UNIVERSITATEA DE MEDICIN I FARMACIE

GR. T. POPA IAI

FACULTATEA DE FARMACIE

Contribuii la studiul farmacognostic i

biologic a unor specii de Lavandula
cultivate n Romnia

REZUMATUL TEZEI DE DOCTORAT

CONDUCTOR TIINIFIC:
Prof. Univ. Dr. URSULA STNESCU

DOCTORAND:
Farm. Drd. Silvia Robu

IAI - 2012
 ABREVIERI

CSS cromatografie pe strat subire

DER raport drog extract
DPPH radical difenilpicrilhidrazil
FR X Farmacopeea Romn ediia a X-a
GC/MS gaz-cromatografie cuplat cu spectrometrie de mas
HPLC cromatografie de lichide de nalt performan
IC50 concentraia inhibitorie 50
Ph.Eur. Farmacopeea European
UV ultraviolet
VIS vizibil
C - corol
cel. par. celule parenchimatice (de tip palisadic)
end. endoderm
ep. epiderm
ep. ext. epiderm extern
ep. int. epiderm intern
exd. exoderm
f.c. fascicul conductor
f.scl. fibre de sclerenchim
f.scl. cort. fibre de sclerenchim cortical
i. cb. inel de cambiu
i. lb. scd. inel de liber secundar
i. lm. scd. inel de lemn secundar
K caliciu
lb liber
lm. lemn
md. lg. mduv lignificat
par. - parenchim
par. as. parenchim asimilator
par. celz. parenchim celulozic
par. cort. parenchim cortical
par. med. parenchim medular
sb suber
scl. - sclerenchim
St. - stil

2
Lucrarea este structurat pe dou pri ce cuprind 6 capitole, dintre
care 5 constituie partea personal.
TEZA prezint urmtorul CUPRINS:

Parte general
Capitolul I. Cunotine farmacobotanice, fitochimice i biologice actuale privind speciile
de Lavandula....................................................................................................................5
Parte personal.................................................................................................33
Capitolul II. Material. metode i tehnici de lucru..............................-...........................35
2.1. Prezentarea materialului vegetal luat n studiu i proveniena acestuia....................35
2.2. Analiza farmacognostic...........................................................................................36
2.2.1. Cercetri histo-anatomice.
2.2.1.1. Metode i tehnici utilizate n cercetrile histo-anatomice
asupra aparatului vegetative la plantele mature prelevate
2.2.1.2. Metode i tehnici utilizate n cercetrile de morfogenez
floral
2.2.2. Analiza farmacognostic macroscopic
2.2.3. Studiul microscopic al elementelor caracteristice n pulberile de
Lavandulae flos
2.3. Studiul fitochimic al probelor de levnic................................................................41
2.3.1. Metode de extracie aplicate...................................................................46
2.3.1.1. Obinerea epuizatelor metanolice/extractelor hidroalcoolice
2.3.1.2. Obinerea tincturilor
2.3.1.3. Obinerea fraciunilor volatile
2.3.2. Analiza chimic calitativ.......................................................................50
2.3.2.1. Cromatografia pe strat subire pentru derivai flavonoidici
2.3.2.2. Analiza cromatografic a acizilor polifenolici
2.3.2.3. Analiza cromatografic pe strat subire pentru compui
volatili
2.3.3. Analiza chimic cantitativ....................................................................................57
2.3.3.1. Determinri spectrofotometrice
2,3.3.2. Analiza prin cromatografie n faz lichid de nalt
performan (HPLC) a polifenolilor
2.3.3.3. Determinarea compuilor volatili
2.4. Determinarea activitii biologice.............................................................................58
2.4.1. Determinarea activitii antioxidante......................................................58
2.4.1.1. Determinarea capacitii de scavenger de radicali liberi
2.4.1.2. Determinarea capacitii de chelatare a ionului feros
2.4.2. Determinarea activitii antimicrobiene a unor uleiuri volatile de
levnic............................................................................................................62

3
Capitolul III . Analiza farmacognostic macro -i microscopic a florilor
de Lavandula angustifolia Mill............. ..........................................65

3.1. Introducere............................................................................................................65
3.2. Material i metod.................................................................................................66
3.3. Rezultate i discuii................................................................................................67
3.3.1. Caractere histo-anatomice la Lavandula angustifolia Mill.
3.3.1.1. Caracterizarea histo-anatomic a organelor vegetative
A. RDCINA
B. TULPINA AERIAN
C. TULPINA SUBTERAN
D. FRUNZA
3.3.1.2. Caracterizarea histo-anatomic a inflorescenei
A. STRUCTURA AXEI INFLORESCENEI
B. STRUCTURA FLORII
3.3.2. Analiza farmacognostic macroscopic a florilor de levnic
3.3.3. Analiza farmacognostic microscopic a florilor de levnic
3.4. Concluzii................................................................................................................90

Capitolul IV. Analiza chimic calitativ i cantitativ a florilor de

Lavandula...91

4.1. Tatonri privind compoziia chimic a uleiurilor volatile separate din flori de
Lavandula angustifolia Mill. recoltate din aceeai locaie, n doi ani consecutivi
(2004/2005)................................................................................................................ ....91
4.1.1. Introducere....................................................................................................91
4.1.2. Material i metod de lucru..........................................................................92
4.1.3. Rezultate i discuii.......................................................................................92
4.1.4. Concluzii.................................................................................. .....................99

4.2. Uleiuri volatile de Lavandula studiate din punct de vedere chimic n 2007.........100
4.2.1. Introducere..................................................................................................100
4.2.2. Material i metod de lucru.........................................................................100
4.2.3. Rezultate i discuii................................................................................... .101
4.2.3.1. Studiul unor uleiuri de levnic provenite de la flori
recoltate n 2007 din Grdina Botanic din Galai
4.2.3.2. Cercetri privind compoziia chimic a unor uleiuri de
levnic comerciale
4.2.4. Concluzii........................................................................................................115
4.3. Contribuii la studiul chimic al uleiului volatil obinut prin hidrodistilare din flori de
Lavandula recoltate n anul 2008....................................................................................116
4.3.1. Introducere.....................................................................................................116
4.3.2. Material i metode de lucru............................................................................116

4
 4.3.3. Rezultate i discuii....................................................................................116
4.3.4. Concluzii.................................................................................. ..................124

4.4. Contribuii la studiul chimic al uleiului volatil obinut prin hidrodistilare din flori de
Lavandula recoltate n anul 2009............................................................................. .126
4.4.1.Introducere............................................................................................... 126
4.4.2. Material i metod de lucru......................................................................126
4.4.3. Rezultate i discuii...................................................................................127
4.4.3.1. Cercetri privind diferenele compoziionale dintre uleiul
volatil extras din flori de levnic proaspete respectiv uscate
4.5.3.2. Compoziia chimic determinat pentru cinci uleiuri volatile
de Lavandula provenite din culturi realizate n 2009 n Grdina
Botanic din Galai
4.4.4. Concluzii....................................................................................... .............141
4.5. Analiza uleiurilor volatile de Lavandula obinute n cursul anului 2010............143
4.5.1. Introducere.................................................................................................143
4.5.2. Material i metode de lucru........................................................................143
4.5.3. Rezultate i discuii....................................................................................145
4.5.3.1. Studiul compoziiei chimice a uleiurilor volatile separate din
flori de levnic - sursa CCB Piatra Neam
4.5.3.2. Cercetri privind compoziia fraciunilor volatile extrase din
inflorescene de Lavandula cultivat la SCDA Secuieni
4.5.3.3. Studiul compoziiei chimice a cinci uleiuri de levnic
separate din flori recoltate de la Grdina Botanic din Galai
4.5.4. Concluzii........................................................................................................ 169
4.6. Cercetri cu privire la compoziia fraciunii polifenolice din florile de levnic....170
4.6.1. Introducere.............................................................................................170
4.6.2. Material i metode de lucru....................................................................170
4.6.3. Rezultate i discuii................................................................................172
4.6.3.1 Tatonri privind extracia i coninutul in polifenoli a florilor
unor subspecii/varieti de cultur de Lavandula angustifolia
4.6.3.2. Cercetri privind compoziia chimic a fraciunii polifenolice
existente n florile de Lavandula
A. DETERMINAREA FLAVONOIDELOR
B. DETERMINAREA POLIFENOLILOR TOTALI
C. DETERMINAREA ACIZILOR HIDROXICINAMICI
4.6.3.3. Analiza prin cromatografie n faz lichid de nalt
performan a polifenolilor existeni n Lavandulae flos
4.6.4. Concluzii..............................................................................................187
Capitolul V. Contribuii la studiul activitii biologice a unor fraciuni
separate din Lavandulae flos...........................................................190

