Aplicacao de Ozonio e Ultrassom Na Desinfeccao Das Maos

1
Universidade Camilo Castelo Branco
Instituto de Engenharia Biomdica
TATIANE COSTA QUARESMA
APLICAO DE OZNIO E ULTRASSOM NA DESINFECO DAS

MOS DE PROFISSIONAIS DA SADE
APPLICATION OF ULTRASOUND IN OZONE AND DISINFECTION OF THE

HANDS OF HEALTH PROFESSIONALS
So Jos dos Campos, SP
2013
2
Tatiane Costa Quaresma
APLICAO DE OZNIO E ULTRASSOM NA DESINFECO DAS MOS DE

PROFISSIONAIS DA SADE
Orientadora: Profa. Dra. Adriana Barrinha Fernandes Moretti
Co-Orientador: Prof. Dr. Carlos Jos de Lima
Dissertao de Mestrado apresentada ao Programa de Ps-Graduao em

Bioengenharia da Universidade Camilo Castelo Branco, como complementao dos
crditos necessrios para obteno do ttulo de Mestre em Bioengenharia.
So Jos dos Campos, SP
2013
3
4
5
DEDICATRIA
Dedico este trabalho aos meus pais, que sempre me permitiram estudar mesmo diante de
todas as dificuldades por ns vivenciadas.
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AGRADECIMENTOS
A Deus que diante de toda minha caminhada esteve sempre me guiando e

iluminando, dando sabedoria para tomar decises e enfrentar problemas. Ele que
me acalmou, direcionou e me fez pr os ps no cho sempre que perdi meu rumo ou
direo. Ele que permitiu a concesso da Bolsa de Estudos para a realizao deste
sonho e que esteve ao meu lado em todos os contratempos passados em uma
cidade grande.
Aos meus pais Paula Costa e Jos Quaresma que se dedicaram a dar a melhor
educao aos seus filhos, deixando muitas vezes de viver plenamente a vida de
casal sempre permitindo boas escolas, livros e fardamento. A vocs que me deram a
vida com dignidade e que sempre estiveram ao meu lado nos momentos bons e
ruins que passei, fazendo diminuir meus anseios, medos e aflies. A vocs prometo
meu amor eterno!
Aos meus irmos Suellen Aguiar e Thiago Quaresma, cunhados Fbio Aguiar e
Suellem da Cruz e sobrinho Arthur Quaresma que me ajudaram direta e
indiretamente a alcanar essa conquista, me permitindo moradia, colo, conselhos,
amizade e muitos momentos de prazer e reflexo. Sem vocs tudo seria muito mais
difcil, perto de vocs sinto paz, amor e doao. Obrigada por cada palavra dita, por
cada momento vivido e por todas as vezes que enxugaram minhas lgrimas. Meu
amor eterno!
Aos meus afilhados Cau Lima, Arthur Quaresma e Roberta Macedo por
fazerem parte da minha vida e mostrar a importncia de viver, dar e deixar bons
exemplos. Um dia vocs entendero o porque deste momento de ausncia pelo qual
passamos neste ltimo ano.
Aos meus filhos caninos Wend, Pedrita, Mel e Ruck que ao longo destes dois
anos de tenso e estresse me proporcionaram momentos de intensa alegria e
satisfao. Que demonstram o amor verdadeiro e companheirismo e que me fazem
sentir ainda mais responsvel.
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Aos meus orientadores Prof. Dra. Adriana Fernandes Moretti Barrinha e Prof.
Dr. Carlos Jos de Lima, pelos ensinamentos, dedicao, pacincia, amizade,
carinho, conselhos. Que perceberam o momento delicado pelo qual passei no
decorrer do curso, mas que mesmo assim souberam me entender e estimular para o
trmino desta pesquisa. Obrigada pelos ralhos e tambm pelos elogios. Vocs foram
excelentes amigos e profissionais!
As Faculdades Integradas do Tapajs FIT que financiou juntamente com a
FIDESA este curso, me proporcionando aquisio de novos conhecimento e
estmulo pessoal para continuar almejando a subida de novos degraus. Estarei
sempre a disposio para dividir conhecimentos e contribuir no crescimento de
nossa instituio de ensino. Minha eterna gratido!
A Universidade do Estado do Par UEPA que permitiu alguns momentos de

ausncia para o alcance deste mrito. Aos meus alunos que entenderam a
necessidade de antecipar aulas em meio ao corre-corre da vida acadmica e aos
que contriburam diretamente para o desenvolvimento do meu trabalho, em especial
Greyce Nivea Viana, Clessya Eline Mota.
Aos amigos Jaciara, Ronald e Emanuel Pedra que me acolheram em sua casa e
me acalmaram frente as dificuldades desta longa jornada. Que foram meus pais,
irmos e confidentes, pois estiveram vivenciando meus problemas e me dando
conselhos. Que me permitiram momentos de muita alegria e paz. Minha amizade
eterna!
A amiga e cumadre Ana Emlia Gomes Macedo que desde a aprovao no

processo de seleo do mestrado me apoiou e se mostrou grande companheira e
parceira. Que tambm se fez presente em momentos de dificuldades. As situaes
vividas jamais sero esquecidas... aquela descida desesperada do morrinho em
frente a universidade para pegar o nibus pra Pinda, o tal Pssaro Marrom que
ningum sabia o que era, a descoberta que o suco do restaurante era grtis e tantas
outras histrias e momentos que passamos juntas. Voc me proporcionou muitos
momentos felizes, Te amo!
8
As minhas amigas do peito Leidiani Viana, Janilce Oliveira que me permitiram

momentos de intensa alegria e descontrao ao longo desta jornada, que estiveram
presentes em momentos nicos da minha vida, momentos de aflio, medo e
angstia. Tambm souberam entender meu afastamento em tantas horas e
momentos. Minha amizade eterna!
A todos os voluntrios que se propuseram a participar deste estudo, direta e

indiretamente, desde a confeco dos meios de cultura e esterilizao de gua bem
como na obteno das amostras biolgicas.
Aos Tcnicos em Enfermagem, Enfermeiros, Coordenadoras de Enfermagem e

Diretor do Hospital que me receberam muito bem e disponibilizaram o espao e
estrutura necessrias para o desenvolvimento desta pesquisa.
Agradeo tambm aos funcionrios da UNICASTELO Nidia Domingues e

Leandro Procpio, da FIT Karina Barbosa e Petra Sinara e da UEPA Lus
Afonso Leite que me socorreram em diversos momentos, e meus colegas, amigos
e familiares que contriburam de alguma maneira na realizao deste sonho e que
mesmo distante torceram por meu sucesso!
Muito Obrigada!
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EPGRAFE
Se voc quiser algum em quem confiar,

Confie em si mesmo!
Quem acredita sempre alcana!
(Mais uma vez Renato Russo)
10
APLICAO DE OZNIO E ULTRASSOM NA DESINFECO DAS

MOS DE PROFISSIONAIS DA SADE
RESUMO
As mos so a principal via de transmisso de microrganismos e possibilitam novos

casos de infeco hospitalar. A prtica da higienizao das mos de grande
importncia para eliminar microrganismos da pele, prevenir a propagao de
doenas, proteger-se contra as agresses do meio. Porm a problemtica est na
baixa adeso e negligncia dos profissionais na realizao dessa prtica. O gs
oznio apresenta caractersticas microbiocidas interessantes, capaz de agir sobre
um grande nmero de microrganismos, incluindo patgenos resistentes e no induzir
resistncia microbiana. Outro recurso disponvel o ultrassom cujos efeitos qumicos
e mecnicos so causados por bolhas de cavitao que provocam a morte
bacteriana. Tcnicas de utilizao de gua ozonizada, gs oznio e US foram
aplicadas na higienizao das mos. Amostras foram coletadas das regies digital,
palmar e ungueal da mo dominante, semeadas e incubadas. Anlise quantitativa
microbiolgica foi realizada, e os resultados evidenciaram significativa diminuio
dos microrganismos em cada tcnica separada. Todos os protocolos aplicados
desenvolveram ao redutora sobre a microbiota das mos. A tcnica com Gs
Oznio se mostrou mais eficiente para reduo, seguido da aplicao combinada do
Ultrassom com gua Ozonizada, Ultrassom com gua Estril e aplicao de gua
Ozonizada. Desta maneira, imperativo que novos estudos sejam realizados, pois
os protocolos que utilizaram o Oznio gasoso e US so muito promissores, uma vez
que foram capazes de reduzir eficientemente o nmero de UFCs mesmo nas regies
mais crticas, como a ungueal. Espera-se que futuramente novos protocolos que tem
como base estas tecnologias possam ter aplicabilidade no ambiente hospitalar.
Palavras-chave: higienizao das mos, protocolo de desinfeco, oznio e

ultrassom.
11
APPLICATION OF ULTRASOUND IN OZONE AND DISINFECTION OF

THE HANDS OF HEALTH PROFESSIONALS
ABSTRACT
Hands are the main route of transmission of microorganisms and possible new cases
of nosocomial infection. The practice of hand hygiene is very important to eliminate
microorganisms from the skin, preventing the spread of disease, protect themselves
against the aggressions of the environment. But the problem lies in poor adherence
and negligence of professionals in performing this practice. Ozone gas has
microbiocides interesting characteristics, is capable of acting on a large number of
microorganisms including pathogenic and resistant microbiana not induce resistance.
Another resource available is ultrasound whose chemical and mechanical effects are
caused by cavitation bubbles causing death bacteriana. Techniques using ozonated
water, ozone gas and U.S. were applied in hand hygiene. Samples were collected
from the digital palmar nail and hand dominant, seeded and incubated. Quantitative
microbiological analysis was performed, and the results showed a significant
reduction of microorganisms in each technique separately. All protocols applied
developed reductive action on the microbiota of hands. The technique with Ozone
Gas is more efficient to decrease, followed by the combined application of ozonated
water with Ultrasound, Ultrasound with Sterile Water and application of ozonated
water. Thus, it is imperative that further studies be conducted, because the protocols
that used ozone gas and U.S. are very promising, since they were able to effectively
reduce the number of CFU's even in the most critical regions, such as the nail. It is
expected that in the future new protocol which is based on these technologies may
have applicability in a hospital environment.
Key-words: hand hygiene, disinfection protocol, ozone and ultrasound.

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LISTA DE ABREVIATURAS
AMH Agar Mueller Hinton

ANVISA Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
Atm Atmosfera
CCIH Comisso de Controle de Infeco Hospitalar
CDC Centers for Disease Control and Prevention
CEP Comit de tica em Pesquisa
cm Centmetro
C Grau Celsius
Cxt concentrao x tempo
DBO Demanda Bioqumica de Oxignio
DQO Demanda Qumica de Oxignio
h horas
HPV Papilomavrus Humano
Hz Hertz
IH Infeco Hospitalar
kHz quilohertz
MS Ministrio da Sade
mL Mililitro
nm Nanmetro
O2 Oxignio
O3 Oznio
pH Potencial de Hidrognio
ppm Partculas Por Milho, Equivalente a mg/L
S. aureus Staphylococcus aureus

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TCLE Termo de Consentimento Livre e Esclarecido
UEPA Universidade do Estado do Par
UFC Unidades Formadoras de Colnias
US Ultrassom
UTI Unidade de Terapia Intensiva
UV Ultravioleta
W Watts
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LISTA DE ILUSTRAES
Figura 1. Estrutura bsica da pele ........................................................................ 23
Figura 2. Microbiota das mos de profissionais da sade..................................... 25
Figura 3. Mos de profissional da sade desencadeando Infeco cruzada........ 26
Figura 4. Mos de profissional da sade desencadeando infeco cruzada no

contato com paciente e dispositivos hospitalares.................................................. 27
Figura 5. Higienizao incorreta das mos............................................................ 27
Figura 6. Tcnica de higienizao simples das mos........................................... 29
Figura 7. Estrutura molecular do oznio................................................................ 33
Figura 8. Representao da formao de oznio por descarga eltrica............... 35
Figura 9. Mecanismo de ao do oznio nos microrganismos.............................. 38
Figura 10. Cavitao acstica................................................................................ 40
Figura 11. Regies de frequncia do som............................................................. 40
Figura 12. Insumos para preparao do meio de cultura...................................... 44
Figura 13. Meio de Cultura. A) Distribuio do meio de cultura em placas de petri. B)

Esterilizao com radiao ultravioleta.................................................................. 44
Figura 14. Regies da mo para obteno das amostras..................................... 45
Figura 15. Processo de higienizao e secagem das mos.................................. 45
Figura 16. Instrumentos utilizados para obteno das amostras.......................... 46
Figura 17. Obteno das amostras microbiolgicas.............................................. 46
Figura 18. Acondicionamento das placas semeadas em estufa............................ 47
Figura 19. Curva de extrapolao para ozonizao da gua................................ 48
Figura 20. Recipiente para aplicao do gs oznio na mo dominante.............. 49

