahua, altura de 3 cm del fondo de la botella. Para el
Distrito Federal y Sinaloa [4]. Los usos principales sellado de las botellas se utilizaron tapones de
que se le dan a este maguey son la produccin de goma con un orificio en la parte central por donde
2
mg/ml de IBA y Cinetina respectivamente. El pH por estriles y sellados con cinta plstica adherible
tratamiento fue ajustado a 5.7-5.8. (IMAGEN 1). Finalmente los 48 frascos, con los 16
tratamientos por triplicado se colocaron dentro de la
Se depositaron 35 ml de medio por frasco y cmara de crecimiento con un fotoperiodo de 16
despus el medio junto con los frascos y tapones horas luz y 8 horas de oscuridad. Cada 24 horas se
preparados fueron esterilizados durante 20 minutos les dio inmersin a todos los frascos durante 1
a 121 C o 20 PSI. minuto y cada semana se realizaron mediciones de
los 6 parmetros a evaluar: altura de la planta,
anchura del dosel, nmero de puntas, nmero de
Establecimiento de explantes de Agave races, brotes y puntas necrosadas.
durangensis Gentry en un SIT
Tabla 1: Diseo experimental
Los explantes de Agave durangensis
Gentry se obtuvieron de la Coleccin Nacional de
IBA 0.5 0.3 0.1 0.001
Agaves UG-SAGARPA, accesin #52. Dado que la
coleccin cuenta con cultivos in vitro el Cinetina mg/L mg/L mg/L mg/L
procedimiento que se sigui fue sacar los explantes 5 mg/L T1 T2 T3 T4
del medio MS slido al 50% en condiciones
3 mg/L T5 T6 T7 T8
estriles dentro de la campana de flujo laminar, ah
se efectuaron los cortes necesarios para obtener 48 1 mg/L T9 T10 T11 T12
explantes saludables y vigorosos, cada uno con 2 o 0.1 mg/L T13 T14 T15 T16
3 puntas, totalmente limpios y sin races. En
seguida se colocaron en frascos con medio MS
nuevo y se guardaron en la cmara de crecimiento RESULTADOS Y DISCUSIN
por un da.
En la Tabla 2 se muestran los resultados
El establecimiento de los explantes en el
obtenidos para cada tratamiento a partir de realizar
biorreactor de Inmersin Temporal se llev a cabo una comparacin de medias (Prueba Tukey) con
dentro de la campana de flujo laminar, se coloc un una significancia del 95%. Se puede apreciar que
explante por frasco con medio. Posteriormente los para la altura de la planta ningn tratamiento
frascos fueron cerrados con los tapones de goma contribuy representativamente, sin embargo para
la anchura del dosel el tratamiento T14 fue el ms
3
Tabla 2: Prueba Tukey para Altura de la Planta, Anchura de Dosel, No. De Puntas, No. De Races, No. De Brotes generados y No. De puntas necrosadas.
Donde las medias que no comparten una misma letra son significativamente diferentes.
4
tratamiento el de las concentraciones 0.3 mg/L de Finalmente la hiptesis planteada se
IBA con 0.1 mg/L de Cinetina. acepta ya que el cido ndol-3-butrico y la Cinetina
s pueden generar brotes de novo en el Agave
A pesar de que en la comparacin de
durangensis Gentry en un Sistema de Inmersin
medias no se observa un tratamiento sobresaliente
Temporal, puesto que nicamente tres
en especfico, cabe mencionar que esta prueba
tratamientos (T12, T13 y T15) fueron los que no
pierde significancia cuando es utilizada para
generaron brotes de los 16 que se llevaron a cabo
evaluar ms de 6 muestras, en este caso se
en el lapso de cuatro semanas de inmersin.
compararon 16 tratamientos. A diferencia de esto, a
travs del anlisis de las interacciones
multifactoriales de los reguladores vegetales, s se
pudo determinar un tratamiento como el mejor para
AGRADECIMIENTOS
la generacin de brotes, dicho tratamiento es el que
Quiero dar un especial agradecimiento al
contiene las concentraciones 0.3 mg/L de IBA con
Dr. Hctor Gordon Nez Palenius quien fue mi
3 mg/L de Cinetina, con una media de 4.333.
asesor durante este trabajo por la atencin brindada
El anlisis ANOVA llevado a cabo para este para mi persona y el proyecto, por la calidad de
diseo experimental no fue un diseo robusto para persona que es y por ofrecer su completo apoyo
todos los parmetros, ya que algunas muestras no para que este proyecto finalizara de la mejor
cumplan con la distribucin normal dentro de sus manera posible. Tambin le quiero agradecer a la
respectivos grupos y tratamientos por lo que se Universidad de Guanajuato Campus Irapuato-
recomienda para futuros diseos hacer un Check Salamanca por ofrecerme la oportunidad de realizar
adequacy para aumentar as el nivel de confianza una estancia de investigacin cientfica en este
del ANOVA, adems de probar un rango ms verano 2015.
grande de concentraciones tanto para Cinetina e
Por ltimo a mis compaeras de laboratorio
IBA dentro de un cultivo in vitro con medio slido y
Ruth Medina Guzmn y Mara del Carmen Durn
lquido en un SIT al mismo tiempo que se efectu
Cuj agradezco su apoyo y ayuda durante todo el
un control de Agave durangensis Gentry con
proyecto, indudablemente son compaeras
proporciones de puntas, anchura de dosel y altura
ejemplares.
de la planta con poca desviacin estndar.
CONCLUSIONES REFERENCIAS
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