GUA PARA EL MANEJO DE

MICROPIPETAS MANUALES

GICUV | Gua para el Manejo de Micropipetas Manuales 1

Oficina de Planeacin y Desarrollo Institucional
OSWALDO LPEZ BERNAL
Representante de la Direccin

rea de Gestin de la Calidad

Rubn Daro Bonilla Zuluaga
Coordinador de rea de Calidad y Mejoramiento

Gizeh Cardozo Pernia

Profesional contratista marzo a diciembre de 2016

Documento basado en:

Manual de mantenimiento para equipos de laboratorio de la Organizacin Panamericana de la
Salud, documento consultado en julio de 2014 en la pgina web:
http://www.cnts.salud.gob.mx/descargas/LAB_manual-mantenimiento.pdf

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Puede reproducirse total o
Parcialmente citando la fuente.
Consltelo en http://planeacion.univalle.edu.co/laboratorios
Oficina de Planeacin y Desarrollo Institucional
rea de Calidad y Mejoramiento
Ciudad Universitaria Melndez
Edificio 301- Oficina 3016 3er. Piso
Tel. Fax: 321 22 23
Cali, Colombia
Junio 2016

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 TABLA DE CONTENIDO

INTRODUCCIN ................................................................................................................................... 4
DESCRIPCIN DEL EQUIPO .................................................................................................................. 4
CUIDADOS GENERALES........................................................................................................................ 5
VERIFICACIN ANTES DEL USO ........................................................................................................... 5
OPERACIN DEL EQUIPO .................................................................................................................... 6
Graduacin del volumen ................................................................................................................. 7
PROBLEMAS Y CAUSAS DE FALLA ........................................................................................................ 8
MANTENIMIENTO PREVENTIVO .......................................................................................................... 9
ALMACENAMIENTO............................................................................................................................. 9
CALIRACIN DEL EQUIPO .................................................................................................................. 10
DOCUMENTOS DE INTERS ............................................................................................................... 10

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 INTRODUCCIN

Las micropipetas son dispositivos de amplia utilizacin en los laboratorios clnicos y de

investigacin, que se utilizan para suministrar cantidades muy exactas de fluidos. En este
documento se explicarn los aspectos importantes con respecto al uso y el manejo de estos
equipos.

DESCRIPCIN DEL EQUIPO

La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeos

volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas cientficas. Es de destacar que
el uso de micropipetas permite emplear distintos lquidos sin tener que lavar el aparato: para ello,
se emplean puntas desechables, de plstico, que habitualmente son estriles. Existen varios tipos
de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volmenes pequeos (por ejemplo, 10 ), y
las azules para pipetear volmenes grandes (por ejemplo, 800 ).

Por lo general, las micropipetas tienen la siguiente forma, aunque especficamente la figura XX
muestra una micropipeta monocanal.

Esquemas de una micropipeta y sus partes

Figura 1. Esquema micropipeta Figura 2. Esquema micropipeta

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 Partes (Figura 1) Partes (Figura 2)
3. Botn pulsador 1. Embolo o mando de pipeteado
4. Tornillo del botn pulsador 2. Control de volumen.
5. Rueda dentada de graduacin del 3. Zona de sujecin.
volumen. 4. Display
6. Cono de la pipeta. 5. Vstago de la pipeta.
7. Expulsor de punta. 6. Zona de acoplamiento.
8. Punta o tip descartable

Las micropipetas en general son de dos tipos: las de volumen fijo que dispensan un volumen
predeterminado de lquido, el cual es conocido como volumen nominal, y las de volumen variable,
las cuales permiten ajustar el volumen a ser dispensado dentro de un rango determinado en las
especificaciones de la pipeta. La variacin en el volumen se logra modificando la longitud de la
carrera del pistn dentro del mbolo. En estas, el volumen nominal es el lmite superior del rango
de volumen de la pipeta, de acuerdo con las especificaciones dadas por el fabricante.

CUIDADOS GENERALES

No pipetear volmenes que sobrepasen la capacidad de la micropipeta.

Durante el uso y manejo las micropipetas deben permanecer en forma vertical.
Ubicar las pipetas en soportes adecuados o en el embalaje original sin puntas.
Mantener limpias las micropipetas.
Si sus micropipetas son autoclavables y son sometidas a este proceso, estas debern ser
verificadas antes de su uso.
Evite autoclavar las micropipetas si esta caracterstica no se encuentra dentro de las
especificaciones.
Una vez terminado el uso de la micropipeta debe limpiarse el rea de acoplamiento con una
servilleta para evitar contaminacin.

