MAKALAH

KIMIA ORGANIK BAHAN ALAM LAUT

IDENTIFIKASI FILOGENETIK JAMUR TERISOLASI DARI SPONS

LAUT Tethya aurantium DAN IDENTIFIKASI METABOLIT SEKUNDER
Jutta Wiese, Birgit Ohlendorf, Martina Blumel, Rolf Schmaljohann dan Johannes
F. Imhoff *

OLEH :

KELOMPOK 8

FAUZIAH NUR USFA (H311 13 326)

SRI MAGFIRAH HS (H311 13 327)
RISMAULI SIMANJUNTAK (H311 13 504)
SRI WIDIASTUTI (H311 13 506)

JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2016
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kita ucapkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah

melimpahkan rahmat dan karunia-Nya serta taufik dan hidayah-Nya, sehingga

penulis dapat menyelesaikan penyusunan makalah ini yang berjudul Identifikasi

Filogenetik Jamur Terisolasi dari Spons Laut Tethya aurantium dan

Identifikasi Metabolit Sekunder (Dari jurnal marine drugs) oleh Jutta Wiese,

Birgit Ohlendorf, Martina Blumel, Rolf Schmaljohann dan Johannes F.

Imhoff. Makalah ini kami susun untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah

Kimia Organik Bahan Alam Laut.

Ucapan terima kasih kepada orang-orang yang telah membantu dalam

penyusunan makalah ini, sehingga penulis dapat menyelesaikan makalah ini tepat

pada waktunya. Ucapan terima kasih kepada Bapak/Ibu Dosen yang telah

membantu dalam penyusunan makalah ini.

Penulis menyadari tidak ada manusia yang sempurna. Penyusunan

makalah ini masih banyak kekurangan serta masih jauh dari kesempurnaan. Untuk

itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang mendukung dari para pembaca

untuk perbaikan dimasa yang akan datang. Akhir kata, penulis mohon maaf

apabila ada kesalahan dalam penulisan makalah ini. Semoga makalah ini dapat

bermanfaat bagi kita semua.

Makassar, 8 April 2016

Penulis
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Laut mencakup sekitar 70% dari permukaan bumi menyediakan
lingkungan hidup yang beragam untuk invertebrata. Oleh karena itu, produk alami
laut akan memainkan peran utama dalam penemuan obat di masa depan.
Pekerjaan pada produk alam laut mulai 59 tahun yang lalu ketika Bergman
menemukan novel bioaktif Arabino-nucleoside dari spons laut Cryptotethya
crypta. Penemuan ini mendorong produk alami kimia untuk memperhatikan
produk alami laut sebagai sumber biomedis penting. Untuk bertahan hidup di
lingkungan yang sangat kompetitif, invertebrata laut menghasilkan keragaman
yang luar biasa dari senyawa beracun yang ekstrim. Hal ini telah mendorong
kelompok penelitian untuk menyaring sampel kelautan di berbagai tes sitotoksik
(Chairman dkk, 2015).

