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INSTITUTO TOCANTINENSE PRESIDENTE ANTNIO CARLOS (ITPAC)

CURSO DE FARMCIA

BIOATIVOS NATURAIS EM NOVAS ESTRATGIAS ANTIFNGICAS

Carlos da Silva Garcia

Leandro Lopes Coimbra
 1

Araguana-TO, 2004
 2

INSTITUTO TOCANTINENSE PRESIDENTE ANTNIO CARLOS (ITPAC)

CURSO DE FARMCIA

BIOATIVOS NATURAIS EM NOVAS ESTRATGIAS ANTIFNGICAS

Carlos da Silva Garcia

Leandro Lopes Coimbra

Monografia apresentada, como trabalho de

concluso do curso de Farmcia Bioqumica sob
a orientao do professor Hebert Lima Batista

Araguana-TO, 2004
 3

GARCIA, Carlos Silva; COIMBRA, Leandro Lopes

Bioativos Naturais em novas estratgias antifngicas. /

Carlos da Silva Garcia, Leandro Lopes Coimbra. Orientao:
Hebert Lima Batista. Instituto Tocantinense Presidente Antonio
Carlos ITPAC/Fundao de Medicina Tropical do Tocantins:
Araguana, 2004.

p.69

1. FARMACOGNOSIA, I- TITULO, II-ANTIFUNGICOS, III-

BIOATIVOS NATURAIS.

CDU -
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INSTITUTO TOCANTINENSE PRESIDENTE ANTNIO CARLOS (ITPAC)

CURSO DE FARMCIA

BIOATIVOS NATURAIS EM NOVAS ESTRATGIAS ANTIFNGICAS

Carlos da Silva Garcia

Leandro Lopes Coimbra

Banca

____________________________
Dr. Renato Antonio Campos Freire
____________________________
Dr. Patrcia Oliveira Vellano
____________________________
Dr. Hebert Lima Batista

Araguana-TO, 10 de dezembro de 2004

 5

GARCIA, Carlos da Silva; COIMBRA, Leandro Lopes.

Bioativos Naturais em Novas Estratgias Antifngicas.
Orientador: Prof. Hebert Lima Batista (ITPAC/FMT)
Banca Examinadora: Prof. Farm. Renato Antonio Campos Freire (ITPAC/HMDO);
Prof. Farm. Patrcia Oliveira Vellano (ITPAC/HMDO)
Data de Apresentao: 09.12.2004.
Drogas antifngicas utilizam diversos alvos de ao para produzir seu efeito. O
grande problema encontrado a alta toxicidade que esses medicamentos
apresentam e tambm o surgimento de resistncias aos frmacos convencionais.
Portanto, devemos buscar novas molculas, outros mecanismos de atuao, e
aproveitando o potencial da metodologia utilizando moldagem qumica, que
proporcionar um encurtamento no tempo e recursos na descobertas de novas
drogas que tenham qualidade, eficcia e segurana .
UNITERMOS: TITULO, FARMACOGNOSIA, BIOATIVOS NATURAIS,
ANTIFNGICOS.
 6

Primeiramente a Deus, aos

meus familiares, amigos e
professores que contriburam para o
meu sucesso.
L
Leandro Coimbra

minha me Raimunda
Garcia, pelos momentos de carinho,
estmulos e dificuldades enfrentadas
para meu crescimento profissional.
R
Carlos Garcia
 7

AGRADECIMENTOS

Em primeiro lugar agradecemos ao nosso Senhor, razo da nossa existncia,

obrigado por nos escolher e nos capacitar, para desenvolvermos um trabalho de

suma importncia para nossa regio.

Aos nossos pais que so nossos espelhos, onde nos baseamos para sermos

o que somos, e por dar-nos sempre o melhor. Jamais esqueceremos vocs.

A Fundao de Medicina Tropical do Tocantins FMT-TO, em nome da sua

presidente Dra. Regina Maria de Siqueira Campos, pelo apoio e ter nos recebidos

como colaboradores neste pequeno projeto de anlise e concluso desta pesquisa,

fornecendo os dados e suportes necessrios.

Agradecemos ao grande companheiro Professor Hebert Lima Batista pelo

importantssimo apoio, incentivo e compreenso, de nos orientar de forma amvel

atravs de seus conhecimentos, experincia e habilidades.

Ficamos gratos a todos os professores do curso de farmcia por nos

encaminhar em buscar o melhor caminho profissional.

Obrigado colegas pelas palavras carinhosas e incentivadoras nos momentos

difceis e de alegria.

Em especial a Natureza, pela a beleza da cura das enfermidades, na qual,

nos trouxe inspirao para a realizao desta monografia.

 8

Bioativos Naturais em Novas Estratgias Antifngicas.

Carlos da Silva GARCIA, Leandro Lopes COIMBRA.

Orientador: Hebert Lima BATISTA

Defesa: dezembro de 2004

RESUMO

Observa-se na literatura cientficas uma grande quantidade de compostos

antifngicos. Entretanto, a realidade muito diferente, pois para o uso humano

existem limitadas opes teraputicas, em decorrncias do aparecimento de

reaes txicas e das resistncias desenvolvidas pelos fungos. Diante desta

situao surgiu a necessidade de investimento em pesquisas que apontem para

frmacos mais especficos para as estruturas fngicas que no esto presentes no

ser humano e outros animais. Atualmente j esto no mercado drogas que possuem

essas caractersticas e que esto revolucionando a terapia antifngica, como por

exemplo: caspofungina e voriconazol. Os pesquisadores atualmente se voltam para

os peptdeos presentes em algumas espcies de anfbios (sapos e rs), que

possuem um alta ao farmacolgica, atualmente, as magaininas representam uma

das mais bem estudadas classes de peptdeos antibiticos, os quais so

considerados efetores da imunidade inata, agindo em uma primeira linha de defesa

contra infeces bacterianas e fngicas nos organismos superiores.

Palavras-chaves: Ttulo, Farmacognosia, Bioativos Naturais, Antifngicos.Apoio:

Fundao de Medicina Tropical do Tocantins FMT-TO

 9

ABSTRACT

In scientific literature observed a great amount of compositions antifungics.

However, the reality is very different, because for the human use limited therapeutic

options exist, in consequences of the emergence of toxicant reactions and of the

resistances developed by the mushrooms. Due to this situation the investment need

appeared in researches that appear for more specific pharmacs for the structures

fungics that they are not present in the human being and others encourage. Now

already they are in the market drugs that possess those characteristics and that they

are revolutionizing the therapy antifungics, as for instance: caspofungina and

voriconazol. The researchers now go back to the present peptdios in some species

of amphibians (toads and frogs), that they possess a high action, nowadays, the

magaininas represent one of the better studied classes of antibiotic peptdios, which

efetores of the innate immunity is considered, acting in a first defense line against

bacterial infections and fngicas in the superior organisms.