15
LISTA DE TABELAS
Tabela 1. Relao da temperatura e da solubilidade do oznio em gua............. 36
Tabela 2. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de US nas

diferentes regies selecionadas............................................................................ 51
Tabela 3. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de gua

ozonizada nas diferentes regies selecionadas ................................................... 52
Tabela 4. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de US nas

diferentes regies selecionadas ........................................................................... 52
Tabela 5. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de US e gua

ozonizada nas diferentes regies selecionadas.................................................... 53
Tabela 6. Reduo do nmero de UFC antes e aps aplicao dos tratamentos com
gs oznio, combinao US/gua ozonizada e gua ozonizada, nas diferentes
regies selecionadas............................................................................................. 54
16
SUMRIO
1. INTRODUO................................................................................................... 18
1.1. Objetivo geral.............................................................................................. 22
1.2. Objetivos especficos ................................................................................. 22
2. REVISO DA LITERATURA.............................................................................. 23
2.1. A pele ......................................................................................................... 23
2.1.1. Aspectos microbiolgicos da pele ...................................................... 23
2.2. Higienizao das mos...............................................................................25
2.2.1. Importncia da higienizao das mos.......................................... 25
2.2.2. Tcnica recomendada pela ANVISA para higienizao
das mos.................................................................................................. 28
2.2.3. Produtos utilizados na higienizao das mos............................... 30
2.3. Oznio........................................................................................................ 32
2.3.1. O gs oznio................................................................................... 32
2.3.2. Gerao do gs oznio................................................................... 34
2.3.3. Solubilidade do gs oznio em meio lquido.................................. 35
2.3.4. Utilizao do oznio em processos de desinfeco....................... 36
2.3.5. Especificidade tcnica de concentrao e dose............................. 38
2.4. Ultrassom....................................................................................................39
2.4.1. Gerao de ondas ultrassnicas.................................................... 39
2.4.2. Utilizao do ultrassom em processos de desinfeco.................. 41
2.5. Uso combinado do oznio e ultrassom na microbiologia .......................... 42
3. MATERIAIS E MTODOS................................................................................. 43
3.1. Sujeitos da pesquisa...................................................................................43
3.2. Meio de cultura........................................................................................... 43
3.3. Obteno da amostra................................................................................. 44
3.3.1. Coleta das amostras....................................................................... 46
3.4. Ozonizao da gua................................................................................... 47
3.5. Aplicao de ultrassom com gua estril nas mos ..................................48
3.6. Aplicao de gua ozonizada nas mos.................................................... 48
3.7. Aplicao de gs oznio nas mos............................................................ 49
17
3.8. Aplicao combinada de gua ozonizada e ultrassom nas mos.............. 50

3.9. Anlise e apresentao dos dados............................................................ 50
3.10. Consideraes ticas............................................................................... 50
4. RESULTADOS................................................................................................... 51
4.1. Higienizao das mos a partir do ultrassom ............................................ 51
4.2. Higienizao das mos seguida da aplicao de gua ozonizada............ 51
4.3. Higienizao das mos seguida da aplicao de gs oznio.................... 52
4. 4. Higienizao das mos seguida da aplicao combinada do ultrassom e
gua ozonizada................................................................................................. 53
5. DISCUSSO...................................................................................................... 55
6. CONCLUSO.................................................................................................... 63
REFERNCIAS ....................................... 64
ANEXO A. Termo de Consentimento Livre e Esclarecido..................................... 75
ANEXO B. Termo de aprovao do projeto pelo Comit de tica em Pesquisa. 78

18
1. INTRODUO
A higienizao das mos um simples ato que deve ser obrigatrio a todos os
profissionais da sade e que deve ser realizado antes e aps o contato com
pacientes. Esta ao simples, pouco dispendiosa e segundo diversos estudos
reduzem riscos de transmisso de microrganismos. As infeces hospitalares (IH)
surgem por diversas razes e mecanismos que favorecem seu aparecimento. Um
deles a transmisso de microrganismos pelos profissionais da rea da sade, que
atuam como vetores, direta ou indiretamente, na transmisso de microrganismos
patognicos a pacientes vulnerveis (FELIX; MIYADAHIRA, 2009). Este um
problema mundial cuja preocupao transcende os rgos de sade e se caracteriza
como um problema de ordem social e tica (SOUSA; ALVES et al., 2008).
A problemtica se acentua devido assistncia sade no ambiente
hospitalar demandar aproximao fsica do profissional com os pacientes. As mos
so as estruturas corporais mais utilizadas no contato direto e se constituem no
principal veculo de transmisso de microrganismos (CRUZ et al., 2009). Devido a
sua extenso, a pele exposta a diversos microrganismos do meio ambiente. Para
que ocorra esta transmisso, as infeces hospitalares contam com trs elementos
necessrios: fonte de infeco; hospedeiros susceptveis e as mos dos
profissionais de sade, causando, assim, mltiplos tipos de infeco (FONSECA;
SILVA, 2006).
O ambiente hospitalar deveria ser promotor da sade, portanto, cada vez
mais preocupante aos seus profissionais que tm suas atenes voltadas para o
controle de infeco, pois ponto primordial entre todos os profissionais de sade,
passando a ser integral e constante nas aes e procedimentos realizados pela
enfermagem (SANTOS, 2008). Acredita-se que uma proporo considervel de IH
possa ser evitada sendo destacada como medida fundamental, nesse aspecto, a
eficcia da higienizao das mos (OLIVEIRA et al., 2007).
A literatura destaca que a infeco cruzada uma importante fonte de surtos
de infeco relacionada assistncia sade. Indiretamente, mesmo sem a
comprovao da colonizao das mos dos profissionais de sade, j havia sido
demonstrado que a baixa adeso higienizao das mos era uma das causas dos
19
surtos de colonizao e infeco por Staphylococcus aureus (S. aureus) (WANG et

al., 2001; WEBER et al., 2002).
Esta simples prtica de higienizar as mos permite reduzir significativamente
a transmisso de microrganismos bem como contribui na diminuio da incidncia
das infeces passiveis de preveno, reduzindo a morbi-mortalidade em servios
de sade (LARSON, 1988; NYSTRON, 1994; PITTET et al., 2000; BOYCE; PITTET,
2002; WHO, 2009; PRATT et al., 2001; PELLOWE et al., 2003; PRATT et al., 2007).
So conhecidos trs elementos principais na preveno a transmisso de
microrganismos pelas mos: agente tpico com eficcia antimicrobiana;
procedimento adequado ao utiliz-lo (com tcnica adequada e no tempo
preconizado) e adeso regular no seu uso (nos momentos indicados) (ROTTER,
2004).
Segundo Larson (2004), a problemtica no processo de higienizao das
mos no a falta de bons produtos, mas sim a negligncia dos profissionais da
sade na realizao dessa prtica. Isso torna o problema maior, pois, o hospital
disponibiliza recursos para tal prtica e caso o profissional de sade no realize a
higienizao das mos por qualquer razo (falta de tempo, indisponibilidade de pia
ou produto), o resultado deixa a desejar, no importando quo eficaz seja o produto
na reduo microbiana das mos contaminadas.
Calil (2007) ratifica a importncia da higienizao das mos dizendo que esta
a medida mais importante de evitar a transmisso de microrganismos de um
paciente para outro; as mos devem ser lavadas antes e aps contato com
pacientes e aps contato com sangue, excrees e equipamentos ou artigos
contaminados. Os autores Couto, Pedrosa e Nogueira (1999), complementam que a
higienizao das mos deve ser um hbito entre os profissionais de sade. Porm o
profissional de sade deve higienizar as mos com a periodicidade recomendada na
tcnica, ou seja, antes e aps o contato com pacientes, aps o contato com sangue,
secrees, excrees, equipamentos contaminados, e antes e aps a retirada das
luvas, para evitar a contaminao ao iniciar o turno do trabalho, aps ir ao banheiro,
antes e depois das refeies, antes do preparo e manipulao de medicaes e do
alimento (ANVISA, 2007).
A pretenso ao se higienizar as mos remover sujidades, eliminar o suor, a
oleosidade, os plos, as clulas descamativas e a microbiota da pele, interferindo na
transmisso de infeces veiculadas pelo contato; na preveno e na reduo das
20
infeces causadas pelas transmisses cruzadas (BOYCE; PITTET, 2002; BRASIL,

2007).
Todos os profissionais da sade devem higienizar suas mos, pois mantm
contato direto ou indireto com os pacientes, bem como os que atuam na
manipulao de medicamentos, alimentos e material estril ou contaminado (WHO,
2006). Essas orientaes so estendidas aos familiares, acompanhantes e
visitantes. A higienizao das mos antes e aps contato com o paciente, contribui
grandemente na reduo da IH. Isto reportado em muitos estudos, visto que este
pblico tambm pode promover a contaminao cruzada. Ainda existem nos
hospitais, falhas no processo de higienizao das mos, visto que o procedimento
geralmente deficiente e realizado por menos de 50% dos profissionais (MARTINS;
COSTA; TORTORA, 2005; KIM et al., 2008).
Em 1989, o Ministrio da Sade (MS) publicou no Brasil o manual Lavar as
mos: Informaes para profissionais de sade, com objetivo de orientar estes
quanto s normas e procedimentos de lavagem das mos com vistas na preveno
e controle de infeces. A legislao brasileira, por meio da Portaria n. 2.616, de 12
de maio de 1998, e da RDC n. 50, de 21 de fevereiro 2002, estabelece,
respectivamente, as aes mnimas a serem desenvolvidas com vistas reduo da
incidncia das infeces relacionadas assistncia sade e as normas e projetos
fsicos de estabelecimentos assistenciais de sade (BRASIL, 2010).
Nas orientaes contidas no Manual bem como na legislao brasileira,
destaca-se que todo profissional de sade deve ser conscientizado, motivado e
orientado no seu trabalho e faz-lo de forma precisa; ao iniciar suas atividades, deve
retirar anis, pulseiras, relgios e lavar as mos at o cotovelo. A higienizao das
mos continua sendo a tcnica bsica para qualquer procedimento a ser realizado,
diminuindo os riscos de infeco hospitalar (SANTOS, 2008). A promoo a
preveno da disseminao de microrganismos no ambiente hospitalar estabelece a
necessidade de instituir e manter medidas de controle durante o perodo de
transmissibilidade para cada doena em particular. A higienizao das mos deve
ser aplicada em todas as situaes de atendimento a pacientes, visam prevenir a
transmisso hospitalar de microrganismos (FONSECA; SILVA, 2006).
Deve-se utilizar para higienizao das mos, preferencialmente, sabonete
lquido cuja probabilidade de contaminao menor em relao ao sabonete em
barra. Segundo estudos de Martins e Soares (1993), os sabes comumente
21
utilizados, tm apenas ao mecnica de remoo, por reduzirem a tenso

superficial, o que eleva o poder umectante da gua na qual esto dissolvidos. Para
maior efeito no ambiente hospitalar, Fiorentino (2009) destaca que esto disponveis
sabonetes medicinais que so preparados pela adio de frmacos e ou princpios
ativos para ao sobre a superfcie cutnea. Os sabonetes lquidos podem ser
usados com maior facilidade como sabonetes medicinais e podem ser incorporados
com substncias antiparasitrias e antimicrobianas usadas na prtica mdica e
veterinria (BONADEO, 1963). Porm a antissepsia inadequada da pele pode
resultar na perda de atividade antimicrobiana do antissptico utilizado propiciando o
surgimento de patgeno resistente (WEBER et al., 2007).
A evoluo das pesquisas voltadas a aplicao do oznio sob a forma
medicinal tem aumentado de forma significativa. O gs oznio apresenta
caractersticas microbiocidas interessantes, por ser mais seguro e contundente do
que os desinfetantes convencionais, alm de agir em um grande nmero de micro-
organismos, incluindo patgenos resistentes. Alm de ser reconhecido como seguro
por no gerar resduos txicos. Quimicamente, o oznio arranjo molecular
triatmico e instvel do oxignio, que pode ser gerado pela excitao do oxignio
molecular a oxignio atmico, atravs de um ambiente eletricamente energizado que
permite a recombinao de tomos. um potente agente oxidante (RICE, 2006).
Outro recurso disponvel e que est sendo utilizado na desinfeco o
ultrassom. Esta uma forma de energia que consiste de ondas mecnicas,
produzidas com frequncia alm da sensibilidade normal do ouvido humano. Os
sons normalmente audveis pelo homem possuem frequncias entre 8 a 20 KHz.
O ultrassom usado na indstria para limpeza de materiais, solda de
plsticos, processos qumicos, preparao de emulso e suspenso, degaseificao
de solventes e avaliao no destrutiva em materiais. Os efeitos qumicos e
mecnicos de ultrassom so causados por bolhas de cavitao que so gerados
durante a presso no perodo de ondas sonoras, que provocam a morte bacteriana.
Com base nestas informaes, o intuito deste estudo foi identificar o potencial
microbicida do oznio, do ultrassom e combinao de oznio/ultrassom nas mos
dos profissionais de sade a fim de possibilitar o desenvolvimento de novos
protocolos para higienizao das mos que permitam a reduo microbiana e
consequentemente reduo dos casos de infeco hospitalar.
22
1.1. Objetivo geral
Desenvolver protocolos para desinfeco das mos de profissionais da sade

atravs da aplicao de Oznio e Ultrassom.
1.2. Objetivos especficos
Avaliar o efeito do Ultrassom, do Oznio (gs e gua ozonizada) e dos dois

simultaneamente (US e Oznio) na eliminao de microrganismos presentes
nas mos de profissionais da sade e determinar a tcnica mais eficiente
neste processo.
23
2. REVISO DE LITERATURA
2.1. A pele
2.1.1. Aspectos microbiolgicos da pele
A pele ntegra um dos maiores rgos do corpo, em termos de rea, e

responsvel por 16% do peso corporal e consiste no revestimento do organismo,
indispensvel vida, pois isola componentes orgnicos do meio exterior, impede a
ao de agentes externos de qualquer natureza, evita perda de gua, eletrlitos e
outras substncias do meio interno, oferece proteo imunolgica, faz termo-
regulao, propicia a percepo e tem funo secretria (HERCEG; PETERSON,
1997; GRANATO, 2003; BOYCE; PITTET, 2002).
A estrutura bsica da pele inclui, da camada externa para a interna, epiderme,
derme e hipoderme (BRASIL, 2008b). Quando a epiderme se encontra ntegra,
funciona como barreira fsica eficaz contra microrganismos, por estar em contato
direto com o ambiente externo. A derme contm todos os folculos pilosos, ductos de
glndulas sudorparas e sebceas, estruturas que possibilitam a passagem de
microrganismos da pele para os tecidos mais profundos. A superfcie ntegra da
epiderme saudvel muito raramente penetrada por microrganismos, porm,
quando sofre ruptura ocorre o desenvolvimento de uma infeco subcutnea
(ALCAMO, 2001; TORTORA; FUNKE; CASE, 2006) (Figura 1).
Figura 1: Estrutura bsica da pele.