5.1. Obiective................................................................................................................190

5
5.2. Evaluarea in vitro a potenialul antioxidant al extractelor obinute din inflorescenele
de lavanda............................................................................................. .........................196
5.2.1. Introducere
5.2.2. Material i metod
5.2.3. Rezultate i discuii
5.2.3.1. Stabilirea coninutului n polifenoli totali
5.2.3.2. Determinarea activitii de scavenger de radicali liberi
5.2.3.3. Stabilirea capacitii de chelatare a ionului feros

5.3. Evaluarea activitii antimicrobiene a uleiurilor volatile de Lavandula.........207

5.3.1. Introducere
5.3.2. Material i metoda
5.3.3. Rezultate i discuii

5.4. Concluzii.........................................................................................................204

Capitolul VI. Concluzii generale. Grad de originalitate. Perspective de

cercetare...209

Bibliografie.....................................................................................................................212
Lista lucrri publicate.....................................................................................................224

6
INTRODUCERE
Florile de levnic i uleiul volatil separat din acestea sunt
mult utilizate n terapeutic [Abuhamdah S, 2008], att la noi n
ar, ct mai ales n Comunitatea European, unde n ultimul
deceniu s-au efectuat cercetri intense, care au avut ca rezultat
ducerea pe piaa farmaceutic a unui nou medicament, Lasea,
coninnd sub denumirea de silexan, Lavandulae aetheroleum
mbogit cu linalool. Produsul se adreseaz tratamentului
sindromului de anxietate generalizat (GAD) i formei
subsindromale a acestuia [Bruning E, 2011].

Plecnd de la faptul c Farmacopeea European ed. a 6-a

permite utilizarea n scopuri medicinale doar a florilor de
Lavandula angustifolia Mill. care conin un ulei volatil cu o
compoziie chimic controlat i care corespunde anumitor cerine
de calitate, principalul scop al cercetrilor noastre l-a reprezentat
caracterizarea chimic i biologic a unor specii/subspecii/varieti
de cultur de Lavandula din Romnia; acestea au fost:
Lavandula angustifolia Mill.,
Lavandula angustifolia ssp. angustifolia (LAA),
Lavandula angustifolia cv. Hidcote Blue (LHB),
Lavandula angustifolia cv. Munstead (LAM),
Lavandula angustifolia ssp. pyrenaica (LAP),
Lavandula hybrida Rev. (LHY).

Aceasta, i datorit faptului c n literatura de specialitate nu

am gsit date care s ateste calitatea farmaceutic i/sau
aromaterapeutic a florilor de lavand prelucrate, n timp ce se tie
c materialul vegetal provenit din culturi realizate n alte state
balcanice (Grecia, Turcia, Bulgaria) nu este corespunztor
cerinelor actuale [Hassiotis CN, 2010; Ognyanov I, 1984.].

7
 Din acest motiv, obiectivele cercetrii au constat n:
stabilirea caracterelor morfo-anatomice a unor specii/
subspecii de cultur de Lavandula cultivate n Romnia;
evaluarea coninutului n ulei volatil extras prin
hidrodistilare i stabilirea profilului chimic al acestora prin
analiza gaz-cromatografic cuplat cu spectrometrie de
mas (GC-MS);
urmrirea variabilitii compoziionale a uleiului volatil n
funcie de factori climatici (an de cultur, temperatur i
nivel de precipitaii medii, solarizare), locaia de
provenien, vrsta plantei, momentul din perioada de
vegetaie cnd se preleveaz probele de material vegetal,
natura drogului analizat (flori/inflorescene),
aprecierea calitii farmaceutice i aromaterapeutice a
uleiurilor volatile separate;
studiul chimic calitativ al flavonoidelor i al derivailor de
tip acizi polifenolcarboxilici [FRX, 1993];
testarea activitii antimicrobiene a fraciunilor volatile;
stabilirea concentraiei minime inhibitorii (CMI) si a
concentraiei minime bactericide (CMB) [NCCLS, 2009];
evaluarea in vitro a potentialului antioxidant al extractelor
de Lavandulae sp. prin 2 teste.

Constanta n acest studiu o reprezint specia (L. angustifolia/L.

hybrida), subspecia (L. angustifolia ssp. angustifolia/L.
angustifolia ssp. pyrenaica) sau varietatea de cultur (L.
angustifolia cv. Hidcote Blue/L. angustifolia cv. Munstead), care
s-au pstrat aceleai pe tot parcursul studiului.
Locaiile din care materialul vegetal a fost prelevat, ca i
momentele recoltrii sunt redate n capitolul material i metode, iar
analiza farmacognostic macro-i microscopic a fost condus
dup metodele clasice.

8
 Analiza fitochimic a apelat la metode de cromatografie pe
strat subire, gaz-cromatografie cuplat cu spectrometrie de mas,
determinri spectrofotometrice i cromatografie de lichide de nalt
performan (HPLC).
Investigarea aciunii biologice a urmrit dou aspecte i
anume:aciunea antioxidant i aciunea antimicrobian i
antifungic.
n acest scop am apelat la metode de determinare a aciunii de
scavenger de RLO i a capacitii de chelatare a ionului feros,
metode de determinare a activitii antimicrobiene.
n prima faz am ncercat s caracterizm din punct de
vedere histoanatomic diferitele organe vegetative pentru
Lavandula angustifolia Mill., Lavandula angustifolia ssp.
anguustifolia, i Lavandula angustifolia ssp pyrenaica.
Diferenele identificate sunt mici i mai mult de ordin
cantitativ, dup cum reiese din imaginile prezentate n fig. 1.

Seciune transversal prin nervura principal

a limbului foliar de L. angustifolia
Seciune transversal prin nervura principal a
limbului foliar de L. angustifolia ssp. pyrenaica.

Seciune transversal prin limbul foliar de

L. angustifolia. Seciune transversal prin limbul foliar de L.
angustifolia ssp. pyrenaica.

Fig.1. Seciuni transversale prin nervura principal i limbul foliar

la L. angustifolia Mill. i L. angustifolia ssp pyrenaica

9
 De asemeni, o serie de elemente microscopice difereniale cum
ar fi fost perii tectori i glandulari au acelai aspect, diferene
existnd doar cu privire la densitatea lor pe unitatea de suprafa.

Fig.2. Peri secretori i tectori la L. angustifolia ssp. angustifolia i

ssp. pyrenaica

Fig.3. Peri secretori i tectori vzui din profil la L. angustifolia

Mill.

10
 n concluzie, deosebirile de structur ntre cele 2 subspecii,
angustifolia i pyrenaica sunt mici i doar de ordin cantitativ chiar
i la nivelul florilor care sunt singurele oficinalle.
Comparativ cu L. angustifolia ssp angustifolia, L. angustifolia
ssp. pyrenaica are:
nervurile (coastele) caliciului mai puin
proeminente dect ale primei subspecii;
tubul corolei mai deprtat de cel al caliciului;
corol cu petale mai subiri, celulele ambelor
epiderme fiind mult mai mari n comparaie cu cele
ale mezofilului;
numrul perilor tectori i secretori de pe caliciu i
corol, mai mare

Studiul a continuat cu analiza chimic calitativ i

cantitativ a florilor de Lavandula, care s-a desfurat pe 6
ani, cnd a fost analizat material vegetal recoltat din 5 locaii
diferite din Moldova: Iai, Bacu, Piatra Neam, Secuieni -
Neam, Galai, urmrindu-se compoziia chimic a fraciunii
volatile i componentele polifenolice (flavonoide, acizi
polifenolcarboxilici i polifenoli totali).

n prima faz, am ntreprins tatonri privind compoziia

chimic a uleiurilor volatile separate din florile de Lavandula
angustifolia Mill. recoltate din Grdina Botanic Iai n doi ani
consecutivi: 2004 i 2005. Cu toate c solul, tehnologia de
cultivare, chiar plantele de la care s-au prelevat probele au fost n
cei doi ani aceleai, compoziia chimic a uleiului volatil separat n
2005 fa de cel din 2004 prezint diferene mari, mai ales n ceea
ce privete subgrupele de componente minore: hidrocarburi
monoterpenice, sescviterpene i oxizi (fig 4).

