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La biofotnica
y tu salud
La biofotnica es la ciencia encargada del uso de la luz en aplicacio-
nes biolgicas y mdicas para estudiar procesos orgnicos de manera
no invasiva con el fin de conocer cmo stos son afectados por la
luz; as como para el diagnstico y tratamiento de ciertas enferme-
dades. Presentamos una breve introduccin a la biofotnica centrn-
donos en tres aplicaciones que estamos desarrollando en el INAOE :
E
l Sol ha influenciado la evolucin de la vida
en la Tierra, y no es sorpresa que los animales
y las plantas hayan desarrollado una variedad
de respuestas fisiolgicas a la radiacin solar.
La luz enfocada por el ojo humano en la retina activa
seales elctricas en los conos y bastones que el ce-
rebro interpreta como imgenes, para disfrutar as de las
bellezas del universo. Al incidir en nuestra piel, la luz
inicia reacciones qumicas que permiten la sntesis de la vita-
mina D, importante para la asimilacin del calcio en los huesos.
La humanidad ha tomado conciencia de los efectos benignos de la luz desde
hace ms de tres milenios; ya los antiguos egipcios, chinos e indios la utilizaban
para tratar diferentes enfermedades, como psoriasis, raquitismo y vitligo. Ms re-
cientemente, se ha utilizado la luz como un tratamiento estndar para ictericia
neonatal (alta bilirrubina); hoy la terapia fotodinmica sirve para tratar diferentes
condiciones mdicas, como cncer de piel, pulmn, cerebro o esfago, entre otros.
El uso de los fotones en el estudio de procesos biolgicos y mdicos se conoce
como biofotnica, la cual ha logrado un tremendo impacto en la comprensin de
los fenmenos moleculares para tener un mejor entendimiento y tratamiento
de diversas enfermedades.
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En particular, una tcnica biofotnica conocida como fototerapia de baja po-
tencia (LLLT, por sus siglas en ingls) ha crecido de manera impresionante en los
ltimos aos. LLLT se ha utilizado para estudiar la activacin celular, reduccin de
dolor, tratamiento de herpes, inflamacin, promocin de cicatrizacin de tejidos
y nervios, y rejuvenecimiento de la piel, entre otros. Sin embargo, a pesar de
muchos resultados positivos in vitro, el uso de LLLT en modelos animales y ensayos
clnicos controlados es controversial, principalmente por dos razones: 1) an no se
entienden completamente los mecanismos bioqumicos subyacentes de los efectos
positivos; y 2) existe una gran variedad de parmetros de iluminacin que pueden
influir crticamente, como longitud de onda de la luz, densidad de energa, razn
de flujo de energa, estructura del pulso de luz y razn de repeticin de la dosis.
Todo esto ha dado lugar a un gran nmero de resultados contradictorios (positivos
y negativos). Pero a pesar de todo, esta tcnica sigue extendiendo sus horizontes
y eventualmente los obstculos que limitan su imple- para biomolculas, y 3) medicin del flujo sanguneo
mentacin sern eliminados. con moteado lser. La seleccin de estas aplicaciones
Hacer una revisin completa de la biofotnica, in- est basada en nuestra experiencia e inters por desa-
cluso de LLLT, es imposible en un espacio tan corto, por rrollarlas en Mxico y por su potencial impacto en la
lo que slo nos concentraremos en tres aplicaciones salud de la poblacin.