Fonte: http://www.infoescola.com/ anatomia-humana/derme/
24
A maioria das bactrias cutneas reside na superfcie do estrato crneo, parte

superior dos folculos pilosos, sulcos da pele e ductos das glndulas sebceas (flora
transitria). A pele ntegra do ser humano colonizada por bactrias e fungos,
sendo que diferentes reas do corpo tm concentrao de bactrias variveis por
centmetro quadrado (cm2) no Couro Cabeludo: 106 UFC/cm2; na Axila: 105
UFC/cm2; no Abdome ou antebrao: 104 UFC/cm2 e nas Mos dos profissionais de
sade: 104 a 106 UFC/ cm2 (GRANATO, 2003; KAMPF; KRAMER, 2004).
Versignassi e Axt (2009) ressalta que nosso corpo contm 10 vezes mais
bactrias do que clulas humanas. Elas no so apenas uma grande parte da gente.
Ns que somos uma parte delas. E essa enorme quantidade de microrganismos
refere-se microbiota residente e transitria do nosso corpo. Essa consiste em
microrganismos patognicos ou no e permanece na pele por horas ou semanas.
Price (1938) classificou as bactrias isoladas das mos em duas categorias:
transitria e residente. A microbiota transitria, que coloniza a camada superficial da
pele, sobrevive por curto perodo de tempo e passvel de remoo pela
higienizao simples das mos, com gua e sabonete, por meio de frico
mecnica. facilmente adquirida por profissionais de sade durante contato direto
com o paciente (colonizados ou infectados), ambiente, superfcies prximas ao
paciente, produtos e equipamentos contaminados.
Segundo os autores, a microbiota transitria consiste de microrganismos no-
patognicos ou potencialmente patognicos, tais como bactrias, fungos e vrus, que
raramente se multiplicam na pele. No entanto, alguns podem provocar infeces
relacionadas assistncia sade (KAMPF; KRAMER, 2004). A microbiota
residente est aderida camada mais profunda da pele mais resistente remoo
apenas por gua e sabonete. As bactrias que compem esta microbiota so
agentes menos provveis de infeces veiculadas por contato (ROTTER, 2004).
Em seus estudos, os autores destacam que o simples ato de lavar as mos
com gua e sabo pode diminuir em at 90% o nmero de microrganismos que
compem a microbiota transitria (Figura 2). Porm, aproximadamente 8 h aps
esse procedimento, a populao bacteriana reconstituda pela flora residente
(TRABULSI; ALTERTHUM, 2005; BUCALEM; WEI, 2008).
25
Figura 2: Microbiota das Mos de Profissionais de Sade. 1) Com Higienizao 2) Sem Higienizao
sendo persistentemente colonizada.
Fonte: WHO Guidelines on Hand Hygiene in Health Care, 2009
As mos dos profissionais de sade podem ser persistentemente colonizadas

por microrganismos patognicos (Staphylococcus aureus, bacilos Gram-negativos
ou leveduras) podendo ser causa de infeco, pois envolve contato direto com
paciente, e em reas crticas como unidades com pacientes imunocomprometidos,
pacientes cirrgicos e Unidade de Terapia Intensiva (UTI), pode agravar as
condies dos pacientes crticos (ROTTER, 2004) Esses microrganismos podem ser
transmitidos por contato direto, pele com pele, ou indireto, por meio de objetos e
superfcies do ambiente.
O pesquisador descreveu para alm das microbiotas residente e transitria, a
microbiota infecciosa. Neste grupo, poderiam ser includos microrganismos de
patogenicidade comprovada, que causam infeces especficas como abscessos,
panarcio, paronquia, ou eczema infectado das mos. S. aureus e estreptococos -
hemolticos que so as espcies mais frequentemente encontradas. (ROTTER,
2004).
2.2. Higienizao das mos
2.2.1. Importncia da higienizao das mos
O mdico Ignaz Semmelweis em 1840 mostrou que a higienizao das mos em

prticas mdicas, evitava as transmisses de infeces de um paciente para outro,
na poca um fato preocupante, era a febre das crianas recm-nascidas. As
primeiras tcnicas em procedimentos de sade para o controle de infeces foram
aplicadas por Joseph Lister, em 1960, que incluam tratamento de ferimentos
26
cirrgicos com soluo de fenol e lavagem das mos. Com isso reduziu a incidncia
de infeces e mortes e outros mdicos adotaram as prticas (TORTORA et al.,
2005).
Segundo Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - ANVISA (2007), as mos
constituem a microbiota transitria que coloniza a camada mais superficial da pele:
S. aureus, S. epidermidis, Enterococcus spp., resistentes a vancomicina e
Enterobacteriaceae, o que permite sua remoo mecnica pela higienizao das
mos com gua e sabo, sendo eliminada facilmente, quando utilizada soluo
antissptica.
Para os autores Andrade e Ferrareze (2006), o uso de sabo tem sua
importncia reconhecida nas prticas de sade, uma vez que representa um recurso
primordial que diminui riscos de contaminao, impede a reproduo de
microrganismos e remove os contaminantes orgnicos e inorgnicos.
Figura 3: Mos de profissional da sade desencadeando a infeco cruzada.

Para higienizao simples das mos, gua e sabo so utilizados por 30

segundos e aps friccionar com soluo alcolica 70% por 40 a 60 segundos
(ANVISA, 2007). As mos so a principal via de transmisso de infeco hospitalar
(Figura 3). A higienizao das mos de grande importncia para eliminar
microrganismos da pele, prevenir a propagao de doenas, proteger-se contra as
agresses do meio e sua eficcia depende da durao e da tcnica (KOCH, 2005).
A lavagem das mos consiste no simples ato que deve ser seguido por todos
os profissionais de sade que mantm contato direto ou indireto com os pacientes
(Figura 4), fluidos corpreos, procedimentos invasivos, que atuam na manipulao
27
de medicamentos, alimentos e material estril ou contaminado (COHEN et al., 2003;

BRASIL, 2007; BRASIL, 2008b).
Figura 4: Mo de profissional de sade desencadeando infeco cruzada no contato com paciente

ou dispositivo hospitalar.
Em 1989, o MS, no Brasil, publicou o manual Lavar as mos: Informaes

para profissionais de sade, como j foi referido e alm da orientao, este visa
preveno e o controle de infeces. Recentemente a ANVISA, disponibilizou o guia
Higienizao das mos em servios de sade, com atualizaes sobre o tema
(BRASIL, 2008b).
H estudos demonstrando que, nem todos os profissionais da sade aderiram
prtica de higienizao das mos de maneira constante em sua rotina de trabalho,
devendo este hbito ser conscientizado e estimulado (Figura 5) (COHEN et al.,
2003; BRASIL, 2008b).
Figura 5: Higienizao incorreta das mos.

28
2.2.2. Tcnica recomendada pela ANVISA para higienizao simples das mos
As tcnicas de higienizao das mos podem variar, dependendo do objetivo ao

qual se destinam. Podem ser divididas em: Higienizao simples das mos;
Higienizao antissptica das mos; Frico de antissptico nas mos; Antissepsia
cirrgica ou preparo pr-operatrio das mos. (BOYCE; PITTET, 2002; WHO, 2006;
BRASIL, 2007). Antes de iniciar qualquer uma dessas tcnicas, necessrio retirar
joias (anis, pulseiras, relgio), pois sob tais objetos podem acumular
microrganismos (BOYCE; PITTET, 2002).
A tcnica higienizao das mos preconizada pela ANVISA estabelece os
seguintes passos (Figura 6):
Abrir a torneira e molhar as mos, evitando encostar-se a pia.
Aplicar na palma da mo quantidade suficiente de sabonete lquido para
cobrir todas as superfcies das mos (seguir a quantidade recomendada pelo
fabricante).
Ensaboar as palmas das mos, friccionando as entre si.
Esfregar a palma da mo direita contra o dorso da mo esquerda
entrelaando os dedos e vice-versa.
Entrelaar os dedos e friccionar os espaos interdigitais.
Esfregar o dorso dos dedos de uma mo com a palma da mo oposta,
segurando os dedos, com movimento de vai-e-vem e vice-versa.
Esfregar o polegar direito, com o auxlio da palma da mo esquerda,
utilizando-se movimento circular e vice-versa.
Friccionar as polpas digitais e unhas da mo esquerda contra a palma da mo
direita, fechada em concha, fazendo movimento circular e vice-versa.
Esfregar o punho esquerdo, com o auxlio da palma da mo direita, utilizando
movimento circular e vice-versa.
Enxaguar as mos, retirando os resduos de sabonete. Evitar contato direto
das mos ensaboadas com a torneira.
Secar as mos com papel toalha descartveis, iniciando pelas mos e
seguindo pelos punhos.
29
No caso de torneiras com contato manual para fechamento, sempre utilize

papel toalha.
Figura 6: Tcnica de higienizao simples das mos.

Fonte: http://www.h1n1online.com/higienizacao-da-maos.html
Essa prtica deve ser feita sempre que as mos estiverem visivelmente sujas
ou contaminadas com sangue e outros fluidos corporais. Ao iniciar o turno de
trabalho. Aps ir ao banheiro. Antes e depois das refeies. (ANVISA, 2009).
Para a lavagem das mos, preferencialmente, deve-se utilizar sabonete
lquido, pois a probabilidade de contaminao atravs de seu uso menor em
relao ao sabonete em barra. No entanto, se o sabonete slido for empregado,
30
deve ter tamanho pequeno, para que seja substitudo mais frequentemente
(BRASIL, 1989; BRASIL, 2007).
2.2.3. Produtos utilizados na higienizao das mos
Produtos que podem ser utilizados para higienizao das mos so sabonete
comum e os antisspticos (lcool, clorexidina, iodo/iodforos e triclosan),
considerando modo de ao, ao antimicrobiana e problemas decorrentes do seu
uso. O sabonete comum no contm agentes antimicrobianos ou os contm em
baixas concentraes, funcionando apenas como conservantes. Os sabonetes
utilizados em servios de sade so apresentados de vrias formas: em barra, em
preparaes lquidas e em espuma. Estes favorecem a remoo de sujeira,
substncias orgnicas e da microbiota transitria das mos pela ao mecnica.
(BOYCE; PITTET, 2002; WHO, 2006; KAMPF; KRAMER, 2004; ROTTER, 2004)
A higienizao com sabonete lquido permite a remoo da microbiota
transitria, permitindo que as mos fiquem limpas. Isso se torna suficiente para os
contatos sociais em geral e para a maioria das atividades prticas nos servios de
sade. Porm, a eficcia da tcnica de higienizao das mos, com gua e
sabonete, e o tempo gasto durante o procedimento que normalmente dura em mdia
8 a 20 segundos, o tempo necessrio para se deslocar para e retornar da pia, so
fatores que pe em risco a descontaminao das mos. O processo completo de
higienizao das mos leva em mdia 40 a 60 segundos (KAMPF; KRAMER, 2004;
ROTTER, 2004).
Ainda se inclui uma problemtica, os sabonetes no associados
antisspticos podem se contaminar, causando colonizao das mos dos
profissionais de sade com bactrias Gram negativas (SARTOR et al., 2000). Se
no houver a limpeza correta dos dispensadores de sabonete, tambm poder haver
contaminao. Os dispensadores devem ser facilmente removveis para serem
submetidos limpeza e secagem completa antes de serem preenchidos, quando
no forem descartveis (LARSON, 1996).
Os agentes antisspticos utilizados para higienizao das mos devem ter
ao antimicrobiana imediata e efeito residual ou persistente. No devem ser
txicos, alergnicos ou irritantes para pele. Recomenda-se que sejam agradveis de
31
utilizar, suaves e ainda, custos-efetivos (LARSON, 1996; WICKETT; VISSCHER,

