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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE CHOTA

BIOLOGA
PRCTICA N04: PROTENAS
I. INTRODUCCIN:
En este trabajo desarrollaremos el tema respecto a las protenas que estn
presentes en todos los seres vivos y es un principal componente de las
clulas animales y vegetales; para esto hemos desarrollado una prctica de
laboratorio en la cual mediante materiales biolgicos como la clara de
huevo, leche, gelatina liquida, etc; hemos obtenido protenas de acuerdo a
cada experiencia.
Las protenas desempean el mayor nmero de las funciones de las clulas
de todos los seres vivos. Forman parte de su estructura bsica de los
tejidos y desempean funciones metablicas y reguladoras tambin son
seres vivos que definen la identidad de cada ser vivo, ya que son la base de
la estructura del cdigo gentico ADN.
Las protenas son biomolculas formadas por cadenas lineales de
aminocidos.
Por sus propiedades fsico-qumicas, las protenas se pueden clasificar en
protenas simples, protenas conjugadas, y protenas derivadas.
Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que
destacan: Estructural, Inmunolgica, Enzimtica, Contrctil, Homeosttica.
Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados
los genes que las codifican. El conjunto de las protenas expresadas en una
circunstancia determinada es denominado proteoma.
II. OBJETIVOS
Identificar el efecto de la temperatura, pH, metales pesados, iones y
solventes orgnicos en la desnaturalizacin de protenas.
Identificar la presencia de protenas en compuestos orgnicos.
Identificar la presencia de aminocidos en sustancias comerciales.
Identificar el papel de las protenas como tampn o buffers.

III. MARCO TERICO.

3.1 Concepto Las protenas son biomolculas orgnicas formadas por C,


H, O, N y en menor medida P y S y otros elementos (Fe, Cu, Mg). Son
polmeros no ramificados de aminocidos que se unen mediante enlaces
peptdicos. Son las molculas orgnicas ms abundantes en los seres
vivos. Su importancia radica en la variedad de funciones diferentes que
pueden desempear.

3.2 Clasificacin de las protenas. Las protenas se clasifican en dos


clases principales atendiendo a su composicin. Las protenas simples u
holoprotenas son las que estn compuestas exclusivamente por
aminocidos. Las protenas conjugadas o heteroprotenas son las que
estn compuestas por aminocidos y otra sustancia de naturaleza no
proteica que recibe el nombre de grupo prosttico. Las protenas
conjugadas pueden a su vez clasificarse en funcin de la naturaleza de su
grupo prosttico. As, se habla de glucoprotenas, cuando el grupo
prosttico es un glcido, lipoprotenas cuando es un lpido, metaloprotenas
cuando es un ion metlico, fosfoprotenas cuando es un grupo fosfato, etc.

Otro criterio de clasificacin de las protenas es la forma tridimensional de


su molcula. Las protenas fibrosas son de forma alargada, generalmente
son insolubles en agua y suelen tener una funcin estructural, mientras que
las protenas globulares forman arrollamientos compactos de forma globular
y suelen tener funciones de naturaleza dinmica.
3.3 Estructura de las protenas La funcin de las protenas est basada
en su estructura tridimensional (orientacin en el espacio de las cadenas
polipeptdicas). Existen 4 niveles de complejidad creciente y cada uno se
construye a partir del anterior: Estructura primaria, secundaria, terciaria y
cuaternaria.

3.3.1 Estructura primaria

Est constituida por la secuencia de aminocidos de la cadena


polipeptdica.

Las distintas protenas se diferencian por el nmero, tipo y orden en que se


encuentran los a, lo cual es consecuencia del mensaje gentico. Cualquier
alteracin en el orden de los a determina otra protena.

Esta estructura se mantiene por la rigidez de los enlaces peptdicos. Pero el


resto de los enlaces pueden girar libremente. La secuencia de a determina
los dems niveles estructurales al establecer un plegamiento tridimensional
especfico y se utiliza para estudios evolutivos.

