UNIVERSIDAD DEL SINU- ELIAS BECHARA ZAINUM

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ODONTOLOGA

BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

DETERMINACION DE PROTEINAS

DOCENTE
Dra. BRICEIDA BERGADO

ESTUDIANTES
JAIRO CABRALES
JHOANA RHENALS ASSAS
ISSAC PEAFIEL
KAROL RODRIGUEZ
JUAN DAVID SALAS
JUAN SEBASTIAN SALCEDO
 2. INTRODUCCION
El trmino "protena proviene de la palabra griega proteos, que significa primero. Las protenas
son los compuestos bioqumicos ms abundantes en los seres vivos. Son verdaderamente
especiales por ser las sustancias centrales en casi todos los procesos biolgicos. A primera vista
podra pensarse en las protenas como polmeros lineales de aminocidos unidos entre s por medio
de enlaces peptdicos. Sin embargo, la secuencia lineal de aminocidos puede adoptar mltiples
conformaciones en el espacio. La estructura primaria viene determinada por la secuencia de
aminocidos en la cadena proteica, es decir, el nmero de aminocidos presentes y el orden en que
estn enlazados. La conformacin espacial de una protena se analiza en trminos de estructura
secundaria y estructura terciaria. La estructura secundaria es el plegamiento que la estructura
primaria adopta gracias a la formacin de puentes de hidrgeno entre los tomos que forman el
enlace peptdico. La estructura terciaria, en cambio, se refiere a la disposicin tridimensional de
todos los tomos que componen la protena. Presentan numerosas funciones. Por ejemplo, casi
todas las enzimas estn compuestas de estructuras proteicas. Las enzimas son los catalizadores que
permiten que ocurran casi todas las reacciones qumicas en los seres vivos. La vida, como la
conocemos no sera posible sin las enzimas. Junto con los lpidos, las protenas son los
componentes estructurales de las membranas celulares. Las protenas de las membranas ayudan a
transportar sustancias a travs de la doble capa lipdica y trabajan como sitios receptores de los
neurotransmisores y de las hormonas. Las protenas son responsables del soporte estructural y del
movimiento del cuerpo humano. El tejido conectivo est compuesto de fibras proteicas fuertes que
ayudan a unir la piel y el hueso. Los tejidos musculares estn compuestos de protenas que se
contraen; los huesos se mueven por msculos que se contraen. Otras funciones de las protenas
incluyen el transporte y almacenamiento de iones y molculas; por ejemplo, transportar el oxgeno
de los pulmones a las clulas (hemoglobina). Numerosas hormonas, agentes de comunicacin
qumica, son estructuras proteicas. Una de las lneas de defensa ms importantes contra los agentes
infecciosos son las protenas denominadas inmunoglobulinas
 3. MARCO TEORICO
Los nutrientes de gran importancia biolgica que son las protenas, estas son macromolculas
formadas por cadenas lineales de aminocidos que constituyen el principal nutriente para la
formacin de los msculos del cuerpo, realizar todas las actividades celulares y tienen una
estructura nica y definida que les permite realizar una funcin particular; funciones como por
ejemplo:
Defensiva: A travs de los anticuerpos
Estructural: A travs del colgeno y la queratina
Transportadoras: A travs de la globulina
Enzimticas: A travs de la lactosa y la pectina

Las protenas cuentan con cuatro tipos estructurales:

Estructura primaria: Es la secuencia de aminocidos que constituyen la cadena polipeptdica.
Estructuras secundarias: Es la disposicin tridimensional de los tomos de una molcula en la
cadena (Organizacin espacial). Esta cuenta con dos tipos: ELICE ALFA, es la columna central
del pptido en forma de espiral; HOJA PLEGADA BETA, son varios segmentos de un
polipptido dispuestos lado a lado de la cadena.
Estructura terciaria: Es la formacin de un polipptido completo, cuenta por protenas fibrosas,
que son de forma alargada y actan como materiales estructurales fuera de las clulas vivas y
tambin tiene protenas globulares que tienen forma compacta y actan dentro de las clulas
Estructuras cuaternarias: Son protenas formadas por subunidades (homodimero y
heterodimeros), estas derivan de la conjuncin de varias cadenas peptdicas que unidas forman
un multmetro.