2006; KAISER; NEWMAN, 2006; McLEOD; EMBIL, 2002).
A atividade antimicrobiana dos lcoois se eleva quanto maior for a cadeia de
carbono, porm sua solubilidade em gua diminui. Sua ao predominante consiste
na desnaturao e coagulao das protenas. Porm, tm-se outros mecanismos
associados, como a ruptura da integridade citoplasmtica, a lise celular e a
interferncia no metabolismo celular. Ainda evidencia-se a coagulao das
protenas, induzida pelo lcool, que ocorre na parede celular, na membrana
citoplasmtica e entre vrias protenas plasmticas. Essa interao do lcool com as
protenas levantou a hiptese da interferncia de sujidade contendo protenas na
antissepsia e desinfeco (BOYCE; PITTET, 2002; WHO, 2006; KAMPF; KRAMER,
2004; ROTTER, 2004; LARSON, 1996; McLEOD; EMBIL, 2002; GRAZIANO; SILVA;
BIANCHI, 2000).
Estudos destacam que na contaminao das mos, friccion-las com produto
alcolico pode prevenir a transmisso de patgenos com maior efetividade do que
higienizar as mos com gua e sabonete comum (EHRENKRANZ; ALFONSO,
1991).
O potencial antimicrobiano da clorexidina se deve ligao e subsequente
ruptura da membrana citoplasmtica, pois ocorre a precipitao ou coagulao de
protenas e cidos nucleicos. A atividade antimicrobiana imediata se d mais
lentamente que nos alcois, sendo, portanto considerada de nvel intermedirio;
porm, seu efeito residual, pela forte afinidade com os tecidos, torna-o o melhor
entre os antisspticos disponveis no mercado (BOYCE; PITTET, 2002; WHO, 2006;
ROTTER, 2004; KAMPF; KRAMER, 2004; LARSON, 1996; DENTON, 2001).
O iodo outro antissptico reconhecido por sua efetividade. Porm mediante
suas propriedades de causar irritao bem como manchar a pele, foi substitudo por
PVPI ou iodforos nos anos 1960 (BOYCE; PITTET, 2002; WHO, 2006; ROTTER,
2004; LARSON, 1996; GRAZIANO; SILVA; BIANCHI, 2000). A atividade
antimicrobiana ocorre devido penetrao do iodo na parede celular, ocorrendo
inativao das clulas pela formao de complexos com aminocidos e cidos
graxos insaturados, prejudicando a sntese proteica e alterando as membranas
celulares (BRASIL, 2008).
A ao antimicrobiana de triclosan ocorre pela difuso na parede bacteriana,
inibindo assim a sntese da membrana citoplasmtica, do cido ribonucleico, dos
32
lipdeos e das protenas, resultando na inibio ou morte bacteriana. Muitos estudos

recentes ressaltam que a atividade antimicrobiana decorrente da sua ligao ao
stio ativo da redutase protica enoil-acil, bloqueando a sntese lipdica (ANVISA,
2000).
A escolha do produto para higienizar as mos deve ser com cuidado, o
profissional dever levar em considerao a necessidade de remover a microbiota
transitria e/ou residente. A escolha do produto tambm depender, alm da
avaliao da Comisso de Controle de Infeco Hospitalar (CCIH) e dos recursos
disponveis, do que possvel em termos prticos e em certo grau, da preferncia
pessoal com base na aceitao dos insumos e/ou equipamentos necessrios para a
prtica de higienizao das mos (ANVISA, 2007).
2.3. Oznio
2.3.1. Gs oznio
O Oznio foi descoberto em 1785 quando Van Marum notou odor durante uma
descarga eltrica, mas Schonbein em 1840 evidenciou que esse odor ocorria devido
a um gs especfico, particular, que ele nomeou de Ozone (do grego Ozein)
(MEDEIROS, 2010).
Em 1886, De Meritens (CAMEL; BERMOND, 1998) desinfetou gua com
oznio. O oznio geralmente referido como uma forma altropica do oxignio.
um gs azul plido com odor pungente e distinto, que se torna perceptvel pelo olfato
humano em concentraes inferiores a 1 ppm no ar. A cor, por sua vez, no
perceptvel em concentraes normalmente produzidas e usadas. O oznio
aproximadamente 10 vezes mais solvel na gua que o oxignio, mas a quantidade
que pode ser dissolvida sob condies operacionais relativamente baixa.
Torna-se instvel com fatores fsico-qumicos como pH, temperatura, luz
ultravioleta, concentrao de oznio bem como pela concentrao de
sequestradores de radicais livres.
um gs que est presente de forma natural na estratosfera como resultado
da ao da radiao ultravioleta emitida pelo sol nas molculas de oxignio. capaz
de oxidar metais como ferro, chumbo e arsnio, aps vrias pesquisas concluram-
33
se que o oznio tem um papel ainda mais importante, utilizando-o como um eficaz
desinfetante durante epidemias infecciosas (INPE, 2006).
O oznio apresenta densidade maior que o oxignio em cerca de 50%,
apresentando-se como um gs incolor, com massa molecular igual a 48,
liquefazendo-se a -112C, possui ponto de congelamento de -251,4C, e sua
decomposio ocorre rapidamente, pode apresentar caracterstica de reao
explosiva em temperaturas acima de 100C (BAYSAN; WHILEY; LYNCH, 2000).
Figura 7: Estrutura molecular do oznio.

Fonte: Rakovsky, Anachkov e Zaikov, 2009
Mahapatra e Julson (2005) referem que o oznio apresenta um terceiro tomo

de oxignio que eletroltico (Figura 7), resultando em uma pequena carga eltrica
de radicais livres no terceiro tomo de oxignio, isso visa o equilbrio eltrico prprio
com outros materiais de carga desequilibrada. Microrganismos patognicos so
portadores desta carga, atraindo assim oznio. Clulas saudveis no podem reagir
com oznio, pois possuem carga eltrica equilibrada.
De acordo com os estudos de Langlais (1991) o oznio por ter sua natureza
fortemente oxidante, pode reagir e promover controle de gosto e odor; desinfeco;
remoo de cor; remoo de slidos por arraste promovido pelas bolhas na coluna
de contato; oxidao de ferro e mangans; saturar o efluente com oxignio
dissolvido; efeito de coagulao; controle de turbidez; oxidao de compostos
fenlicos; oxidao de pesticidas; controle de crescimento de algas; controle de
subprodutos de desinfeco com compostos clorados e estabilizao biolgica.
Em funo de suas caractersticas singulares, tornou-se nas ltimas dcadas
alvo de pesquisa de inmeros cientistas em todo o mundo, desde experimentos
evidenciando suas caractersticas bactericidas (SINGER et al., 2003; TERAO et al.,
34
2003; FARIA et al., 2005; BLANC et al., 2005; KIM et al., 2008), fungicidas e
herbicidas (RIP; AHARON, 1984) bem como uma larga aplicao no campo da
sade humana (BOCCI, 2005). Vrios autores utilizaram em suas pesquisas o
oznio como agente desinfetante.
O oznio tem sido utilizado como uma alternativa de baixo custo, confivel,
prtico e com poucos efeitos colaterais no tratamento de vrias doenas em
humanos e animais, desde que obedea a dosagem correta para o objetivo
especfico, ressalta-se tambm a sua aplicao na descontaminao bacteriana,
fngica e viral de fluidos, objetos, alimentos e ambientes (FONSECA, 2012).
Na medicina, o oznio pode ser utilizado na desinfeco de instrumentais
cirrgicos, lavanderias de hospitais, pois apresenta muita eficcia na inativao de
bactrias, vrus, fungos e protozorios (COSTA; DANIEL; 2002). Na parte
teraputica, so vrias as vantagens referidas na literatura, por exemplo, potente
ao microbiana, fcil aplicao sistmica ou local, ausncia de efeitos adversos,
intolerncia, contraindicao e de baixo custo (BAYSAN; WHILEY; LYNCH, 2000;
BOCCI, 2006; MARTINEZ-SANCHEZ et al., 2005). At o momento h muito debate
em relao a dose teraputica adequada, pois se o oznio for empregado em
concentraes imprprias, pode ser intil ou txico.
Na higienizao das mos no foram encontrados estudos que avaliam a
ao deste gs na reduo da microbiota local.
2.3.2. Gerao do gs oznio
O oznio um gs que se forma quando o oxignio exposto a uma alta

intensidade de luz ultravioleta (como sucede nas capas superiores da atmosfera) ou
a um campo de alta energia (chamado descarga corona) capaz de dissociar os dois
tomos que o compe e dar lugar a uma nova molcula triatmica de oxignio
(JACINTO, 2012).
A descoberta do oznio atribuda ao qumico Christian Friedrich Schonbein
que em meados do sculo XIX, observou que aps descargas eltricas na atmosfera
havia um odor, notado tambm quando a gua era decomposta por uma corrente
voltaica. Schonbein acreditou que esse odor poderia ser atribudo existncia de
um gs atmosfrico de odor peculiar (SHELDON; BROWN, 1996).
35
As tecnologias de maior destaque e aplicao na gerao de oznio so:

irradiao ultravioleta (UV) e descarga Corona. Esta ltima a que apresenta
melhor rendimento, isto obtm-se maior concentrao de oznio a partir do
oxignio do ar ou oxignio puro, por esta razo a mais conveniente para os
geradores industriais.
O elemento gerador de oznio composto por dois eletrodos, polarizados
eletricamente com alta tenso dependente do volume e comprimento do reator. A
regio entre os eletrodos ser preenchida por gs oxignio.
No efeito Corona, o mecanismo responsvel por tornar esse gs condutor a
ionizao por choque eletrnico. Neste caso o fenmeno ocorre principalmente pela
presena de campos eltricos elevados (alta tenso), nos quais ons ou eltrons
com energia cintica suficientemente alta produzem a ionizao, (JACINTO, 2012).
Estas partculas passam a ser aceleradas pelo intenso campo eltrico que colidem
contra os tomos de oxignio, gerando O3 (Figura 8). Esta gerao do efeito Corona
pode ser observada pela medio da emisso de radiao ultravioleta (200 nm-400
nm) do espectro eletromagntico.
Figura 8: Representao da formao do oznio por descarga eltrica.

Fonte: http://www.jornallivre.com.br/101511/o-que-significa-ozonio.html, 2012
De acordo com os estudos de Filippi (1998) o oznio liberado no ar no

decorrer de sua produo pelo gerador ou na obteno de gua ozonizada no
oferece riscos ou contraindicaes na sua utilizao devido quantidade liberada
para a atmosfera ser baixa.
2.3.3. Solubilidade do gs oznio em meio lquido

36
A taxa de solubilizao do oznio em meio lquido, dependente do tamanho das

bolhas do gs que borbulham na gua, sendo, portanto constante a relao de
quanto menores forem as bolhas formadas, maior ser a superfcie de contato,
permitindo a maior probabilidade de transferncia do gs para a gua. Este tamanho
varia entre 1 e 3mm de dimetro.
A estabilidade do oznio em gua aumenta com a acidificao e reduo de
temperatura, demonstrado na Tabela 1.
Tabela 1: Relao da temperatura e da solubilidade do oznio em gua.

Temperatura (C) Solubilidade (litros oznio/litros gua)
0 0,640
15 0,456
27 0,270
40 0,112
60 0,000
Fonte: Rice, 2002
O oznio cerca de 50% mais denso que o oxignio, apresenta-se como um

gs incolor, tem massa molecular igual a 48, liquefaz-se a -112C, possui ponto de
congelamento de -251,4C, e sua decomposio ocorre rapidamente, pode
apresentar caracterstica de reao explosiva em temperaturas acima de 100C
(BAYSAN; WHILEY; LYNCH, 2000).
Velano et al., (2002), Haas e Kayanak (2003), relataram que a ao
antimicrobiana do oznio depende da relao de sobrevivncia do microrganismo
com o tempo de exposio a este gs, intimamente associado concentrao inicial
de microrganismos e a concentrao do oznio, e tambm da velocidade de
dissipao destes expostos a gua ozonizada.
2.3.4. Utilizao do oznio em processos de desinfeco
O oznio tem sido amplamente utilizado, pois uma alternativa de baixo custo,
confivel, prtico e com poucos efeitos colaterais no tratamento de vrias doenas
em humanos e animais, desde que obedea a dosagem correta para o objetivo
especfico, ressalta-se tambm a sua aplicao na descontaminao bacteriana,
fngica e viral de fluidos, objetos, alimentos e ambientes.
37
A inativao de bactrias por oznio pode ser considerada como uma reao
de oxidao. A oxidao causada pelo alto potencial de oxidao-reduo do
oznio na gua; pela habilidade do oznio em se difundir em stios a serem
desativados e por espcies qumicas como os radicais livres, que so subprodutos
reativos do oznio. Diversos autores reportam que o primeiro alvo estrutural afetado
na bactria a membrana devido as glicoprotenas ou ainda devido a certos
aminocidos como o triptofano (WU; LIU, 2007).
O oznio tambm prejudica a atividade enzimtica da bactria pela ao em
grupos sulfidril de certas enzimas. As bactrias ozonizadas perdem sua habilidade
de degradar acares e de produzir gases. Ainda segundo Langlais (1991) assim
que atravessa a membrana e a parede celular, o oznio pode agir no material
nuclear, que um stio preferencial de oxidao.
A eficincia da desinfeco depende da resistncia dos microrganismos ao
desinfetante, da concentrao e do tempo de exposio ao agente desinfetante.
De acordo com Greene, Few e Serafin (1993), o oznio efetivo na
destruio de bactrias e vrus, em pH variando de 5,6 a 9,8. Segundo o mesmo
autor, quando comparada clorao, a ozonizao possui custo baixo, no requer
calor e no deixam resduos como os clorados.
Essas caractersticas sanitizantes so atraentes para as indstrias
alimentcias, por ser mais seguro e potente do que os desinfetantes convencionais
agem sobre um grande nmero de microrganismos, incluindo patgenos resistentes.
O oznio no deixa resduos txicos nos alimentos capazes de alterar o odor e o
sabor dos mesmos (TORRES et al., 1996).
O oznio apresenta grande significncia no tratamento de enfermidades
causadas por vrus, fungos e bactrias (SUNNEN, 1988). Pode ser aplicado de
vrias maneiras como: aplicao tpica de leos ozonizados, a insuflao do gs em
regies enfermas e a injeo da mistura de oznio-oxignio na regio lesionada.
Existem vrios estudos relatando o uso do oznio para cura de lceras de pele,
leses oculares, tratamento de verrugas causadas por Papilomavrus Humano
(HPV), coadjuvante no tratamento de hepatite B e C, doenas circulatrias, doenas
causadas por fungos dentre outros (JIAO, 2008).
As paredes das clulas infectadas por vrus so mais susceptveis a
destruio pelo perxido produzido atravs da ozonlise, porque possuem as
paredes enzimticas mais fracas. Sendo assim, o oznio danifica a cpsula viral e
38
desfaz o ciclo reprodutivo por ruptura do contato vrus-clula com a peroxidao.

