Marco teorico

Cuando se desarrolla nuevos mtodos analticos se puede determinar si los resultados son
menores o mayores que los otorgados por un mtodo establecido, por medio de la
identificacin de los errores aleatorios. Dicha comparacin puede ser realizada por medio del
uso de rectas de regresin para comparar dos mtodos analticos, la cual consiste en graficar
en uno de los ejes de la recta de regresin el mtodo de referencia (eje x) y el mtodo que
se desea comparar (eje y) con el fin de que cada punto de la grfica represente una muestra
nica analizada por dos mtodos distintos. Si el resultado por ambos mtodos es idntico se
esperara que la recta de regresin tendr una ordenada en el origen 0, una pendiente y un
coeficiente de correlacin de 1. (Miller & Miller, 2002)
En la prctica las condiciones descritas anteriormente no ocurren y se dan desviaciones del
ideal. Se pueden tener situaciones en donde la pendiente tenga un valor de 1 y la ordenada
en el origen de 0, por lo que un mtodo de anlisis puede conducir a valores ms altos o bajos
de concentracin. Tambin podra darse el caso donde la pendiente tenga un valor mayor o
menor a 1. Otros errores sistemticos que se pueden presentar son el de especiacin (el
analito se encuentra en dos formas qumicas distintas, que puede variar de muestra en
muestra) teniendo como consecuencia que uno de los mtodos identifique una de las formas
de la especie, mientras que el otro identifique ambas. (Miller & Miller, 2002)
Se realizara una comparacin de dos mtodos la espectroscopia de absorcin atmica y
espectroscopia de absorcin molecular. La espectroscopia de absorcin atmica por
aspiracin directa de llama, es una tcnica que presenta una fcil operacin y una alta
selectividad. La cantidad de energa absorbida en la llama a una determinada longitud de
onda (510nm) ser proporcional a la concentracin de analito en la muestra. (Walton & Reyes,
2005)
En este mtodo instrumental se da un proceso de absorcin que impulsa a las partculas
de las especies (iones, molculas y tomos) desde su estado fundamental a temperatura
ambiente, a uno a ms estados de energa. Para que haya absorcin de la radiacin, la energa
del fotn excitado debe coincidir con la diferencia de energa entre el estado fundamental y
el estado excitado de la especie absorbente, lo que se logra con una lmpara de ctodo hueco
(constituida por un ctodo del metal de inters y un nodo de Wolframio colocados en un
tubo hermtico y sumergidos en una atmosfera inerte de gas). Como dicha diferencia es nica
para cada especie, el estudio de las frecuencias de radiacin absorbida proporciona un medio
para caracterizar los constituyentes de una muestra de la materia. ( Skoog & Holler, 2008)

Por otro lado la regin ultravioleta visible del espectro electromagntico, que se extiende
de unos 200-300nm es la regin espectral ms utilizada en el anlisis qumico. La
espectroscopia molecular basada en la radiacin ultravioleta se emplea mucho en la
identificacin y determinacin de muchas especies inorgnicas, orgnicas y bioqumicas.
Estas tcnicas inorgnicas hacen uso de la luz para medir la concentracin de sustancias
qumicas, con los espectros de absorcin que se obtienen, se pueden hallar formulas,
estructuras y la estabilidad de muchas especies qumicas. La espectroscopia de absorcin
ultravioleta-visible se basa en el principio de absortividad alta, es decir en el color fuerte de
una sustancia. Cuando este requisito no se cumple, se requiere desarrollar color a la sustancia
mediante la formacin de un complejo coloreado. (Skoog & West,2005)
Cuando una molcula absorbe un fotn, su energa aumenta y pasa a un estado excitado,
que quiere decir que pasa de su estado basal a otro de mayor energa. En el caso del hierro
(II), las disoluciones de este catin son incoloras, por lo que no se puede determinar su
concentracin utilizando la espectroscopia de absorcin. Debido a esto, se hace reaccionar el
Fe+2 con 1,10-0-fenantrolina para formar un complejo coloreado rojo de fe (III)-o-
fenantrolina. ( Alvarado & Quiros,2008)
Se determinara el porcentaje de hierro presente en 6 muestras incgnitas por medio de
dos mtodos: Espectroscopia de absorcin atmica y espectroscopia de absorcin molecular.
Como principales objetivos de la prctica se tiene determinar la concentracin de hierro II y
la comparacin de ambos mtodos para la identificacin de errores sistemticos.
Bibliografa
Miller, N.J; Miller, J.C. (2002). Estadstica y quimiometria para qumica analtica. Espaa:
Pearson education.
Skoog,D.A; West,D.A.(2005).Fundamento de qumica analtica. Mxico: Cengage learning.
Alvarado, G.A; Quirs, M.B. (2008). Anlisis instrumental: manual de prcticas de laboratorio.
Costa Rica: Editorial UCR.
Skoog, D.A; Holler, F.I. (2008). Principios de anlisis instrumental. Mxico: Cengage Learning.
Resultados