11
 % compusi
40
30
20
10
0

2004
2005
2005
2004

Fig. 4. Compoziia (%) uleiurilor volatile din Lavandula

angustifolia pe grupe mari de componente

n aceast situaie singurii factori care puteau influena

producia i compoziia chimic a uleiului volatil erau de natur
climatic. Urmrind variaia lunar medie a temperaturii la sol i n
aer, a precipitaiilor i durata de strlucire a soarelui, constatm c
acestea ar putea reprezenta factorul detrminat pentru sinteza i
acumularea diferit a terpenoidelor n plante.

Poate cel mai important factor l reprezint numrul i

repartiia orelor de solarizare, 1210 ore n 2004 fa de 1261 n
2005 cu maximum de intensitate n lunile de dezvoltare a spicului
florifer, ca i nivelul precipitaiilor, mai mare n lunile
mai/iunie/iulie 2004, comparativ cu aceeai perioad din 2005.

12
 temperatura temperatura
la suprafaa atmosferic
solului (0C) (0C)
30
25
26,7 28,3 28,2 21,3 23,3
20,7 21,2
25 26 20
24,9 25,2 20,1
18,4
20
15
15 9,9
12,8 10
10 9,2
7,3 6,9 6,6
5 5
0,3 0,7
0 0
3 4 5 6 7 luna 3 4 5 6 7
luna
umiditatea
precipitaii 200 relativ (%)
(mm/m2) 180 173 76
171,8 80 69
160 139 69
70
140 67
60 53 66
120 115,7 59
50 55
100 50 51
80 40
60 30
39,8 42
40 15,3
20
31,9 31,1
20 14,4 10
0 0
3 4 5 6 7 luna 3 4 5 6 7
luna

durata de
strlucire a
soarelui 400 340,8
(total ore) 320,2 271,6
300
304,8
190,6 203,3 268,2
247,3
200
125 175,2 2004
100
2005
0 luna
3 4 5 6 7

Fig. 5. Datele climatice ale anului 2004/2005 nregistrate la Iai

Cum ns, pentru aciunea farmacologic importani sunt doar

monoterpenesterii (tip acetat de linalil) i monoterpenolii (gen
linalool), trebuie s admitem c variaiile climatice menionate au
condus n 2005 la o compoziie chimic deficitar fa de 2004 a
uleiului volatil din flori.

n 2007 au fost analizate din punct de vedere chimic 4 uleiuri

volatile provenite de la flori de Lavandula prelevate din Grdina

13
Botanic Galai, la care s-au asociat apoi 3 uleiuri comerciale
pentru care productorii declarau c provin de la L. angustifolia.

Drept martor, am folosit fraciunea volatil separat de noi din

material vegetal cu apartenen botanic sigur: Lavandula
angustifolia Mill. de la CCB Piatra Neam, pentru a avea termen de
comparaie.

n acest fel, pentru recolta iulie 2007 au fost analizate

urmtoarele uleiuri volatile de levnic:
A
Lavandula angustifolia ssp. angustifolia,
Lavandula angustifolia cv. Hidcote Blue,
Lavandula angustifolia cv. Munstead,
Lavandula angustifolia ssp. pyrenaica,
B
3 uleiuri de levnic comerciale: Hofigal,
Solaris,
Fares,
ulei de lavand martor, Piatra Neam.

Cercetrile au constat din: separarea uleiului volatil si analiza

GC/MS, controlul ncadrrii n parametrii cerui de PhEur a 6-a
(calitate farmaceutic), calcularea reprezentrii procentuale a
fiecarei subgrupe de terpene, realizarea modelelor mnemotehnice
i aprecierea calitii aromaterapeutice.

Urmrind caracteristicile profilului gaz-cromatografic la cele

patru uleiuri volatile separate din florile de Lavandula recoltate de
la Grdina Botanic din Galai, am obinut valorile inserate n
tabelul 1.

14
 Tabelul 1. Caracteristicile profilului gaz-cromatografic cerut
de Ph.Eur. a 6-a i valori identificate n studiul nostru pentru
cele patru uleiuri volatile (2007)
Cerin Determinat %
Component
Ph.Eur. a 6-a LAA LHB LAM LAP
limonen sub 1 % 0.60 0.35 0.40 0.35
cineol sub 2.5 % - - - -
3-octanon 0.1 2.5 % - - - -
camfor sub 1.2 % - - - -
linalool 20.0 45.0 % 24.22 28.22 26.11 25.19
acetat de 25.0 46.0
13.31 9.98 13.28 11.43
linalil %
4 terpinen-ol 0.1 6.0 % 9.68 8.12 - 4.94
acetat de peste 0.2 %
5.05 5.07 3.43 5.93
lavandulil
lavandulol peste 0.1 % - - - 2.69
-terpineol sub 2.0% 4.23 3.07 5.12 3.51

Constatm pe de o parte, variaii n compoziia chimic a celor

2 varieti de cultur Hidcote Blue i Munstead fa de subspecia
mam angustifolia, iar pe de alt parte, ntre cele dou subspecii
angustifolia i pyenaica. Din pcate nici unul din cele 4 uleiuri
volatile nu corespunde cerinelor Farmacopeei Europene a 6-a,
acetatul de linalil fiind sub 25 %, iar coninutul n 4-terpinenol i
-terpineol este depit.

Imaginnd pentru aceleai uleiuri profilele mnemotehnice care

ne indic utilitatea aromaterapeutic, observm c nici unul dintre
ele nu se apropie suficient de modelul standard. Aceasta nseamn
c aciunile farmacologice i n consecin domeniile de utilizare
terapeutic vor fi diferite fa de cele standard.

15
 LHB LAA LAM

Esteri 17.87% Esteri 19.62%

Monoterpenoli 39.22% Esteri 20.91%
Monoterpenoli 40.70%
Monoterpene 25.22 % Monoterpenoli 32.59%
Monoterpene 7.04% Monoterpene 14.05%
Sescviterpene 7.21% Sescviterpene 4.52 %
Oxizi - Sescviterpen 5.40%
Oxizi 1.02% Oxizi 3.41%
Sescviterpencetone/ -
Sescviterpencetone/ - Sescviterpencetone/ 0.92%
oxizi
oxizi oxizi
Std

LAP

Esteri 40-50% (linalilacetat)

Monoterpenoli 30-40% (linalool)
Monoterpene 7-13% (ocimen)
Sescviterpene pana la 8% (-cariofilen)
Oxizi pana la 1.5% (1,8- cineol,
linalooloxid)
Esteri 20.22% Sescviterpencetone/ urme
Monoterpenoli 36.33% Cumarine urme
Monoterpene 17.71% Eugenol urme
Sescviterpene 5.53% Acizi/aldehide aromatice urme
Oxizi - Esteri/alcooli aromatici urme
Sescviterpencetone/ - Monoterpencetone urme
oxizi

Fig. 6. Profilul mnemotehnic al uleiurilor volatile de levnic

(2007, Grdina Botanic Galai) comparativ cu standardul (Std)

16
 Cercetnd compoziia chimic a uleiurilor comerciale
comparativ cu proba martor Piatra Neam, constatm aceeai
variabilitate larg. Fa de martorul de la Piatra Neam, proba
Solaris este mult mai bogat n linalool, fapt care presupunem c se
datoreaz adugrii n ulei a acestei componente de ctre
productor, n scopul apropierii de cerinele de calitate menionate.
Aceast practic de mbogire nu este ns permis nici de ctre
Farmacopeea European i nici n aromaterapie.
De altfel, suplimentarea cu linalool a uleiuli volatil de la
Solaris este aceea care scade artificial coninutul probei n celelalte
componente (acetat de geranil, -terpineol, camfor).

% linalool
60 % geranilacetat
40 10
20
0 0
LA A B C LA A B C

% -terpineol % camfor
10
5
5
0 0
LA A B C LA A B C
Fig. 7. Coninutul n linalool, geranilacetat, -terpineol i camfor
identificat n mostrele comerciale de ulei de Lavandula
(LA = prob martor Piatra Neam; A = Hofigal; B = Solaris; C = Fares)

17
 Tocmai de aceea, am aplicat i acestor uleiuri cerinele
menionate, situaia gsit fiind ilustrat n imagine. Dup cum se
vede, nici unul dintre uleiurile volatile nici chiar martorul dar
nici Solaris nu se ncadreaz n cerinele Farmacopeei.

