MINI PROJECT

KIMIA ANALISIS MODERN

KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS UNTUK ANALISIS KOMPONEN GULA

DALAM UMBI PATI GANYONG (Canna edulis Kerr)

Oleh:
Ainul Avida (141810301042)
Siti Mariya Ulfa (141810301048)
Farida Utami (141810301038)
Pratma Noor Adi N (141810301039)
Weni Farida Ulfa (141810301046)

LABORATORIUM KIMIA ANALITIK

JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS JEMBER
2017
 DIAGRAM ALIR PENELITIAN

Umbi Ganyong

Pati Ganyong

Ekstrak pati ganyong

Uji Kualitatif Uji Kuantitatif

Sakarida Glukosa

1. Uji Barfoed
Somogyi-Nelson
2. Uji Benedict
3. Kromatografi lapis Tipis
 BAB 3. METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat

- Erlenmeyer 100 mL
- Tabung reaksi
- Neraca analitik
- Sentrifus
- Gelas beker 100 mL
- Pipet mohr 25 mL
- Termometer
- Penangas listrik
- 1 set alat refluks
- pH meter/ pH universal
- Oven
- spektrofotometer Visibel
- labu ukur 10 mL
- labu ukur 100 mL
- kuvet
- pipet mikro
- bath elusi plat KLT
- pipet tetes
- lampu bunsen
- ball pipet
- corong gelas
- penjepit kayu
- botol semprot

3.1.2 Bahan

- plat silika gel 60 F254

- piridin
- 2-propanol
- Asam asetat
- Umbi ganyong
- HCl 0,1 M
- Cu-asetat
- Asam asetat glasial
- Na2CO3
- Na-sitrat
- CuSO4
- Difenilamin
 - Aseton
- Anilin
- Asam fosfat
- Reagen somogyi-nelson
- Glukosa
- Fruktosa
- Sukrosa
- Maltosa
- Kertas saring

3.2 Prosedur kerja

3.2.1 Preparasi pati ganyong (Canna edulis Kerr)

Umbi ganyong

- Dikupas kulit arinya

- Dicuci dan diparut
- Diremas-remas hasil parutan dan dilarutkan dalam air, kemudian
disaring
- Diambil suspensi dan diendapkan
- Dicuci bagian padatan 4-5 kali
- Dikeringkan pati basah yang diperoleh dalam oven bersuhu 60C
sampai kering dan diayak

Hasil
3.2.2 Pembuatan ekstrak

Pati ganyong

- Ditimbang sebanyak 5 gram

- Dilarutkan dalam akuades sebanyak 100 mL
- Ditambah HCl sampai pH 1
- Direfluks selama 30 menit
- Disaring menggunakan kertas saring
- Disentrifuse dan diambil fase bagian atas

Hasil

3.2.3 Pembuatan reagen-reagen

3.2.3.1 Reagen Barfoed

1,663 gram CU-asetat

- Dilarutkan dalam 25 mL air

- Ditambahkan 0,5 mL asam asetat glasial

Hasil

3.2.3.2 Reagen Benedict

0, 541 gram NA-sitrat

- Ditambahkan 3,125 gram Na2CO3 dalam 25 mL air

yang sudah dimasak
- Diaduk dan ditambahkan 0,541 gram CuSO4 dalam
4 mL air

Hasil
3.2.3.3 Reagen penampak noda

Difenilamin

- Diambil sebanyak 0,12 gram dan dilarutkan dalam

10 mL aseton
- Ditambah anilin 1% dan 1 mL asam fosfat

Hasil

3.2.4 Analisa Kandungan Sakarida

3.2.4.1 Uji Benedict

Larutan sampel hasil ekstraksi

- Diambil sebanyak 1mL

- Dimasukkan dalam tabung reaksi
- Ditambah reagen benedict dan digojog
- Dididihkan dalam api kecil dan didinginkan
- Diamati adanya endapan merah bata yang terbentuk

Hasil
3.2.4.2 Uji Barfoed

Larutan sampel hasil ekstraksi

- Diambil sebanyak 1mL

- Dimasukkan dalam tabung reaksi
- Ditambah reagen barfoed
- Dididihkan dengan api kecil
- Diamati adanya endapan merah yang terbentuk

Hasil

3.2.5 Uji Kualitatif Gula dengan Kromatografi Lapis Tipis

Larutan ekstrak pati

- Ditotolkan sebanyak 0,5 ke plat silika gel 60 F254 bersama

dengan larutan pembanding (digunakan standart glukosa, fruktosa,
sukrosa dan maltosa)
- Dielusi dengan fase gerak 2-propanol-piridin-air-asam asetat
(8:8:4:1 v/v)
- Disemprot dengan reagen penampak noda (anilin-difenilamin)
setelah elusi selesai
- Dimasukkan ke dalam oven suhu 55C selama 5 untuk
menampakkan noda

dalam oven sampai kering

Hasil
3.2.6 Uji kadar glukosa dengan metode kolorimetri (somogyi-nelson)

Larutan standar glukosa

- Dibuat dengan konsentrasi 0 (blanko); 1;5; 10; 20; 30;40 dan 50 ppm
- Diambil 100 L untuk setiap larutan standar
- Ditambah 100 L reagen somogyi-nelson
- Digojog dan dipanaskan dalam peangas air dengan suhu 100C selama
20 menit
- Ditambah 100 L arsenomolibdat dan digojog lagi
- Diukur absorbansinya dengan spektrofotometer visibel pada 720 nm

Hasil
DAFTAR BAHAN

No. Bahan Jumlah

1. Piridin 10 mL
2. 2-propanol 10 mL
3. Asam asetat 5 mL
4. HCl 37% 10 mL
5. Cu-asetat 2 gram
6. Asam asetat glasial 5 mL
7. Na2CO3 4 gram
8. Na-sitrat 2 gram
9. CuSO4 2 gram
10. Difenilamin 1 gram
11. Anilin 10 mL
12. Asam fosfat 5 mL
13. Aseton 15 mL
14. Reagen somogyi-nelson 10 mL
15. Glukosa 15 mL
16. Fruktosa 5 mL
17. Sukrosa 5 mL
18. Maltosa 5 mL
19. akuades 1L
20. Plat KLT
21. Kertas saring 5 pcs

DAFTAR ALAT
No. Alat spesifikasi Jumlah
1. Erlenmeyer 100mL 5
2. Tabung reaksi 3
3. Neraca analitik 1
4. Sentrifus 1
5. Gelas beker 100 mL 3
6. Pipet mohr 25 mL 1
7. Ball pipet 1
8. alat refluks 1 set
9. pH meter 1
10. oven 1
11. Spektrofotometer visibel 1
12. kuvet 2
13. Labu ukur 10 mL 2
14. Labu ukur 100 mL 1
15. Pipet mikro 10 1
16. Pipet tetes 5
17. Corong gelas 1
18. Botol semprot 1
19. Lampu bunsen 1
20. Penjepit kayu 2