VERIFICACIN ANTES DEL USO

Comprobar el estado general de la pipeta a verificar y que sta se encuentra perfectamente

limpia.
Comprobar la temperatura a la que se encuentra la sala. Se recomienda una temperatura de
entre 18,0 0,5 y 23,0 0,5, una presin atmosfrica de 950 a 1050 y
una humedad relativa del aire del 30 % al 70%, no siendo obligatoria su medida y control. En
estas condiciones, se estima una densidad del aire igual a 1,2 /3.

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 Recopilar los siguientes datos para realizar la verificacin:
o Valores nominales en los que se va a verificar la pipeta y la inexactitud e imprecisin dada
por el fabricante para estos valores.
o Incertidumbre de la balanza en las medidas de masa en las que se va a trabajar.
Para las pipetas de volumen fijo, se realizar la verificacin en el volumen nominal de la pipeta.
Para pipetas de volumen variable, se realizar la verificacin en el volumen mnimo, el mximo
y a la mitad del mximo, o en aquellos volmenes en los que el fabricante proporciona la
inexactitud e impresin.
Registrar stos y otros datos y los resultados de la verificacin.

OPERACIN DEL EQUIPO

Para el manejo y operacin del equipo se siguen las siguientes instrucciones:

1. Presione el botn superior hasta el primer tope positivo (figura 3)

2. Sostenga la pipeta verticalmente, sumerja la punta en el lquido. La profundidad a la

que la punta se sumerge en la muestra depende del modelo. En general menos de
6 (figura 4).

3. Suelte el botn despacio y fcilmente para aspirar (figura 5). Espere unos segundos
y entonces retire la punta del lquido.

4. Ubique la punta de la pipeta en la pared interior del vaso en un ngulo de 10 a 40

grados. Presione el botn suavemente hasta el primer tope (figura 6). Espere un
segundo.

5. Presione el botn hasta el segundo tope para expeler cualquier remanente de

lquido (figura 7). Mantenga el botn presionado hasta el final, remueva la pipeta por
arrastre sobre la superficie del vaso.

6. Libere el botn (figura 8) y expulse la punta presionando el botn de eyeccin

(figura 9).

Teniendo en cuenta las siguientes figuras:

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 Figura 3 Figura 4 Figura 5

Figura 7 Figura 8
Figura 6

Es necesario el cambio de la punta si el lquido es diferente al ya muestreado o si el volumen

establecido es cambiado.

Cuando se pipetean lquidos que tienen una viscosidad y densidad diferentes a la del agua, por
ejemplo solventes orgnicos, una pelcula de lquido se forma sobre las paredes internas de la
punta. Esta pelcula puede crear error. Desde que la pelcula remanentes sea constante en
sucesivas pipeteadas con la misma punta, este error puede ser evitado mediante la formacin de
la pelcula antes de transferir la primera muestra; esto es hacer una aspiracin de la muestra y
dispensarla en el mismo vaso, cuando la pelcula es formada ya todas las muestras siguientes
tendrn mejor exactitud y repetibilidad.

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Esta operacin de pre-enjuague deber ser repetida cuando el volumen a ser aspirado cambia o
cuando se usa una nueva punta.

Graduacin del volumen

Para graduar el volumen de la micropipeta se debe identificar la rueda, control y/o tornillo de
graduacin:
Seleccionar la micropipeta y las puntas que va a utilizar teniendo en cuenta el volumen de
solucin a pipetear:

Tipo de Micropipeta Volumen Tipo de punta

P10 0,5 l - 10 l Amarillas o blancas
P20 0,5 l - 20 l Amarillas o blancas
P100 10 l -100 l Amarillas
P200 20 l -200 l Amarillas
P1000 100 l -1000 l Azules o blancas

Seleccionar el volumen por medio de la rueda y/o tornillo de graduacin, de forma firme pero
suavemente de vuelta al tornillo mientras se observa el cambio de la numeracin del display.
Se debe tener cuidado de exceder los lmites de la micropipeta.
Poner la punta correspondiente y presionar la punta firmemente usando un movimiento de
torsin ligero.

PROBLEMAS Y CAUSAS DE FALLA

PROBLEMA CAUSA PROBABLE SOLUCIN

La pipeta presenta Punta colocada de forma incorrecta
fugas. en la pipeta.
Cuerpos extraos entre la punta y su
cono de ajuste.
Cuerpos extraos entre el pistn y el
anillo/sello en O alojado en el
cilindro.
Lubricante insuficiente en el pistn
y/o en el sello en O.
Sello en O doblado o daado.
Pistn contaminado.
Cono inferior flojo.
Gotas visibles dentro de Humidificacin no homognea de la
la punta de la pipeta. pared plstica.
La pipeta presenta Operacin incorrecta de la pipeta.
Instalar la punta de acuerdo a
procedimiento definido por el
fabricante.
Limpiar acople. Retirar la punta y
limpiar el cono de ajuste. Instalar una
punta nueva.
Desensamblar y limpiar el conjunto
cilindro/pistn. Lubricar y ensamblar.
Desensamblar y lubricar
adecuadamente.
Reemplazar sello en O. Desensamblar,
limpiar, reemplazar sello, lubricar y
ensamblar.
Lubricar el pistn y lubricar
ligeramente.
Ajustar el cono inferior.
Instalar una punta nueva en la pipeta.
Revisar los procedimientos de uso y