Tabelul 2. Caliatea farmaceutic a uleiurilor de levnic procurate

din magazine naturiste
Cerin Determinat %
Component
Ph.Eur. a 6-a LA A B C
limonen sub 1.0 % - - - -
cineol sub 2.5 % 13.50 7.69 - -
3-octanon 0.1 2.5 % - - - -
camfor sub 1.2 % 9.57 7.30 1.68 7.26
linalool 20.0 45.0 % 29.25 32.32 53.29 32.62
acetat de linalil 25.0 46.0 % 13.15 - - -
4-terpinenol 0.1 6.0 % - 0.40 0.53 1.33
acetat de lavandulil peste 0.2 % 0.15 - - -
lavandulol peste 0.1 % - - - -
-terpineol sub 2.0 % 2.28 1.79 0.56 1.51

Pentru confirmarea sau infirmarea rezultatelor obinute n

2007, am reluat un an mai trziu studiul uleiului volatil separat din
aceleai 4 lavande prelevate de la Grdina Botanic din Galai i
anume:
L. angustifolia ssp. angustifolia (LAA),
L. angustifolia cv. Hidcote Blue (LHB),
L. angustifolia cv. Munstead (LAM) i
L. angustifolia ssp. pyrenaica (LAP).

n anul 2008 din cele 4 probe de ulei de lavandula de la Galai

a lipsit complet acetatul de linalil, la 3 dintre probe acesta fiind
nlocuit cu acetat de lavandulil , aa cum reiese i din figur.

18
 %
%
mono-
lavandul
terpen-
il- acetat
esteri
15
10
10
5
5

0 0
LAA LAM LHB LHP LAA LAM LHB LHP

Fig. 8. Coninutul n monoterpenesteri i acetat de lavandulil n

uleiurile volatile de levnic studiate

La toate probele linaloolul depete limita inferioar cerut,

de 20 %. Celelalte componente importante variaz foarte mult n
funcie de proveniena botanic.
% mono-
terpenoli 60
% l-
40 linalool40

20 20
0 0
LAA LAM LHB LHP LAA LAM LHB LHP
%
lavandulol 5

0
LAA LAM LHB LHP

Fig. 9. Coninutul n monoterpenoli, linalool i lavandulol n

uleiurile volatile de levnic analizate

19
 % mono- %
terpene30 ocimen
10
20
10
0
0
LAA LAM LHB LHP
LAA LAM LHB LHP

Fig. 10. Coninutul n monoterpene a uleiurilor de Lavandula, din

care ocimen n uleiurile volatile de levnic studiate

n continuare, studiul nostru a urmrit evidenierea

diferenelor de compoziie chimic a fraciunii volatile separate
din acelai material vegetal aflat n stare proaspt,
comparativ cu cel uscat.

Cu toate c Ph.Eur. definete uleiul volatil de levnic ca fiind

extras prin hidrodistilare din flori uscate, la noi n ar exist
productori care supun antrenrii materialul vegetal n stare
proaspt, avndu-i instalaiile mobile de distilare amplasate pe
timpul verii pe cmpurile de cultur, pentru a face economie la
transport i instalaii de uscare.

Cutnd s vedem ct de mari pot fi diferenele compoziionale

n acest caz, am antrenat uleiul volatil din flori proaspete respectiv
uscate de levnic i l-am analizat gaz-cromatografic. Diferena
este evident. Chiar dac, la o prim vedere, am putea aprecia ca
fiind mai bun uleiul din florile proaspete datorit compoziiei mult
mai complexe, n realitate componentele majore se dilueaz, iar
parfumul se modific i aciunea farmacologic se dilueaz i ea.

20
 flori proaspete flori uscate
Fig. 10. Gaz-cromatograma uleiului volatil din Lavandula
angustifolia Mill. (SCDL - Bacu)

Cutnd s vedem, n ce msur diferenele compoziionale se

reflect n efectul terapeutic am trasat profilele mnemotehnice
pentru cele dou uleiuri, proaspt i uscat, pe care le-am comparat
cu standardul, deducnd apoi paleta aciunilor farmacologice pe
care probabil, le vor dezvolta.
Rezultatul este redat n tabelul 3.

Tabelul 3. Aciuni farmacologice probabile ale celor 2 uleiuri

volatile i intensitatea lor
Lavandulae aetheroleum
ACIUNI N PLAN SOMATIC
Standard Proaspt Uscat
antibacterian,antiviral, antimicotic ++ + ++
dezinfectant ++ + ++
febrifug ++ + ++
imunostimulator puternic +++ + ++
dermoregenerator, cicatrizant +++ ** ++
antiinflamator ++ + ++
stimulator al circulaiei ++ + ++
reglator al tensiunii + + ++
analgezic ++ + +
spasmolitic ++ + +
inductor al somnului ++ + ++
repelant ++ + +

21
 ACIUNI N PLAN PSIHIC
echilibrant +++ + ++
sedativ +++ + ++
anxiolitic i antidepresiv +++ - +
analeptic i revigorant n stri de
epuizare psihic i lips de ++ - +
motivaie
Legend: activitate foarte bun (+++), bun (++), slab (+), lips (-), dermoiritant (*)

Dac aciunile farmacologice dezvoltate de uleiul volatil

standard sunt de la bune pn la foarte bune att n plan somatic,
ct i n plan psihic, intensitatea lor se reduce substanial, de la
slab la inexistent pentru proba de ulei volatil separat din florile
proaspete; n plus, dup cum se poate vedea, acesta este
dermoiritant la aplicare topic. Comparativ cu acesta, uleiul din
aceleai flori, dar prelucrate n stare uscat, i recapt o bun
parte din proprietile farmacologice.
Relund studiile n 2010 am cutat s urmrim influena unor
factori asupra calitii uleiurilor volatile. Este vorba de factori
precum:
momentul recoltrii (recolta iulie, august, octombrie)
Piatra Neam i Secuieni,
anul de vegetaie n care s-a gsit planta (anul III respectiv
VII) Secuieni i anul IV Piatra Neam,
partea de plant analizat (flori sau tij florifer) Piatra
Neam, Secuieni i Galai,
condiii climatice Secuieni,
poziionarea locului de cultur n nordul (Piatra Neam,
Secuieni) respectiv sudul Moldovei (Galai),
apartenena la specii, subspecii sau varieti de cultur
diferite Galai.
S-a stabilit c toi, mai puin vrsta plantei influeneaz
calitatea fraciunii volatile.

22
 Studiul a continuat cu cercetri privind compoziia chimic a
fraciunii polifenolice din florile de levnic.
S-au urmrit:
componentele flavonoidice,
polifenolii totali,
derivaii de tip acizi hidroxicinamici, prin
determinri spectrofotometrice i HPLC.
Studiul polifenolilor din lavand s-a desfurat pe parcursul a 2
ani consecutivi n anul 2008, probe de LAA, LAM, LHB, LAP
(Galai), iar n 2009, au fost analizate probele LAA, LAM, LHB,
LAP i LHY (Galai), la care s-au adugat 2 probe de Lavandula
angustifolia Mill. de la Piatra Neam, LAV1 = 07.07.2010 ; LAV2
= 18.10.2010.
ntr-o prim faz, am testat influena solventului de extracie
asupra epuizrii materialului vegetal, i implicit a rezultatelor
privind coninutul la % n flavonoide i acizi polifenolici. Am
constatat astfel, c fraciunea polifenolic se extrage complet la
utilizarea unui alcool inferior diluat.

Tabelul 4. Influena solventului de extracie asupra rezultatelor

Extractibilitate
Tip de extracie acizi
flavonoide
polifenolici
Extracie cu metanol + +
Extracie cu metanol 70 % +++ ++
Extracie cu etanol 70 % +++ ++
Extracie cu etanol 50 % + +++

Relund acest aspect un an mai trziu, dozarea cantitativ a

flavonoidelor a condus la obinerea rezultatelor ilustrate n
imagine, de unde deducem c pentru fiecare material vegetal
trebuie ales cel mai bun solvent, care nu este ntotdeauna
metanolul, metanolul sau etanolul 70% respectiv etanolul 50%.