 10

SUMRIO

1. INTRODUO........................................................................................................10

2. OBJETIVO..............................................................................................................17

3. REVISO BIBLIOGRFICA..................................................................................18
3.1. ESTRUTURA e BIOQUMICA FUNGICAS...............................................................18
3.2. ALVOS TERAPEUTICOS DAS DROGAS ANTIFUNGICAS....................................26
3.3. DROGAS ANTIFNGICAS.........................................................................................44
3.3.1. TERAPUTICA CONVENCIONAL DE ANTIFUNGICOS................................44
3.3.2. ALTA TOXICIDADE DAS DROGAS ANTIFUNGICAS.........................................50
3.3.3. NOVAS DROGAS ANTIFUNGICAS COMERCIAIS..........................................52
3.3.4. RESISTNCIA.......................................................................................................56

4. NOVAS DROGAS POTENCIALMENTE ANTIFUNGICAS EM ESTUDOS...........58

5. METODOLOGIA.....................................................................................................60

6- RESULTADOS E DISCUSSO DOS RESULTADOS............................................61

7. CONCLUSO.........................................................................................................63

8. REFERNCIA BIBLIOGRFICA...........................................................................64
 11

1. INTRODUO

O homem e microorganismos partilham uma vida comum a bilhes de anos.

Certamente, desde a pr-histria estes microrganismos causam doenas no homem,

doenas estas que s comearam a ser estudadas a partir de 1878, graas a

trabalhos de Pasteur, que se preocupou em desenvolver meios de cultivos para

isolamento e purificao dos microorganismos, e ao mdico Robert Koch, e seus

contemporneos, que demonstram a origem infecciosa de vrias enfermidades do

homem e de animais, definindo ainda um Postulado, que at hoje defini os

procedimentos para que seja inferido a um determinado microorganismo o seu

envolvimento e a sua responsabilidade na patologia.

Um destes microorganismos so os fungos. Estes so eucariontes, heterotrficos e

maioritariamente multicelulares, embora alguns possam ser unicelulares (leveduras).

So imveis, na sua grande maioria, embora alguns possam apresentar flagelos,

fato que conduziu sua incluso no reino das plantas, no tempo de Lineu. Como

podemos ver abaixo, os fungos derivam da mesma rvore filogentica dos outros

microorganismos, diferenciando-se dos demais pelo isolamento do seu material

gentico em uma organela, carioteca, o que caracteriza uma maior especializao e

organizao celular, justificando o fato observado acima.

Figura 1. rvore Filogentica dos Seres Vivos. Adaptado de Micrbios en lnea.

acesso em novembro de 2004, http://biblioweb.dgsca.unam.mx/libros/microbios/Cap1/

Figura 2. rvore Filogentica dos Microorganismos. Adaptado de Micrbios en

lnea.acesso em novembro de 2004,
http://biblioweb.dgsca.unam.mx/libros/microbios/Cap1/
 12

Embora, recentemente a natureza infecciosa de muitas doenas tenha sido

definida, a histria da humanidade tem demonstrado que desde longo tempo o

homem utiliza substncias para combater infeces. Chineses, Hindus, Babilnios,

Sumrios e Egpcios j empregavam plantas medicinais e seus derivados e,

tambm, produtos de origem animal, como gorduras, toucinho, mel ou de origem

mineral, como sal de cozinha e sais de xidos simples, contendo cobre, antimnio

entre outros.(LACAZ,1975)

As primeiras descries de antibiose, data de 3000 anos, quando mdicos

Chineses usavam bolores para tratar tumores inflamatrios e feridas infeccionadas

e, os Sumrios recomendavam emplastos com uma mistura de vinho, cerveja,

zimbro e ameixas. Os valores teraputicos desta ltima foram potencializados pelo

lcool contido na cerveja, no vinho e no cido actico contido no zimbro, dos quais

agiram como anti-spticos.

J o valor dos bolores usados, se devia ao de antibiticos (substncia

qumica produzida por microrganismos) produzidos pelos fungos, desconhecidas

naquela poca. Alis, as propriedades teraputicas dos antibiticos, existentes nos

mofos e bolores foram tambm aproveitadas pelos mdicos Indianos, que h mais

de 1.500 anos recomendavam a ingesto de certos mofos para a cura de

disenterias, e pelos ndios norte-americanos, que utilizavam fungos para o

tratamento de feridas. At mesmo Hipcrates, que viveu cerca de 400 a.c.,

empregou a lavagem de ferimentos com vinho para evitar a infeco e recomendava

o uso de bolores tostados para o tratamento de doenas genitais femininas. Mas no

s as propriedades teraputicas so observadas nesta classe de microorganismo.

 13

Os fungos tambm acarretam infeces superficiais e ou sistmicas dependentes de

fatores intrnsecos do portador ou paciente.

A descobertas de drogas antifngicas como para os outros microorganismos

encontra-se em paralelo com o desenvolvimento tecnolgico, uso e isolamento de

substancias qumicas sintticas ou extradas de plantas, animais e outros

microorganismos.

A demonstrao, no sculo XIX, da origem infecciosa de vrias doenas

estimulou a pesquisa no sentido de se descobrir substncias especficas no combate

dos agentes infecciosos. Em resultado destas pesquisas, no incio do sculo XX

surgiram os primeiros Quimioterpicos de ao sistmica.

Os trabalhos pioneiros neste campo devem-se a Paul Ehrlich, que elaborou

as teorias sobre a ao das drogas antimicrobianas e estabeleceu os princpios

bsicos da quimioterapia.

Um grande passo na histria das drogas antimicrobianas ocorreu em 1928,

quando Alexandre Fleming estudando culturas de Staphylococcus aureus, descobriu

a penicilina, verificada pela ao do fungo Penicillium notatum. O uso teraputico da

penicilina tornou-se uma realidade da prtica clnica a partir de 1943. A droga

rapidamente se mostrou eficaz nos tratamentos de Pneumonias, Sfilis, Difterias,

Amidalites, Septicemias, Endocardites bacterianas, Meningites entre outras

infeces causadas por microrganismos Gram-positivos e negativos, inclusive as

decorrentes de ferimentos ocorridos em soldados em luta na Guerra.

Havia-se ento, necessidade de produo da droga em grande quantidade, o

que obrigou os laboratrios farmacuticos a se esforarem na busca de novas

tcnicas de refinamento e controle da qualidade do laboratrio, gerando com isso

maior grau de pureza da droga.