0.5000
Absorbancia (0.0001)

0.4000

0.3000

0.2000
A = (0.0740.002)Cn +( 0.03830.038)
0.1000 R = 0.9952
0.0000
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00
Concentracion de Hierro II (0.01) mg/L

Figura 2: Absorbancia vs concentracin de Fe II a una longitud de onda de 510nm por Absorcin

Atmica.
Cuadro II: Resumen de la incertidumbre de la regresin lineal por mnimos cuadrados de Fe II a una
longitud de onda de 510nm por Absorcin atmica.

Resumen de la regresin AA
Sy/x 0.008
Pendiente (b) 0.074
Sb 0.002
Intercepto (a) 0.038
Sa 0.006
Lmite de deteccin mg/L 0.306
Lmite de cuantificacin mg/L 1.020

Cuadro III: Calculo de la concentracin de Fe II de las 6 muestras incgnitas por interpolacin en una
curva de regresin lineal por Absorcin Atmica
Concentracin Sx0 expandido K=2 para un 95% de
muestra mg/L Sx0 confianza
1 4.0 0.42 0.8
2 3.7 0.29 0.6
3 4.0 0.40 0.8
4 4.0 0.42 0.8
5 3.7 0.29 0.6
6 3.4 0.18 0.4

Calculo del % de hierro II por Absorcin Atmico

Determinacin de la incertidumbre Absorcin Atmica

Incertidumbre
ES para cada
(x) concentracin mg/L muestra
(x) baln de 100ml 0.05
(x) pipeta de 2ml 0.1
(x) balanza analtica g 0.0003

Porcentaje de incertidumbre expandida K=2 95%

muestra hierro incertidumbre confianza
1 10 1.17 2
2 9 0.85 2
3 10 1.10 2
4 10 1.16 2
5 9 0.86 2
6 8 0.61 1
 1.200

1.000
Absorbancia (0.001)

0.800 A = (0.19840.0002)Cn + (0.01270.0006)

R = 1
0.600

0.400

0.200

0.000
0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00
Concentracion de hierro II (0.01)mg/L

Figura 3: Absorbancia vs concentracin de Fe II a una longitud de onda de 510nm por Absorcin

molecular.
Cuadro II: Resumen de la incertidumbre de la regresin lineal por mnimos cuadrados de Fe II a una
longitud de onda de 510nm por Absorcin molecular.

Resumen de la regresin AM
Sy/x 0.0007
Pendiente (b) 0.1984
Sb 0.0002
Intercepto (a) 0.0127
Sa 0.0006
Lmite de deteccin mg/L 0.011
Lmite de cuantificacin mg/L 0.037

Cuadro III: Calculo de la concentracin de Fe II de las 6 muestras incgnitas por interpolacin en una
curva de regresin lineal por Absorcin molecular.
Concentracin Sx0 expandido K=2 para un 95% de
Muestra mg/L Sx0 confianza
1 3.93 0.014 0.03
2 3.62 0.010 0.02
3 4.22 0.018 0.04
4 4.06 0.016 0.03
5 3.72 0.011 0.02
6 3.38 0.007 0.01

Calculo del % de hierro II por Absorcin molecular

Determinacin de la incertidumbre absorcin molecular.

Incertidumbre
ES para cada
(x) concentracin mg/L muestra
(x) baln de 100ml 0.05
(x) pipeta de 2ml 0.1
(x) balanza analtica g 0.0003

Porcentaje de incertidumbre expandida K=2 95%

Muestra Hierro incertidumbre confianza
1 9.58 0.036 0.07
2 9.19 0.027 0.05
3 9.86 0.044 0.09
4 10.10 0.041 0.08
5 9.46 0.030 0.06
6 8.35 0.019 0.04

Calculo de la incertidumbre de los patrones

patrones Concentracin mg/L volumen utilizado ml

1 1.00000 5.00
2 1.50000 7.50
3 1.00000 10.00
4 2.50000 12.50
5 3.00000 15.00
6 3.50000 17.50
7 4.00000 20.00
8 4.50000 22.50
9 5.00000 25.00
Incertidumbre

(x) dsln madre mg/L 0.01

(x) baln de 50ml 0.02
(x) bureta de 25.00ml 0.02

Incertidumbre de cada Incertidumbre expandida K=2 para un 95% de

Concentracin patrones patrn confianza
1.000 0.0047 0.009
1.500 0.0048 0.010
1.000 0.0025 0.005
2.500 0.0053 0.011
3.000 0.0056 0.011
3.500 0.0059 0.012
4.000 0.0063 0.013
4.500 0.0066 0.013
5.000 0.0070 0.014