23
 g flavonoide/100g drog
0,5
0,4
0,3 E 70 %
0,2 E 50 %
0,1
0
LAA LHB LAM LAP LHY LAV1 LAV2
Fig. 11. Continutul flavonozidic (%) in probele de Lavandulae flos
(E70%=extractie etanol 70%; E50%=extractie etanol 50%)

Determinnd polifenolii totali exprimai n echivaleni acid

galic, pentru aceleai probe, constatm c extracia cea mai bun o
furnizeaz etanolul 50 %.

g acid galic/100g drog

10
8
6 E 70 %
4 E 50 %
2
0
LAA LHB LAM LAP LHY LAV1 LAV2
Fig. 12. Concentratia polifenolilor totali (%) in probele de
Lavandulae flos

Determinrile HPLC ale extractelor obinute au permis

identificarea n materialul vegetal a cinci componente acide (acid
clorogenic; acid cafeic; acid ferulic; acid rozmarinic; acid o-

24
cumaric), a 3 compui flavonoidici (rutozid; luteolin;
apigenol) i a catehinei.
Coninutul n aceste componente este prezentat n tabelul 5.

Tabelul 5. Componente identificate prin HPLC n fraciunile

polifenolice separate din flori de levnic
g/ml extract
Cod
1 2 3 4 5 6 7 8 9
LAA 0.0001 0.0429 0.0637 0.0326 0.0002 0.0188 0.0195 0.0007 0.0007
LHB 0.0002 0.0312 0.0652 0.0223 0.0003 0.0169 0.0830 0.0007 0.0004
LAM - 0.0055 0.0582 0.0316 0.0002 0.0120 0.0834 0.0005 0.0006
LAP 0.0001 0.0355 0.0686 0.0172 0.0002 0.0196 0.0722 0.0011 0.0007
LHY 0.0001 0.0317 0.6034 0.0495 0.0004 0.0199 0.0538 0.0009 0.0004
LAV1 0.0003 0.0454 0.0989 0.0924 0.0001 0.0237 0.1140 0.0016 0.0007
LAV2 0.0004 0.0609 0.1009 0.0927 0.0004 0.0304 0.1306 0.0020 0.0005
Legenda: 1 Acid clorogenic; 2 Acid cafeic; 3 Acid ferulic; 4 Acid rozmarinic;
5 Acid o-cumaric; 6 Catehin; 7 Rutozid; 8 Luteolin; 9 Apigenol.

Din punct de vedere cantitativ principalele componente s-au

dovedit a fi acidul rozmarinic i rutozida; probele de la Piatra
Neam sunt cele mai bogate att n acid rozmarinic ct i n
rutozid. Interesant este faptul c n proba de flori de lavand
recoltat n iulie 2010 de la Piatra Neam, cantitatea de rutozid
este mai mic dect la mostra prelevat n octombrie.

g ac. rozmarinic/ml extract g rutozid/ml extract LAA

LAA
0,1 0,14 LHB
LAB
0,12 LAM
0,08
LAM 0,1
0,06 LAP
0,08
LAP
0,04 0,06 LHY
LHY
0,02 0,04 LAV1
LAV1 0,02
0 LAV2
LAV2 0

Fig. 13. Concentraia n acid rozmarinic i rutozid identificat

prin HPLC n probele de lavand studiate

25
 Trecnd la studiul activitii biologice a unor fraciuni
separate din Lavandulae flos, au fost investigate:
activitatea antioxidant a fraciunii polifenolice, prin testul
DPPH i prin stabilirea capacitii de chelatare a ionului
feros [Capecka E.,2005; Apetrei C, 2011],
efectul antimicrobian i antifungic a uleiurilor volatile.

Activitatea antioxidant a fost investigat pentru extractele

uscate , motiv pentru care am determinat coninutul n polifenoli
totali exprimai n echivalent mg acid galic/1 g extract, rezultatele
obinute fiind ilustrate n figura 14.

mg acid galic/
1g extract uscat
100
80
60
40
20
0
LAA LHB LAM LAP LHY LAV1 LAV2
Fig. 14. Coninutul n polifenoli totali exprimai n mg acid
galic/1g extract uscat de Lavandula

Din nou, coninutul cel mai mare n polifenoli se regsete n

extractul uscat LAV 1 de la Piatra Neam.
Urmrind activitatea de scavenger de radicali
difenilpicrilhidrazil (DPPH) a extractelor uscate de Lavandula am
testat 4 concentraii diferite, constatnd c pentru calculul
concentraiei inhibitorii 50 pot fi luate n lucru doar valorile
obinute cu 5 i 10 mg extract/ml

26
 Tabel 6. Activitatea de scavenger de radicali DPPH a extractelor
uscate de Lavandula i concentraia inhibitorie a acestora
Proba/ Concentraie Eu (mg/ml)
CI50 ( g/ml)
etalon 20 10 5 2.5
LAA 85.4198 0.13 66.8936 0.73 45.7988 0.50 26.8737 0.78 95.6000 1.70
LHB 88.5053 0.50 67.6040 0.45 45.2210 0.48 27.3299 0.27 96.5333 1.45
LAM 85.1819 0.27 68.1173 0.69 42.7933 0.19 21.4148 0.21 101.4000 0.90
LAP 85.9800 0.44 65.1209 0.97 39.6023 0.13 24.4064 0.16 110.3666 1.40
LHY 91.3995 0.51 76.1863 0.78 51.9172 0.76 31.7290 0.36 73.5333 1.25
LAV1 92.4127 0.14 87.1801 0.32 64.4878 0.41 38.0901 0.21 56.9666 0.45
LAV2 90.8866 0.48 60.2115 0.55 66.4588 0.24 39.7781 0.58 54.3333 0.65
Cvercetol 96.2588 0.35 96.0419 0.09 95.5488 0.48 94.0285 0.03 3.4000 0.00
Rutozida 92.8949 0.08 92.4943 0.023 91.8886 0.11 90.9540 0.13 11.5333 0.15
Ac. galic 97.3433 0.07 97.2334 0.08 97.2110 0.01 96.2494 0.35 1.5000 0.00

Calculnd CI50, pentru a putea aprecia intensitatea aciunii

antioxidante, am obinut valorile redate n imagine. Trebuie s
inem cont de faptul, c valoarea mic de extract necesar
nseamn activitate mare.

CI50 (g extract sau etalon/ml)

120
100
80
60
40
20
0

Fig. 15. CI50 determinat pentru extractele uscate de lavand i

etaloanele cvercetol, rutozid i acid galic

Cea mai puternic aciune de scavenging o au probele de

lavand LAV1 i LAV2 de la Piatra Neam, urmate de LHY din
Galai.

27
 Ca i n testul anterior calculnd CI50, activitatea chelatant
cea mai bun o au probele LAV1 i LAV2, iar cea mai slab LAP.

CI50 (g extract sau etalon/ml)

90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

Fig. 16. CI50 pentru activitatea de chelatare a ionului feros

determinat pentru extractele uscate de lavand i etaloane

Efectul antimicrobian i antifungic al uleiurilor volatile a

fost determinat pe bacterii gram pozitive i fungi din genul
Candida, cnd s-au determinat valorile CMI i CMB i s-a urmrit
efectul sinergic pentru asocierile ulei de levnic/antibiotic sau
antifungic.

Dac efectul antimicrobian al uleiurilor de levnic testate s-a

dovedit a fi de intensitate slab pn la medie, se remarc faptul c
adugarea uleiului volatil peste antibiotic induce o uoar cretere
a activitii bactericide. n toate cazurile LHB este cea care are
efectul sinergic cel mai bun.

28
 40
30
25 30
20
15 20
10 A 10 C
5 LAA LAA
0 0 LHB
LHB
LAM LAM
Ampicilina 10g+ ul vol LAP Cloramfenicol 30g+ ul LAP
20l LHY vol 20l LHY

30
25 30
20 25
20
15
15
10 AK 10 OF
5 LAA 5 LAA
0 LHB 0 LHB
LAM LAM
Amikacina 30g+ ul LAP Ofloxacina 5g+ ul vol LAP
vol 20l LHY 20l LHY
Fig. 17. Efectul antimicrobian sinergic determinat in vitro pentru
asocierile ulei de levanic/antibiotic

n mod analog, combinarea nistatinei cu uleiurile de lavand

mbuntete activitatea antifungicului, efectul maxim obinndu-
se la asocierea acestuia cu LHB.

29
 50
40
30
20 N
10 LAA
LHB
0
LAM
LAP
Nistatina 100g+ ul vol 20l LHY
Fig. 18. Efectul antifungic sinergic determinat in vitro pentru
asocierile ulei de levanic/nistatin

CONCLUZII GENERALE. GRADUL DE ORIGINALITATE.