 14

Nascia ento a Era da Antibioticoterapia, envolvendo novas tcnicas, novos

cientistas, novos equipamentos e materiais relacionados com a Qumica, Biologia,

Farmacologia, o que exigiu a montagem de novas estruturas na produo e

comercializao de novas drogas. O resultado final deste processo cientfico e

tecnolgico refletiu na mudana de expectativa de inmeras doenas infecciosas,

elevando-se o ndice de cura com pouqussimas seqelas. (TAVARES, 1996).

A descoberta de antibiticos foi acompanhada pelo desenvolvimento de

tcnicas de laboratrio que permitam verificar in vitro seu espectro antimicrobiano.

Estas metodologias foram desenvolvidas inicialmente para bactrias, mas tambm

houve a necessidade de desenvolvimento para os fungos, visto que com o uso de

antimicrobianos, aumentou a expectativa de vida da populao, aumentando a

morbidade de outras doenas, destacando-se, doenas degenerativas e ou

oportunistas, que no so ocasionadas a estes microorganismos.

O uso indiscriminado destes antibiticos levou a efeitos indesejveis e

principalmente seqelas irreversveis na qual hoje se discute ostensivamente.

Os mtodos in vitro demonstram logo, que determinados microorganismos da

mesma espcie, porm, de linhagens diferentes, podiam se comportar de modo

diversificado frente a um mesmo antimicrobiano; enquanto uma linhagem era

sensvel, outra poderia ser resistente. A necessidade de conhecer quantitativamente

o fenmeno e de obter informaes mais rapidamente, embora menos precisas de

ordem qualitativa, bem como o interesse em tornar o antibiograma, tcnica utilizada

para medir a sensibilidade de microrganismos e determinadas substncias qumicas,

se tornasse mais prtico e econmico, fizeram com que aparecessem numerosas

tcnicas de execuo dessa prova.

 15

Partindo-se do pressuposto de que, uma das etapas essenciais escolha de

um antimicrobiano para a correta utilizao clnica, sem dvida, o conhecimento da

sensibilidade dos microorganismos infectantes. Esta preocupao tem sido uma

constante, desde a introduo desses produtos na prtica mdica a partir da dcada

de 40.

Tem se observado que alguns microorganismos conservam, praticamente o

mesmo padro de sensibilidade atravs de anos, independente da utilizao maior

ou menor de frmacos sobre eles; outros, em contrapartida, demonstraram

habilidade extraordinria de desenvolver resistncia a esses agentes com relativa

rapidez, constituindo-se um difcil problema teraputico e numa constante

preocupao. (LACAZ, 1975).

Esta preocupao esta intimamente associada ao uso de antifngicos visto

que estas infeces fngicas sistmicas tm aumentado de forma alarmante durante

as ltimas dcadas, sendo um dos problemas mais graves a nvel hospitalar. Os

principais fatores de risco que tm contribudo para este problema so: o incremento

do nmero de procedimentos cirrgicos e tcnicas invasivas (cateteres centrais,

nutrio parentrica), o aumento de doentes submetidos a tratamentos de

quimioterapia, teraputica com frmacos imunossupressores (transplantes de

rgos), quadros patolgicos de imunossupresso (SIDA), e a prescrio de

antibiticos de largo espectro (fator de risco acrescido devido reduo da flora

bacteriana protetora, levando ao crescimento de fungos que colonizam o doente).

As micoses profundas mais relevantes so: a aspergilose, produzida

geralmente pelo Aspergillus fumigatus, e com menor frequncia, por outras espcies

de Aspergillus spp.(a aspergilose invasiva um quadro infeccioso com uma

mortalidade prxima dos 90% em doentes imunodeprimidos); as candidases

 16

sistmicas, provocadas na sua maioria por Candida albicans; e a criptococose

induzida por Cryptococcus neoformans (sendo a sua forma mais grave a meningite,

um dos problemas mais complicados de solucionar nos doentes com SIDA).

Os antifngicos se destacaram a partir de 1940, vistos que antes desta data,

poucos frmacos estavam disponveis para o tratamento de infeces fngicas

sistmicas.

O aparecimento dos polienos antifngicos representou o maior avano na

micologia mdica; a anfotericina B rapidamente se tornou na teraputica de primeira

linha para infeces graves; no entanto possua efeitos secundrios associados

perfuso e nefrotoxicidade que dose limitante. Continuaram as pesquisas para

novos antifngicos menos txicos, levando descoberta dos azis algumas dcadas

mais tarde.

Nos anos 80, surgiu a primeira gerao de triazis, o que constituiu o

segundo maior avano no tratamento de infeces fngicas. Primeiro com o

cetoconazol, depois com o fluconazol e itraconazol, estes ltimos com um melhor

perfil de segurana relativamente anfotericina B e ao cetoconazol.

O seu uso generalizado levou ao desenvolvimento de resistncias, e a

induo de interaes medicamentosas imps algumas limitaes na sua utilizao.

Nos anos 90, surgiram as formulaes lipdicas de anfotericina B (lipossmica,

complexo lipdico e disperso coloidal) associadas a uma diminuio de

nefrotoxicidade, mas com um custo teraputico muito elevado.

Atualmente surgiu uma nova classe de antifngicos, as equinocandinas, com

a caspofungina e uma segunda gerao de triazis, com o voriconazol.

Estas novas drogas que recentemente entraram no mercado farmacutico

foram fruto de estudos detalhados das estruturas moleculares dos fungos e sua
 17

bioqumica, associado modelagem molecular levando em conta a relao estrutura

atividade. Frmacos Inteligentes o que se busca desenvolver a cada dia.

Nesta monografia descreveremos as preocupaes sobre as drogas

antifngicas, bem como as metodologias para buscas de novas alternativas, que

observem as necessidades atuais dos usurios, sem lhe causarem uma seqela

indesejvel, conforme preconiza hoje os frmacos inteligentes.

2. OBJETIVO

Analisar sistematicamente artigos cientficos, revistas, livros e material

digitalizado, num perodo de 1970 a junho de 2004 sobre drogas e prospeco

de drogas antifngicas .

Descrever os novos alvos antifngicos e suas perspectivas apresentadas pelos

autores.
18
 19

3. REVISO BIBLIOGRFICA

3.1. ESTRUTURA e BIOQUMICA FUNGICAS

Os fungos apresentam uma morfologia estrutural bastante diversificada

podendo, ser visto fungos unicelulares e ou organizados em hifas. Nos unicelulares

a diferenciao somtica mnima ou mesmo nula, mas existe diferenciao dos

tecidos reprodutores, principalmente observados em hifas.

