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Primera edicin
First Edition
1. OBJETO
1.1 Esta norma establece los mtodos de ensayo para determinar el contenido de nitrgeno de
nitratos en el agua.
2. ALCANCE
2.1.2 Este mtodo determina el nitrgeno de nitratos en agua que contenga bajos contenidos de
materia orgnica; agua natural no contaminada, y la de suministros de agua potable.
2.1.3 Este mtodo no se recomienda para aguas que requieren una correccin significativa para
la absorbancia de la materia orgnica.
2.2.1 Este mtodo es aplicable para la determinacin de nitratos en aguas claras y residuales, en
los rangos de 0,01 a 1,00 mg/L de NO3- - N. Para concentraciones ms altas, diluir la muestra
con el fin de estar dentro del rango de sensibilidad del mtodo.
3. DISPOSICIONES GENERALES
3.1 Interferencias
3.1.1.1 Son fuentes de interferencia: la materia orgnica disuelta, los detergentes, el nitrito y el
cromo hexavalente.
3.1.1.2 Pueden interferir, algunos iones inorgnicos como cloritos y cloratos, los cuales
normalmente no se encuentran en el agua natural.
3.1.2.2 La presencia de hierro, cobre u otros metales, (en en concentraciones de varios mg/L),
disminuye la eficiencia de la reduccin de la muestra. Para eliminar esta interferencia se debe
aadir EDTA a las muestras y filtrar en una membrana de 0,45 m de dimetro de poro.
(Contina)
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DESCRIPTORES: Calidad del agua, examen del agua, determinacin de nitrgeno.
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NTE INEN 995 2013-06
3.1.2.3 Para remover los aceites y grasas, que cubren la superficie del cadmio, realizar una pre-
extraccin son un solvente orgnico.
3.1.2.4 Para eliminar el cloro residual, que puede interferir, oxidando la columna de cadmio y
reducir su eficiencia, aadir la solucin de tiosulfato de sodio (Na 2S2O3).
3.1.2.5 El color de la muestra tambin causa interferencia cuando se absorbe alrededor de 540
nm.
3.1.2.6 En presencia de nitritos (NO2-), realizar la correccin analizando la muestra sin el paso de
la muestra por la columna de cadmio.
3.2.1 Iniciar la determinacin de nitratos inmediatamente despus de tomar las muestras; caso
contrario, almacenar las muestras a 4 C hasta por 2 d; muestras desinfectadas son estables por
hasta 14 d sin acidificacin. Para perodos ms largos preservar la muestra con 2 cm 3 de cido
sulfrico concentrado (H2SO4) por litro y mantener a 4 C (ver NTE INEN 2169).
3.2.2 Si la muestra contiene nitritos, la preservacin con cido sulfrico puede causar la
conversin del HNO2 a NO3 y NO (xido ntrico). El NO puede es oxidado e hidrolizado a nitrato.
El contenido de nitratos puede resultar en la suma de nitratos y nitritos, por lo tanto, no se debe
acidificar las muestras para determinacin de nitratos.
0,004, 0,005 y 0,01, respectivamente. En un nico laboratorio, usando aguas residuales con
adiciones de 0,24; 0,55 y 1,05 mg de NO3 - N + NO2 - N/L, las recuperaciones fueron de 100
4.1 Resumen
4.1.2 La curva de calibracin para el NO3- sigue la ley de Beer hasta 11 mg/L de N.
4.1.3 Debido a que la materia orgnica tambin puede absorber a 220 nm y el NO 3- no absorbe
a 275 nm; se realiza una segunda medicin a 275 nm que se usa para corregir el valor de NO 3-
debido a que la materia orgnica tambin puede absorber a 220 nm y el NO 3 no absorbe a 275
nm.
4.1.4 El alcance de esta correccin emprica tiene relacin con la naturaleza y la concentracin
de la materia orgnica y puede variar de una muestra a otra.
4.1.6 La filtracin de la muestra se realiza para remover las posibles interferencias por partculas
en suspensin.
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4.2 Equipos
4.2.1 Espectrofotmetro para usar a 220 nm y a 275 nm, con celdas de silicio de 1 cm de
trayectoria de luz.
4.2.2.1 Membrana filtrante: de 0,45 m de dimetro de poro, y equipo adecuado para filtrar.
4.2.2.2 Papel filtro: lavado con cido, libre de cenizas, papel filtro fino suficientemente retentivo
para precipitados finos.
4.3 Reactivos
4.3.1 Agua libre de nitratos. Usar agua redestilada o destilada y desionizada de alta pureza para
preparar todas las soluciones y diluciones (ver nota 1).
