Resultados datos y clculos

Muestra Biuret Escala Nirhidrina Escala de

(observaciones) de (observaciones) cruces
cruces
Agua No hay cambio No hay cambio
Clara Morado oscuro ++++ Desnaturalizo
Yema Morado ms ++ No hay cambio
clarito
S. de Azcar Blanco moradito + No hay cambio
Pia Verde azulado + No hay cambio
Maicena No hay reaccion No hay cambio
Limn Azul+ amarillo + No hay cambio
Bebida Morado clarito ++ No hay cambio
carbonatada
Extracto de papa No hay reaccin No hay cambio
Gelatina Morado fuerte +++ No hay cambio
Carne cocida Caf con ++ Moradito claro ++
moradito
Carne cruda Morado fuerte +++
Papaya Moradito con + No hay cambio
anaranjado

Discusin de resultados
Los pptidos y protenas producen una reaccin coloreada muy usada para la
valoracin de los mismos, llamada reaccin del Biuret, que contiene Cu 2SO4 como
disolvente. Las protenas por sus uniones peptdicas reaccionan con los iones
cpricos del reactivo en medio alcalino formando un complejo de color violeta. Se
necesitan 2 ms uniones peptdicas para que se forme el complejo coloreado. Esta
prueba sirve para la identificacin de tripptidos en adelante.
Un color violeta resulta cuando los iones cpricos en medio alcalino forman
complejos con los electrones no saturados de los tomos de nitrgeno y oxgeno de
los enlaces de todas las protenas. La cantidad de color producido es proporcional
a la concentracin de protenas. Sin embargo, el mtodo es un poco insensible
siendo el lmite menor de 0.25mg de protenas.
Las sustancias que dan el color violeta tienen dos grupos CONH2 unidos
directamente o por un carbono o nitrgeno. Los compuestos que contienen
CH2NH2, -C(NH)NH2 y CSNH2 en lugar de los grupos CONH2 tambin reaccionan.
Las estructuras peptdicas en protenas y sus derivados que contengan enlaces
peptdicos tambin dan positivo para la prueba de Biuret.
De los aminocidos, la histidina da positivo. Los dipptidos dan pruebas negativas.
Las protenas dan color morado o violeta mientras que las proteosas o peptonas
(enzimas que rompen los enlaces peptdicos de las protenas) dan un color rosado
y los pptidos dan un color rosado claro. Adems, los aminocidos dan un color
amarillento.
El agua no cambi en ningn momento del procedimiento porque no contiene
ningn tipo de elemento orgnico y mucho menos compuestos proteicos, por esta
razn da negativo a la reaccin de biuret.
La geltaina es una mezcla coloide, incolora, translcida, quebradiza y casi inspida
que se obtiene a partir del colgeno procedente del tejido conectivo de despojos
animales hervidos con agua. El colgeno es un compuesto proteico hecho
sustancialmente de prolina, hidroxiprolina y glicina. El reactivo biuret debera dar
positivo, debido a los componente peptdicos del colgeno presente en la gelatina.
El resultado del laboratorio fue un color morado claro, que concuerda con lo que la
teora requiere, aunque se han hechos estudios donde la gelatina da un color azul.
Por ende podemos decir que si se hubiera dejado reaccionar por ms tiempo o si
se hubiera aadido ms gelatina, se hubiera obtenido el color azul.
La casena es una fosfoprotena presente en la leche y en algunos de sus derivados.
En la leche, se encuentra en la fase soluble asociada al calcio en un complejo que
se ha denominado caseingeno. El resultado del laboratorio fue el cambio de
coloracin de levemente blanco a un blanco opaco total. El resultado terico
esperado es un cambio de coloracin a un azul lechoso, que en nuestro caso no fue
azul, slo lechoso. Deducimos que fue el hecho de solamente usar 1 ml, el que
produjo nuestro resultado: es posible que en la solucin de casena no se alcanz
el lmite mnimo (0.25 mg) de casena para que se llevara a cabo la reaccin biuret.
Concordamos, tambin, en que posiblemente el factor tiempo influy en la
manifestacin de la reaccin.
La albmina es una protena que se encuentra en gran proporcin en el plasma
sanguneo, siendo la principal protena de la sangre y a su vez la ms abundante
en el ser humano. Es sintetizada en el hgado. Lo esperado en esta reaccin es
obtener un color violeta translucido. En la prctica del laboratorio, despus de 5
minutos de reaccin, no se not ningn cambio convincente para afirmar que hay