PERSPECTIVE DE CERCETARE

Concluziile generale ale tezei pot fi sistematizate dup cum urmeaz:

Macroscopic, toate probele au prezentat n stare uscat
caracteristicile cerute de Farmacopeea European a 6-a.
Structura histoanatomic a organelor vegetative prezint la cele
dou subspecii (L. angustifolia ssp. angustifolia/ L. angustifolia ssp.
pyrenaica) diferene minore, i acestea mai mult de ordin cantitativ.
Din punct de vedere microscopic, speciile (L. angustifolia/L.
hybrida), subspeciile (ssp. angustifolia/ ssp. pyrenaica) i varietile de
cultur Munstead i Hidcote Blue prezint aceleai elemente, diferenele
fiind doar cantitative.
Microscopic, pulberile vegetale se caracterizeaz prin prezena:
perilor glandulari secretori, pe elementele florale,
epiderma petalei cu papile,
peri tectori, mori, plini cu aer.

Compoziia chimic a uleiului volatil depinde de:

30
 specia, subspecia i varietatea de cultur prelucrat,
momentul din perioada de vegetaie i partea de plant
prelevat,
locaia de provenien,
condiiile climatice ale anului n care se face recoltarea,
tipul de material (proaspt/uscat) supus antrenrii.

Calitatea farmaceutic/aromaterapeutic nu este ndeplinit de

nici unul din uleiurile studiate i difer de la an la an, dependent de
parametrii anterior menionai.

Situaia constatat nu difer de cea cunoscut pentru uleiul volatil de

levnic produs n Grecia sau Turcia, justificarea gsindu-se n calitatea
materialului sditor iniial adus din zona de vest a Mediteranei. Grecii au
iniiat un program care i propune obinerea prin culturi de esuturi
vegetale a unei varieti de cultur pe care deja au denumit-o Lavandula
angustifolia ssp. etherio i care se pare c va prezenta parametrii chimici
mbuntii.

Uleiurile volatile comerciale prezint aceeai nencadrare n

limitele prevzute de Farmacopeea European cerute pentru atestarea
calitii farmaceutice. Din acest motiv productorul de ulei volatil ar
trebui s-i analizeze fiecare arj produs industrial, pentru a putea
elibera un buletin de analiz corespunztor.

Fraciunea polifenolic variaz calitativ i cantitativ dependent

de:
specie, subspecie i varietatea de cultur prelucrat,
condiiile climatice ale anului n care se face recoltarea,
tipul de solvent utilizat pentru extracie.

Activitatea antioxidant a fraciunii polifenolice variaz n funcie

de:
coninutul n polifenoli existeni n extract, determinai de

specie,
subspecie i

31
 varietatea de cultur, probele de la Piatra Neam (L.
angustifolia Mill.) fiind mai active dect variantele de
cultur recoltate de la varietile cultivate n Grdina
Botanic din Galai.

Activitatea antimicrobian i antifungic difer dependent de

proveniena botanic a probei de ulei volati:
LHB are activitatea antibacterian i antifungic cea mai bun,
LHB are aciune sinergic cu antibioticele i antifungicul
testat, n cazul aplicrii combinaiei,
toate uleiurile testate sunt active fa de Bacillus cereus, dar au
aciune antistafilococic redus;
LAM este puternic antibacilar.

Gradul de originalitate. Perspective de cercetare

Originalitatea proiectului deriv n primul rnd din investigarea unor

specii i soiuri noi de Lavandula cultivate n condiiile pedo-climatice
specifice sud-estului Romniei.

Un alt element de originalitate l constituie totalitatea aspectelor

farmacobotanice, chimice i biologice sub care sunt cercetate speciile
luate n studiu.

n acest context, proiectul contribuie la lrgirea cunotinelor

fitochimice, fitofarmacologice i a corelaiilor existente ntre condiiile
pedoclimatice din ara noastr i compoziia chimic, fundamentnd
aciunea antimicrobian i antioxidant a speciilor.
Prin rezultatele care vor fi puse la dispoziia specialitilor n ideea
unei valorificri a acestora n industria farmaceutic, cosmetic i
alimentar, proiectul depete sfera importanei pur teoretice, avnd i o
finalitate practic. Alturi de o alt tez de doctorat, cercetrile legate de
florile de Lavandula ne-au motivat ca alturi de ali parteneri (IBA,
INCDSB, Planta Vorel Piatra Neam) s nscriem n competiie un
proiect, care s urmreasc trasabilitatea biologic, chimic, i

32
funcional a unor plante utilizate n obinerea unor suplimente
alimentare cu component vegetal, care s corespund cerinelor
Comunitii Europene.
Cu siguran prin lucrarea de fa se deschide o cale de monitorizare
a produselor vegetale care constituie surse pentru extracte cu utilizare
terapeutic i cercetrile se pot extinde, mai ales pentru Lavandula dar i
pentru alte splante medicinale, pn la obinerea i selectarea unor specii
valoroase prin prisma principiilor active cu aciune biologic.

Integrarea proiectului n prioritile naionale

Tematica proiectului se ncadreaz n problematica care preocup

comunitatea european, precum i cea naional, i anume
fundamentarea cunotinelor tiinifice privind remediile de origine
vegetal, gsirea de noi ageni terapeutici lipsii de efecte adverse,
armonizarea metodologiei de control a produselor de origine vegetal i
a fitopreparatelor.

Totodat, se integreaz n prioritile naionale, prin urmrirea

calitii farmaceutice a produsului comercializat la noi prin reeaua
farmaceutic, atrgnd atenia supra lipsei de competitivitate a
materialului nostrum vegetal, dac nu se ncearc o revizuire de strategie
pe linie de cultur, fie prin crearea unei linii romneti, fie prin
procurarea de material sditor de calitate.

Bibliografie selectiv

***2008 ist Lavendeljahr, D.A.Z. 2007, 147 (22):4688

***Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for antimicrobial
dilution and susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. Approved
standard M07-A8 and Informational Supplement M100-S19.2009, v.29,
National Commitee for Clinical and Laboratory Standards Institute, Wayne,
PA 2009
***Farmacopeea European a 6-a, EDQM Stuttgart, 2008
***Farmacopeea Romn, ed. a X-a, Editura Medical, Bucureti, 1993

33
Abuhamdah S, Chazot PL. Lemon Balm and Lavender herbal essential oils:
Old and new ways to treat emotional disorders? Current Anaesthesia &
Critical Care, 2008, 19:221226
Adams RP. Identification Of Essential Oil Components By Gas
Chromatography/Mass Spectroscopy. In: Stream C. (eds.). Allured Publishing
Corporation, IL, USA. 1995.
Adorjan B, Buchbauer G. Biological properties of essential oils: an updated
review. Flavour and Fragrance Journal, 2010, 25:407426
Angioni A, Barra A, Coroneo V, Dessi S, Cabras P. Chemical composition,
seasonal variability and antifungal activity of Lavandula stoechas L. ssp
stoechas essential oils from stem/leaves and flowers. J. Agric. Food Chem.
2006, 54(12):4364-4370
Apetrei CL, Tuchilus C, Aprotosoaie AC, Oprea A, Malterud KE, Miron A.
Chemical, Antioxidant and Antimicrobial Investigations of Pinus cembra L.
Bark and Needles. Molecules. 201, 16(9):7773-88
Ballabeni V, Tognolini M, Chiavarini M, Impicciatore M, Bruni R, Bianchi A,
Barroceli E. Novel antiplatelet and antithrombotic activities of essential from
Lavandula hybrida Reverchon grosso. Phytomedicine, 2004, 11 (7-8):596-
601
Barrocelli E, Calcina F, Chiavarini M, Impicciatore M, Bruni R, Bianchi A,
Ballabeni V. Antinociceptive and gastroprotective effects of inhaled and orally
administred Lavandula hybrida Reverchon Grosso essential oil. Life Sci.,
2004, 76 (20):213-223
Barry AL. Procedure for testing antibiotic in agar media: theoretical
consideration. In: Larian V (eds.), Antibiotics in Laboratory Medicine.,
Williams JD and Wilkins, London, 1981, 1-23
Basch E, Foppa I, Liebowitz R. Lavender (Lavandula angustifolia Miller).
J.Herb. Pharmacother. 2004, 4(2):63-68
Binet L, Binet P, Micque M., Roux M, Bernier A. Recherches sur les
propriets pharmacodynamiques (action sdative et action spasmolytique) de
quelques alcools terpniques aliphatiques. Ann.Pharm. Franc, 1972, 30:611-
616
Bousmaha L, Boti JB, Bekkara FA, Castola V, Casanova J. Infraspecific
chemical variability of the essential oil of Lavandula dentata L. from Algeria.
Flavour and Fragrance Journal 2006, 21:368-372
Brning E. Lavendell (Lasea) gegen Angst? Arznei-telegramm, 2011,
42(3):31-32
Buch HO. Britrage zur Anaomie der Blattes pharmazeutisch gebrauchlicher
Labiatendrogen. Thesis, Basel, 1925, 85