Os fungos multicelulares so formados por uma rede miclio - de filamentos,

formados por clulas alinhadas topo a topo, ramificados hifas -, que podem ser

septados ou asseptados.(PRATES,2004)

A estrutura em miclio confere aos fungos uma elevada relao rea/volume,

facilitando a aquisio de alimento, pois esta estrutura rapidamente se estende em

todas as direes sobre o alimento, podendo crescer mais de um quilometro por dia,

no total, e afastar-se mais de 30 metros do local de inicio do crescimento. Por este

motivo, um fungo tem um importante efeito no meio, nomeadamente na degradao

de substrato e na acumulao de partculas.

O crescimento das hifas ocorre apenas nas extremidades, podendo as zonas

mais antigas estar livres de contedo citoplasmtico.

Hifas septadas tm paredes septos a separar os compartimentos

celulares entre si. Os septos no so, no entanto, completos, existem poros que

permitem a comunicao, e mesmo o movimento de organitos, entre os citoplasmas

adjacentes. Este tipo de hifa pode apresentar um nico ncleo por compartimento

monocaritico ou dois ncleos por compartimento dicaritico.

Figura 3. Miclio com hifas septadas. Adaptada de http://www.doctorfungus.org/

Figura 4. Miclio com hifas no-septadas. Adaptada de http://www.doctorfungus.org/

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Todos os fungos apresentam parede celular, pelo menos em algum estgio do

seu ciclo de vida. Esta parede, outro argumento a favor da sua anterior incluso no

reino das plantas, tem, geralmente, caractersticas bem diferentes das vegetais, pois

apresenta quitina, polissacardeo presente na carapaa de muitos animais, o que lhe

confere elevada rigidez e maior resistncia degradao microbiana.

Figura 5. Esquematizao da parede e membrana celular de um fungo.

Adaptada de http://www.doctorfungus.org/

Figura 6. Micrografia eletrnica de um corte transversal de uma levedura. PM =

Parede celular, CW= Membrana Celular. Adaptada de http://www.doctorfungus.org/

Existem espcies de fungos, no entanto, que apresentam parede celular de

celulose e alguns com quitina.

A presena da parede impede-os de realizar fagocitose, logo, se alimentam

por absoro, libertando enzimas hidrolticas para o exterior do corpo e absorvendo

os nutrientes sob a forma j digerida.

Esta situao permite entender melhor porque motivo os fungos apresentam

corpo sob a forma de miclio, pois sem esta estrutura no teriam uma relao

rea/volume suficientemente elevada para se alimentar satisfatria.

Os fungos so altamente tolerantes a ambientes hostis, sendo alguns mais

resistentes a ambiente hipertnicos que as bactrias (fungos so capazes de

crescer num frasco de doce no frigorfico, onde no cresceriam bactrias). Resistem

igualmente a grandes amplitudes trmicas, tolerando temperaturas de 6C a 50C

ou mais, dependendo da espcie.

 21

Reproduo assexuada este tipo de reproduo ocorre atravs fenmenos

mitticos de fragmentao do miclio, gemiparidade em fungos unicelulares, como

as leveduras, ou esporulao, o mtodo mais usual em fungos multicelulares. A

esporulao implica a existncia de estruturas especializadas na produo de

esporos, formadas por hifas verticais, mais ou menos compactadas e separadas por

septos do restante miclio esporangiforos ou conodiforos.

Os esporos imveis, clulas de parede espessa e especializada na disperso,

so produzidos aos milhes e transportados pelo vento at atingirem um substrato

favorvel, onde se desenvolvem num novo miclio. Estes esporos so geralmente

libertados explosivamente e podem permanecer viveis durante longos perodos

de tempo. Existem, igualmente, esporos mucilaginosos, de parede fina e envoltos

por uma substncia pegajosa que lhes permite aderir ao corpo de outros

organismos, que os espalham meio.

Figura 7. Leveduras em gemulao. Adaptada de http://www.doctorfungus.org/

Figura 8. Esporangiforo (hifa vertical produtora de esporos

endogeneamente). Adaptada de http://www.doctorfungus.org/

Reproduo sexuada tal como sempre acontece, este tipo de reproduo,

devido ao elevado investimento que exige dos organismos, ocorre em condies

desfavorveis, apenas quando se pretende aumentar a variabilidade atravs da

meiose.

Nos fungos predomina a haplofase, apenas existindo ncleos diplides em

etapas da reproduo sexuada. A reproduo sexuada designa-se conjugao, e

 22

ocorre entre dois miclios diferentes, estirpe + (positivas) e estirpe (negativo) -. Duas

hifas crescem em direo uma outra, transportando um ncleo na sua

extremidade. Quando estas se tocam, as paredes so dissolvidas por enzimas e

formam-se septos, que isolam os ncleos nas extremidades, originando

gametngios. A fuso dos ncleos gametas origina uma clula diplide zigoto,

que ir desenvolver uma espessa parede de proteo zigsporo.

Em condies favorveis, este esporo sexuado sofre meiose e origina um

novo miclio haplide. Deste modo, os fungos apresentam um ciclo de vida

haplonte, com meiose ps-zigtica.

Os processos nucleares, mitose e meiose, que esto por trs dos dois tipos

de reproduo apresentam importantes diferenas nos fungos: membrana nuclear

permanece durante todo o processo de diviso nuclear, sofrendo uma constrio

mediana na separao dos ncleos-filhos; fuso acromtico forma-se no interior da

membrana nuclear; centrolos no esto presentes, embora existam organizadores

de fibrilas, sem, no entanto, a estrutura tpica dos eucariontes.

Figura 9. conidiforo de Penicillium sp. Adaptada de

http://www.doctorfungus.org/

Figura 10. Abaixo um Zigosporo, esporo sexuado de parede espessa. Adaptada de

http://www.doctorfungus.org/
 23

Os fungos podem formar estruturas que lhe confere maior grau de resistncia

ao meio, como o Biofilme. Este uma estrutura altamente especializada formada

por uma malha de microorganismos justapostos que aumentam a resistncia a

antibiticos, exemplo Anfotericina B. Este mecanismo de resistncia no

envolvendo mecanismos moleculares recente e est sendo estudado

profundamente, pois poucas informaes tm-se desta arquitetura organizacional

dos microorganismos, e principalmente de tratamentos eficazes para se combater

quando estes microorganismos apresentam esta estrutura.

Figura 11. Biofilme de C. albicans. Adaptado de

http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol10no1/pdfs/03-0119.pdf

Figura12. Biofilme de C. albicans. Adaptado de

http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol10no1/pdfs/03-0119.pdf
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Outra forma de organizao observado em fungos predadores, formando

uma malha que servem como armadilhas para captura de alimento, como observado

na fotomicrografia de varredura abaixo, onde um fungo captura um nematoda.