3.3.2 Estructura secundaria

Es la disposicin espacial que adopta la secuencia de a debido a la


capacidad de giro de los enlaces. De los posibles plegamientos hay algunos
que dan lugar a estructuras estables y son los que se mantienen: La
estructura secundaria puede ser de dos tipos:

Hlice 2

Estructura 3 o en lmina plegada

3.3.3 Estructura terciaria

Es la disposicin espacial que adopta la secundaria al replegarse


adquiriendo una conformacin ms o menos redondeada.

En general, presenta hlice 2 en los tramos rectos y estructura 3 en las


dobleces.
La estructura terciaria se mantiene estable gracias a los siguientes enlaces:

Fuertes: Puentes disulfuro (S-S): Realizados entre dos grupos SH de dos


a cistena. Es covalente.

Dbiles: o Puentes de hidrgeno: entre aminocidos polares o


Interacciones inicas: entre radicales con cargas opuestas (a cidos y
bsicos) o Interacciones hidrofbicas: los a apolares se disponen en el
interior de la estructura o Fuerzas de Van der Waals.

3.3.4 Estructura cuaternaria

La presentan aquellas protenas que tienen ms de una cadena peptdica.


Cada cadena constituye una subunidad. La agrupacin de varias
subunidades forma un oligmero.

Los enlaces estabilizadores son los mismos que en la estructura terciaria,


aunque en general no covalentes.

Si estn formadas por dos subunidades se llaman dmeros: ej: 3- queratina.


Si estn formadas por tres subunidades se llaman trmeros: ej colgeno

Si estn formadas por cuatro subunidades se llaman tetrmeros: ej:


hemoglobina.

Si estn formadas por muchas subunidades se llaman polmeros: ej:


filamentos de actina

3.4 Propiedades de las protenas

Son substancias de elevado peso molecular y sus propiedades dependen


sobre todo de los radicales R libres y de que estos se puedan
interrelacionar con el medio.

3.4.1 Solubilidad

Debido a su gran tamao son insolubles en agua o se disuelven formando


coloides. Este es el caso de las protenas globulares cuyos radicales se
ionizan y establecen puentes de hidrgeno con el agua formando coloides.
Las fibrilares son insolubles.

3.4.2 Especificidad

Los glcidos y lpidos son los mismos en todos los seres vivos pero las
protenas son especficas de cada especie e incluso algunas de cada
individuo. Esta especificidad se basa en el plegamiento de la cadena
peptdica como consecuencia de su secuencia de a y esta es el reflejo de la
informacin gentica, ya que la sntesis de protenas est controlada por los
cidos nucleicos.

3.4.3 Desnaturalizacin

Es un cambio en la estructura tridimensional de la protena cuando se la


somete a cambios bruscos de PH, de temperatura, accin de rayos
ultravioletas, detergentes, cidos o bases fuertes, agitacin fuerte lo que
provoca la rotura de los enlaces con la consiguiente prdida de su
estructura y por tanto de su funcin. No afecta a la estructura primaria.

Si la desnaturalizacin es suave, al restablecer las condiciones iniciales


puede recuperar su estructura y a esto se le llama desnaturalizacin.

3.5. Clasificacin de las protenas

Se clasifican tomando como criterio su composicin, forma, estructura y


solubilidad.