Supe-se que o ataque primrio do oznio se d a parede da clula do
microrganismo e, depois, ao penetrar no interior da clula, esse agente promova a
oxidao dos aminocidos e cidos nuclicos. A lise celular depende da extenso
dessas reaes (BOCCI, 2006).
Como um desinfetante alternativo ao cloro o oznio tem se mostrado muito
eficaz na inativao de bactrias, vrus e protozorios (COSTA; DANIEL, 2002). No
Brasil, sua utilizao ainda tem sido pequena, mas j bastante utilizado na Europa
(DANIEL, 2001).
Khadre, Yousef e Dave (1999) concluram que o oznio um eficaz
sanitizante com potencial aplicao na descontaminao de diversas superfcies de
contato. Essa ao tambm foi evidenciada em embalagens flmicas e
equipamentos hatchery (WHISTTER; SHELDON, 1989).
A diminuio do crescimento de organismos na gua ozonizada se deve
tambm ao aumento do oxignio nela dissolvido e disponvel. Sua alta capacidade
de remoo de compostos orgnicos atravs da parcial oxidao um atributo
importante na atuao bactericida (Figura 9) (HANNA; PATRICK; SLOUGH, 1978).
Figura 9: Mecanismo de ao do oznio nos microrganismos: 1- Bactria; 2- Parede celular em

contato com oznio; 3- Oxidao da parede celular da bactria; 4, 5 e 6- Ruptura e destruio da
bactria.
Fonte: Chiattone, Torres e Zambiazi, 2008
Por ser voltil, o gs oznio pode afetar o sistema respiratrio e causar

sintomas de toxicidade, como cefaleia, tontura, sensao de queimao na regio
dos olhos, irritao da garganta e tosse. Em baixas concentraes, o oznio no
provoca sinais de toxicidade, mas em altas concentraes pode ser fatal aos
humanos (BOOT, 1991).
39
2.3.5. Especificidade tcnica de concentrao e dose
O efeito desinfetante pode ser quantificado em funo dos valores C x t

(concentrao em ppm por tempo de contato oznio - gua em minutos). Mesmo
que tais valores sejam afetados pela temperatura, o pH, entre outros, podemos dizer
globalmente que um valor de C x t = 2 ppm/min para oznio alcana o mesmo efeito
que um valor de 500 ppm/min. para cloro (HERNN, 1991).
2.4. Ultrassom
2.4.1. Gerao de ondas ultrassnicas
O Ultrassom atualmente empregado em uma variedade de indstrias tais como

limpeza de superfcies, terapias mdicas de varredura, tecnologia de alimentos e
bebidas, materiais de nano-sntese, processamento mineral, soldagem industrial,
ensaios no destrutivos e aplicaes ambientais (gua, terra e ar) (MASON;
PANIWNYL, 2003).
A aplicao de ultrassons a meios lquidos caracteriza-se pela ocorrncia de
fenmenos de cavitao acstica, que resultam da formao, do crescimento e do
colapso de bolhas gasosas, sujeitas alternncia dos ciclos de rarefao e de
compresso da onda. As condies verificadas na zona de cavitao favorecem um
nmero considervel de fenmenos fsicos e qumicos, resultantes da libertao de
elevadas quantidades de energia, do aumento da presso e da formao e
libertao de radicais livres, extremamente reativos.
Atualmente, a tecnologia ultrassnica mais comum, os custos foram
reduzidos e as aplicaes so mais econmicas. O ultrassom de potncia pode ser
considerado como uma alternativa vivel para tcnicas bactericidas convencionais
(MASON; TIEHM, 2001).
O ultrassom tem uma frequncia caracterstica num intervalo acima de 20
kHz, sendo que a sensibilidade do ouvido est na faixa de 10 Hz a 18 kHz. O que
torna o ultrassom uma ferramenta to poderosa o fenmeno fsico da cavitao,
baseado no processo de criar, aumentar e implodir cavidades de vapor e gases. A
cavitao a formao de cavidades ou bolhas no meio lquido contendo
40
quantidades variveis de gs, vapor ou ambos, conforme mostra a figura 10

(BELLO, 2003).
Figura 10: Cavitao acstica.

Fonte: Korn, Pereira e Borges, 2005
O limite superior da frequncia de ultrassons de 5 MHz para gases e 500

MHz para lquidos e slidos. A sua aplicao dividida em duas reas: alta
frequncia e baixa intensidade (2-10 MHz), aplicada em diagnstico mdico e
anlise qumica, e baixa frequncia e alta intensidade (20-100 kHz), normalmente
usada para limpeza, soldadura e sonoqumica (NASCIMENTO; LIMA; VALLE, 2005),
como mostra a Figura 11.
Figura 11: Regies de frequncia do som.

Fonte: Cravotto e Cintas, 2006
Os equipamentos de ultrassom so fabricados pelo acoplamento de um ou

mais cristais piezeltricos na parte inferior de um reservatrio metlico,
preferencialmente construdo em ao inoxidvel, neste, ocorre o preenchimento com
lquido e quando iniciado, promove a propagao de ondas acsticas.
Conforme Williams (1990) vasta as aplicaes de ondas de ultrassom, que
vo desde homogeneizao de substncias, rompimento de clulas, extrao de
41
produtos fitoqumicos, esterilizao de equipamentos, localizao de mineral,

emulsificao, at degradao de massa molar e fonoforese (ao do ultrassom
para facilitar a penetrao de agentes farmacologicamente ativos atravs da pele).
Experincias realizadas por Scherba, Weigel e Brien (1991), mostraram a
eficincia da ao germicida da energia ultrassnica, a uma frequncia de 26.000 Hz
aplicada em suspenses aquosas de bactrias.
2.4.2. Utilizao do ultrassom em processos de desinfeco
A destruio de microrganismos por ultrassom de potncia tem sido de interesse

considervel nos ltimos anos. As primeiras pesquisas de campo puderam ser
rastreadas no trabalho de Harvey e Loomis que examinaram a reduo na emisso
de luz (relacionado morte bacteriana), de uma suspenso de gua do mar
contaminada com bacilos, devido sonicao de 375 kHz a 19C. Ainda afirmam
que em condio adequada de irradiao, bactrias luminosas podem ser
quebradas e mortas por ondas sonoras de 400.000 ciclos por segundo e as solues
esterilizadas, mas o mtodo atribui muitas despesas (HARVEY; ALFRED, 1929).
As causas encontradas em pesquisas de 1960 para a interao do ultrassom
com clulas microbianas foram: ruptura e cavitao associadas, aquecimento
localizado e formao de radicais livres (HUGHES; NYBORG, 1962). Em 1975, foi
descrito que uma breve exposio ao ultrassom, causou um afinamento das clulas
atribudo liberao da membrana citoplasmtica da parede celular (ALLIGER,
1975).
possvel liberar o contedo de clulas em suspenso sem destruir ou
desnatur-las com ultrassons modernos. Os efeitos mecnicos do ultrassom em
sistemas de energia qumica em meio lquido devem-se, sobretudo a cavitao e
essas mesmas foras tem um efeito dramtico sobre os sistemas biolgicos. A
Imploso da bolha produz alta fora de cisalhamento e jato de lquidos no solvente
tem energia suficiente para danos na estrutura bacteriana, principalmente na parede
celular/membrana (LEE; HEINZ; KNORR, 2003).
Efeitos mecnicos deste tipo tm sido usados em uma pequena escala para a
desinfeco de gua contaminada com esporos microbianos de, por exemplo,
Cryptosporidium embora a energia acstica necessria alta. O colapso tambm ir
42
produzir espcies de radicais livres no meio aquoso. Estes radicais atacam a

estrutura qumica da parede celular bacteriana e enfraquece-a ao ponto de
desintegrao (AMMI, 1994).
Entre os produtos finais desta degradao sonoqumica de gua est uma pequena
quantidade de perxido de hidrognio, que um forte bactericida. Por outro lado, a
cavitao estvel induz estresse em qualquer espcie microbiana presente no
lquido (MASON; PANIWNYL, 2003).
Uma importante consequncia do fluido micro conveco pelo colapso da
bolha um forte aumento na transferncia de massa lquido-slido em interfaces. Na
microbiologia existem duas zonas onde este acessrio ultrassnico de transferncia
de massa ser importante, a primeira na membrana e/ou parede celular e a
segunda no citosol (MEI, SUN, 2008).
2.5. Uso combinado do oznio e ultrassom na microbiologia
Embora as energias necessrias para a desinfeco com ultrassom sejam altas, h

agora equipamentos comerciais disponveis com uso combinado de ultrassom com
oznio e/ou radiao Ultravioleta.
Boot (1991) demonstraram que o ultrassom de 20kHz em conjunto com
oznio uma alternativa rentvel para o uso convencional de biocida, e o efeito
sinrgico de ultrassom com oznio tem sido mostrado para reduzir a concentrao
necessria de oznio para eliminar cerca de 66% de Pseudomonas fluorescens.
Outros estudos referiram tecnologias hbridas envolvendo cavitao
hidrodinmica e acstica com tratamento de oznio. Essas combinaes podem
oferecer uma alternativa atraente para qualquer tcnica individual para a inativao
de bactrias heterotrficas e organismos indicadores, tais como coliformes totais,
coliformes fecais e Estreptococos fecais.
43
3. MATERIAL E MTODOS
3.1. Sujeitos da pesquisa
Cada mtodo aplicado neste estudo (US, gua Ozonizada, O3 Gasoso e Hbrido US
+ gua Ozonizada) contemplou a participao de 06 profissionais da sade (06
Enfermeiros e 18 Tcnicos em Enfermagem), totalizando 24 voluntrios, de ambos
os sexos. Os indivduos foram convidados pela Coordenao de Enfermagem do
Hospital Unimed do Oeste do Par, localizado no municpio de Santarm/PA.
Foram includos neste estudo os Tcnicos em Enfermagem e Enfermeiros
que apresentaram suas mos ntegras e unhas curtas, limpas e sem presena de
esmalte e que assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE).
Foram excludos da pesquisa os participantes que apresentaram leses nas
mos, alm de unhas compridas, sujas e com presena de esmaltes, bem como os
que no concordaram assinar o TCLE.
Todos os indivduos da pesquisa assinaram o Termo de Consentimento Livre
e Esclarecido, seguindo determinao do Comit de tica e Pesquisa (CEP). Os
participantes foram informados sobre as etapas da pesquisa e receberam
treinamento sobre a tcnica preconizada pela ANVISA para remoo de sujidades
das mos.
3.2. Meio de cultura
Foi utilizado o Agar Mueller Hinton. Este Agar padronizado por Kirby e Bauer e pelo
NCCLS que oferece condies de crescimento das principais bactrias. (ANVISA,
2004) Este foi pesado e hidratado com gua destilada em bales volumtricos
conforme instrues do fabricante (Figura 12); vedado, esterilizado em autoclave.
44
Figura 12: Insumos para preparao do meio de cultura.

Fonte: acervo do pesquisador
Em seguida foi distribudo em placas de petri descartveis que posteriormente

foram esterilizadas em Capela de Biossegurana com Radiao Ultravioleta por 15
minutos e deixado esfriar em temperatura ambiente.
A B
Figura 13: A) Distribuio do AMH nas placas de petri. B) Esterilizao por radiao UV.
3.3. Obteno da amostra
As amostras foram colhidas pelo pesquisador, devidamente paramentado, com

roupa e sapato branco, touca, mscara e luva estril. Pretendeu-se comparar cinco
metodologias de desinfeco:
1. Desinfeco Simples proposta pela ANVISA que preconiza Higienizao
com gua e Sabo (Higienizao Padro),
2. Desinfeco Sequencial Higienizao Padro gua Ozonizada;
3. Higienizao Padro Ultrassom com gua Ozonizada;
4. Higienizao Padro Ultrassom com gua local;
5. Higienizao Padro Gs Oznio.
45
Aps instruo, foi iniciada a coleta da mo dominante do participante com

Swab umedecido em gua destilada estril, sendo este, passado nas Regies
Digital, Palmar e Ungueal, como apresentado na Figura 14.
R. Ungueal R. Digital
R. Palmar
Figura 14: Regies escolhidas para obteno das amostras. Ungueal, Digital e Palmar.
As coletas ocorreram aps a higienizao Padro e aps a aplicao da

metodologia. Para cada metodologia da pesquisa foram colhidas duas amostras. A
coleta inicial foi realizada aps a higienizao padro preconizada pela ANVISA e a
segunda amostra aps a aplicao do Oznio e/ou Ultrassom (Figura 15). Em
seguida foi analisado o nmero de Unidades Formadoras de Colnias.
1 2
3 4
Figura 15: Processos de higienizao e secagem das mos.

46
3.3.1. Coleta das amostras
O material foi coletado com auxlio de um swab estril, umedecido e em seguida

semeado no meio de cultura AMH em placa de petri. As placas foram identificadas
com o nmero do participante, o tratamento utilizado e a data do respectivo teste, e
acondicionados em estufa para posterior leitura microbiolgica de 24 e 48 h (Figura
16).
Figura 16: Instrumentos utilizados para coleta das amostras.

As regies investigadas foram: digital, palmar e ungueal, visto que a

microbiota normal da mo um ambiente microbiologicamente dinmico, podendo
ocorrer variao tanto em nmero, como em tipo de bactrias de um local para outro
(Figura 17).
1 2 3
Figura 17: Obteno das amostras. 1) R.Digital; 2) R.Palmar; 3) R.Ungueal.

Posteriormente, as amostras foram semeadas em Agar Mueller Hinton,

dispostos em placas de acrlico descartveis. As placas foram identificadas com
nmeros e acondicionadas em caixas isotrmicas em condies asspticas para
encaminhamento imediato ao Laboratrio de Microbiologia da UEPA para incubao
a 36C (+2) por 24h e 48h. Este trajeto (Hospital Laboratrio de Microbiologia) no
ultrapassou 10 minutos (Figura 18).
47
Figura 18: Acondicionamento das placas semeadas em estufa.

3.4. Ozonizao da gua
Foi utilizado um gerador de oznio desenvolvido pelo Engenheiro eltrico e

colaborador do presente estudo, Prof. Dr. Carlos Jos de Lima, a partir do princpio
do efeito Corona por descarga eltrica.
A ozonizao da gua foi realizada a partir do gerador de oznio, bem como
atravs de um cilindro de oxignio com acoplamento de vlvulas de controle de
presso e fluxo de gs O2 na entrada.
As amostras de gua utilizadas nos experimentos passaram pelo processo de
destilao, deionizao e autoclavagem para ento, serem ozonizadas em recipiente
estril. Com esta finalidade, foi adicionado um difusor de gases a um tubo de
silicone acoplado ao gerador de oznio. A monitorao da medida de concentrao
do O3 na gua foi realizada a partir de teste colorimtrico, da marca CHEMets,
modelo R-7402, quando se atingiu a concentrao de 10 ppm com temperatura de
20oC, o processo de ozonizao era finalizado e as amostras de gua utilizadas nos
experimentos descritos a seguir. De acordo com a Figura 19 foram necessrios
55min/L para obteno de 10 ppm de O3.
48
Figura 19: Curva de extrapolao para ozonizao de gua.