En cuanto a las enzimas, estas son un tipo de protena a enzima que cataliza las reacciones
bioqumicas del metabolismo. Las enzimas actan sobre las molculas conocidas como sustratos
y permiten el desarrollo de los diversos procesos celulares.
Como todos los catalizadores, las enzimas funcionan disminuyendo la energa de activacin de
una reaccin, de forma que la presencia de la enzima acelera sustancialmente la tasa de reaccin.
Las enzimas no alteran el balance energtico de las reacciones en que intervienen, ni modifican
por lo tanto el equilibrio de la reaccin, pero consiguen acelerar el proceso incluso en escalas de
millones de veces. Una reaccin que se produce bajo el control de una enzima, o de un
catalizador en general, alcanza el equilibrio mucho ms deprisa que la correspondiente reaccin
no catalizada.
Al igual que ocurre con otros catalizadores, las enzimas no son consumidas en las reacciones que
catalizan, ni alteran su equilibrio qumico. Sin embargo, las enzimas difieren de otros
catalizadores por ser ms especficas.
Existen tres factores principales que influyen en la catlisis enzimtica:
PH: En medios muy cidos, la enzima se desnaturaliza, es decir que se cambia la forma de la
molcula, por el rompimiento de ciertos enlaces, por lo que esta se inactiva.
Temperatura: Aumenta la reaccin enzimtica y tambin desnaturaliza la molcula al estar en
grados elevados.
Concentracin de sustrato: Vara la velocidad de reaccin o catlisis.

3.1 Objetivos
1. Determinar cualitativamente la presencia de protenas en una muestra biolgica.
2. Demostrar que las protenas pueden desnaturalizarse.
 4. PARTE EXPERIMENTAL

4.1 Materiales y reactivos

5 gotas cido actico

Clara de huevo (ovoalbmina) 02 goteros
10ml leche 04 tubos de ensayo
1ml hidrxido de sodio al 20% 01 mechero
5 gotas sulfato de cobre al 1% 1 encendedor o fsforos
1 porcin jamn Servilletas de papel de cocina
10 semilla de papaya 50gr de detergente
Marcador permanente

4.2 Procedimiento
a) Reaccin de biuret
1. rotular los tubos
2. colocar 1ml de muestra en cada tubo de ensayo
3. aadir 1ml de hidrxido de sodio al 20%
4. agitar suavemente
5. aadir 4 o 5 gotas de sulfato de cobre al 1%
6. observar el cambio de coloracin

b) desnaturalizacin proteica
1. rotular los tubos
2. colocar en un tubo de ensayo una pequea cantidad de clara de huevo y en otro leche
3. aadir 5 gotas de cido actico
4. calentar el tubo al mechero
5. observar el cambio de coloracin
 c) efecto de las enzimas sobre las protenas
1. coloca en un mortero 10 semillas de papaya con un poco de agua mulela y decanten
2. en otro mortero muela 2gr de jamn con un poco de agua
3. rotula el tubo. Coloca en un tubo de ensayo 2ml del lquido del decantado del jamn,
agregue 4 gotas de reactivo de biuret.. agite. Anote el color
4. rotula el tubo. Coloca en un tubo de ensayo 2ml de lquido del decantado del jamn y 2ml
del lquido del decantado de la papaya, deje reposar por 25 min, transcurrido este tiempo
agregue gotas de reactivo de biuret.. agite. Anote el color.
4.3 Resultados y Anlisis
a) Reaccin de Biuret
Tubo con clara de huevo + hidrxido de sodio 20% + sulfato de cobre 1%

Se observa que la reaccin fue positiva con la solucin ovoalbmina (clara del huevo),
por este motivo tomo una coloracin violeta indicando la presencia de enlaces peptdicos,
es decir el reactivo Biuret se uno con los enlaces peptdicos.