Figura 13. Captura de nematoda por um fungo. Adaptado de

http://www.cdc.gov/ncidod/EID/vol10no1/pdfs/03-0119.pdf
 25

3.2. ALVOS TERAPEUTICOS DAS DROGAS ANTIFUNGICAS.

Os alvos das drogas antifngicas so baseados na formao estrutural destes

seres, o que envolve o conhecimento de toda bioqumica e a biologia molecular dos

fungos (via metablica), como vistos nas paginas anteriores. Partindo do princpio,

que os fungos so seres complexos, que tem organelas e enzimas que tambm so

apresentadas no Homem (reino animal), tornando mais dificultoso o rduo trabalho

para o desenvolvimento de novas drogas, e demonstrando que as atuais utilizam as

excees bioqumicas presentes no catabolismo necessrios para o

desenvolvimento, perpetuao e sobrevivncia dos fungos em relao ao Homem.

Entretanto, muitos destas vias tm em alguma parte inter-relao com o

metabolismo comum e ou as drogas no so to seletivas o quanto precisa, o que

proporciona efeitos secundrios srios para o ser humano. Assim so as principais

drogas utilizadas na teraputica atual.

Descreveremos a seguir, passos bioqumicos importantes selecionados por

pesquisadores, como SeltrenniKoff, Barata e Gottlieb, sendo alvos para o

desenvolvimento de novas drogas antifngicas inibidoras e seletivas:

a) Esterides de membrana

b) Sntese de DNA/RNA

c) Topoisomerase fngicas

d) Parede Celular fngica,

Os principais agentes antifngicos em uso clnico atualmente (polinos, azis,

alilaninas, tiocarbamatos) devem sua atividade a interao direta com ergosterol ou

inibio de sua sntese. Exceo a 5-flucitosina que inibe a sntese do RNA/DNA.

 26

3.2.1.Inibidores do Esterides da Membrana Fngica

Os Esterides esto presentes em todas as clulas fngicas. O principal

esteride das leveduras e muitos outros fungos, o Ergosterol. Seu objetivo primrio

modular a fluidez da membrana e evitar suas alteraes por flutuao nas

condies ambientais. Alem disto os esterides tem um papel vital nos fungos,

regulando o crescimento e proliferao celular. Os antifngicos que atuam em nvel

do ergosterol o fazem por formao de complexo com ergosterol ou inibindo alguma

das etapas da sua Biossntese.

Engenharia metablica do ergosterol:

Figure 14: Via de biosintese de Ergosterol nos fungos. Ergosterol e alguns

percusores podem ser esterificados atravs de esterilester e armazenadas em
gotculas de lipdeos, estas reaes so catalizadas pela Sat1p (Are2p) and Sat2p
(Are1p) (Acil esteril transferases). Fonte: http://www.tu-
berlin.de/~biotec/mibi/AG_Lang/Lang_web/Projekte/2sterolpathwaylarge.htm acesso,
novembro de 2004.
 27

3.2.2. Formao de Complexo com Ergosterol

Os polienos em geral, e Anfotericina em particular tem a capacidade de formar

complexos com esterides da membrana. No caso das clulas fngicas, se unem ao

ergosterol, formando poros e permitindo a sada do contedo intracelular, resultando

na morte da clula. Estes poros impedem tambm o gradiente de prtons que

estabelecido pelas ATPases Fngicas. Alem disto a Anfotericina no s tem

afinidade pelos esterides fngicas, como tambm pelo de mamferos e por tanto,

antifngicos com esse mecanismo de ao so muito txico para humanos .

3.2.3. Inibio da Biossntese o Ergosterol:

Muito dos agentes com maior exceto no uso clinico (Azis e alilaninas),

interferem com a Biossntese do ergosterol. Alem disto, conhecido que eles no

so seletivos e podem tornar se txico para o homem j que inibem etapas da

biossintese que so comuns a biossintese do ertgosterol e, por tanto, as vias

biossinteticas que levam aos hormnios sexuais e outros esterides do hospedeiro.

O esquema abaixo mostra a biossintese do ergosterol e colesterol e as etapas que

so bloqueadas por distintos compostos antifngicos:

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Acetil CoA
1233 A HMGCoA sintase
HMGCoA
Compactina HMGCoA redutase
Ac. mevalnico

Esqualeno

Alilaninas: Naftifina e anlogos Esqualeno epoxidade

Epxido de esqualeno

Lanosterol
Azoles:Cetoconazol e anlogos 14-demetilase

14-demetil lanosterol

24-metilen zimosterol Zimosterol 7-dehidro zimosterol

5,7-dehidro 24-metenil zimosterol 5,7-dehidrozimosterol

ERGOSTEROL (Fungos) COLESTEROL (Humano)

Figura 15. Biossintese do Ergosterol e Colesterol. Os quadros direita das

flechas mostram as enzimas que participam desta etapa da Biossntese. O quadro a
Esquerda das flechas mostram os inibidores destas enzimas. Fonte: Plantas
medicinais sob a tica da Qumica Medicinal Moderna. P. 447.
 29

3.2.4. Inibidores da passagem de Acetil Coezima a (AcCoA) a cido

Mevalnico:

a - Inibio da hidroximetilglutaril coeziama-A sintase, esta enzima catalisa de

3-hidroxi-3-metil-glutaril-CoA a partir de AcCoA e Acetoacetil-Coa. O composto

denominado 1233 a foi relatado como antifngico inibidor especifico da

hidroximetilglutamil-coezima-A sintase (HMG-CoA sintase) relatado em 1988,

segundo YUNES. Mas apesar de ter atividade in vitro, no seletivo, j que

tambm inibe a via do colesterol em clulas de mamferos.

b - Inibio da Hidroximetilglutaril Coezima-A Redutase

Vrios produtos microbianos, entre eles a compactina, isolada de Penicilina

brevicompactum tm se identificado como antifngico, atuando como potentes

inibidores desta enzima. No entanto, a compactina foi indicada tambm como um

agente antihipercolesterolmico (YUNES, 2001).

c- Inibio da Esqualeno Epoxidase

A esqualeno epoxidase surgiu na dcada de 70, como um alvo importante

para detectar agentes antifngicos. uma enzima que epoxida o esqualeno na

posio 2,3. No era um membro da superfamlia citocromo P450 e sua inibio

resultava em atividade antifngica. Parecia um alvo muito seletivo, j que a enzima

do fgado do rato mostrou ser vrias ordens de magnitude menos sensvel que a C.