biofotnicas: 1) terapia fotodinmica, 2) pinzas pticas
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La biofotnica y tu salud
Ventana
105 ptica
Colgeno
T er api a fotodi nmi ca
Protenas
104 Melanina La terapia fotodinmica (PDT) fue descubierta ac-
103
cidentalmente hace ms de 100 aos cuando Oskar
Raab y su asesor de doctorado, Hermann von Tappei-
102 Grasa
ner, de la Universidad de Munich, encontraron que
101 HHb paramecios (microorganismos acuticos) teidos con
O 2HB
100 Agua acridina naranja (ahora usada como marcador fluores-
Agua cente de ADN) murieron cuando fueron colocados en
100 200 400 600 1000 2000 3000 10000
una zona muy iluminada. Posteriormente, encontraron
Longitud de onda, (nm)
que la acridina naranja se vuelve txica bajo ilumina-
Nobel de Medicina en 1903. La PDT fue redescubierta geno molecular O2 es el triplete, y cuando reacciona
en la dcada de 1970 por varios investigadores esta- con el PS en su estado triplete pasa al estado single-
dounidenses que usaron derivados de hematoporfirina te (1O2), el cual es altamente reactivo. Otros agentes
combinada con luz roja para tratar cncer de vejiga en reactivos pueden ser producidos, como iones superpe-
animales y humanos. A partir de entonces, la PDT rxidos, hidrxido y perxidos de hidrgeno (O2, OH
se ha consolidado como una terapia para la destruc- y H2O2). El efecto antitumoral de los agentes reactivos
cin selectiva de clulas malignas sin los terribles de oxgeno deriva en tres mecanismos: el efecto cito-
efectos secundarios de la quimioterapia. txico directo sobre las clulas tumorales, dao en los
La PDT involucra la administracin local o intra- vasos sanguneos que irrigan al tumor y la induccin
venosa de un agente fotosensitizador (PS) no txico, de una fuerte reaccin inflamatoria con la respectiva
el cual se absorbe por las clulas en contacto o se dis- respuesta inmunitaria. Los puntos decisivos para una
tribuye por el torrente sanguneo a todo el cuerpo. En PDT exitosa son: una apropiada oxigenacin, buena
las clulas cancergenas no se desecha tan rpido como distribucin del PS y suficiente penetracin de la luz.
en las clulas sanas debido a una diferenciacin meta- La PDT puede ser empleada en la eliminacin de
blica. El exceso de PS es filtrado por el rin y des- microorganismos como bacterias, especficamente en
echado a travs de la orina. Despus de un par de das, aplicaciones dentales y otros problemas de la cavidad
se ilumina la zona afectada (con mayor concentracin oral. En el caso de hongos, se ha tratado Candida albi-
del PS) con luz cuya longitud de onda corresponde cans, el hongo ms comn responsable de infecciones
a una banda de absorcin del PS (vase la Figura 2). oportunistas, as como con dermatofitos, causantes de
Bajo iluminacin, el PS es excitado al primer estado infecciones en la piel. La PDT ha sido aceptada por la
de excitacin. De ah puede regresar al estado base Administracin de Medicamentos y Alimentos (FDA)
mediante la emisin de un fotn (fluorescencia) o es de Estados Unidos para su uso en cncer de piel, endo-
posible que el electrn sea transferido no radiactiva- bronquial, estmago, vejiga, mamas y lesiones en cavi-
mente al estado triplete de la molcula. En el estado dad bucal, entre otros.
