Aplicacin de diferentes tipos de colorantes Mariela Gines Moreno Equipo 8

Los colorantes se utilizan ampliamente en bacteriologa para tincin y como indicadores, la

incorporacin de un colorante a un medio de cultivo con frecuencia lo torna selectivo. Tambin son las
primeras herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnstico de enfermedades
infecciosas. En la mayora de las ocasiones, para la observacin de los microorganismos, estos son
teidos, ya que de esta forma son ms fciles de visualizar y se puedes poner de manifiesto las
caractersticas diferenciales.
Las tcnicas de tincin de pueden clasificar por dos criterios:
Segn el procedimiento de coloracin.
a) Tcnica de inmersin: permite teir varias preparaciones a la vez; se realiza introduciendo la
extensin en el recipiente que contiene el colorante.
b) Tcnica de vertido: Se efectan por decantacin libre de colorantes y reactivos. Se distinguen
dos tipos: Tincin en condiciones normales y tincin en condiciones drsticas.
Segn su aplicacin
a) Tincin simple: utiliza un solo colorante, se tie el microorganismo entero con el propsito de
reconocer estructuras y morfologa se utilizan colorantes como: Azul de metileno, safranina,
fucsina fenicada Tortora,
b) Tincin diferencial o compuesta: Requiere ms de un colorante y pone de manifiesto algn
carcter propio
Tincin de Gram: Composicin de la pared celular de las bacterias, las bacterias G+ est
compuesta por varias capas de peptidoglicanos, las bacterias G-tienen una membrana externa
con un componente estructural nico que son los lipopolisacridos. Las bacterias G+ retienen
el cristal-violeta despus de la decoloracin y aparecen de color azul intenso (purpura), las
bacterias G-no son capaces de retener el cristal-violeta despus de la decoloracin y son
teidas de rojo con safranina.
Tincin acido alcohol resistencia (AAR): Se trata de un procedimiento de tincin diferencial,
conocido como mtodo de Ziehl-Neelsen, que tiene gran relevancia por su aplicacin clnica.
Permite poder distinguir aquellos microorganismos cuya coloracin resiste la accin de
alcoholes y cidos suaves (cido-alcohol resistente) de otros que no resisten la decoloracin
(no cido-alcohol resistente).
Tincin de esporas: Se suspende una bacteria del genero Bacillus, evidencia capsula incolora
en un contraste morado.
Tincin de flagelos: La observacin de flagelos en preparaciones teidas es muy difcil. Se debe
partir de cultivos jvenes (menos de 24 horas), sembrados en agar blando. Normalmente se
emplean tcnicas que engruesan los flagelos.
Tincin de cpsulas: Es una tincin negativa en donde vemos la cpsula no teida sobre un
fondo morado y se visualiza la bacteria en el centro de la cpsula, esta pude ser de
glicoprotenas o polisacridos.
Tinciones especiales:
Tincin negativa: Es una tcnica intermedia entre las tinciones, observacin en fresco, ya que
carece de etapas de fijacin y coloracin. Para su realizacin se requiere un colorante acido,
que o tie las bacterias por su carga global negativa; estas se observan sin teir, mientras que
aparece coloreado el fondo de la preparacin.
Bibliografa
Koneman E. Diagnstico microbiolgico. 6a ed. Mxico DF: Editorial Mdica Panamericana S.A.; 2006
Covadonga Vzquez,Ana Martn, M Isabel de Silniz, Susana Serrano,
Departamento de Microbiologa III. Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad Complutense.Madrid.(2010).
Tcnicas bsicas de Microbiologa, Observacin de bacterias.
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