3.5. Aplicao do ultrassom com gua estril
Foi utilizado o equipamento comercial de Ultrassom (UNIQUE), Modelo: USC 750,

com Frequncia 25 kHz e Potncia Acstica 100 W. Em seu reservatrio de ao
inoxidvel foi adicionada gua estril e o participante foi orientado a submergir a
mo dominante na cuba por 1 minuto, e em seguida foram realizadas as coletas
microbiolgicas.
. Aps o tratamento realizou-se as coletas microbiolgicas utilizando o swab
umedecido, semeadas em meio AMH, em placas de Petri, acondicionadas em estufa
a 37C, realizou-se a leitura das placas e quantificao das UFCs por 24 e 48 h.
3.6. Aplicao de gua ozonizada nas mos
Os profissionais da sade foram orientados a realizar a higienizao padro das

mos e uma primeira coleta foi realizada sem uso de qualquer agente microbicida.
As mos destes profissionais foram submetidas a repetio do processo de
higienizao padro com utilizao de gua ozonizada. As mos ficaram imersas na
cuba do US contendo gua ozonizada na concentrao de 10 ppm, com temperatura
de 20C por 1 minuto.
Aps os testes com gua ozonizada, realizou-se as coletas microbiolgicas
utilizando o swab umedecido, semeadas em meio AMH, em placas de petri,
acondicionadas em estufa a 37C, realizou-se a leitura das placas e quantificao
das UFCs por 24 e 48 h.
49
3.7. Aplicao do gs oznio nas mos
Neste protocolo foi desenvolvido um recipiente plstico com tampa que permitiu o
vedamento necessrio para a manuteno do fluxo de gs. Fez-se uma abertura
frontal e adaptao de dispositivo para insero da mo do participante, bem como
uma abertura para a entrada do fluxo gs na parte superior e outra na parte inferior
para sada deste (Figura 20). Isto foi realizado a partir do gerador de oznio, bem
como tambm atravs de um cilindro de oxignio com acoplamento de vlvulas de
controle de presso e fluxo de gs O2 na entrada.
Figura 20: Recipiente para aplicao do gs oznio na mo dominante.

O experimento foi realizado dentro de uma Capela de Biossegurana com

exaustor ligado para que no houvesse risco aos participantes da pesquisa.
Inicialmente o gerador de oznio foi ligado (concentrao = 33 mg/L de
oznio) por 5 minutos antes para garantir a homogeneizao do gs no recipiente.
Aps este perodo mo dominante foi inserida na caixa e permaneceu por um
minuto. Aps os testes com Gs Oznio, realizou-se as coletas microbiolgicas
utilizando o swab umedecido, semeadas em meio AMH, em placas de Petri,
50
3.8. Aplicao de gua ozonizada + ultrassom nas mos
Foi utilizado o mesmo equipamento de US descrito anteriormente sendo que em seu

reservatrio de ao inoxidvel foi adicionada gua estril ozonizada na concentrao
de 10 ppm e a temperatura foi controlada (20C). O participante foi orientado a
submergir a mo dominante na cuba e o equipamento de US foi acionado por 1
minuto, e em seguida foram realizadas as coletas microbiolgicas.
Aps os testes com gua ozonizada, foram realizadas coletas microbiolgicas
utilizando o swab umedecido, semeadas em meio AMH, em placas de Petri,
3.9. Anlise e apresentao dos resultados
Os resultados obtidos foram coletados, tabulados, determinada a mdia e desvio

padro do nmero de UFCs a partir de contagem padro. Com o intuito de
uniformizar e facilitar a interpretao dos resultados, os dados apresentados nas
figuras foram expressos em porcentagem (%) de reduo aps os diferentes
tratamentos.
3.10. Consideraes ticas
A coleta de dados s foi realizada aps a aprovao do Comit de tica em

Pesquisa (CEP) da Universidade do Estado do Par sob o nmero de processo
084/11, respeitando os preceitos ticos em pesquisa que envolve seres humanos.
51
4. RESULTADOS
4.1. Higienizao das mos a partir do ultrassom
A primeira coleta ocorreu aps a higienizao padro e em seguida imergiu-se a

mo dominante do participante no equipamento de ultrassom com gua Estril por 1
minuto.
Na sequncia foi realizada a semeadura do material em placa de Petri
contendo Agar Mueller Hinton e aps 24 e 48 h em estufa a 37C, realizou-se
contagem das UFCs contidas nas placas.
Tabela 2: Reduo do Nmero de UFC, antes e aps aplicao de US, nas diferentes regies
selecionadas.
Voluntrios (N) Regies % Reduo (Mdia) (SD)
6 Digital 77.8% ( 22.2)
6 Palmar 83.2% ( 12.0)
4 Ungueal 76.4% ( 4.3)
Mdia Final = 79,1% ( 12.8)
De acordo com os dados apresentados na tabela 2, observou-se a reduo

nas UFCs em todas as regies, porm com maior efeito de declnio na microbiota
da regio palmar (83,2% 12.0), seguido das regies ungueal (76,4% 4.3) e digital
(77,8% 22.2).
Os resultados acima apresentados demonstraram que com uso do ultrassom
de frequncia 25KHz e potncia acstica de 100w, com apenas um minuto de
exposio, a populao bacteriana das mos declinou em 79,1% ( 12.8).
4.2. Higienizao das mos seguida da aplicao de gua ozonizada
O teste foi realizado com gua Ozonizada na concentrao de 10 ppm. A primeira

coleta ocorreu aps a higienizao padro e em seguida, imergiu-se a mo
dominante na cuba contendo gua ozonizada por um minuto. Na sequncia foi
realizada a semeadura do material em placa de petri contendo Agar Mueller Hinton e
52
aps 24 e 48 h em estufa a 37C, realizou-se contagem das UFC contidas nas

placas.
Tabela 3: Apresenta a reduo do Nmero de UFC, antes e aps aplicao de gua ozonizada, nas
diferentes regies selecionadas.
4 Digital 82.8% ( 17.6)
5 Palmar 55.8% ( 33.9)
4 * Ungueal 0% ()
Mdia Final = 69,3% ( 8.1)
* Valores de reduo da Regio Ungueal no foram considerados no clculo da mdia final.
De acordo com os dados apresentados na Tabela 3, observou-se a reduo

nas UFCs nas regies digital (82,8% 17,6) e palmar (55,8% 33,9), porm no
houve efeito de declnio na microbiota da regio ungueal (0%). Os resultados acima
apresentados demonstraram que quando aplicada a gua ozonizada 10 ppm com
um minuto de exposio, a populao bacteriana das mos declinou em 69,3%
(8,1), porm este efeito redutor no foi observado na Regio Ungueal.
4.3. Higienizao das mos seguida da aplicao do gs oznio
O teste foi realizado com aplicao direta do Gs Oznio na mo dominante do

participante. A primeira coleta ocorreu aps a higienizao padro e em seguida,
inseriu-se a mo, por um minuto, dentro do recipiente apresentado na Figura 22,
seguindo todos os cuidados para que no houvesse inalao do gs por parte do
voluntrio. Na sequncia foi realizada a semeadura do material em placa de Petri
contendo gar Mueller Hinton e aps 24 e 48 h em estufa a 37C, realizou-se
contagem das UFCs contidas nas placas. O uso do gs oznio se mostrou eficaz na
reduo da populao microbiana de todas as regies, havendo somente dificuldade
na eliminao da microbiota da regio ungueal de um dos participantes.
Tabela 4: Apresenta a reduo do Nmero de UFC antes e aps aplicao de gs oznio, nas
diferentes regies selecionadas.
4 Digital 91.7% ( 3.1)
5 Palmar 93.3% ( 10.7)
5 Ungueal 88.7% ( 17.4)
Mdia Final = 96,4% ( 10.4)
53
De acordo com os dados apresentados na Tabela 4, observou-se a reduo

nas UFCs em todas as regies, porm com maior efeito de declnio na microbiota
da regio palmar (93,3% 10,7), seguido das regies digital (91,7% 3,1) e ungueal
(88,7% 17,4).
Os resultados acima apresentados demonstraram que quando aplicado Gs
Oznio 10 ppm com um minuto de exposio, houve o declnio da populao
bacteriana das mos em 96,4% (10,4).
4.4. Higienizao das mos seguida da aplicao combinada do ultrassom com

gua ozonizada
O teste simultneo foi realizado com gua ozonizada (10 ppm O3) e sonicao
(frequncia 25kHz). A primeira coleta ocorreu aps a higienizao padro e em
seguida imergiu-se a mo dominante do participante no equipamento de ultrassom
contendo gua ozonizada, por um minuto.
Na sequncia foi realizada a semeadura do material em placa de Petri
contendo Agar Mueller Hinton e aps 24 e 48 h em estufa a 37C, realizou-se
contagem das UFCs contidas nas placas.
Tabela 5: Apresenta a reduo do Nmero de UFC, antes e aps aplicao do tratamento combinado
de Ultrassom e gua ozonizada, nas diferentes regies selecionadas.
4 Digital 96.9% ( 4.7)
5 Palmar 90.6% ( 12.5)
4 Ungueal 90.2% (5.2)
Mdia Final = 92.6% ( 7.4)
De acordo com os dados apresentados na tabela 5, observou-se a reduo

nas UFCs com maior efeito na microbiota na regio digital (96,9% 4,7), seguido
das regies palmar (90,6% 12,5) e ungueal (90,2% 5,2).
Os resultados acima apresentados demonstraram que quando combinado o
ultrassom de frequncia 25 kHz e gua ozonizada na concentrao de 10 ppm com
um minuto de exposio, observou-se que a populao bacteriana das mos
declinou em 92,6% (7,4).
54
Tabela 6: Percentual de reduo do Nmero de UFC, antes e aps aplicao dos tratamentos com
Gs Oznio, US, US + gua ozonizada e gua ozonizada nas diferentes regies selecionadas.
Mtodos Aplicados % Reduo (Mdia) (SD)
GAS OZNIO 96,4% ( 10.4)
US + GUA OZONIZADA 92.6% (7.4)
US 79,1% ( 12.8)
GUA OZONIZADA 69,3% ( 8.1)
A realizao destes testes permite-nos avaliar, o desempenho dos mesmos

na desinfeco das mos de profissionais da sade. Observa-se de acordo com a
Figura 31, que todos os protocolos aplicados desenvolvem ao redutora na
microbiota das mos.
Porm, o protocolo com Gs Oznio mostrou-se mais eficiente na
desinfeco das mos com 96,4% (10,4), seguido do protocolo Hbrido de
Ultrassom com gua Ozonizada com 92,6% (7,4), protocolo com Ultrassom e Agua
Estril correspondendo a 79,1% (12,8) de reduo e protocolo com gua
Ozonizada apresentando 69,3% (8,1) de reduo bacteriana.
55
5. DISCUSSO
Nesta pesquisa pretendeu-se identificar o mtodo mais eficiente para desinfeco

das mos de profissionais da sade mediante processos de ozonizao, sonicao
e ozonizao/sonicao simultaneamente, alm de caracterizar qual regio da mo
apresenta maior dificuldade para remoo microbiana frente a estes mtodos. Trata-
se de um experimento quantitativo que props a utilizao de novos mtodos para
higienizao das mos visto que o mtodo atual proposto pela ANVISA apresenta
baixa adeso por parte dos profissionais de sade.
As mos so naturalmente habitadas por microrganismos saprfitos e
patognicos, fato este que pode resultar em grave problema de sade pblica caso
no seja realizada a higienizao correta das mesmas.
Objetivou-se identificar o desempenho dos mtodos de ozonizao,
sonicao e ozonizao/sonicao simultaneamente, na desinfeco das mos dos
profissionais de sade, com a disponibilizao de novos protocolos dentro do tempo
ideal para uma boa higienizao, que segundo os manuais disponveis no Brasil,
referem 40 a 60 segundos.
As mos constituem a principal via de transmisso de microrganismos
durante a assistncia prestada aos pacientes, pois a pele reservatrio de diversos
microrganismos, que podem se transferir de uma superfcie para outra, por meio de
contato direito ou indireto, atravs do contato com objetos e superfcies
contaminadas (MENDONA et al., 2003).
Muitas publicaes demonstram a correlao entre a higienizao das mos e
a reduo na transmisso de infeces. Segundo estudos de Santos (2002) a
importncia da implementao de prticas de higienizao das mos na reduo
das taxas de infeces e a maioria absoluta dos especialistas em controle de
infeces concorda que a higienizao das mos o meio mais simples e eficaz de
prevenir a transmisso de microrganismos no ambiente assistencial.
As tcnicas para higienizao das mos disponveis envolvem o uso de gua
e sabo, sabo com adio de ativos medicinais para reduo microbiana, produtos
a base de lcool, bem como solues contendo PVPI.
Na prtica diria a tcnica mais comumente realizada e difundida pelas
CCIHs a higienizao simples com gua e sabo, que deve ser feita sempre que
56
as mos estiverem visivelmente sujas, antes e aps o preparo de medicamentos,