3.5.1. Holoprotenas
Son protenas simples, compuestas nicamente por aminocidos.
Pueden ser: Protenas globulares, Protenas fibrilares, filamentosas o
escleroprotenas.
3.5.2 Heteroprotenas (protenas conjugadas)
Formadas por dos molculas:
Grupo proteico: una protena
Grupo prosttico: una molcula no proteica. Puede unirse mediante enlace
dbil o covalente.
3.6 Funciones de las protenas.
Estructural: Forman parte de la membrana celular, cilios y flagelos,
microtbulos, fibrillas contrctiles, Ejemplos: colgeno, gelatina,
glucoprotenas, queratinas.
Cataltica o enzimtica: Muchas son enzimas y catalizan reacciones
qumicas que son la base de la vida.
Reguladora u hormonal: Muchas son hormonas, cuya accin es
parecida a la de las enzimas pero en vez de ser local se realiza en
todo el organismo. Ejemplo: insulina, FSH,tiroxina.
Reserva: Como las albminas y la casena que actan como almacn
de aminocidos.
Defensiva: Las K-globulinas o anticuerpos actan defendiendo al
organismo de sustancias extraas.
Contrctil: Algunas como la actina y la miosina intervienen en la
contraccin muscular.
Transportadora: Pueden transportar distintos tipos de sustancias.
Ejemplo: la hemoglobina, citocromos, lipoprotenas.
Homeosttica: Algunas colaboran en mantener estables las
constantes del medio, como el PH y la concentracin osmtica.
IV. MATERIALES.

a) Materiales de laboratorio

Pipetas NaOH al 40%


Placas Petri HNO3
Gradilla Acetato de Pb
Tubos de ensayo Formol 10%
Alcohol al 75% Mechero
Agua destilada Balanza analtica
Placas Petri Reactivo de Biuret
HCl 10% Reactivo de Ninhidrina.

b) Material Biolgico: clara de huevo, leche, colapz, aji-no-moto, gelatina


lquida, queso, cabellos, uas, plumas, semillas y agua corriente.

V. EXPERIENCIAS
a) Experiencia N01: Accin de diversas sustancias sobre las protenas
En 6 tubos de ensayo colocar 1 ml de albmina o clara de huevo.
Luego agregar al:
Tubo N01: HCl 10%
Tubo N02: alcohol al 75%
Tubo N03: NaOH 40%
Tubo N04: Acetato de Pb 10%
Tubo N05: Formol 10%
Tubo N06: --------
A los 5 primeros tubos agitar y solo la muestra del tubo 6 llevar al fuego.
b) Experiencia N02: Reconocimiento de protenas en estado lquido.
Seleccionar 4 tubos de ensayo y agregar 2 ml de:
Tubo N01: leche
Tubo N02: colapz
Tubo N03: solucin de aji-no-moto
Tubo N04: gelatina en solucin
A cada tubo agregar 2 ml del Reactivo de Biuret.
Agitar y observar

c) Experiencia N03: Solubilidad de protenas en estado slido


En 6 tubos de ensayo colocar:
Tubo N01: 1 ml de albmina
Tubo N02: pedazo de queso
Tubo N03: cabellos
Tubo N04: uas
Tubo N05: plumas
Tubo N06: semillas
A cada tubo agregar HNO3 hasta que cubra las muestras.
Llevar a ebullicin.
Dejar enfriar a temperatura ambiente y agregar 1 ml de NaOH al 40%
Observar.

d) Experiencia N04: Reconocimiento de aminocidos usando Reactivo


de Ninhidrina.
Tomar 4 tubos de ensayo y agregar:
Tubo N01: 2 mL de leche
Tubo N02: 2 ml de solucin de aj-no-moto
Tubo N03: 2 ml de colpiz
Tubo N04: 2 ml de gelatina en solucin
A cada tubo agregar 0.5 ml del Reactivo de Ninhidrina.
Agitar y observar.
e) Experiencia N04: Protenas como tampones o buffers
Seleccionar 2 tubos de ensayo y agregar 3 ml de solucin:
Tubo N01: agua corriente
Tubo N02: clara de huevo
A cada tubo agregar dos gotas de indicador rojo fenol.
Anotar resultados.
VI. RESULTADOS Y CONCLUSIONES.
EXPERIENCIA N 01 Accin de diversas sustancias sobre las protenas
(desnaturalizacin de protenas)
MUESTRAS INICIALES
MUESTRA O
MS (+) (-)
COMPUESTO

HCl 10 % Positivo

Alcohol al
Positivo
75 %
2 ML de clara de
huevo NaOH 40% Positivo
1 ML de clara de huevo
Acetato de
Positivo
Pb 10%

Formol
Positivo
10%

CALOR Positivo

MUESTRAS FINALES
EXPERIENCIA N02: Reconocimiento de protenas en estado lquido.