34
Buchbauer G. ber biologische Wirkungen von Duftstoffen und etherischen
len, Wien.Med.Wochenschr., 2004, 154 (21-22):539-547
Burns EE, Blamey C, Ersser SJ, Barnetson L, Lloyd AJ. An investigation into
the use of aromatherapy in intrapartum midwifery practice. Journal of
Alternative and Complementary Medicine, 2000, 6:141-147
Butur V. Enciclopedie de etnobotanic romneasc, Ed. tiinific i
Enciclopedic Bucureti, 1979, 134
Capecka E., Mareczek A., Leja M. Antioxidant activity of fresh and dry herbs
of some Lamiaceae species. Food Chemistry, 2005, 93 (2):223-226
Carson CF, Mee BJ, Riley TV. Mechanism of action of Melaleuca alternifolia
(tea tree) oil on Staphylococcus aureus determined by time-kill, lysis, leakage,
and salt tolerance assays and electron microscopy. Antimicrobial Agents
Chemother. 2002, 48:1914-1920
Ciulei I, Grigorescu E, Stnescu U. Plante medicinale, fitochimie, fitoterapie,
Editura Medical, Bucureti, 1993, Vol. 2:78-86
Delaveau P, Guillemain J, Narcisse G, Rousseau A. Sur les proprietes neuro-
depressives de lhuile essentielle de lavande, 1989, CR Soc Biol 183:342348
Deutschmann F, Hohmann B, Sprecher E, Stahl E. Pharmazeutische Biologie,
Bd. 3, Drogenanalyse I: Morphologie und Anatomie, 3. Aufl., Gustav Fischer
Verlag, Stuttgart, S. 1992, 249
Ferreres F, Barberan FAT, Tomas F. Flavonoids from Lavandula-Dentata.
Fitoterapia, 1986, 57:199200
Fessler B. Neues Phyto-Anxiolytikum: Standardisiertes Lavendell gegen
Unruhe bei Angst. D.A.Z, 2010, 150 (2):160-161
Fessler B. Spezielles Lavendell gegen Angstsymptomatik. Arzte Zeitung,
2010, 29 (12):2-4
Gren A, Topu G, Bilsel G, Bilsel M, Aydomus Z, Pezzuto JM. The
chemical constituents and biological activity of essential oil of Lavandula
stoechas ssp. stoechas. Z. Naturforsch C. 2002, 57(9-10):797-800
Grigorescu E, Lazr M, Stnescu U, Ciulei I, Index Fitoterapeutic, ed. a II-a,
Ed. Cantes, Iai, 2001
Grinescu I. Despre speciile de Lavandula culivat n R.P. Romn i imporana
lor economic. Acta Boanica Horti, Bucureti, 1963, fasc. I:257-265
Hncianu M, Poiat A, Robu S, Gille E, Aprotosoaie C, Tuchilu C, Cioanc
O, Stnescu U. Antibacterial coactions between Lavandulae aetheroleum and
selected antibiotics. Abstracts - 7th joint meeting of AFERP, ASP, GA, Atena
Grecia, 03-08 august, 2008.
Hncianu M, Robu S, pac AF, Dorneanu V, Aprotosoaie AC, Cioanc O,
Miron A, Stnescu U. Contribuii la studiul unor uleiuri volatile obinute din

35
flori de Lavandula sp. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iai 2008, 112 (2),
1/supl, 262-266, ISSN 0048-7848.
Hassiotis CN, Tarantilis PA, Daferera D, Polissiou MG. Etherio, a new variety
of Lavandula angustifolia with improved essential oil production and
composition from natural selected genotypes growing in Greece. Industrial
Crops and Products, 2010, 32:7782
Hassiotis CN. Chemical compounds and essential oil release through
decomposition process from Lavandula stoechas in Mediterranean region.
Biochemical Systematics and Ecology, 2010, 38:493501
Heywood VH., Richardson IBK. Labiatae n Flora Europaea, Cambridge
University Press, Cambridge, 1972, 3:126-192
Ionic V. Contribuii la studiul speciilor de Lavandula cultivat la noi n ar: L.
angusifolia Mill. i hibridul su lavandin. Rezumatul tezei de doctorat, I.M.F.
Bucureti, 1973
Istudor V. Farmacognozie, Fitochimie, Fitoterapie, vol. I, Ed. Medical,
Bucureti, 1998
Joachimsthaler S. Lavendel, Bluten die beruhigen und erfrischen. PTA heute,
2007, 21 (13-14):68-69
Kasper S, Gastpar M, Mller WE, Volz HP, Mller HJ, Dienel A, Schlfke S.
Efficacy and safety of silexan, a new, orally administered lavender oil
preparation, in subthreshold anxiety disorder - evidence from clinical trials.
Wien Med Wochenschr, 2010, 160(21-22):547-556
Kasper S, Gastpar M, Mller WE, Volz HP, Mller HJ, Dienel A, Schlfke S.
Silexan, an orally administered Lavandula oil preparation, is effective in the
treatment of subsyndromal anxiety disorder: a randomized, double-blind,
placebo controlled trial. International clinical psychopharmacology, 2010,
25:277-287
Kienholz M. Studies on the antibacterial action of ethereal oils. Arzneimittel-
Forschung/Drug Research, 1959, 9, 51921.
Kim JT, Wajda M, Cuff G. Evaluation of aromatherapy in treating
postoperative pain: pilot study. Pain Pract. 2006, 6(4):273-277
Lalande B. Lavender, lavandin and other French oils. Perf. Flav.1984, 8, 117
21
Langer R. Grunes fur die Nerven, Foliaca, 2006, 10 (3):4-6
Lawrence BM. Chemical components of Labiatae oils and their exploitation.
In: Harley RM., Reynolds T. (eds), Advances in Labiate Science, Royal
Botanic Gardens, Kew, 1992, 399436
Lee C-J, Chen L-G, Chang T-L, Ke W-M, Lo Y-F, Wang C-C. The correlation
between skin-care effects and phytochemical contents in Lamiaceae plants.

36
Food Chemistry, 2011, 124:833841
Linck VM, Da Silva AL, Figueir M, Caramo EB, Moreno PRH, Elisabetsky
E. Effects of inhaled linalool in anxiety, social interaction and agressive
behaviour in mice. Phytomedicine, 2010, 17(8-9):679-83
Lis-Balchin M, Hart S. A preliminary study of the effect of essential oils on
skeletal and smooth muscle in vitro. J. Ethnopharmacol. 1997, 58:183-187
Lis-Balchin M, Hart S. Studies on the mode of action of the essential oil of
lavender (Lavandula angustifolia P.Miller). Phytother.Res. 1999, 13(6):540-
542
Lis-Balchin M. (eds.). Lavender- the genus Lavandula. Taylor&Francis,
London, 2002
Litvinenko VI, Popova TP, Simonjan AV, Zoz IG, Sokolov VS. ["Tannins"
and derivatives of hydroxycinnamic acid in labiatae]. Planta Med. 1975,
27(4):372380
Martinou E., Hancianu M., Robu S., Tzakou O. The essential oil composition
of some Lavandula species grown in Romania. Planta Med. 2010, 76(12),
1200, ISSN 0032-0943
Mayr O. Montavit, Phytotherapie Austria, 2010, 4 (1), 10-11
Miron A, Stnescu U. Antioxidanii naturali-ntre medicament i aliment.
Editura Gr.T.Popa, Iai, 2003
Motomura N., Sakurai A., Youtsuya Y. Reduction of mental stress with
lavender odorant. Percept Mot Skills, 2001, 93(3):713-718
Nakane H , Asami O, Yamada Y, Harada T, Matsui N, Kanno T, Yanaihara N.
Salivary chromogranin A as an index of psychosomatic response. Biomed. Res.
1998, 19:401-406
Napp-Zinn KL. Anatomie des Blattes II. Angiospermen. In Handbuch der
Pflanzenanatomie, Gebruder Borntrarger, Berlin, Stuttgart, 1973-1974, Bd.
VIII, A1-2
Ognyanov I. Bulgarian lavender oil and Bulgarian lavandin oil. Perf. Flav.
1984, 8, 2941
Papanov GY, Malakov P, Tomova K. Triterpenoids from Lavandula vera.
Nauchni Tr.-Plovdivski, 1984, 22:213220
Peana AT, DAquila PS, Panin F, Serra G, Pippia P, Moretti MDL. Anti-
inflammatory activity of linalool and linalyl acetate constituents of essential
oils. Phytomedicine. 2002, 9:721-726
Robert Shellie, Mondello L, Marriott P, Dugo G. Characterisation of lavender
essential oils by using gas chromatographymass spectrometry with
correlation of linear retention indices and comparison with comprehensive
two-dimensional gas chromatography Journal of Chromatography A, 2002,
970 (1-2): 225-234