Organisme laut yang mempunyai kandungan kimia terbanyak dihasilkan

oleh invertebrata laut disusul kemudian oleh tumbuhan laut. Kelompok yang
termasuk invertebrata laut antara lain: Spon laut (Filum Porifera), Hewan lumut
(Filum Bryozoa), Soft Coral (Filum Cnydaria) dan hewan bermantel (Filum
Tunicata) (Edrada, 2000). Spon laut diketahui memproduksi senyawa metabolit
sekunder yang aktif secara biologis. Spon laut juga dilaporkan menjadi tempat
hidup beberapa jenis bakteri dimana jumlahnya mencapai 40% dari biomassa spon
itu sendiri (Kanagasabhapathy,2005; Burgess, 1999).
Penemuan pertama senyawa yang bioaktif dari spon laut adalah senyawa
spongothymidine (ara-T) dan spongouridine (ara-U). Kedua senyawa ini diisolasi
dari spon laut Cryptothethya crypta dari laut Karibia pada awal tahun 1950.
Senyawa ini mempunyai aktifitas sebagai antivirus dan berperan penting menjadi
struktur model (lead structure) dalam proses sintesa ara-A dan ara-C. Ara-A
secara klinis berguna sebagai antivirus yang lebih dikenal dengan nama dagang
Acyclovir. Sedangkan ara-C (cytosine arabinosine) merupakan senyawa sintetik
yang secara klinis digunakan sebagai senyawa antikanker selama lebih kurang 15
tahun terakhir (Balzarini, 2001). Mengingat begitu potensialnya organisme laut
dan masih banyak organisme laut yang belum diteliti maka perlu dilakukan
penelitian terhadap kandungan senyawa kimia dan bioaktifitasnya.
Sampel spon laut Tethya aurantium diisolasi dan diidentifikasi dengan
kriteria morfologi dan analisis filogenetik berdasarkan internal transcribed spacer
(ITS). Mereka dievaluasi sehubungan dengan profil metabolit sekunder. Di antara
81 isolat yang ditandai, anggota dari 21 genera telah diidentifikasi. Beberapa
genera seperti Acremonium, Aspergillus, Fusarium, Penicillium, Phoma, dan
Trichoderma cukup umum, tapi strain yang tergolong genera juga diisolasi seperti
Botryosphaeria, Epicoccum, Parasphaeosphaeria, dan Tritirachium. Berdasarkan
klasifikasinya, strain dipilih untuk menganalisis kemampuannya dalam
menghasilkan produk-produk alami. Selain sejumlah senyawa yang dikenal,
beberapa produk alami baru diidentifikasi. scopularides dan sorbifuranones telah
dijelaskan di tempat lain. Dalam jurnal ini telah mengisolasi empat zat tambahan
yang belum dijelaskan sejauh ini. Metabolit cillifuranone baru (1) diisolasi dari
Penicillium chrysogenum ketegangan LF066. Struktur cillifuranone (1) telah
ditetapkan berdasarkan 1D dan 2D NMR analisis dan ternyata menjadi perantara
yang sebelumnya disebutkan dalam biosintesis sorbifuranone. Hanya bioactivities
antibiotik kecil senyawa ini ditemukan sejauh ini.

1.2 Tujuan Penulisan

Tujuan dari makalah ini adalah :
1. Memberikan informasi mengenai identifikasi filogenetik jamur terisolasi
dari spons laut Tethya aurantium dan identifikasi metabolit sekundernya.

2. Mengetahui tentang senyawa metabolit sekunder yang berperan aktif

dalam Tethya aurantium
 BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1. Identifikasi Strain jamur Terisolasi dari T. aurantium

Dalam kebanyakan studi tentang jamur terkait dengan spons klasifikasi
taksonomi jamur itu secara eksklusif berbasis pada karakteristik morfologi dan
dalam banyak kasus identifikasi itu mungkin hanya pada tingkat genus [17]. Hal
ini dapat dikaitkan dengan fakta bahwa identifikasi taksonomi jamur pada tingkat
spesies tidak selalu mudah. Jamur ini diklasifikasikan sebagai "miselia sterilia".
Oleh karena itu, kriteria morfologi serta informasi urutan dan penentuan
hubungan filogenetik dianggap diperlukan untuk identifikasi jamur. Akibatnya,
kita telah menggabungkan karakterisasi morfologi dengan analisis berbasis PCR
menggunakan ITS1-5.8S-rRNA-ITS2 urutan gen untuk mengidentifikasi 81 jamur
diisolasi dari tethya aurantium. Berdasarkan kriteria tersebut alunan dapat
diidentifikasi untuk tingkat spesies (Gambar 1, Tabel 1).
Gambar 1. Mikrograf scanning elektron dari Fusarium sp. regangan LF236. (A)
multiselular, conidiospore melengkung; (B) eksudat pada lapisan permukaan cair;
(C) Interkalar chlamydospores di mycelium.

