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del tracto
respiratorio
Actualizamos el tema 24
24
tema
Tcnicos Especialistas en Laboratorio del Servicio Andaluz de Salud
NDICE
1. Introduccin
4. Transporte
5. Conservacin
6. Anlisis macroscpico
7. Anlisis microscpico
Grmenes del tracto respiratorio
1. Introduccin
El tracto respiratorio comienza en la nariz y boca, extendindose a travs de la
nasofaringe hasta la traquea y pulmones. La traquea se divide en bronquios y stos
en bronquiolos finalizando en los alvolos pulmonares. Nuestro organismo est do-
tado de mecanismos de proteccin frente a infecciones, como mucus, pelo, pasajes
tortuosos, IgA secretora para impedir que posibles microorganismos alcancen los
pulmones (que en condiciones normales son estriles).
Los huspedes sanos presentan una flora continua en el tracto respiratorio supe-
rior que previene la colonizacin de posibles microorganismos patgenos, aunque
en determinadas circunstancias pueden provocar la enfermedad. En cambio, existen
otros microorganismos que, en caso de aislarse en tracto respiratorio se consideran
causantes de enfermedad.
2.1. Faringitis
La principal causa de faringitis es por Streptococcus pyogenes (grupo A). Otras
bacterias que pueden ocasionar esta patologa son: Streptococcus grupo C, G y
Corynebacterium haemolyticum.
El estudio de laboratorio incluye los mtodos para el diagnstico de Streptococ-
cus grupo A que sean sensibles ya que un nmero bajo de estas bacterias pueden
indicar infeccin, tambin se debe considerar la importancia de su deteccin por la
reemergencia de la fiebre reumtica aguda y la posibilidad de shock txico like.
El estudio de Neisseria meningitidis se realiza generalmente para estudios epide-
miolgicos.
El estudio de faringitis gonoccica debe ser solicitado en forma especfica por el
mdico.
Corynebacterium diphtheriae se debe buscar slo cuando se solicita expresamente.
FARIGITIS
(S. GRUPO A)
Hisotopo
PAS
Incubacin 35-37 C
18-24 h
Observacin - hemlisis
T. Gram
DIFTERIA
2 Hisopos
Silica gel
PAS
Agar sangre telurito
Incubar 35 C 18-24 h
Observacin colonias
T. Gram
FARINGITIS GONOCCICA
Hisopo
Amies Stuart
Transporte nutritivo
Thayer-Martin
35 C CO2 72 h
Observ. Colonias
ANGINA VINCENT
Hisopo
Gram
Grmenes del tracto respiratorio
BORDETELLA
PERTUSSIS
Aspirado nasofarngeo
Aspiracin
Cultivo
Sembrar inmediatamente
Regan-Lowe 35
Humedad
Hasta 7 das
Observacin colonias
T. gram
Diagnstico definitivo
Inmunofluorescencia
Serologa
N. MENINGITIDIS
PORTADORES
Nasofarngea
Sembrar en Thayer-Martin
35 Co2
24-48 h
Observacin colonias
T. de Gram
oxidasa
Diagnstico definitivo
Envo al laboratorio
HAEMOPHILLUS INFLUENZAE
Sembrar
Amies Stuart
Agar chocolate
Incubar 35 C CO2
18-24 h
Gram
Factores X y V
Oxidasa
b-lactamasa
Identificacin definitiva:
serologa
Grmenes del tracto respiratorio
2.2. Laringitis
En un 90% es de origen vrico, siendo el 10% restante debida a SBHA. En adultos
tambin puede ser causado por Moraxella catarrhalis. El diagnstico suele hacerse
por la clnica.
a) Laringitis aguda de etiologa viral.
b) Los cultivos bacterianos raramente son orientados excepto para descartar dif-
teria o infeccin estreptoccica (segn clnica).
2.3. Epiglotis
En nios ocasionada por H. influenzae tipoB y en adultos por SBHA y H. Influen-
zae. Es una infeccin peligrosa ya que puede ocasionar una obstruccin de vas
areas. En periodos de inmunosupresin puede verse favorecida la aparicin de
candidiasis oral (muguet), que podra extenderse y llegar a producir esofagitis.
2.4. Sinusitis
a) Sinusitis bacteriana causa por organismos comensales del tracto respiratorio
superior. Ej.: S. pneumoniae. H. influenzae, Neisseria, B. catarrhalis. S. aureus.
b) La muestra apropiada es el aspirado mediante jeringa de la cavidad sinusal. Se
realiza cultivo aerobio y anaerobio.
c) Rechazar lquidos de lavado o trulas de fosas nasales o nasofaringe, ya que
stas contienen mucha flora normal.
2.6. Traqueobronquitis
En nios es de etiologa vrica exclusiva, mientras que en adolescentes aparecen
tanto virus como M. pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, B. pertussi.