4.3.2 Solucin patrn de nitrato. Secar nitrato de potasio, KNO3, en una estufa a 103 C por 24
h. Disolver 0,7218 g en agua y aforar a 1 litro. Conservar con 2 cm3 de CHCl3 por litro. Esta
solucin es estable por seis meses. 1 cm3 = 100 g de NO3 - N.
4.3.3 Solucin estndar de nitrato. Diluir 50 cm3 de la solucin patrn de nitrato (indicada en el
numeral 4.3.2) a 500 cm3 con agua; conservar con 2 cm3 de CHCl3 por litro.
1 cm3 = 10 g de NO3 - N.
4.4.1 Preparar la curva de calibracin del NO3- en el rango de 0 a 7 mg/L de NO3 - N (0 - 350
g/50 cm3 de NO3 - N).
4.4.2 Diluir a 50 cm3 los siguientes volmenes de la solucin estndar de nitrato (indicado en el
numeral 4.3.3): 0; 1,0; 2,0; 4,0; 7,0. 35,0 cm3.
4.4.3 Tratar los estndares de NO3- de la misma manera que las muestras.
4.5 Procedimiento
4.5.2 Medicin espectrofotomtrica. Usar agua redestilada para llevar a cero la absorbancia o a
100 % la transmitancia.
4.5.4 Usar una longitud de onda de 220 nm para obtener la lectura de NO 3 y a 275 nm para
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NOTA 1. Pureza de los reactivos. Todos los reactivos utilizados en esta norma deben ser productos qumicos con grado
analtico.
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4.6 Clculos
4.6.1 Correccin para materia orgnica disuelta. Para muestras y estndares restar dos veces la
absorbancia a 275 nm de la lectura a 220 nm para obtener la absorbancia debida al NO 3- (ver
nota 2).
5.1 Resumen
5.1.2 El NO2 producido es determinado por diazotacin con sulfanil amida y acoplamiento con
Dihidro Cloruro de N-(1- Naftil)-Etilen Diamina, para formar un compuesto altamente coloreado
que se mide colorimtricamente.
5.2 Equipos
5.2.1 Columna de vidrio para reduccin. Adquirase o constryase la columna (ver figura 1) a
partir de una pipeta aforada de 100 cm3 a la que se le quita la parte superior. Tambin se puede
fabricar con dos piezas tubulares unidas extremo contra extremo, nase 10 cm de tubo con
dimetro interno de 3 cm a 25 cm de tubo con 3,5 cm de dimetro interno. Adase una llave de
paso con vlvula de medida para controlar el flujo.
5.2.2.1 Espectrofotmetro, para usar a 543 nm, provisto de una celda con una trayectoria de luz
de 1 cm o mayor.
5.2.2.2 Filtro fotmetro, con una trayectoria de luz de 1 cm o mayor, y equipado con un filtro
que tenga la mxima transmitancia cerca de 540 nm.
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NOTA 2. Si el valor de correccin es mayor al 10 % de la lectura a 220 nm no se debe usar este mtodo.
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5.3 Reactivos
5.3.1 Agua libre de nitratos. Usar agua redestilada y desionizada, de la mxima pureza para
preparar todas las soluciones y diluciones. La absorbancia del blanco preparado con esta agua no
debe exceder de 0,01.
5.3.2 Grnulos de cobre-cadmio. Lavar 25 g de cadmio granulado, de 20 a 100 mesh, con HCl 6
N, y enjuagar con agua libre de nitratos. Aadir 100 cm 3 de solucin al 2 % de sulfato de cobre
(indicado en el numeral 5.3.7), agitar por 5 min o hasta que el color azul desaparezca
parcialmente, decantar y repetir la agitacin con una nueva solucin de sulfato de cobre hasta
que forme un precipitado coloidal de color caf. Cuidadosamente lavar con agua para remover
todo el cobre precipitado.
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5.3.3 Reactivo de color: Para preparar este reactivo, a 800 cm3 de agua, aadir 100 cm3 de
cido fosfrico al 85 % y 10 g de sulfanil amida; disolver completamente y adicionar 1 g de
dihidrocloruro de N (1 naftil) etiln diamina, mezclar y aforar a 1 litro con agua libre de
nitratos. La solucin es estable por un mes, almacenar en una botella de vidrio oscura y mantener
en refrigeracin.
5.3.4 Solucin de Cloruro de amonio - EDTA: Disolver 13 g de NH4Cl y 1,7 g de sal disdica de
EDTA en 600 cm3 de agua. Ajustar el pH a 8,5 con hidrxido de amonio concentrado, NH 4OH, y
aforar a 1 litro con agua libre de nitratos.
5.3.5 Solucin diluida de cloruro de amonio - EDTA: Diluir 300 cm3 de la solucin NH4Cl - EDTA
(indicado en el numeral 5.3.4) a 500 cm3 con agua libre de nitratos.