Albicans. inibio por alilaminas um tipo de composto com propriedade inibidora

dessa enzima (Barett-Bee et al., 1992). Naftifina foi a primeira alilamina detectada

com propriedade inibidora de esqualeno epoxidase, seguida por terbinafina, que

 30

mais potente e mostra eficcia oral e tpica na clinica. Os tiocarbamatos como o

tolnaftato, so uma importante classe de antifngico que atuam tambm inibindo a

esqualeno epoxidase. Como no caso das alilaminas, a ao fngica se produziria

por um acumulo de esqualeno intracelular, o qual seria txico para a clula (YUNES,

2001).

Alem disto, foi sugerido que a esqualeno epoxidase seria um alvo

clinicamente til, no somente como agente antifngico, mais tambm como

moduladora da biossintese do colestreol somando se a isto no tratamento de plantas

infectadas com fungos com alilaminas, tambm se observou uma falta de

seletividade, j que o tratamento antifngico resultou na modicao da composio

de todos os esterides da planta (YUNES, 2001).

3.2.5. Inibio da 14-demetilase

Em fungos e mamferos a eliminao do metil do C-14 do lanosterol a

primeira transformao depois da cilizao do epoxido do esqualeno. Esta

demetilao catalizada pela lanosterol 14-alfa-metil demetilase, enzima

monooxigenase que contm o citocromo P450. A maioria dos fungicidas usados na

agricultura (diclorbutrazol, fenarimol), assim como os usados no tratamento de

micoses humanas (miconazol, cetoconazol, fluconazol), atuam inibindo a 14-

dimetilase e assim inibir a biosntese de ergosterol. (YUNES, 2001).

 31

Dada importncia que reveste este tipo de composto, nos ltimos anos foram

relatadas novas estruturas inibidoras da 14-demetilase. Tambm foram sintetizados

novos Azois com um amidoalcool e com ncleo quinazolinona (YUNES, 2001).

Os Azis alem de serem fungistticos o que leva ao aparecimento de

recorrncias, inibem as enzimas, no s do fungo mais tambm do hospedeiro. A

maior toxicidade dos agentes antifngicos, que atuam por esse mecanismo, se

observa nas vias enzimticas, que metabolizam os esterides para formar

hormnios, particularmente hormnio sexuais. Assim a maior manifestao clinica da

toxicidade do cetoconazol a inibio da biossintese de testosterona. Alem disto,

terapia prolongada com Azois para tratar candidiases orais e outras infeces

fngicas em paciente co SIDA, levam ao aparecimento de cepas resistentes.

3.2.6. Inibidores da 24-demetilao

Uma das reas mais promissoras da investigao de antifngicos seletivos

a inibio da etapa de adio de um grupo metil no C-24 da cadeia lateral dos

esteroides. Mecanisticamente, o doador de metil a s-adenosil metionina (SAM),

segundo YUNES.

Esta etapa da biossntese do ergosterol no tem lugar nos mamferos, assim

evita uma toxicidade baseada no mecanismo de ao. O produto natural sinefungina

mostrou ser inibidor desta enzima. Entretanto, este composto tambm inibe outras

reaes de metilao dependente da SAM sistemas de mamferos levando a

toxicidade. Anlogos do produto natural Sinefungina, 25-azaterol, plakinaminas e

compostos relacionados, tambm foram relatados como possveis inibidores dessa

enzima (YUNES, 2001).

 32

3.2.7. Inibidores da sntese RNA/DNA

Estes inibidores atuam interferindo no metabolismo das pirimidinas impedindo

a sntese de DNA/RNA e, conseqentemente, de protenas na clula fngica. A 5-

flucitosina atua por este mecanismo por meio da enzima citosina deaminase, este

composto se desamina intracelularmente a 5-fluoroulacila composto que inibe a

sntese de RNA e DNA por diferentes vias. A ausncia de citosina deaminase nas

clulas dos mamferos faz com que a flucitosina tenha baixa toxicidade para o

hospedeiro, entretanto este composto desenvolve rpida resistncia.

3.2.8. Inibidores da topoisomerase

O DNA celular, tanto comossomal como plasmidico se encontra como um

crculo fechado covalentemente que pode esta em estruturas topolgicas diferentes,

relaxando ou superenovelando. As DNA-topoisomerases so grupos de enzimas

capazes de catalisar a interconvero entre ambas as formas topolgicas,

permitindo que o mesmo cumpra suas funes de transcrio, traduo ou

recombinao dentro da clula. Estas enzimas rompendo transitoriamente uma das

cadeias do DNA (topoisomerase tipo I) ou as duas (topo isomerase tipo II) e logo

relaxando as, permite as transformaes topolgicas que seriam de outra forma

impossvel. As DNA-tpoisomerase mostraram ser alvos moleculares importantes

para o descobrimento de frmacos antibacterianos e anticancergenos.

 33

Atualmente novos estudos tm demonstrado que varias topoisomerases I

extrada de fungos seriam alvos muito promissores para o descobrimento e

desenvolvimento de agentes fungicidas seletivos (YUNES, 2001).

As topoisomerases I tem sido menos estudados como alvos para antifngicos.

3.2.9. Inibidores da Parede Celular Fngica

Nos ltimos anos surgiu a parede celular fngica como alvo extremamente til

para detectar agentes antifngicos seletivos e, por tanto, no txico para o

hospedeiro. A diferena mais marcante entre clulas fngicas e humana que as

clulas dos seres classificados dentro do reino animlia no possuem esta parede.

A parede no somente uma cobertura externa inerte mais tambm cumpre

um papel dinmico em todos os aspectos da fisiologia fngica. Ela serve ao fungo

como uma barreira protetora, evita sua ruptura osmtica e lhe confere forma,

essencial para seu crescimento e viabilidade. O fato das clulas humanas no

possurem parede e as fngicas possurem faz com que, os antifngicos que atuam

por esse mecanismo sejam frmacos especficos e, por tanto, seguros, e ento

muito atrativo para o futuro uso clinico.

A parede celular fngica esta formada por muitos componentes moleculares

entre eles beta-glicano, quitina, monoproteinas e outras protenas. Uma vez

sintetizados, eles interagem uns com os outros, via uma serie de enzimas

associadas parede, realizando se unies cruzadas, ramificaes e outras funes.

Trs atividades enzimticas tm mostrado ser essenciais para a formao da parede

celular fngica: 1,3-beta-glicano sintase, 1,6-beta-glicano sintase e quitinase que

catalizam a formao de 1,3 e 1,6-beta-glicanos e quitina respectivamente, sendo,

 34

por tanto, alvos atrativos para o descobrimento de novos frmacos antifngicos

(YUNES, 2001).

3.2.10. Peptdeos Antimicrobianos Extrados de Fontes Naturais no

Convencionais.