Rectas de regresin para comparar dos mtodos analticos.

mtodo AM AA
9.576 10.023
9.190 9.104
9.858 9.751
10.099 10.069
9.459 9.135
8.346 8.320
desviacin estndar 0.6140 0.6757

Como la desviacin estndar de AM (0.6140) es ms pequea de la de AA (0.6757), este mtodo es

ms preciso y se grafica en el eje x.
 12

Porentaje de hierro II (0.4)AA

10
% = (1.00.2)% - (0.21.9)
8

0
0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00
Porcentaje de hierro II (0.01) AM

Figura 4: % Fe II Absorcin atmica vs % Fe II Absorcin atmica a una longitud de onda de 510nm.

Determinacin de los Lmites de confianza

Sy/X 0.3
Pendiente (m) 1.0
Sb 0.2
Intercepto (b) 2x10-1
Sa 2
Valor de t 4 (tablas miller &miller ) 2.78

L.C de pendiente (m)

Intervalo de L.C (m) 1.556

0.444

El lmite de confianza de m pasa por 1.00.

L.C de intercepto (b)

Intervalo de L.C (b) 5.76

-5.56

Lmite de confianza de b pasa por 0.

Puesto que de los valores ideales de m =1,00 y b= 0,00 estn incluidos dentro del mbito de los
lmites de deteccin respectivos, se deduce que la pendiente y la ordenada en el origen calculadas,
no difieren en forma significativa al 95% nivel de confianza.

Discusin

En la prctica de laboratorio se determin la concentracin de 6 muestras incgnitas de

hierro II. Para relacionar la absorbancia (a una longitud de onda de 510nm) con la
concentracin de hierro II se realiz una curva de calibracin utilizando patrones de
concentraciones a partir de Fe II 10.0%. Se realizaron 9 patrones de hierro II, a los cuales se le
midi la absorbancia. Se grafic la absorbancia en funcin de la concentracin y se interpolo
la absorbancia de la muestra mediante el mtodo de mnimos cuadrados. Esto se hizo tanto
para los resultados obtenidos en absorcin atmica como en molecular.
Una vez obtenidos las concentraciones de las muestras, se obtuvo su porcentaje en hierro
para poder realizar la comparacin ambos mtodos mediante el anlisis de los lmites de
confianza. Como se puede ver en la figura 4 el coeficiente de correlacin no juega un papel
importante en la comparacin de ambos mtodos, ya que no juega un papel importante en
establecer si ocurren o no errores sistemticos. Adems vale la pena resaltar que se desea
cubrir un buen intervalo de concentracin en el cual este contenido la muestra. (Miller &
Miller, 2002)
Por otro lado es importante tener en cuenta que el mtodo ms preciso se debe graficar
en el eje x (ver figura 4) esto debido a que la recta de regresin se calcula bajo el supuesto de
tener errores despreciables en el eje x y que se deben utilizar una cantidad considerable de
patrones (que cubra ampliamente la concentracin de inters) ya que para el clculo de
lmites de confianza se quieren evitar valores pequeos de n. Por otro lado se establece
tericamente que los errores en los valores de y son constantes (homocedasticos) pero en la
prctica estos tienden a ser heterocedasticos, lo que quiere decir que la desviacin estndar
de y aumenta conforme lo hace la concentracin de analito. (Miller & Miller,2002)
Bibliografa.
Miller, N.J; Miller, J.C. (2002). Estadstica y quimiometria para qumica analtica. Espaa:
Pearson education.
Resumen y conclusin
En la prctica de laboratorio compararon estadsticamente dos mtodos: Absorcin
atmica y Absorcin molecular con el fin de determinar si los resultados eran
significativamente diferentes. Para esto se determin el % de hierro presente en 6 muestras
incgnitas mediante la realizacin de dos curvas de calibracin, posteriormente se determin
cul de los dos mtodos era ms preciso y se tom como referencia, seguidamente se realiz
una curva de regresin lineal y se determinaron los lmites de deteccin a partir de la ecuacin
de la curva. Se pudo determinar que de los valores ideales de m =1,00 y b= 0,00 estn
incluidos dentro del mbito de los lmites de deteccin respectivos, se deduce que la
pendiente y la ordenada en el origen calculadas, no difieren en forma significativa al 95% nivel
de confianza.
Al comparar los resultados obtenidos se puede concluir que se determin de manera
satisfactoria el % de hierro de las 6 muestras incgnitas y ambos mtodos no presentan
resultados significativamente diferentes.