triplete, la molcula puede regresar al estado base me- Las ventajas de la PDT sobre tratamientos estndar
diante la emisin de un fotn de menor energa que contra el cncer son mltiples: mnimos efectos secun-
el incidente (fosforescencia) o puede interactuar con darios para los pacientes, como hipersensibilidad a la
molculas del medio ambiente y producir agentes reac- luz, dolores de cabeza temporales o hinchazn, que des-
tivos de oxgeno. Por ejemplo, el estado base del ox- aparecen al cabo de unos das. En Mxico ha habido
intentos aislados de estudiar la PDT, pero sin mucho
xito hasta el momento. Una razn que podra explicar
este aparente fracaso es su multidisciplinariedad, que
Estado singlete
Relajacin involucra la participacin de qumicos, fsicos y mdi-
no radiactiva cos. Difundir e implementar la PDT en hospitales me-
1 estado excitado
er
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La biofotnica y tu salud
gradientes y al mismo tiempo empujadas fuera de esta con la adhesin de partculas coloidales a la membrana
zona por presin de radiacin. Para un confinamiento y enfocando el lser a estas partculas, o bien, directa-
tridimensional, la fuerza gradiente debe ser mayor a la mente con el lser sobre la clula. La deformacin de
fuerza de presin de radiacin, lo cual se logra usan- un solo glbulo rojo permite determinar si la clula est
do objetivos de microscopio de alta apertura numrica infectada a travs de la dinmica viscoelstica de su
(por ejemplo, un 100x). Una descripcin bsica de los estructura, as como detalles del proceso de parasita-
principios fsicos de operacin de las pinzas pticas se cin. La deteccin toma slo unos minutos, con alta
puede encontrar en las lecturas adicionales. sensibilidad y especificidad. Esta tcnica puede exten-
La habilidad de confinar objetos biolgicos sin derse a la identificacin y caracterizacin de glbulos
daarlos y adems manipularlos para estudiarlos en blancos y clulas cancergenas de diferentes tipos, con
combinacin con otras tcnicas microscpicas, como lo que se espera mejorar las tcnicas de deteccin,
fluorescencia, confocal o Raman, se convierte en una diagnstico de enfermedades como cncer y aqullas
herramienta muy poderosa en el entendimiento de provocadas por virus, para as repercutir en el trata-
los procesos moleculares y celulares. Las pinzas pticas miento y la calidad de vida de los pacientes.
permiten medir y ejercer fuerzas menores que las obte-
nidas con un microscopio de fuerza atmica, as como
producir microdeformaciones de manera no invasiva. Moteado l ser
Las pinzas pticas se han usado en el estudio de la La sangre es un fluido altamente especializado
dinmica molecular (tanto lineares como rotatorias), que transporta los nutrientes y el oxgeno que nuestro
motores moleculares como el sistema actina-miosina, cuerpo necesita para mantenerse sano, y por lo tan-
el estudio de flagelos de bacterias, entre una gran varie- to es indispensable que el suministro de sangre sea
dad de aplicaciones. Se ha podido observar cmo una el adecuado para el correcto funcionamiento de todos
molcula de ARN polimerasa se mueve a travs de un los rganos del cuerpo. Es bien sabido que diferentes en-
templete de ADN complementario de ARN. Asimismo, fermedades, como insuficiencia cardiaca, arterosclero-
se han utilizado en el estudio de protenas de mem- sis, cardiopatas congnitas y angiopatas, entre otras,
branas, incluyendo la adhesin celular de protenas,
como los receptores lambda en Escherichia coli y recep-
tores de transferinas. Se ha confirmado, adems, que
la manipulacin con pinzas pticas de clulas neuro-
nales estimula la secrecin de factores de crecimiento
neuronales, lo cual abre la posibilidad, por ejemplo, de
conexiones neuronales y, con ello, posibles curas a ce-
guera, parlisis y muchas enfermedades degenerativas
del cerebro.
Un problema de salud que afecta a la poblacin
del sur de Mxico es la malaria o paludismo. ste se
transmite por la picadura del mosquito hembra del g-
neroAnopheles. La deteccin del paludismo implica la
tincin, deteccin proteica o tcnicas moleculares, las
cuales pueden ser lentas, de baja sensibilidad o caras.
Los sistemas de pinzas pticas de trampa doble se han
empleado recientemente en la deformacin controlada
de clulas para el estudio de las propiedades viscoels-
ticas de las membranas. En particular, se han utilizado
para estudiar la deformacin de glbulos rojos, ya sea
pueden causar un suministro irregular de la sangre a objeto no se mueve, entonces un patrn de moteado
los rganos; por ello, la medicin del flujo sanguneo esttico es obtenido; pero si el objeto o las partculas
proporciona informacin esencial para el diagnstico dentro de l se mueven, como las clulas de la sangre
de dichos padecimientos. Dado que los cambios en el que estn circulando en los vasos sanguneos, entonces
flujo sanguneo se pueden presentar en etapas iniciales el patrn de motas se mueve y ahora se obtendr un
de la enfermedad, una tcnica al servicio de los m- patrn de moteado dinmico. Al tomar una fotografa
dicos para medicin de flujo sanguneo de manera no del patrn de moteado, las zonas dinmicas del objeto
invasiva, rpida y fiable, podra proveerles de nuevas se vern difuminadas, pero no en las zonas estticas.