3.1. Introduccin
Las infecciones del TRI, es decir las que comprometen: trquea, bronquios, bron-
quiolos, alvolos y/o parnquima pulmonar, constituyen una de las primeras causas
de mortalidad infantil tarda y una de las primeras causas de muerte por enfermedad
nosocomial.
El diagnstico etiolgico de estas infecciones no es fcil debido a que la muestra
clnica necesariamente pasa a travs de la orofaringe, lugar donde se contamina con
numerosas especies bacterianas, salvo aquellas muestra obtenidas directamente de
la lesin.
C. pneumoniae.
Bordetella pertusis.
Micobacterium pneumoniae.
Neumona por aspiracin:
Peptoestreptococos sp.
Fusobacterium sp.
Enterobacterias.
Pseudomonas sp.
Bacterias relacionadas a neumona por aspiracin intrahospitalaria.
Acinetobacter sp.
Neumona nosocomial:
S. aureus.
S. pneumoniae.
Pseudomona aeruginosa.
Serratia marcescens.
Acinetobacter sp.
Infecciones de TRI nios:
Virus:
Virus de la influenza A v.
Virus Syncytial respiratorioi.
Human Metapneumovirus.
Varicella zoster.
Bacterias:
S. pneumoniae.
H. influenzae.
S. aureus.
K. pneumoniae.
Enterobacterias.
Anaerobios.
Microorganismos atpicos; micoplasmas, Legionella, Chlamydia, Coxiella Burnetti.
La patognesis de las infecciones del TRI se caracterizan por los diversos meca-
nismos del agente invasor para burlar las defensas del husped entre ellas:
Mecanismos para evitar la fagocitosis:
Produccin de cpsula (S. pneumoniae, H. capsulatum, Neumoniae, N. menin-
gitidis).
Produccin de toxinas (leucocidinas y citotoxinas por S. aureus).
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3.3.1. Esputo
Precauciones
Las muestras designadas como esputos, pocas veces contienen slo las secrecio-
nes de las vas respiratorias bajas, sino que con frecuencia se hayan contaminadas
por la saliva, secreciones naso-farngeas, bacterias o restos de alimentos.
El enjuague de la boca y limpieza de los dientes antes de la toma de muestra eli-
minar la mayora de estos contaminantes sin afectar el resultado analtico.
Para la mayora de los anlisis, las muestras de las primeras horas de la maana
son las mejores puesto que representan las secreciones pulmonares acumuladas
durante la noche.
Material
La muestra debe recogerse en un recipiente estril, desechable, de boca ancha
y con tapn. Si el paciente est hospitalizado se puede recoger en una placa Petri;
aunque sta cada vez se utiliza menos, es muy aconsejable para algunos anlisis,
como por ejemplo en la bsqueda de cuerpos extraos.
Si se recoge las secreciones de 24 horas se utiliza una copa graduada. No se debe
tomar muestra para anlisis microbiolgico de estas secreciones (24 horas).
La obtencin de la muestra no resulta muy complicada en adultos pero s en los
nios. Para su obtencin en nios pequeos o que no colaboran se utiliza varios
mtodos diferentes:
1. Se realiza un frotis nasofarngeo en los nios que sufren enfermedad bron-
quial, el cual se considerar representativo de los microorganismos patolgi-
cos bronquiales.
2. Mantener delante de la boca del nio una placa de petri y pedirle que tosa.
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4. Transporte
La muestra debe remitirse inmediatamente al laboratorio ya que no es aconseja-
ble guardarla ni refrigerarla, puesto que la citlisis es rpida.
5. Conservacin
Cuando la muestra se ha de enviar, se utiliza el bromuro de cetil- piridinium, que
permite la descontaminacin y la fluidez.
6. Anlisis macroscpico
b) Color
Normal
El color del esputo est determinado por las sustancias que contiene y con
qu frecuencia indica el proceso patolgico. La secrecin normal es trans-
parente e incolora.
Anormal
En condiciones patolgicas el esputo puede ser:
* Amarillo: nos indica que contiene una gran cantidad de clulas epitelia-
les y con frecuencia pus. Se observa en las bronquitis crnicas y en el
fumador.
* Marrn: el esputo herrumbroso de debe a la hemoglobina descompues-
ta. Se observa en la neumona producida por el neumococo o en la
gangrena pulmonar (o gaseosa).
* Rosado: aparece en el edema agudo de pulmn, un constipado comn
(debido a un golpe de tos fuerte se produce la rotura de algn vaso o
capilar sanguneo.).
* Rojo brillante: se denomina tambin hemoptisis; y se detecta en hemo-
rragia reciente, secundaria a diversas enfermedades como la tubercu-
losis o el cncer de pulmn. Siempre que en un paciente aparezca este
tipo de esputo es necesario averiguar la causa.