Tubo con leche + hidrxido de sodio 20% + Sulfato de cobre 1%

 La mezcla se torn de un color lila, ya que esta tiene pocas protenas, por lo que contiene
pocos enlaces peptdicos.
b) Desnaturalizacin proteica
Tubo con clara de huevo + cido actico

Sometido a temperatura
alta (Mechero), se puede
notar que la clara de
huevo + las gotas de
cido actico con el calor
da una formacin de
cogulos.

La clara del huevo est compuesta en gran parte por agua y ovoalbmina, un tipo de protenas.
Al aumentar la temperatura las protenas de la clara del huevo se desnaturalizan, pierden su
solubilidad y la clara del huevo deja ser lquida y transparente y pasa a ser opaca de color blanco
y slida; de este modo los aminocidos que la componen se desordenan generando un cambio de
su estructura.

Tubo con leche + cido actico

 Pas de un estado totalmente liquida a uno cortado (el cido actico tiene como funcin cambiar
el pH), pues la protena se desnaturaliz y perdi estructuras superiores. (Hay prdida de las
estructuras 2rias, 3rias, y 4rias).
c) Efecto de las enzimas sobre las protenas

Tubo con jamn + semillas de papaya + Tubo con jamn + reactivo de biuret
reactivo de biuret

Se torn de un color gris, dado que la

papaya posee una enzima que rompe los
enlaces peptdicos conocida como papana,
por lo que se torn de gris (reaccin
negativa).

Debido a la presencia de polipectidos de

cadena corta estos se presentan en muy
mnima cantidad (reaccin positiva).
4.4 Cuestionario
1) Indique las principales caractersticas estructurales y funcionales de las protenas.

3) Cul es el fundamento de la reaccin de biuret?

La reaccin o prueba de BIURET es un mtodo que detecta la presencia de compuestos con
dos o ms enlaces peptdicos y, por tanto, sirve para todas las protenas y pptidos cortos.

El reactivo del biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los enlaces del pptido
y cambia el color cuando entra en contacto con otra sustancia, tornndose VIOLETA. Mientras
ms cantidad de protena est presente en la solucin, ms oscuro es el color.
Por ejemplo cuando se calienta la urea a 180 Celsius, se descompone transformndose en un
compuesto llamado "biuret", el cual en presencia de Cu2+ en solucin alcalina forma un complejo
color violceo ya que reconoce los enlaces peptdicos de las protenas, no es especfico para
identificacin de protenas con dos o ms enlaces peptdicos.

4) Cules son las patologas relacionadas con el aumento o disminucin de protenas a nivel
plasmtico?

-ARTRITIS REUMATOIDE: aumenta la albumina y tambin las PCR, la beta y las alfa 2
aumentan ligeramente, el resultado total es una disminucin en el nmero de protenas.
- ANEMIA FERROPNICAS: aumenta mucho la beta globulinas.

- SINDROME NETROFICO: disminucin brusca de protenas totales, sobre todo de albumina,

por un mal filtrado en riones.
- HEPATOPATIA CRONICA: disminuye mucho las albuminas y tambin las gamma globulinas.
El resto baja un poco.

-RESCCION DE FASE AGUDA: disminuye la albumina pero aumenta mucho la alfa globulina
y las PCR.
 5. CONCLUSN
Con esta prctica podemos ver las clases de protenas en las cuales nos enfrentamos en nuestra
vida diaria; tambin nos sorprendimos al ver que la papana puede romper los enlaces peptdicos

Esta prctica tuvo como objetivo lograr el reconocimiento e importancia de las protenas,
durante el desarrollo de la prctica se explic que la protena se le reconoce mediante el reactivo
de biuret, el cual permite reconocer la protena. Una vez que se identificaron algunas protenas
quedo claro las funciones y la importancia de las protenas y finalmente concluyo en que la
protena tiene cuatro niveles en su estructura.
 6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

http://www.uv.es/tunon/pdf_doc/proteinas_09.pdf
https://www.asturnatura.com/articulos/nutricion/energia-nutrientes-componentes-
dieta/proteinas-estructura-quimica.php
http://www.ehu.eus/biomoleculas/peptidos/pep2.htm