opciones para un diagnstico temprano. La medicin Entre mayor sea la velocidad del objeto, mayor ser
del flujo sanguneo no es una tarea sencilla, ya que la el difuminado. En el lenguaje ptico, hacer la medi-
luz no penetra mucho dentro de los tejidos debido al cin del difuminado significa medir el contraste local
fuerte efecto de esparcimiento y absorcin, por lo que de la imagen de moteado. Esta tarea es llevada a cabo
la medicin del flujo sanguneo es posible slo en vasos mediante procesamiento de imgenes. A partir de la
sanguneos relativamente superficiales, como en reti- imagen de contraste, es posible obtener una imagen de
na, piel o cerebro. ndice de perfusin, el cual es una medida de la veloci-
Las tcnicas de medicin de flujo sanguneo han dad del flujo sanguneo. En la Figura 3 se observa una
evolucionado a lo largo de los aos y se han fundamen- imagen de vasos sanguneos en el dorso de un roedor y
tado en diferentes principios fsicos. Algunas de estas su correspondiente imagen de flujo sanguneo, indica-
tcnicas son: ultrasonido Doppler, resonancia magn- do en mapas de colores. Las zonas rojas indican mayor
tica, tomografa por emisin de positrones, lser Do- velocidad de flujo sanguneo; mientras que el azul os-
ppler y moteado lser. Esta ltima es una de las lneas curo indica zonas de baja velocidad.
de investigacin que hemos desarrollado en los ltimos Esta tcnica de medicin de flujo sanguneo se
aos en nuestro grupo de trabajo. ha empleado en diferentes reas de la medicina; por
El moteado lser consiste en lo siguiente: un ob- ejemplo, se ha utilizado para monitorear el ritmo car-
jeto esparcidor de luz, como el vidrio esmerilado o diaco en humanos, estimar la profundidad del dao
el tejido biolgico, es iluminado por luz lser. La luz ocasionado por una quemadura, determinar el mapa
esparcida es colectada por un sistema ptico sobre un de flujo sanguneo en retina, medir la efectividad de
detector de luz, por ejemplo, una cmara fotogrfica. la PDT en cncer y en cerebro, por mencionar algunas
La luz colectada formar un patrn de interferencia aplicaciones.
sobre la imagen del objeto consistente de motas bri- A pesar de la popularidad que ha adquirido la in-
llantes y oscuras, llamado patrn de moteado. Si el terferometra de moteado (LSI, Laser Speckle Imaging)
Figura 3. a) Imagen en blanco y negro de una red de vasos sanguneos en la subdermis de un roedor;
b) mapa de flujo sanguneo correspondiente, obtenido con la tcnica de moteado lser.
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La biofotnica y tu salud
en el ambiente clnico, como toda lnea de investiga- mania. Tiene experiencia docente en el Departamento de Ciencias
cin an enfrenta retos. Por ejemplo, se requiere de biolgicas de la Universidad de las Amricas y en investigacin en
un modelo terico ms robusto que proporcione una desarrollos biotecnolgicos con empresas privadas. Actualmente
expresin analtica para el tiempo de correlacin de la realiza un posdoctorado en el Instituto Nacional de Astrofsica p-
luz que genera el moteado y su grado de difuminado, as tica y Electrnica en el rea de biofotnica.
