ANEXO 08

ESCALA DE SNTOMAS EXTERNOS CAUSADOS POR M. roreri EN FRUTOS DE RBOLES de Theobroma

Snchez et al., (1987).

ANEXO 09
ESCALA DE SNTOMAS INTERNOS CAUSADOS POR M. roreri EN FRUTOS DE RBOLES de Theobroma Snchez
et al., (1987).

LA CLAVE PARA QUE NO SE CONTAMINE EL MEDIO: AEM+jugo v8 adicionar el antibitico: Cloranfenicol al 0.15 g, lo mezclo en 5 ml de alcohol
bien y luego lo adiciono al 1litro del medio que voy autoclavar, es importante que calibrar el pH del medio a : 5.0 a 5.5 segn lo que observes en
el hongo le sube o le bajas no mucho hasta 4.9 menos no.
 PREPARACIN MEDIO DE CULTIVO PARA ESPORULACION Y CRECIMIENTO AGAR EXTRACTO DE MALTA + V8, Arbelez (2005)

#1 Para 1 litro: (Est fue el mejor donde creci M. roreri ).

1. Realizar los clculos necesarios utilizando las ecuaciones de concentracin para hacer las conversiones para la elaboracin del medio de cultivo as tendremos:

163mL de jugo V8
815mL de agua destilada
34.4 g de Agar Extracto de Malta AEM

2. Depositar el contenido de una lata de jugo V8 (163 mL), en un beaker de 1000mL.

3. Agregar 815 ml de agua destilada.

4. Pesar en la balanza el agar extracto de malta.

5. 5. Poner a calentar el agua con el jugo V8 e ir agregando los productos antes mencionados.

6. Transferir medios a fiolas de 500 mL y autoclavar servir y dejar solidificar

#2 PREPARACIN MEDIO DE CULTIVO PARA ESPORULACION Y CRECIMIENTO AGAR EXTRACTO DE MALTA

Para 1 Litro (Est fue el segundo medio donde creci pero no fue tan efectivo como el primero anterior)

1. Calentar 1000 mL de agua destilada en un beaker

2. Pesar 35.5 gramos de agar extracto de malta en la balanza analitica.

3. Depositar el agar en el agua caliente y revolver constantemente hasta hervir.

4. Depositar el medio en dos beaker de 500 mL y llevar a la autoclave por 15 minutos a 121 C (1 atm).

5. Servir cajas de Petri y tubos de ensayo.

6. Dejar solidificar y guardar en el refrigerador.

 PREPARACIN MEDIO DE CULTIVO PARA ESPORULACION Y CRECIMIENTO V8MAA (20% v/v jugo V8 + 0.1% P/V asparagina 2% P/V maltosa+ 1.8% P/V agar)
(Phillips-Mora et al., 2005)

#3 Para 1 litro: (este creci muy poco el hongo no espurolo mucho sus micelios pero crece).

1. Realizar los clculos necesarios utilizando las ecuaciones de concentracin para hacer las conversiones para la elaboracin del medio de cultivo as tendremos:

163mL de jugo V8

815mL de agua destilada

0.97g de asparagina

19.5g de maltosa

17.6g de agra-agar

2. Depositar el contenido de una lata de jugo V8 (163 mL), en un beaker de 1000mL.

3. Agregar 815 ml de agua destilada.

4. Pesar en la balanza analtica:

0.97 gramos de asparagina

19.5 gramos de maltosa

17.6 gramos de agar- agar

5. Poner a calentar el agua con el jugo V8 e ir agregando los productos antes mencionados.

6. Revolver hasta que el agar se diluya.

7. Transferir el medio a dos fiolas de 500 mL y llevar a autoclave por 15 minutos a 121C (1 atm).

8. Servir en cajas de Petri o tubos de ensayo.

9. Dejar solidificar y guardad en refrigerador