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 PROBLEMA CAUSA PROBABLE
inexactitudes.
Cuerpos extraos bajo el botn de
accionamiento.
Punta de la pipeta mal instalada.
Interferencia en la calibracin.
Punta contaminada.
La micropipeta presenta Calibracin inadecuada.
inexactitudes con
determinados lquidos.
El botn de control no Pistn contaminado.
se mueve suavemente o Sello contaminado.
presenta alta resistencia
al accionarlo.
Pistn daado.
Vapores de solvente han entrado en
la micropipeta.
Fuente: Manual de mantenimiento para equipo de laboratorio (Organizacin Panamericana de la
Salud).
SOLUCIN
corregir errores detectados.
Limpiar el montaje del botn.
Revisar el montaje de la punta de la
pipeta. Instalar una punta diferente,
adecuada a las especificaciones de la
pipeta.
Recalibrar de acuerdo a procedimiento
estandarizado. Revisar procedimiento
de uso.
Instalar una nueva punta.
Recalibrar la micropipeta utilizando
procedimiento estandarizado.
Ajustar la calibracin si se utilizan
lquidos de viscosidad alta.
Limpiar y lubricar ligeramente.
Desensamblar la micropipeta, limpiar
todos los sellos o reemplazarlos si es
necesario. Lubricar ligeramente.
Reemplazar el pistn y los sellos del
pistn. Lubricar ligeramente.
Desenroscar la unin central de la
micropipeta. Ventilar, limpiar el pistn
y lubricar ligeramente.

MANTENIMIENTO PREVENTIVO

Iniciar el da limpiando la parte externa de las pipetas de polvo o suciedad.

Use solamente etanol al 70% para la limpieza de la pipeta. Otro tipo de solvente no es
aconsejable.
Utilizar las puntas adecuadas a las pipetas y a la cantidad de solucin que se va a medir.
El pistn y el cilindro pueden ser chequeados dos veces al ao si la pipeta es usada
diariamente. El mantenimiento preventivo de la pipeta tiene que ser realizado por personal
especializado de mantenimiento.

ALMACENAMIENTO

Para utilizar una pipeta se requiere que el laboratorio brinde unas condiciones adecuadas de
comodidad, limpieza e iluminacin. Las condiciones generales son las siguientes:

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 Verificar que la temperatura del ambiente donde se utiliza sea estable, con un rango de
variacin de 0,5 C, que se encuentre entre los 15 C y los 30 C, siendo ptima una
temperatura de 20 C.
Confirmar que la humedad relativa del ambiente sea superior al 50 %. Las pipetas y muestras o
materiales con los que se trabaja deben estar estabilizados a las condiciones del laboratorio,
por lo que se recomienda que se encuentren en el mismo con dos o tres horas de anticipacin
al momento en que se realiza el trabajo.
Evitar trabajar con las pipetas bajo la influencia de la luz solar directa.
Utilizar los elementos de proteccin adecuados, si se trabaja con materiales txicos o que
conlleven riesgo biolgico.

CALIRACIN DEL EQUIPO

Por calibracin de micropipetas de entiende la comparacin del volumen real y el volumen

terico. El volumen real se determina por va gravimtrica.

El apartado 8655 de ISO de 1990 y la DIN 12650, son las reglamentaciones ms utilizadas para
establecer las condiciones de una micropipeta. Estas reglamentaciones definen diferentes niveles
de controles para micropipetas (testeo funcional, testeo rpido, testeo de calibracin, etc.), sin
embargo ambas coinciden en recomendar una calibracin completa cada seis meses.

La calibracin debe ser realizada exclusivamente por personal capacitado. Los instrumentos de
trabajo deben estar debidamente calibrados por instituciones nacionales o internacionales,
responsables de verificar el cumplimiento de los estndares internacionales de medicin.

Las micropipetas de volumen ajustable deben ser calibradas a tres diferentes volmenes (100 %,
50 % y 20 % del volumen mximo nominal), 10 mediciones en cada volumen es el nmero
mnimo necesario para calcular la exactitud y precisin de la misma.

DOCUMENTOS DE INTERS

Micropipetas (Operacin y Manejo)

http://www.equiposylaboratorio.com/sitio/contenidos_mo.php?it=1031

Prctica: El uso de micropipetas

http://jorge-contreras.webs.com/guia-El%20uso%20de%20micropipeta-BM.pdf

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