como tambin debera de ser capaz de proporcionar in- terespezzia@inaoep.mx
formacin sobre la velocidad del flujo sanguneo en va-
sos profundos. En el Instituto Nacional de Astrofsica Julio Csar Ramrez San Juan estudi la licenciatura en Fsica
ptica y Electrnica justamente estamos desarrollan- en la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional Autnoma
do modelos tericos y comparando sus predicciones en de Mxico; la maestra y el doctorado en Ciencias en el Instituto
el laboratorio. Nacional de Astrofsica, ptica y Electrnica ( INAOE ) en Puebla; pos-
A manera de conclusin, podemos decir que la bio- teriormente realiz una estancia posdoctoral en el Beckman Laser
fotnica ha tenido un tremendo impacto en la detec- Institute de la Universidad de California, Irvine. Su rea de inters es
cin, el diagnstico y tratamiento de enfermedades de la biofotnica, la cual desarrolla en el departamento de ptica del
manera no invasiva con mnimos efectos secundarios. INAOE desde hace diez aos. Es miembro del Sistema Nacional de
La biofotnica es una ciencia multidisciplinaria que re- Investigadores, nivel I.
quiere el concurso de especialistas de varias ramas del jcram@inaoep.mx
conocimiento para poder hacer contribuciones de alto
impacto. Desafortunadamente, esto no ha ocurrido en
Mxico y se es el gran reto de la biofotnica en nues-
tro pas.
Par a saber ms
Boas, D. y A. Dunn (2010), Laser speckle contrast ima-
ging in biomedical optics, Journal of Biomedical Optics,
Rubn Ramos Garca estudi la licenciatura en Fsica y Matem- 15:1-12.
ticas en el Instituto Politcnico Nacional; la maestra en el Centro
Dennis, E., G. Dolmans, D. Fukumura y R. Jain (2003),
Photodynamic therapy for cancer, Nature Reviews
de Investigaciones en ptica, y el doctorado en Fsica en el Imperial
Cancer, 3:380-387.
College of London. Desde 1997 es investigador en el Departamento Greulich, K. (1999), Micromanipulation by Light in Biology
de ptica del Instituto Nacional de Astrofsica, ptica y Electrnica and Medicine: The Laser Microbeam and Optical Tweezers,
en Puebla. Sus reas de inters son biofotnica, cavitacin ptica Basilea, Birkhuser Verlag (Methods in Bioengineering
Series).
y ptica no lineal de cristales lquidos. Es investigador titular C;
Ramrez San Juan, J., R. Ramos Garca, I. Guizar Iturbide
miembro del Sistema Nacional de Investigadores, nivel II; miembro et al. (2008), Impact of velocity distribution assump-
de la Academia Mexicana de Ciencias, e investigador asociado al tion on simplified laser speckle imaging equation, Op-
Centro Internacional de Fsica Terica ( ICTP ) en Trieste, Italia. tics Express, 16:3197-3203.
rgarcia@inaoep.mx Spezzia Mazzocco, T., Ramos-Garca, R. y Ramrez-San
Juan, J. C. (2015), La terapia fotodinmica en las in-
fecciones fngicas, en Alejandra Paula Espinosa Texis,
Teresita Spezzia Mazzocco estudi la licenciatura de Qumico Candelario Vzquez Cruz, Patricia Snchez Alonso et
Frmaco Bilogo en la Benemrita Universidad Autnoma de Pue- al. (eds), Temas selectos de microbiologa mdica y mole-
bla; curs la maestra en Biotecnologa en el Centro de Investigacin cular, Puebla, Direccin de Fomento Editorial de la Be-
en Ciencia Avanzada y Tecnologa Aplicada del Instituto Politcnico nemrita Universidad Autnoma de Puebla, pp. 41-46.
Volke Seplveda, K., I. Ricrdez Vargas y R. Ramos Garca
Nacional, y el doctorado en el rea de Biotecnologa del Colegio de
(2007), Pinzas pticas: las delicadas manos de la luz,
Posgraduados. Hizo una estancia doctoral en el Institute of Forest Ciencia, 58(4):18-25.
Botany, Section Molecular Wood Biotechnology, en Gottingen, Ale-