AO DE LA CONSOLIDACIN DEL MAR DE GRAU

INFORME N 2016/UNT-FCCAA-PGCU

PARA : Ing. Pedro Gerardo Calle Ulfe

Docente De Prcticas Del Curso De Fitopatologa General

DE :

ASUNTO : HONGOS FITOPATOGENOS

FECHA : Tumbes,
..

Me dirijo a usted, para saludarlo e informarle lo realizado en la prctica N .

De la asignatura de Fitopatologa general.

TEMA : Mtodos microscpicos para la observacin de los hongos Fitopatgenos y sus

estructuras.

OBJETIVOS :

Aprender a realizar mtodos para efectuar una correcta observacin de hongos

fitopatogenos, ya que es un pilar importante a la hora de hacer un diagnstico.
Observar las estructuras ms distintivas que poseen algunos hongos fitopatogenos como
son: estructuras reproductivas, E. vegetativas y E. de conservacin etc.

MATERIALES : Los materiales utilizados en la prctica de laboratorio son:

Muestras de tejido vegetal afectado por hongos.

Bistur
Cubre y portaobjetos
Microscopio
Cinta adhesiva
Agua
Aguja tuberculina
lactofenol

PROCEDIMIENTO:

En primer lugar, se selecciona las muestras de tejido vegetal afectado por hongos, estas pueden
ser hojas, frutos, tallos, etc.

Dentro de los mtodos microscpicos para la observacin de hongos estn los siguientes:
a) Mtodo del Raspado: Utilizar este mtodo es a adecuado cuando se trata de un hongo
ectoparsito como por ejemplo la Fumagina u Odium causantes de manchas foliares.

Para el desarrollo de este mtodo se utiliz una aguja tuberculina con la cual se realiz un ligero
raspado en el rea afectada por fumagina en un fruto de papaya, pero antes de realizar este
proceso se coloc una gota de lactofenol sobre un portaobjetos, entonces la muestra obtenida
durante el raspado se distribuy cuidadosa y uniformemente sobre la lmina con lactofenol.

Figura 01. Dispersin del raspado sobre la lmina portaobjeto.

Luego se procedi a colocar la lmina cubreobjetos, tratando que no queden burbujas de aire
para que no dificulte la observacin en el microscopio.

Ya puesta la lmina cubreobjeto procedimos a llevar al microscopio para realizar la observacin

de la muestra con los aumentos de 4x, 10x y 40x.

b) M. cortes Histolgicos: conviene utilizar este mtodo cuando el hogo Fitopatgeno tiene
habito de endoparsito que causan los marchitamientos y necrosis en plantas como por
ejemplo cercosporas o cuando se traten de ectoparsito que causan manchas foliares como
Odium.

En este mtodo se utiliz una porcin de hoja de banano afectada por cercosporiosis (Sigatoka
sp.) y se realiz un corte longitudinal y simtrico del rea afecta obteniendo dos muestras con
el mismo nivel y rea afectada.

Figura 02. Corte longitudinal de la muestra

Lo que se realiz a continuacin se hizo con mucho cuidado pues consisti en realizar cortes
trasversales muy finos a una de las muestras como consecuencia se obtuvieron muestras a
manera de tiras muy finas.
 Figura 03. Corte transversal de la muestra

Ya realizado el corte histolgico de la hoja se procede a colocar sobre la lmina porta objeto con
una gota de lactofenol y luego se coloca la laminilla cubre objeto para poder as llevar al
microscopio para su observacin.

Figura 04. Muestras a manera de tiras sobre la lmina portaobjetos.

Colocamos la muestra en el microscopio y observamos a 4X, 10X y 40X de aumento.

c) M. de macerado: Generalmente se utiliza este mtodo cuando se trata de observar hongos

fitopatogenos endoparsitos causantes de pudriciones o manchas foliares.

Para el mtodo de macerado de hojas se cortaron trozos pequeos de hojas con hongos, luego
esos trozos de hojas se colocaron sobre una lmina portaobjetos. Ya los trozos de hojas en la
lmina portaobjeto se coloc una gota de lactofenol y se procedi a machacar cuidadosamente
con una varilla de vidrio.

Luego eliminamos los residuos de la hoja para que solo queden los hongos disueltos en el
lactofenol.

Procedemos a colocar la laminilla cubre objeto para su observacin en el microscopio.

Figura 05. Colocacin correcta del cubre objetos sobre la lmina portaobjetos.
 d) M. de la cinta adhesiva: este mtodo sencillo se utiliza para hongos ectoparsitos causante
de manchas foliares.

La realizacin de este mtodo consisti en pegar una cinta adhesiva encima de la muestra de la
hoja que presenta el hongo, luego con mucho cuidado retiramos la cinta adhesiva de la hoja.

Figura 06. Pegado de la cinta adhesiva sobre el rea afectada de la porcin de

la hoja.

Una vez retirada la cinta adhesiva de la hoja se procedi a pegarla sobre la lmina portaobjetos.

Despus colocamos una gota de lactofenol encima de cinta adhesiva colocamos la laminilla
cubre objeto con cuidado a que no queden burbujas de aire que dificulten la observacin.

Una vez la muestra preparada la colocamos en el microscopio y observamos a 4X, 10X, 40X.

RESULTADOS: A continuacin, se detallan los resultados de las observaciones realizadas en cada

uno de los mtodos descritos en el procedimiento.
 a) Mtodo del Raspado:

Figura 07. Observacin realizada en microscopio ptico a 40x de aumento

En esta muestra se puede observar estructuras con forma ovoide individualizadas, en otras
observaciones se pudieron observar estas mismas estructuras muy aglomeradas formando
pequeas masas y en otros casos se pudo observar que estaban unidad una tras otra a manera de
cadenas, estas estructuras son los conidios del hongo fumagina. Tras una observacin ms
minuciosa se pudo observar que algunas posean septos.
 b) M. cortes Histolgicos:

Haz
rea necrtica

Envs

Figura 08. Observacin realizada en microscopio Figura 09. Observacin realizada en microscopio
ptico a 4x de aumento ptico a 10x de aumento

Figura 10. Observacin realizada en microscopio

ptico a 40x de aumento

Como consecuencia de los finos cortes a maneras de tiras se pudo observar tanto el haz como el
envs de la hoja en el rea afectada, Figura 08. Adems, se pudo observar muy claramente los
conidiforos conteniendo las conidias, en el haz y en el envs, Figura 09.
 c) M. de macerado:

Figura 11. Observacin realizada en microscopio Figura 12. Observacin realizada en microscopio
ptico a 10x de aumento ptico a 40x de aumento

En la observacin de esta muestra se pudieron distinguir diversas formas de ellas podemos

diferenciar hifas sealizadas con flecha verde en la Figura 11. Y conidios de diferentes formas como
las observadas en la Figura 12.
 d) M. de la cinta adhesiva:

Figura 13. Observacin realizada en microscopio ptico a 4x de

aumento

Se pudo observar esporas en forma de cadenas

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:

Como resultado dela la prctica de lograron identificas la estructuras vegetativas y

reproductivas de algunos hongos fitopatogenos.
Se logr aprender las distintas preparaciones microscpicas para la observacin de
hongo.

CUESTIONARIO :

BIBLIOGRAFA CONSULTADA:
 http://virtual.uptc.edu.co/ova/fito/archivo/guia7.pdf

http://es.slideshare.net/SalvadorDelaCruz1/manual-de-micologa-agricola

http://www.pv.fagro.edu.uy/fitopato/cursos/fitopato/practicas/hongos.html