Venenos e toxinas de origem natural h muito representam uma fonte de

fascnio para o homem, graas aos seus extraordinrios efeitos farmacolgicos. Sua

utilizao cientfica tem contribudo com sucesso para a elucidao de vrios

mecanismos fisiolgicos, como demonstrado por Claude Bernard (citado por Junior

& Prates, 2004) em seus experimentos clssicos da dcada de 1850, com o curare.

Assim como sua explorao industrial para o uso teraputico, a exemplo de vrias

comunidades indgenas e na medicina popular. Os vertebrados, mais precisamente

os anfbios da ordem Anura, representam um verdadeiro laboratrio de bioqumica,

tendo em vista o arsenal de toxinas que fabricam. Nas clulas que revestem as

paredes de glndulas granulares presentes na pele desses animais produzida uma

variedade de princpios ativos que compreendem molculas alifticas, aromticas e

heterocclicas, alm de uma diversificada gama de esterides, de alcalides, de

aminas biognicas, de derivados guanidnicos, de protenas e de peptdeos,

incluindo-se na produo desses dois ltimos, seus precursores e todo o sistema

enzimtico envolvido na sua biossntese. Essas molculas acumulam-se em

grnulos, os quais compem a luz de glndulas drmicas e so liberadas mediante

estmulos apropriados. Seu papel muito diversificado sobre as funes fisiolgicas

da pele ou na defesa contra predadores e microrganismos.Grande nmero desses

compostos j se encontra caracterizado estrutural e funcionalmente. Entre todos os

 35

tipos de molculas mencionados acima, os peptdeos tm despertado bastante

interesse devido s suas atividades como mediadores farmacolgicos e

descoberta de molculas homlogas ou anlogas em tecidos do trato

gastrointestinal e sistema nervoso de mamferos. O exemplo mais freqente de

molculas encontradas em ambos os grupos so as taquicininas, as cerulenas, o

hormnio liberador de tirotropina, as bobesinas e os peptdeos opiides, (JUNIOR &

PRATES, 2004).

O primeiro relato da ocorrncia de peptdeos com atividade antibacteriana e

hemoltica na pele de anfbio, data de 1969, quando foi identificada a bombinina, um

peptdeo de 24 resduos de aminocidos, proveniente da secreo cutnea do anuro

europeu Bombina variegata. No final da dcada de 1980, foram isoladas as

magaininas de Xenopus laevis e, somente a partir da, outros peptdeos com

atividade microbicida de origens diferentes comearam a ser estudados mais

detalhadamente. Atualmente, as magaininas representam uma das mais bem

estudadas classes de peptdeos antibiticos, os quais so considerados efetores da

imunidade inata, agindo em uma primeira linha de defesa contra infeces

bacterianas e fngicas nos organismos superiores. Exemplos importantes retirados

de nossa fauna so as rs leptodactylus ocellatus e Dendrobates galactonotus, que

esto representadas abaixo, (JUNIOR & PRATES, 2004).

 36

Figuras 16 e 17. Fonte: PEPTDEOS ANTIMICROBIANOS.Uma alternativa no

combate a microrganismos resistentes.Maura Vianna Prates: Aluna de

doutorado do curso de Ps-graduao do Departamento de Biologia Celular da

Universidade de Braslia/UnB. mprates@unb.br.Carlos Bloch Jnior Professor

adjunto do Instituto de Qumica da Universidade de Braslia/UnB, Pesquisador

do Cenargen/Embrapa.cbloch@cenargen.embrapa.br.

Mais de cinqenta peptdeos antimicrobianos de anfbios j foram isolados,

tendo como principal caracterstica a natureza catinica e a capacidade de

permeabilizar membranas de microorganismos. Podem ser agrupados segundo sua

estrutura primria e muitos so encontrados em indivduos do mesmo gnero e at

mesmo em indivduos de gneros distintos, pertencentes mesma subfamlia ou

no. Em 1970, a bombinina foi descrita como um peptdeo antibacteriano e

hemoltico isolado da secreo da pele do anfbio B. variegata. Pouco tempo depois,

outras bombininas foram detectadas na secreo do mesmo anfbio, as quais

diferiram entre si por poucos resduos de aminocidos. Peptdeos do tipo bombinina

tambm foram isolados da espcie B. orientalis e mostraram pouqussima variao

em relao aos encontrados em B. variegata. As bombininas possuem amplo

espectro de ao contra microrganismos em geral, porm apresentam toxicidade

seletiva contra clulas sangneas, provocando a lise das mesmas. A secreo da

pele de Xenopus laevis tambm tem sido objeto de intensa investigao. Nessa

secreo, foi detectado o TRH (hormnio liberador de tirotropina), a xenopsina e a

cerulena, com potente atividade hipotensora.Alm desses peptdeos bioativos,

foram encontrados ainda peptdeos homlogos s bombininas, denominados

 37

magaininas, que tambm so encontradas no estmago do anfbio, porm sem

funo definida nesse rgo, (JUNIOR & PRATES, 2004).

Os peptdeos de defesa isolados da pele de Xenopus sp. esto agrupados em

subfamlias de acordo com sua origem biossinttica. A xenopsina e a cerulena so

molculas de estrutura e atividades farmacolgicas anlogas s da neurotensina e

da gastrina/CCK (colecistocinina) dos mamferos, respectivamente. Esses peptdeos

adotam a estrutura de hlice anfiflica quando em ambiente hidrofbico, sendo ativos

em doses micromolares, contra uma variedade de bactrias gram-positivas, gram-

negativas, fungos e leveduras. As magaininas I e II so peptdeos homlogos que

possuem um amplo espectro de ao antimicrobiana. Em doses micromolares,

interrompem o crescimento e/ou induzem a lise osmtica de diversos tipos de

bactrias gram-positivas e gram-negativas e de protozorios. Elas so capazes de

induzir uma lise irreversvel das clulas tumorais hematopoiticas e de tumores

slidos de diversas origens, mas no provocam efeito sobre clulas diferenciadas de

eucariticos, (JUNIOR & PRATES, 2004).