contato com pacientes ou troca de dispositivos do paciente ou prximo ao leito
hospitalar e ainda antes e aps o uso de luvas.
Promover a desinfeco das mos de fundamental importncia para a
reduo dos casos de IH. O ambiente hospitalar deve ser seguro, limpo e promotor
da sade e bem estar do paciente. Todos os profissionais da sade conhecem a
necessidade da desinfeco das mos e esta temtica precisa ser constantemente
trabalhada pelas CCIHs para conscientizao e manuteno na realizao da
tcnica. Segundo Veronesi (2005) os profissionais de sade precisam ser lembrados
constantemente de lavar suas mos durante o contato com o paciente.
Porm, de acordo com a literatura, evidencia-se baixa adeso por parte dos
profissionais que alegam como fatores que dificultam o processo a falta de tempo,
bem como a carga de trabalho muito pesada, no oferecendo muitas possibilidades
para a realizao desta ao com os devidos cuidados no tempo e na forma da
higienizao como proposta pela ANVISA e CCIHs do hospital.
No incomum observar a realizao da tcnica de lavagem das mos de
forma rpida e desatenta, o que pode aumentar a incidncia no quadro de infeces
hospitalares, principalmente para os profissionais que prestam assistncia a
pacientes mais vulnerveis. (SANTOS; GONALVES, 2009).
Mesmo sendo oferecido pelo Hospital todas as condies para uma
higienizao correta, tais como, pia, sabonete lquido, papel toalha, lcool gel, dentre
outros, o profissional deixa de realizar o processo de higienizao das mos. Isso
confirmado por Santos (2002) onde refere que embora a higienizao das mos seja
um procedimento simples, requer mudana de hbito do profissional existindo um
distanciamento entre o conhecimento da higienizao das mos e sua prtica.
Pittet et al. (2006) destacam que, o sentimento de estar sendo observado,
uma atitude positiva em relao a higienizao das mos e uma baixa carga de
trabalho esto associados com a adeso a higiene das mos. De fato isto foi
comprovado neste estudo, pois no momento que foram aplicados os mtodos, os
profissionais perguntavam se estava fazendo da maneira correta ou se precisavam
fazer a higienizao em outra regio da mo. Destaca-se que estes haviam recebido
treinamento dos pesquisadores, bem como foi observada a presena atuante da
CCIH no Hospital em questo.
57
Conforme BRASIL (2008), se conseguir a adeso dos profissionais de sade

a esta prtica ser possvel diminuir as IH e, consequentemente, a mortalidade dos
pacientes, o tempo de permanncia destes no hospital e os custos destas
internaes.
A insero de novas tcnicas de higienizao visa maior reduo da
populao microbiana das mos, possibilitando menores ndices de infeco
hospitalar e de infeco cruzada. O uso de novas tcnicas foi sugerido por Pittet et
al. (2000) onde destacaram que ainda existe a necessidade de um programa de
investigao sistemtica que permita o desenvolvimento de novos programas para
limpeza das mos.
O uso da ozonizao, sonicao e ozonizao/sonicao na microbiota das
mos no foi evidenciado nas buscas literrias, caracterizando este estudo como
pioneiro e inovador.
Existem muitas vantagens na utilizao destes mtodos no ambiente
hospitalar, pois os mesmos so de baixo custo, fcil acesso, no geram resduos. A
desvantagem encontra-se na toxicidade apresentada pelo Gs Oznio, pois sua
inalao oferece risco de morte, porm se seguidas as normas de Biossegurana,
essa letalidade torna-se nula.
As coletas foram realizadas da mo dominante do voluntrio e envolveram as
regies digital, palmar e ungueal. Foi realizada a semeadura e quantificao das
UFCs aps 24 e 48h. Optou-se por tais regies devido serem de intenso contato
com objetos e pacientes, bem como por requererem especial ateno no processo
de higienizao das mos, pois para Mota et al. (2010), a composio do ambiente
das mos dinmica, portanto a microbiota normal varia tanto em nmero como em
tipo, de um local para outro.
Este estudo preocupou-se com a correta aplicao da tcnica proposta pela
ANVISA, para que todas as regies da mo fossem higienizadas, e que em seguida
ocorresse aplicao dos mtodos. O processo de secagem das mos foi
cuidadosamente analisado, evitando que as mos permanecessem midas, uma vez
que o excesso de umidade pode favorecer a transferncia das colnias bacterianas
de um indivduo para o outro bem como o seu prprio crescimento.
Sabe-se que a variao de umidade das mos influencia na transferncia de
bactrias e na disseminao para superfcies e itens tocados. Segundo Snelling et
al. (2010), isso provavelmente ocorre no s pelo aspecto fsico da umidade, mais
58
tambm porque as bactrias podem ser mantidas em um estado fisiolgico que as

torna mais capazes de sobreviver no ambiente.
Patrick, Findon e Miller (1997), Merry et al. (2001) e Snelling et al. (2010)
verificaram que umedecer as mos com gua influencia na transferncia bacteriana
e difuso das macrocolnias. J para Yamamoto, Ugai e Takahashi (2005), a
contagem bacteriana aumenta acentuadamente quando as mos so esfregadas.
Isso ocorre devido o ato de esfregar as mos perturbar as escamas da pele e trazer
bactrias de dentro dos poros superfcie. Snelling et al. (2010) complementam que
as bactrias adicionais liberadas a partir de escamas da pele ou no interior dos
poros pela ao de frico, provvel que seja constituinte da microflora normal da
pessoa, assumindo remoo substancial dos transitrios durante a lavagem.
Para o hospedeiro essas bactrias liberadas pela frico no apresentam
risco eminente, porm, quando transferidas a indivduos imunocomprometidos,
pacientes com leses ou feridas abertas passam a ser potencialmente patognicas.
Segundo Yamamoto, Ugai e Takahashi (2005), a ao do detergente do
sabo pode contribuir no aumento desta populao, pois rompe aglomerados de
bactrias comensais, como estafilococos e propionibactria, aumentando assim o
nmero de UFCs.
Horwood e Minch (1951) e Stiles e Sheena (1987) revelaram diferentes nveis
de contaminao para a microbiota das mos. O nmero expressivo de UFCs nas
mos pode ser explicado devido apresentar sulcos e depresses, facilitando assim,
a colonizao e permanncia de espcies microbianas.
Ao utilizar o US isolado ou associado com gua ozonizada a porcentagem de
reduo aumenta nessa regio e as causas dessa interao do ultrassom com
clulas microbianas so ruptura e cavitao associadas, aquecimento localizado e
formao de radicais livres.
De acordo com trabalhos encontrados na literatura, pode-se afirmar que
mesmo a mais rigorosa lavagem das mos no garante que as mesmas fiquem
livres de microrganismos (ALMEIDA et al., 1995).
As regies Digital, Palmar e Ungueal apresentaram considervel reduo no
nmero de UFCs, alcanando resultados muito satisfatrios aps aplicao dos
protocolos.
O mtodo mais eficiente para reduo microbiana das mos de acordo com
este estudo foi o Gs Oznio, apresentando mdia de reduo de 96,4% (10,4). A
59
aplicao deste diretamente nas mos permitiu reduo considerada nas regies
palmar (93,3% 10,7), digital (91,7% 3,1) e ungueal (88,7% 17,4).
A partir de ensaios preliminares foi estabelecida para este estudo uma
concentrao de 10 ppm ou 10 mg/L. Estudos de Song et al. (2007) envolvendo Gs
Oznio referem que quanto maior o tempo de atuao deste, maior ser a inativao
microbiolgica. A dosagem utilizada nos experimentos que refere a concentrao
(mg/L) x tempo (minuto) de atuao so variveis dependentes para observncia do
efeito.
A utilizao do oznio na desinfeco reportada por diversos autores, pois
este gs forma radical oxidante em funo dos parmetros do meio em que ele
habita, esta partcula inica atua na membrana celular do microrganismo, podendo
causar neste ser a lise celular. (GARDUO et al., 1995; OIZUMI et al., 1998;
VELANO et al., 2001). Isto foi comprovado por Ishizaki et al. (1987), em estudo
realizado com E. coli, notaram que o oznio foi capaz de penetrar na membrana
celular e reagir com substncias citoplasmticas e tambm modificar o DNA da
bactria, o que possivelmente diminuiu a sua capacidade multiplicadora.
Baysan e Lynch (2006) encontraram em seu estudo, que o tratamento com
oznio reduziu drasticamente o nmero total de microrganismos.
O segundo mtodo potencial de reduo bacteriana de acordo com este
estudo foi o US com gua Ozonizada, apresentando mdia de reduo de 92,6%
(7,4). A regio digital apresentou o maior percentual de reduo (96,9% 4,7),
seguido das regies palmar (90,6% 12,5) e ungueal (90,2% 5,2).
Diversos experimentos envolvendo US e Oznio tem sido realizado com
intuito de reduzir ou eliminar bactrias patognicas. Gary et al. (1975), prepararam
vrus e bactrias presentes em meios de cultura especficos e trataram com gua
ozonizada e ultrassom simultaneamente, bem como tambm de forma isolada de
cada tcnica.
A reduo bacteriana pode ser devido ao aumento de radicais livres O e OH,
que a sonicao ocasiona na gua ozonizada, e pelo efeito mecnico e fsico do
ultrassom nas molculas, alm do efeito bactericida do prprio oznio. Neste estudo
utilizou-se a tcnica por um minuto. De acordo com Fonseca (2012), foi evidenciado
em seu estudo que houve uma reduo de aproximadamente 100%, aps 5 minutos
de ozonizao/sonicao de curetas odontolgicas.
60
Ao submeter s mos no equipamento de ultrassom, foi evidenciada a morte

bacteriana e consequentemente a eficincia do mtodo, devido o ultrassom
desenvolver o processo biofsico da cavitao; processo este que vem sendo
considerado como um dos principais mecanismos que acarretam a atividade
germicida em meio lquido.
A aplicao simultnea do oznio e do ultrassom demonstrou maior eficcia
quando comparado a cada tcnica isolada e proporcionou a reduo bacteriana em
todas as regies, principalmente a ungueal, evidenciada como a mais problemtica
para reduo.
Diversos autores avaliaram os efeitos do ultrasom e do oznio sobre
microrganismos, porm sem especificar nos protocolos a concentrao de oznio na
gua e a dose do ultrasom em seus testes (BOTT, 2004; ESTRELA et al., 2006;
BURLESON; MURRAY; POLLARD, 1975). Neste estudo, as doses especficas de
ultrasom e ozonio foram especificados, permitindo uma anlise comparativa dos
efeitos observados.
O terceiro mtodo foi quando aplicado ultrassom com gua estril. A mdia
de reduo apresentada equivale a 79,1% (12,8), sendo que na regio palmar
houve maior reduo (83,2% 12,0), seguida das regies digital (77,8% 22,2) e
ungueal (76,4% 4,3). O efeito do US est relacionado ao fenmeno da cavitao e
ruptura de cisalhamento associado, o aquecimento localizado e a formao de
radicais livres.
De acordo com Suslick (1990), o efeito do ultrassom na rea biolgica, pode
ocorrer pelo poder da alta potncia acstica, que desloca, distorce e/ou reorienta
partculas intercelulares ou mesmo clulas com relao a suas configuraes
normais. Esses efeitos esto associados a grandes tenses hidrodinmicas
suficientes para causar danos s clulas e macroclulas suspensas.
O ultrassom induz o processo biofsico da cavitao que vem sendo
considerado como um dos principais mecanismos que acarretam a atividade
germicida em meio lquido. Segundo Gonze et al. (1998), a destruio ou inativao
de microrganismos por aplicao de ondas ultrassnicas pode ser utilizado com
eficcia na desinfeco de guas.
Neste processo de aplicao do Ultrassom as mos ficaram imersas em gua
estril. Este fato pode ter proporcionado manuteno das colnias, visto que
uma regio propcia colonizao e no momento da sonicao, as macrocolnias
61
podem ter sido dispersas. Isto pode ser explicado por Patrick et al. (1997), Merry et
al. (2001) e Snelling et al. (2010), onde referem que o molhamento das mos
grandemente influenciado na transferncia bacteriana e difuso das macrocolnias.
Suslick (1990) realizou um estudo com aplicao de US na preparao e
preservao de produtos cosmticos emulsionveis, constatando por meio de seus
resultados que o US um excelente agente biocida.
No trabalho de Bougrier et al. (2006), quando aplicaram o US de 20 KHz o em
condies controladas de laboratrio houve diminuio da viabilidade celular de
Saccharomyces cerevisae. A eficincia do US aumenta com o tempo de exposio
aos efeitos das ondas acsticas e da cavitao sobre as clulas.
O protocolo com menor efeito redutor sobre a microbiota das mos foi
aplicao da gua Ozonizada, apresentando mdia de reduo 69,3% (8,1). A
regio com maior reduo foi a digital (82,8% 17,6), seguido da regio palmar
(55,8% 33,9). Na regio ungueal no foi observado reduo no numero de UFCs
(0%).
O efeito pode ter sido reduzido devido a tenso superficial do meio lquido,
formar uma bolha de ar nessa regio que dificulta o contato com a gua ozonizada.
Nesta pesquisa, ozonizou-se a gua, com difusor para diminuir o tamanho
das bolhas, at atingir um valor de concentrao especfico (10 ppms);
posteriormente foi realizada a higienizao das mos por 1 minuto. Este tempo foi
escolhido devido ser o tempo preconizado pela ANVISA para que a higienizao das
mos seja considerada eficiente. Segundo Chen citado por Torres et al. (1996),
quanto maior for o tempo de atuao da soluo ozonizada maior ser o seu efeito
oxidativo, consequentemente seu resultado microbiocida.
Bezirtzoglou et al. (2008) afirmaram que a aplicao de oznio durante curtos
perodos de tempo tem efeito bacteriosttico, enquanto ozonizao para mais de 30
minutos apresenta efeito biocida.
Johansson, Claesson e Van Dijken (2009), demonstraram que a exposio
gua ozonizada, a uma concentrao de 10 mg/L, durante 10 ou 30 minutos foi
eficaz na reduo significativa da quantidade de microrganismos que adere s
superfcies dos instrumentos dentrios. Segundo o mesmo autor, apesar do oznio
parecer exibir um efeito antibacteriano in vitro, o efeito do oznio em diferentes
ambientes in vivo ainda no foi comprovado cientificamente. Porm, no presente
62
estudo foi verificada a reduo bacteriana do gs O3 in vivo, quando o aplicamos na