Tabel 1. Identifikasi strain jamur yang diisolasi dari sampel aurantium Tethya
berdasarkan kriteria morfologi serta analisis genetik dari internal transcribed
spacer (ITS).
3.2. Analisis Metabolit sekunder
Diperoleh berbagai strain dari berbagai kelompok filogenetik jamur untuk
diisolasi dan diidentifikasi metabolit sekundernya. Strain dipilih untuk mewakili
spektrum yang luas dari genera, perwakilan dari berbagai genera yang berbeda.
Metabolit yang dapat diidentifikasi oleh HPLC dengan DAD (UV) dan MS
tercantum dalam Tabel 2.
Tabel 2. Metabolit sekunder diidentifikasi dalam ekstrak jamur yang diisolasi dari
sponge Tethya aurantium.
 Penicillium strain LF066, penghasil dari cillifuranone, dibedakan untuk
identifikasi lebih lanjut. Dari strain yang sama, sorbifuranone B dan C serta 2 ', 3'-
dihydrosorbicillin telah dijelaskan oleh Bringmann et al. [31] dan itu jelas bahwa
potensi penuh strain belum dimanfaatkan. Analisis lebih lanjut menghasilkan
xanthocillines dan sorbifuranones dan isolasi sorbifuranone B, meleagrin,
roquefortin C, beberapa ergochromes serta cillifuranone baru (1) yang strukturnya
telah ditetapkan berdasarkan 1D dan 2D NMR eksperimen.

Gambar 3. Sistem spin disimpulkan dari 1H-1H spektrum Cosy (bold) dan dipilih

Cillifuranone (1) diuji dalam sebuah panel bioassays mengevaluasi

senyawa sehubungan dengan sitotoksik, antimikroba dan enzim aktivitas
penghambatan. Aktivitas yang sangat rendah hanya ditemukan terhadap
Xanthomonas campestris (24% penghambatan pertumbuhan) dan Septoria tritici
(20% penghambatan pertumbuhan) pada konsentrasi 100 pM.
Strain LF066 diidentifikasi sebagai Penicillium chrysogenum, spesies
yang dalam pengalaman kami sering menghasilkan metabolit yang berasal dari
sorbicillinol sebagai prekursor biosintesis (sorbicillinoids). Deteksi bisvertinolone
dan sorbifuranones dalam ekstrak jamur dengan pengalaman ini. substruktur
Furanone berlimpah dalam produk alami dan dapat ditemukan di metabolit dari
bakteri, jamur dan tanaman [42] dan mungkin adalah produk dari jalur biosintesis
yang berbeda [44-46]. Dari genus Penicillium sejumlah senyawa furanone
mengandung telah dijelaskan, termasuk molekul kecil sederhana seperti asam
penicillic, tetapi juga struktur cincin yang lebih kompleks seperti rotiorinols [47]
atau rugulovasines [48]. Dari strain Penicillium, terlepas dari sorbifuranones
disebutkan di atas, berkeleyamide D [49] dan asam trachyspic [50], kedua
senyawa spiro seperti sorbifuranone C, adalah contoh. Cillifuranone baru
merupakan substruktur dari sorbifuranones, meskipun dengan konfigurasi yang
berbeda dari ikatan rangkap eksosiklik, dan mewakili substruktur yang membuat
sorbifuranones unik di kelas senyawa sorbicillinoids. Baru-baru ini Bringmann et
al. [31] diterbitkan struktur dari sorbifuranones dan didalilkan 1 menjadi perantara
dalam biosintesisnya (Gambar 4) yang membuat isolasi 1 hasil yang sangat
menarik. Satu-satunya perbedaan antara didalilkan menengah dan struktur kita,
seperti disebutkan di atas, konfigurasi ikatan rangkap. Namun, dalam ekstrak
kasar strain, kami mendeteksi dua isomer dengan berat molekul yang sama dan
UV-spektrum yang sangat mirip, sehingga kita berasumsi bahwa kedua isomer
hadir, tapi setelah proses isolasi hanya E-isomer diperoleh, sehingga mungkin
konfigurasi disukai di bawah kondisi diterapkan.
Gambar 4. Biosintesis sorbifuranone A melalui reaksi Michael dari isomer dari
cillifuranone (1) dan sorbicillinol sebagai didalilkan oleh Bringmann et al.
(Dimodifikasi dari [31]).