37
Robu S, Aprotosoaie AC, Spac A, Cioanc O, Hancianu M, Stnescu U.
Cercetari privind compozitia chimica a uleiurilor volatile extrase din flori de
levantica. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iai 2011, 115 (2):584-589, ISSN
0048-7848
Robu S, Aprotosoaie C, Hancianu M, Trifan A, Cioanca O, Spac A, Stnescu
U. Contributii la studiul fitochimic al inflorescentelor unor varietati de
Lavandula. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iai 2009, 113 (2), 4/supl:375
381, ISSN 0048-7848
Robu S, Gales R. Toma C, Stnescu U. Cercetari histo-anatomice privind
doua subspecii de Lavandula angustifolia Mill. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat.
Iai 2011, 115 (1):232-236, ISSN 0048-7848
Saddiq AA, Khayyat SA. Chemical and antimicrobial studies of monoterpene:
citral, Pesticide Biochemistry and Physiology. 2010, 98:89-93
Schongrunder C. Lavendell. Aromatherapeutische Anwendung im
Aufwachranm. Z. Phytother, 2011, 32 (2):82-83
Stnculescu M. Cercetri farmacognostice asupra uleiului volatile de levnic
(Aetheroleum lavandulae FR IX) obinut n ara Brsei. Rezumatul tezei de
doctorat, IMF Trgu-Mure, 1979
Stnescu U, Hncianu M, Miron A, Aprotosoaie C. Plante Medicinale de la A
la Z; Monografii ale produselor de interes terapeutic, Ed. Gr.T. Popa, Iai,
2004, vol.II:341-345
Thrupp LD. Susceptibility testing of antibiotics in liquid media, In: Larian V
(eds.), Antibiotics in Laboratory Medicine. Williams JD and Wilkins, London,
1981, 73-113
Toda M, Morimoto K. Effect of lavender aroma on salivary endocrinological
stress markers. Archives of oral biology , 20 0 8, 53: 9 6 4 9 6 8
Toma C, Ni M. Observaii histo-anatomice asupra unor clone de levnic
(Lavandula angustifolia Mill.). Analele t. Univ. Iai, 1982, s. II-a (Biol.),
28:23-27
Toma C, Rugin R. Anatomia plantelor medicinale. ATLAS. Edit. Academiei
Romne, Bucureti, 1998
Ulubelen A, Olcay Y. Triterpenoids from Lavandula stoechas L. subsp.
stoechas. Fitoterapia. 1989, 60:475476
Umezu T, Nagano K, Ito H, Kosakai K, Sakaniwa M, Morita M. Anticonflict
effects of lavender oil and identification of its active constituents. Pharmacol
Biochem Behav, 2006, 85(4), 713-721
Upson TM, Grayer RJ, Greenham JR, Williams C, Ghamdi F, Chen F-H. Leaf
flavonoids as systematic characters in the genera Lavandula and Sabaudia.
Biochemical Systematics and Ecology, 2000, 28(10):991-1007
Vakilian K, Atarha M, Bekhradi R, Chaman R. Healing advantages of

38
lavender essential oil during episiotomy recovery:A clinical trial.
Complementary Therapies in Clinical Practice, 2011, 17:50-53
Valnet J, Duraffoud Ch, Duraffoud P, Lapraz J-Cl. L'aromatogramme:
Nouveaux resultats et essai d'interpretation sur 268 cas cliniques. Plantes
Medicinales et Phytotherapie, 1978, 12:43-52
Venskutonis R, Poll L, Larsen M. Influence of drying and irradiation on the
composition of volatile compounds of thyme (Thymus vulgaris L.). Flavour
and Fragrance Journal. 1996, 11 (2):123-128
Vernet-Maury E, Alaoui-Ismaili Q, Dittmar A, Delhomme G, Chanel J. Basic
emotions induced by odorants: a new approach based on autonomic pattern
results. J Autonomic Nervous System, 1999, 75:176-183
Waterworth PM. Tests of combined antibacterial action. In: Laboratory
methods in antimicrobial chemotherapy. Reevesv DS, Phillips J, Williams JD,
Wise R. (eds.), London, Churchill Livingstone, 1978, 41-49
Werner M, Braunschweig R. Praxis Aromatherapie, K.F. Haug, Stuttgart,
2006, 124-131
Woelk H, Schlfke S. A multi-center, double-blind, randomised study of the
Lavender oil preparation Silexan in comparison to Lorazepam for generalized
anxiety disorder. Phytomedicine, 2010, 17:94-99
Yang Z, Xi J, Li J, Qu W. Biphasic effect of citral, a flavouring and scenting
agent, on spatial learning and memory in rats. Pharmacology, Biochemistry
and Behaviour. 2009, 93:391-396
Yip YB, Tse SH-M. An experimental study on the effectiveness of acupressure
with aromatic lavender essential oil for sub-acute, non-specific neck pain in
Hong Kong. Complementary Therapies in Clinical Practice, 2006, 12:1826
Zuzarte MR, Dinis AM, Cavaleiro C, Salgueiro LR, Canhoto JM. Trichomes,
essential oils and in vitro propagation of Lavandula pedunculata (Lamiaceae).
Industrial Crops and Products, 2010, 32:580587

39
 LUCRRI PUBLICATE IN EXTENSO
DIN TEMATICA TEZEI DE DOCTORAT
n reviste B+
1. Robu S, Aprotosoaie AC, Spac A, Cioanca O, Hancianu M, Stanescu
U. Cercetari privind compoziia chimic a uleiurilor volatile extrase din
flori de levnic. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iai 2011, 115 (2),
584-589, ISSN 0048-7848
2. Robu S, Gales R, Toma C, Stanescu U. Cercetari histo-anatomice
privind doua subspecii de Lavandula angustifolia Mill. Rev. Med. Chir.
Soc. Med. Nat. Iai 2011, 115 (1), 232-236, ISSN 0048-7848.

n reviste B (suplimente ale unor reviste cotate B+)

1. Robu S., Aprotosoaie C., Hancianu M., Trifan A., Cioanca O., Spac
A., Stanescu U. Contributii la studiul fitochimic al inflorescentelor unor
varietati de Lavandula. Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iai 2009, 113
(2), 4/supl, 375 381, ISSN 0048-7848.
2. Hncianu M., Robu S., pac A. F., Dorneanu V., Aprotosoaie A. C.,
Cioanc O., Miron A., Stnescu U. Contribuii la studiul unor uleiuri
volatile obinute din flori de Lavandula sp. Rev. Med. Chir. Soc. Med.
Nat. Iai 2008, 112 (2), 1/supl, 262-266, ISSN 0048-7848.

REZUMATE PUBLICATE DIN TEMATICA TEZEI DE DOCTORAT

n reviste cotate ISI/indexate n baze de date
1. Martinou E., Hancianu M., Robu S., Tzakou O. The essential oil
composition of some Lavandula species grown in Romania. Planta
Med. 2010, 76(12), 1200, ISSN 0032-0943, ISI Master Journal List
(factor impact = 2,037).
2. Hncianu M., Poiat A., Robu S., Gille E., Aprotosoaie C.,
Tuchilu C., Cioanc O., Stnescu U. Antibacterial coactions between
Lavandulae aetheroleum and selected antibiotics. Abstracts - 7th joint
meeting of AFERP, ASP, GA, Atena Grecia, 03-08 august, 2008.

40