5.3.6 cido clorhdrico 6 N: Colocar 400 cm3 de agua libre de nitratos en un baln aforado de 1
litro, aadir 500 cm3 de HCl concentrado y aforar a 1 litro con agua.
5.3.8 Solucin patrn de nitrato: Secar nitrato de potasio, KNO3, en una estufa a 103 C por 24
h. Disolver 0,7218 g en agua y aforar a 1 litro. Preservar con 2 cm3 de CHCl3 por litro. Esta
solucin es estable por seis meses. 1 cm3 = 100 g de NO3 - N.
5.3.9 Solucin intermedia de nitrato: Diluir 50 cm3 de la solucin patrn de nitrato (indicada en el
numeral 5.3.8) a 500 cm3 con agua; preservar con 2 cm3 de CHCl3 por litro. 1 cm3 = 10 g de
NO3 - N.
5.3.10 Solucin patrn de nitrito: Disolver 1,232 g de nitrito de sodio, NaNO 2, en agua destilada
y aforar a 1 litro. Preservar con 1 cm3 de CHCl3 (ver Anexo A para estandarizacin de la solucin
patrn de nitrito). 1 cm3 = 250 g de N.
5.3.12 Solucin de trabajo de nitrito: Diluir 50 cm3 de la solucin intermedia de nitrito (indicado
en el numeral 5.3.11) a 500 cm3 con agua libre de nitrito. Preparar diariamente. 1 cm 3 = 5,0 g
de N.
5.3.13 Reactivo para remover la interferencia del cloro: Solucin de tiosulfato de sodio,
Na2S2O35H2O. Disolver 3,5 g de Na2S2O35H2O en agua libre de nitratos y aforar a 1 litro.
Preparar semanalmente. Usar 1 cm3 de este reactivo para remover 1 mg/L de cloro residual en
500 cm3 de muestra.
5.4.1 Usar la solucin intermedia de nitrato NO3- - N (indicado en el numeral 5.3.9), para preparar
los estndares en los rangos de 0,05 a 1,0 mg de NO 3- - N/L, diluyendo a 100 cm3 los siguientes
volmenes: 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 y 10,0 cm3. Tratar los estndares de la misma manera que las
muestras.
5.4.2 Comparar por lo menos un estndar de NO2- con un estndar de NO3- reducido, de la
misma concentracin, para verificar la eficiencia de la columna de reduccin.
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5.5 Procedimiento
5.5.1.1 Para muestras que tengan turbiedad, filtrar la muestra a travs de una membrana de
0,45 m de dimetro de poro.
5.5.1.2 Utilizando un medidor de pH, ajustar el pH entre 7 y 9 con HCl y NaOH diluidos.
Adicionar la solucin de NH4Cl - EDTA (indicado en el numeral 5.3.4) hasta obtener un pH de
8,5.
5.5.2.1 Colocar un tapn de lana de vidrio en la base de la columna y llenar con agua. Aadir
suficiente cantidad de grnulos de Cu-Cd hasta tener una altura de 18,5 cm.
5.5.2.2 Mantener el nivel de agua por encima de los grnulos de Cu-Cd para evitar que se quede
aire atrapado.
5.5.2.3 Lavar la columna con 200 cm3 de la solucin diluida de NH4Cl EDTA (indicado en el
numeral 5.3.5).
5.5.2.4 Activar la columna pasando 100 cm 3 de una solucin compuesta de: 25 cm3 de la
solucin patrn de nitrato (indicado en el numeral 5.3.8) 1 mg de NO3- - N/L y 75 cm3 de la
solucin diluida de NH4Cl EDTA, con un flujo de 7 a 10 cm3/min.
5.5.2.5 Si la columna no va a ser utilizada por varias horas, poner 50 cm 3 de la solucin diluida
de NH4Cl EDTA y pasar a travs del sistema.
5.5.2.6 Conservar la columna con la solucin diluida de NH4 EDTA y no permitir que se seque
hasta el siguiente anlisis.
5.5.3.1 A 25 cm3 de muestra o una alcuota diluida a 25 cm3, adicionar 75 cm3 de solucin
NH4Cl EDTA y homogenizar.
5.5.3.2 Poner la mezcla en la columna, descartar los primeros 23 cm3 y recolectar la muestra
reducida a un flujo de 7 a 10 cm3/min.
5.5.4.4 Realizar un blanco utilizando agua libre de nitratos y preparada de igual manera que las
muestras y los estndares.
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5.6 Clculos
5.6.1 Obtener una curva, graficando las absorbancias de los estndares frente a la concentracin
de NO3 - N.