MUESTRAS INICIALES

MUESTRA
(+) (-)
(2ML)
Leche Positivo

Colapz Positivo

Solucin de Aj- Positivo


no-moto
Gelatina en
Positivo
solucin
MUESTRAS FINALES
EXPERIENCIA N 03 Solubilidad de protenas en estado slido

MUESTRAS INICIALES

MUESTRAS (+) (-)

1 ml de Albmina Positivo

Queso Positivo

Cabellos Positivo

Uas Positivo

Plumas Negativo

Semillas Positivo
MUESTRAS FINALES

EXPERIENCIA N04 Reconocimiento de aminocidos usando Reactivo de


Ninhidrina
MUESTRAS INICIALES
MUESTRA (+) (-)

Leche Positivo

Aji-no-moto Positivo

Colapz Negativo

Gelatina Negativo

MUESTRAS FINALES
EXPERIENCIA N05 Protenas como tampones o buffers

MUESTRAS INICIALES

MUESTRA (+) (-)

Agua Corriente Negativo

Clara de huevo Positivo


MUESTRAS FINALES

Al finalizar la prctica N 4 del curso de biologa y al realizar debidamente


todas las experiencias llegamos a las siguientes conclucines:
Obtuvimos conocimiento sobre los diferentes tipos de protenas que
estn presentes en el ser humano y que cumplen funciones como
mantenimiento, crecimiento, reproduccin, etc.
Reconocimos los diferentes aminocidos presentes en cada
protena y la funcin que cumple cada uno de ellos.

VII. CUESTIONARIO
1. En qu consiste la desnaturalizacin de protenas?
La desnaturalizacin ocurre por ciertas condiciones fsicas y qumicas
llamadas factores desnaturalizantes; estos pueden ser la temperatura,
extremos del PH, accin de disolventes orgnicos.
La mayora de protenas se pueden desnaturalizar mediante un aumento de
la temperatura. La accin de de PH afecta a las protenas mediante la
accin de los iones H+ y OH- . La accin de disolventes orgnicos tales
como el alcohol y la cetona tiene que ver con la interaccin de estos y el
centro hidrfobo de las protenas, desorganizndolas.
2. Qu es una solucin tampn o buffers?
Es una mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido y su
base conjugada, es decir sales hidrolificamente activas. Tienen la propiedad
de mantener estable el PH de una disolucin frente a la adicin de
cantidades relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Es
importante en el laboratorio y en la industria.
3. Por qu las protenas son los constituyentes principales de la materia
viva?
Las protenas son constituyentes ms importantes de la materia viva, pues
no existe vida sin protenas, estoy en el 50% del peso de la clula, de all
en todos los fluidos corporales excepto la orina y la bilis; de all su nombre
que deriva de la palabra griega PROTEIOS qu significa primero.

4. Qu es un aminocido?
Son molculas nitrogenadas que contienen el grupo amino (-NH) y el grupo
carboxlico (-COOH) unidos a un carbono. El primero les confiere
propiedades bsicas y el grupo carboxlico le da propiedades de los cidos
orgnicos (molculas anfteras). Adems posee un grupo R (radical). En
los seres vivos adoptan carga elctrica, dependiendo del pH, llamndose
zwiteriones. Su frmula qumica es NH2CH2COOH y su masa es 75,07.
VIII. BIBLIOGRAFA

Carbajal Azcona., . (07 de 07 de 2007). Universidad Complutense de Madrid. Obtenido de


https://www.ucm.es/nutricioncarbajal/

Garca Fernndez , A. C. (2012). Biloelementos y Biomoleculas. Buenos Aires: B. D. Liceo N 6


Francisco Bauz .

JIMNEZ PREZ, G., & TUESTA CALDERN, N. (2015). Informe de practica de laboratorio.
Lambayeque-Peru

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