forma aquosa ou gasosa nas mos dos profissionais da sade.
De acordo com Huth et al. (2009), a eficcia do oznio aquoso (1,25 -
20mg/L) contra patgenos endodnticos em suspenso e os agentes patognicos
que formaram biofilme tambm foi comprovada. Esses autores verificaram que a
aplicao de oznio aquoso por 1 min foi eficaz e poderia eliminar E. faecalis e C.
albicans em suspenso de uma forma dependente da dose quando o oznio foi
usado em concentraes de 5, 10 e 20 mg/mL.
Pryor, Squadrito e Fridman (1995); Bocci (2006), Mahapatra e Julson (2005),
confirmam que o oznio apresenta-se como eficiente desinfetante devido seu alto
poder de oxi-reduo. A eficcia do oznio tambm foi comprovada por Johanson,
Claesson e Van Dijkn (2009), quando borbulhou o gs direto a soluo contaminada
com microrganismo sem o difusor, comprometendo a eficincia da transferncia do
gs para o meio lquido, a concentrao foi estabelecida a partir do gerador sem
considerar a atuao do tempo.
Ao final dos estudos foi observado que o processo de desinfeco das mos
com gs oznio demonstrou ser o mtodo mais eficaz seguido do mtodo US + gua
ozonizada, ultrassom com gua estril e gua ozonizada.
O uso de equipamentos ultrassnicos em ambientes hospitalares contribuiria
para a reduo dos ndices de infeco hospitalar, bem como facilitaria o acesso do
profissional para higienizao das mos j que no seria necessrio a repetio de
movimentos e sim a imerso das mesmas em lavadoras ultrassnicas.
Este estudo procurou evidenciar a aplicabilidade da desinfeco das mos de
profissionais da sade por novos mtodos, visto que o mtodo tradicional disponvel
atualmente no est sendo aplicado por estes profissionais. Estas tcnicas
apresentam baixo consumo de energia eltrica, e principalmente, significativa
eficcia em termos de morte bacteriana. Tambm mostrou que a temperatura da
gua, a dose de O3, densidade de energia acstica tiveram um efeito positivo na
reduo da microbiota das mos de profissionais da sade.
63
6. CONCLUSO
Mediante os resultados e discusso realizados nesta pesquisa conclui-se que a

problemtica do processo de higienizao das mos persistente. extremamente
necessria a realizao de estudos abordando novos mtodos para higienizao,
visto que os profissionais de sade no aderem s tcnicas disponveis mesmo as
unidades de sade disponibilizando todos os insumos necessrios.
As tcnicas usuais propostas pela ANVISA apresentam eficincia, porm
frente negligncia dos profissionais, seu efeito torna-se nulo.
Dos mtodos propostos neste estudo, o que apresentou maior percentual de
reduo bacteriana em um minuto de aplicao foi aplicao do gs oznio
(96,4%10,4), seguido da aplicao combinada de ultrassom e gua ozonizada
(92,6% 7,4) aplicao do ultrassom com gua estril (79,1% 12,8) e aplicao de
gua ozonizada (69,3% 8,1).
Espera-se que futuramente novos protocolos que tenham como base estas
tecnologias possam ter aplicabilidade no ambiente hospitalar e para isso novos
estudos so extremamente relevantes para definio do menor tempo de
desinfeco, da dose aplicada, da regio e ou ambiente de aplicao.
64
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75
ANEXO A Termo de Consentimento Livre e Esclarecido
Ttulo da Pesquisa: Aplicao de Oznio e Ultrassom na desinfeco das mos

de profissionais da sade.
Voc est sendo convidado (a) a participar do projeto de pesquisa intitulado:

Aplicao de Oznio e Ultrassom na desinfeco das mos de profissionais da
sade que ser desenvolvido com a finalidade de fornecer novos protocolos para
desinfeco das mos.
A elaborao e aplicao destes protocolos permitir avaliar a influncia
bactericida do Oznio e Ultrassom na microbiota das mos de profissionais da
sade. Permitir identificar o tempo ideal de aplicao capaz de inibir o crescimento
bacteriano, comparar a desinfeco convencional e a desinfeco sequencial
utilizando oznio e ultrassom. Servir ainda para reforar o conhecimento destes
profissionais quanto a importncia da higienizao das mos, bem como
disponibilizar novos conhecimentos sobre novos procedimentos para desinfeco
das mos.
O oznio contm poucas contra-indicaes e efeitos colaterais, sendo mnimos
os riscos ao participantes e estes sero anulados pois a aplicao dos mtodos ser
realizada por profissionais habilitados e treinados para tal.
Sua participao na pesquisa ser a partir da disponibilizao da mo
dominante para coleta de amostra com o auxlio de swab umedecido em gua
destilada estril. As coletas sero realizadas nas Unidades de Internao do
Hospital Unimed Oeste do Par e ocorrero em duas etapas: a primeira coleta
ocorrer aps a higienizao preconizada pela ANVISA e a segunda aps a
aplicao dos protocolos utilizando Oznio e Ultrassom. A incubao das placas e a
diluio seriada das colnias para quantificao bacteriana ser realizada no
Laboratrio de Microbiologia da UEPA.
As informaes obtidas sero utilizadas somente para a presente pesquisa,
no sendo divulgada qualquer informao que possa levar a sua identificao. Os
dados sero armazenados em pasta arquivo, em duas vias, na casa de ambas as
pesquisadoras e somente sero destrudas por incinerao aps 05 anos.
76
Aps analisadas as placas e quantificadas as colnias, as amostras sero

descartadas conforme procedimento padro adotado no Laboratrio de
Microbiologia da UEPA.
Voc, enquanto voluntrio (a) pode se sentir constrangido em ter que realizar
anlise microbiolgica de suas mos ou ainda ficar receoso de o resultado promover
alguma penalidade em relao a sua prtica laboral e por isso no querer participar
da pesquisa. Para evitar tal situao, no momento da coleta todas as dvidas sero
dirimidas e a mesma ocorrer de maneira individualizada.
Voc poder ainda sentir uma leve aspereza em suas mos aps o contato
com a gua ozonizada, caso isso acontea, voc ser orientado a fazer uma nova
higienizao com gua e sabo neutro.
A pesquisa ir contribuir para que voc avalie a importncia da higienizao
adequada das mos na promoo a uma assistncia segura e de qualidade para
todos os usurios dos servios de sade. E tambm far voc conhecer novas
metodologias para desinfeco das mos, favorecendo a reduo dos ndices de
infeco hospitalar. Portanto, sua colaborao e participao iro contribuir para o
desenvolvimento cientfico local e mundial.
Informamos que voc tem o direito de no participar desta pesquisa, se assim
o desejar, sem que isso acarrete qualquer prejuzo. Existe garantia de anonimato e
sigilo quanto ao seu nome ou qualquer outra informao que possa identific-lo, pois
no faremos uso de seu nome completo ou iniciais, a voc participante, ser
atribudo um nmero de 0 a 10 que constar no TCLE. Voc tem direito a se manter
informado a respeito dos resultados finais da pesquisa e para isso ter a qualquer
momento, acesso aos profissionais responsveis pela mesma para esclarecimento
de dvidas. Voc ter liberdade de retirar seu consentimento a qualquer momento,
durante o andamento da pesquisa, sem que isto lhe traga prejuzo e danos.
A principal investigadora a Prof Dra. Adriana Barrinha Fernandes Moretti
orientadora desta pesquisa, que pode ser encontrada na Universidade Camilo
Castelo Branco UNICASTELO na Rod Dutra Km 138, Bairro Eugnio de Melo,
CEP: 12247-004 So Jos dos Campos SP ou pelo telefone (12) 3905-4401, ou
ainda no e-mail dricabf@yahoo.com.br.
Caso no seja localizada a pesquisadora responsvel, poder ainda ser
contatada a pesquisadora Tatiane Costa Quaresma de Lima que pode ser
encontrada na Alameda Aquarius, 25 bairro Novo Horizonte ou pelo telefone celular
77
(93) 9954-9171 ou (93) 9141-2522 ou ainda pelo e-mail tatiane-

quaresma@hotmail.com.
Tambm pode ser contatado o Comit de tica em Pesquisa CEP,
responsvel pela aprovao deste projeto de pesquisa, no endereo Avenida
Plcido de Castro, 1399, Aparecida ou pelo telefone (93) 35235118.
DECLARAO
Declaro que compreendi as informaes do que li ou que me foram explicadas

sobre o trabalho, incluindo os propsitos da pesquisa, os procedimentos a serem
realizados, os possveis riscos e benefcios, as garantias de confidencialidade e de
esclarecimentos permanentes. Ficou claro tambm que minha participao no ser
paga, nem terei despesas e que se houverem danos posso legalmente solicitar
indenizaes.
Concordo voluntariamente em participar desse estudo podendo retirar meu
consentimento a qualquer momento, sem necessidade de justificar o motivo da
desistncia, antes ou durante o mesmo, sem penalidades, prejuzo ou perda de
qualquer beneficio para minha vida pessoal e profissional.
Santarm, ____ de _______________ de 2012.
____________________________________
Assinatura do participante da pesquisa
____________________________________
Assinatura de testemunha
Declaro que li ou ouvi a explicao das pesquisadoras ao participante, que

compreendeu e retirou suas dvidas, assim como eu, a tudo que ser realizado na
pesquisa.
______________________________
Pesquisador responsvel
______________________________
Pesquisador 1
Declaro que obtive de forma apropriada e voluntria o consentimento livre e

esclarecido do voluntrio para participao no presente estudo.
78
ANEXO B Termo de aprovao do Projeto pelo Comit de tica em Pesquisa

79

Aplicacao de Ozonio e Ultrassom Na Desinfeccao Das Maos

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Aplicacao de Ozonio e Ultrassom Na Desinfeccao Das Maos

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1

Universidade Camilo Castelo Branco

Instituto de Engenharia Biomdica

TATIANE COSTA QUARESMA

APLICAO DE OZNIO E ULTRASSOM NA DESINFECO DAS

APPLICATION OF ULTRASOUND IN OZONE AND DISINFECTION OF THE

So Jos dos Campos, SP

Tatiane Costa Quaresma

APLICAO DE OZNIO E ULTRASSOM NA DESINFECO DAS MOS DE

Orientadora: Profa. Dra. Adriana Barrinha Fernandes Moretti

Co-Orientador: Prof. Dr. Carlos Jos de Lima

Dissertao de Mestrado apresentada ao Programa de Ps-Graduao em

So Jos dos Campos, SP

A Deus que diante de toda minha caminhada esteve sempre me guiando e

A Universidade do Estado do Par UEPA que permitiu alguns momentos de

A amiga e cumadre Ana Emlia Gomes Macedo que desde a aprovao no

As minhas amigas do peito Leidiani Viana, Janilce Oliveira que me permitiram

A todos os voluntrios que se propuseram a participar deste estudo, direta e

Aos Tcnicos em Enfermagem, Enfermeiros, Coordenadoras de Enfermagem e

Agradeo tambm aos funcionrios da UNICASTELO Nidia Domingues e

Se voc quiser algum em quem confiar,

APLICAO DE OZNIO E ULTRASSOM NA DESINFECO DAS

As mos so a principal via de transmisso de microrganismos e possibilitam novos

Palavras-chave: higienizao das mos, protocolo de desinfeco, oznio e

APPLICATION OF ULTRASOUND IN OZONE AND DISINFECTION OF

Key-words: hand hygiene, disinfection protocol, ozone and ultrasound.

AMH Agar Mueller Hinton

Cxt concentrao x tempo

DBO Demanda Bioqumica de Oxignio

DQO Demanda Qumica de Oxignio

HPV Papilomavrus Humano

ppm Partculas Por Milho, Equivalente a mg/L

S. aureus Staphylococcus aureus

TCLE Termo de Consentimento Livre e Esclarecido

UEPA Universidade do Estado do Par

UFC Unidades Formadoras de Colnias

UTI Unidade de Terapia Intensiva

Figura 1. Estrutura bsica da pele ........................................................................ 23

Figura 2. Microbiota das mos de profissionais da sade..................................... 25

Figura 3. Mos de profissional da sade desencadeando Infeco cruzada........ 26

Figura 4. Mos de profissional da sade desencadeando infeco cruzada no

Figura 5. Higienizao incorreta das mos............................................................ 27

Figura 6. Tcnica de higienizao simples das mos........................................... 29

Figura 7. Estrutura molecular do oznio................................................................ 33

Figura 8. Representao da formao de oznio por descarga eltrica............... 35

Figura 9. Mecanismo de ao do oznio nos microrganismos.............................. 38

Figura 10. Cavitao acstica................................................................................ 40

Figura 11. Regies de frequncia do som............................................................. 40

Figura 12. Insumos para preparao do meio de cultura...................................... 44

Figura 13. Meio de Cultura. A) Distribuio do meio de cultura em placas de petri. B)

Figura 14. Regies da mo para obteno das amostras..................................... 45

Figura 15. Processo de higienizao e secagem das mos.................................. 45

Figura 16. Instrumentos utilizados para obteno das amostras.......................... 46

Figura 17. Obteno das amostras microbiolgicas.............................................. 46

Figura 18. Acondicionamento das placas semeadas em estufa............................ 47

Figura 19. Curva de extrapolao para ozonizao da gua................................ 48

Figura 20. Recipiente para aplicao do gs oznio na mo dominante.............. 49

Tabela 1. Relao da temperatura e da solubilidade do oznio em gua............. 36

Tabela 2. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de US nas

Tabela 3. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de gua

Tabela 4. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de US nas

Tabela 5. Reduo do numero de UFCs antes e aps a aplicao de US e gua

3.8. Aplicao combinada de gua ozonizada e ultrassom nas mos.............. 50

ANEXO A. Termo de Consentimento Livre e Esclarecido..................................... 75