* Gris negruzco: aparece en cualquier tipo de neumoconiosis (silicosis,
siderosis, etc.)
c) Olor
Generalmente en los esputos normales y patolgicos no se detecta ningn
olor; pero si se ha producido una descomposicin bacteriana tanto dentro del
cuerpo como despus de la expectoracin pueden presentar diferentes olo-
res. La gangrena pulmonar y los abscesos pulmonares pueden presentan un
olor putrefacto.
d) Masas gaseosas
Estn constituidas por fragmentos de tejido pulmonar necrtico, observado
principalmente en enfermedades como el cncer de pulmn, la gangrena pul-
monar y, a veces, en la tuberculosis.
e) Broncolitos.
Generalmente se forman por calcificacin del tejido infectado o necrtico en
el interior de un bronquio. Son ms frecuentes en el cncer de pulmn y en la
tuberculosis.
f) Tapones Dittrich.
Se observan a menudo en las bronquiectasias. A veces se expulsan por s so-
los al toser. Aparecen en forma de cuerpos amarillentos o grisceos que varan
de tamao desde la cabeza de un alfiler a un haba. Al aplastarlos y examinarlos
al microscopio se ve que estn compuestos de restos celulares, cristales de
cido y bacterias.
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g) Cuerpos extraos.
En algunos casos se pueden expulsar cuerpos extraos durante un ataque vio-
lentos de tos. En los nios pude ser cualquier objeto (botones, frutos secos...)
que se hayan llevado a la boca o inhalado. En adultos los cuerpos extraos
ms frecuentes son partculas de alimentos y contenido gstrico aspirados
durante convulsiones o anestesia quirrgica.
7. Anlisis microscpico
Los anlisis microscpicos ms frecuentes que se realizan en el esputo son: an-
lisis citolgico, y microbiolgico.
a) Anlisis citolgico
La muestra debe ser reciente para evitar la citlisis; a ser posible la obtencin de
la misma debe hacerse mediante broncoscopia, en especial para la determinacin
de clulas neoplsicas.
Las clulas que se analizan son:
Clulas neoplsicas.
Para la determinacin de tumores. El hallazgo de estas clulas es positivo en el
75% de los casos y permiten un diagnstico precoz del cncer. Teir la mues-
tra con el mtodo de Papanicolau.
Un aumento de clulas epiteliales nos indica infecciones del aparato respirato-
rio. Teir la muestra con Panptico rpido o Papanicolau.
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Clulas hemticas.
La determinacin de eritrocitos tiene importancia en las hemptisis; la de leu-
cocitos en todas las enfermedades infecciosas y la de eosinfilos en el asma
bronquial (alergias).
Como mtodo de tincin se utilizan: el mtodo Panptico, Giemsa, etc.
b) Anlisis Microbiolgico
Microscopia directa:
Para la determinacin de neumococos, estreptococos y estafilococos, teir la
muestra con la tincin diferencial de Gram. Su determinacin tiene importan-
cia para hallar el microorganismo patgeno especfico causante de las infec-
ciones del aparato respiratorio, en especial de la neumona.
El bacilo de Koch (B.K) tiene importancia para el diagnstico de la tuberculosis
pulmonar; el B.K presente en el esputo indica tuberculosis abierta. La tincin
utilizada es la de Ziehl.
Para determinar las micosis pulmonares, se puede analizar con tincin Gram
o preparar la muestra en fresco. Es necesario que el paciente adems de cepi-
llarse los dientes y enjuagarse la boca, realice gargarismos con Lugol (antimi-
ctico), para evitar la contaminacin con los hongos de la boca.
Para la determinacin del equinococo causante del quiste hidatdico, se hace
un examen en fresco. La presencia de los mismos en la muestra es un valor
importante para el diagnstico.
Cultivo:
El ms usual es el de Lowenstein para determinar el B.K.
Preparacin de la muestra
Homogeneizar: es necesario homogeneizar el esputo antes de la siembra.
Existen diferentes tcnicas. Una de las ms utilizadas es la fluidificacin del es-
puto con Fluimicil (expectorante) u otro mucoltico, agitacin y centrifugacin
de la muestra a poca velocidad y poco tiempo.
Descontaminar: es necesario mezclar igual volumen de reactivo de descon-
taminacin (contiene citrato sdico al 2,94 % e hidrxido sdico al 4%) que
esputo (a partes iguales). Agitar durante 20 segundos en Mixer y centrifugar
15 minutos a 4000 rpm (las revoluciones pueden variar en funcin del radio de
la centrfuga).
Sembrar dos tubos Lowenstein con tres gotas de la muestra (se puede recoger
en una jeringa). Tambin se siembra en agar sangre y agar chocolate. De la
muestra homogeneizada se puede utilizar para hacer un examen en fresco y
tincin para la microscopia directa del B.K.
Incubar: se incuba durante 8 semanas a 37 C.