5.6.3 Reportar como mg/L de nitrgeno oxidado (la suma de NO 3 - N + NO2 - N), a menos que
la concentracin de NO2 - N sea determinada por separado y restada del resultado obtenido.
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NOTA 3. Si la concentracin de NO3- excede el rango de la curva estndar (alrededor de 1 mg de Nitrgeno por litro),
usar el remanente de la muestra reducida y hacer una dilucin apropiada y repetir el anlisis.
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ANEXO A
A.1 Estandarizacin de la solucin patrn de nitrito. Usar agua destilada libre de nitritos para
preparar todos los reactivos y las diluciones.
A.1.1 Solucin patrn de nitrito: Utilizar nitrito de sodio (NaNO2) 99,8 %, grado reactivo; debido
a que el NO2- se oxida rpidamente en presencia de humedad, usar un frasco nuevo de reactivo
para preparar la solucin patrn y mantener el frasco hermticamente tapado cuando no est en
uso para evitar el ingreso de aire. Disolver 1,232 g de nitrito de sodio (NaNO2) en agua y diluir a
1000 cm3; 1 cm3 = 250 g N. Preservar con 1 cm 3 de CHCl3.
A.1.2 Solucin de oxalato de sodio, 0,05 N (0,025 M). Disolver 3,350 g de oxalato de sodio
Na2C2O4 grado reactivo, estndar primario, en agua y diluir a 1000 cm 3.
A.1.3 Solucin de Sulfato de amonio y hierro, 0,05 N (0,05 M). Disolver 19,607 g de sulfato de
amonio y hierro hexahidratado Fe (NH4)2(SO4)26H2O ms 20 cm3 de H2SO4 en agua y diluir a
1000 cm3. Estandarizar, esta solucin diariamente, con una solucin estndar de K2Cr2O7 0,05 N
(0,0417 M).
A.1.3.1 Solucin estndar de dicromato de potasio, 0,25 N (0,0417 M). Pesar 12,25 g de
K2Cr2O7 grado reactivo, estndar primario, previamente secado a 103 C durante 24 h, disolver
en agua destilada y diluir a 1 000 cm3. Diluir 10 cm3 de la solucin estndar de K2Cr2O7 a 100
cm3 aproximadamente; aadir 30 cm3 de H2SO4 concentrado y enfriar. Titular con la solucin de
Sulfato de amonio y hierro utilizando 2 3 gotas de indicador ferron.
V1
N = x 0,25
V2
En donde:
A.1.4 Solucin patrn de permanganato de potasio, 0,05 N (0,01 M). Disolver 1,6 g de
permanganato de potasio KMnO4 en 1000 cm3 de agua destilada. Mantenerlo en un frasco caf
con tapa de vidrio y dejarlo al menos una semana. Cuidadosamente decantar o pipetear el
sobrenadante, cuidando de no agitar el sedimento. Esta solucin se debe estandarizar
frecuentemente con el siguiente procedimiento:
a) Pesar con aproximacin a 0,1 mg varias muestras de 100 a 200 mg de oxalato de sodio
anhidro, Na2C2O4, dentro de un erlenmeyer de 400 cm3.
b) A cada erlenmeyer, en orden, adicionar 100 cm3 de agua destilada y agitar para disolver;
adicionar 10 cm3 de H2SO4 (1 + 1) y calentar rpidamente hasta alcanzar de 90 a 95 C.
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g Na2 C2 O4
M
( A B) x 0,33505
En donde:
M = Molaridad de KMnO4
A = cm3 de la solucin de permanganato de potasio utilizados en la titulacin del oxalato de
sodio
B = cm3 de la solucin de permanganato de potasio utilizados en la titulacin del blanco
A = [(B x C) - (D x E)] x 7
F
En donde:
h) Cada 1 cm3 de KMnO4 0,05 N consumido por la solucin de NaNO 2 corresponde a 1750 g
de NO2N.
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APNDICE Z
Norma Tcnica Ecuatoriana NTE INEN 2169 Agua. Calidad del agua. Muestreo. Manejo y
conservacin de muestras.
Standard Methods for the Examination of Water & Wastewater, 4500-NO3- B. Nitrogen (nitrate)
Ultraviolet Spectrophotometric Screening Method; 4500-NO3- E. Nitrogen (nitrate) Cadmiun
Reduction Method. APHA, AWWA, WEF 22nd edition. Baltimore, 2012.
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INFORMACIN COMPLEMENTARIA
Subcomit Tcnico:
Fecha de iniciacin: Fecha de aprobacin:
Integrantes del Subcomit Tcnico:
Otros trmites: Esta NTE INEN 995:2013 (Primera revisin), reemplaza a la NTE INEN 995:2003
La Subsecretara de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprob este proyecto de norma