presencia de protenas. Sin embargo una observacin efectuada 3 minutos despus
de la primera observacin, demostr un cambio de coloracin violeta, por
consiguiente podemos concluir que el tiempo requerido o el reactivo n fue el
suficiente.
La desnaturalizacin de protenas se da en la clara de los huevos, que son en gran
parte albminas en agua. En los huevos frescos, la clara es transparente y lquida;
pero al cocinarse se torna opaca y blanca, formando una masa slida
intercomunicada. Esa misma desnaturalizacin puede producirse a travs deuna
desnaturalizacin qumica, por ejemplo volcndola en un recipiente con acetona.
Desnaturalizacin irreversiblede la protena de la clara de huevo y prdida de
solubilidad, causadas por la alta temperatura (mientras se la fre)
La nirhidrina tiene el efecto de la temperatura, cuando la temperatura es elevada
aumenta la energa cintica de las molculas con lo que se desorganiza la envoltura
acuosa de las protenas y, se desnaturalizan.
La ninhidrina es un poderoso agente reactivo comn para visualizar las bandas de
separacin de aminocidos (y por ende protenas) por cromatografa o
electroforesis. sta reacciona con los aminocidos (pH entre 4 y 8) y en caliente,
produciendo amoniaco, dixido de carbono y un complejo de color prpura azulado.
Todos los aminocidos primarios forman el mismo complejo qumico tras su
reaccin con ninhidrina. Si la coloracin es violeta o amarillo claro se trata de una
protena, un polipptido o un aminocido. Adems, si el color es rojo o amarillo
fuerte se trata del aminocido prolina, o la hidroxiprolina.
El agua no cambi en ningn momento del procedimiento, ni al agregar ninhidrina
ni al momento de aplicarle calor, porque no contiene ningn tipo de elemento
orgnico y mucho menos compuestos proteicos, por ende la ninhidrina no tiene con
quin reaccionar.
Como ya se mencion anteriormente la gelatina es un compuesto proteico, que en
la reaccin de biuret cambi de color por la presencia de colgeno; sin embargo, en
el procedimiento con ninhidrina la muestra de gelatina no cambi de color, aunque
la teora dice que por la presencia de prolina e hidroxiprolina, debera cambiar a una
tonalidad amarillenta o roja. Suponemos que esto sucedi debido a problemas
durante el goteo. Esto lo notamos porque el tubo de ensayo de la gelatina
presentaba un notorio volumen mayor que el de los otros tubos de ensayo. Al ser
una gran cantidad de gelatina y una cantidad relativamente menor de ninhidrina,
sta ltima tuvo una saturacin ms lenta para su reaccin, dejando poco producto
visible (lo que proveera su notorio color positivo).
Como ya se sabe la casena es un compuesto proteico presente en la leche y sus
derivados. En la prctica del laboratorio, la casena actu tal y como lo dice la teora;
cambio de color a un azul-morado, debido a la presencia de protenas; y tambin
cambi de estado (debido al aumento de termperatura): se coagul, esto indica
presencia de globulinas.
Al hacerse la reaccin con ninhidrina, la albumina cambi de un color transparente
a rojo sangre y adems se coagul. El cambio de color indica la presencia de prolina
e hidroxiprolina. La albmina se coagula por el calor, lo que confirma su identidad.

Conclusiones
Indicamos la presencia de protenas en diferentes muestras de pruebas
cualitativas, del mismo modo identificamos algunos de los aminocidos
presentes en ellas por medio de las reacciones que ocurrieron en cada caso
de acuerdo al radical o al grupo que caracteriza al aminocido.
Identificamos estructuralmente diferentes aminocidos presentes en
determinadas protenas o en su defecto como aminocidos libres.
Para que se lleve a cabo una reaccin como la de biuret revela nicamente
la presencia de protenas y pptidos pequeos.
 La reaccin de ninhidrina es ms genrica que la de biuret. Identifica
aminocidos y protenas no por sus enlaces, sino por su constitucin qumica,
lo cual le otorga un mayor poder de identificacin ante el biuret.
Otros factores como el tiempo, temperatura y cantidad de sustrato afectan la
calidad de la reaccin y resultados para la identificacin de protenas.
Dependiendo de la estructura primaria de cada protena, la manifestacin en
las reacciones puede tener ciertas variaciones especficas.