As espcies do gnero Rana de diferentes reas geogrficas tm-se

mostrado igualmente interessantes, no que se refere ao contedo de peptdeos

antimicrobianos da pele.Foram detectados peptdeos com atividade antimicrobiana

nas espcies R. esculent, R. brevipoda, R. catesbeiana, R. rugosa e R. temporaria ,

denominados esculentinas, brevininas, ranalexinas, rugosinas e temporinas,

respectivamente. A particularidade encontrada nos peptdeos desse gnero a sua

estruturao secundria, a qual decisiva no modo de interao toxina /

microrganismo, distinta de todas as outras at ento descrita, (JUNIOR & PRATES,

2004).
 38

Na Amrica do Sul, os hildeos da subfamlia Phyllomedusinae constituem

uma fonte muito rica de peptdeos antimicrobianos. Atualmente quatro espcies do

gnero Phyllomedusa vm sendo estudadas: P. bicolor; P.sauvagei, P. distincta e P.

tarsius. Nesse gnero foram detectados potentes agentes antimicrobianos

denominados dermaseptinas, com amplo espectro de atividade antimicrobiana e

cicatrizante, (JUNIOR & PRATES, 2004).

As dermaseptinas so molculas catinicas de 24 a 34 resduos de

aminocidos que formam uma cadeia linear com estrutura secundria aleatria em

solvente aquoso, porm ordenada (a-hlice) quando em meio apolar, como

podemos observar na fotocristalogafia e modelagem molecular apresentadas

abaixo, mostrando o canal caracterstico formado por esta estrutura, responsvel

pela atividade, desestruturando a homeostase celular destes seres. (PRATES,

2004).

Figura 18. Estrutura tridimensional calculada em pH 4 a 20C de HSP 1 em

TFE/H2O (70:30), baseada em RNM, para observao da formao de tubulo
desestruturados de membrana. Adaptado de Maura V. Prates, et al. THE
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY. The NMR-derived Solution Structure
of a New Cationic Antimicrobial Peptide from the Skin Secretion of theAnuran
Hyla punctata. Vol. 279, No. 13, Maro 2004, p. 13024.

Figura 19. Anlise superficial da estrutura tridimensional calculada em pH 4 a

20C de HSP1 em TFE/H2O (70:30), baseada em RNM, para observao da
formao de tubulo desestruturados de membrana, e as caractersticas de
 39

solubilidade da molcula, as partes mais avermelhadas apresentam

resultantes de cargas residuais hidrofbicos e azuis hidroflica, observando os
resduos N e C-terminais. Adaptado de Prates, Maura V., et al. THE JOURNAL
OF BIOLOGICAL CHEMISTRY. The NMR-derived Solution Structure of a New
Cationic Antimicrobial Peptide from the Skin Secretion of theAnuran Hyla
punctata. Vol. 279, No. 13, Maro 2004, p. 13025.

Outras espcies, tais como P. rhodei e P. burmeisteri, tambm tm sido

investigadas como provveis produtoras de peptdeos antimicrobianos, da famliadas

dermaseptinas. Alm disso, peptdeos relacionados com as dermaseptinas foram

detectados em outros hildeos dessa subfamlia, nas espcies Pachymedusa

dacnicolor e Agalychnis annae, ambas provenientes da Amrica Central. As

dermaseptinas exercem atividade ltica sobre bactrias gram-positivas e gram-

negativas, protozorios ciliados, leveduras e fungos filamentosos em concentraes

micromolares. Contudo, tais efeitos citolticos no foram observados em clulas de

mamferos, devido, possivelmente, estrutura e composio da membrana celular

desses animais. De fato, estudos de citlise usando lipossomas de diferentes

composies fosfolipdicas e crescente concentrao de colesterol (caracterstica de

animais superiores) mostraram maior resistncia dessas membranas artificiais

ruptura. A adenoregulina de P. bicolor um peptdeo de estrutura similar s

dermaseptinas, mas foi isolada primeiramente por sua funo farmacolgica

neurotransmissora, que consiste na sua capacidade de induzir a ligao de

agonistas aos receptores A1 de adenosina, provavelmentevdevido presena de

Damino cidos em sua composio. Posteriormente, foi relatada sua atividade

antimicrobiana, semelhante a das outras dermaseptinas. Da mesma forma, muitas

espcies australianas de anfbios do gnero Litoria tm sido estudadas por

apresentarem peptdeos antimicrobianos. As espcies L. xanthomera e L. chloris

revelaram a presena de peptdeos antimicrobianos denominados caerinas, e as

 40

espcies L. splendida e L. cerulea, o peptdeo cerulena, todos ativos contra

bactrias gram-positivas. J as espcies L. infrafrenata e L. genimaculata

apresentaram peptdeos denominados frenatinas e maculatinas, sendo o primeiro de

amplo espectro e o segundo, com atividade semelhante das caerinas, (JUNIOR &

PRATES, 2004).

Na tabela, esto listados os principais peptdeos com atividade antimicrobiana

encontrados nas secrees da pele ou em outros rgos de anfbios anuros.

Tabela de Peptdios Antimicrobianos extrados de seus respectivos Anfbios.

Peptdeos Anfbios
Magaininas Xenopus sp.
Bombininas Bombina sp.
Dermaseptinas Phyllomedusa sp.
Brevininas Rana brevipoda
Caerinas Litoria sp
Gaegurinas Rana rugosa
Rugosinas Rana rugosa
Buforina Bufo bufo
Ranalexinas Rana catesbetana
Xenoxinas Xenopus sp.
Temporinas Rana temporaria
Maculatinas Litoria genimaculada
Esculentinas Rana esculenta
Pipininas Rana pipiens
PGLa Xenupus laevis
Tabela 1. Adaptado da Fonte: PEPTDEOS ANTIMICROBIANOS. Uma alternativa
no combate a microrganismos resistentes.Maura Vianna Prates: Aluna de
doutorado do curso de Ps-graduao do Departamento de Biologia Celular da
Universidade de Braslia/UnB. mprates@unb.br.Carlos Bloch Jnior Professor
adjunto do Instituto de Qumica da Universidade de Braslia/UnB, Pesquisador
do Cenargen/Embrapa.cbloch@cenargen.embrapa.br.
 41

A tabela abaixo mostra figuras determinando uma seqncia de aminocidos

de cada peptdeo e um tridimensional de estrutura de sua tubular.

Figura 20. Fonte: 4- BULET, Philippe; et al. Anti-microbial peptides: from

invertetbrates to vertebrates. Immunological reviews. 2004; vol. 198. p. 171.
Figura 21. extrado de : 4- BULET, Philippe; et al. Anti-microbial peptides: from
invertetbrates to vertebrates. Immunological reviews. 2004; vol. 198. p 175.

Assim, veremos futuramente no mercado diversas drogas utilizando este

mecanismo. Estes novos mecanismos observados de atividade antimicrobiana

envolvendo peptdeos demonstram ser bastante promissor para aplicao clinica,

visto que possuem seletividade alta como antifngicos de membranas e os outros

microorganismos, no invadido membranas de clulas humanas. O que hoje ainda

torna-se este medicamento no disponvel para utilizao clnica o alto custo para

produo destes peptdeos e as vias de administrao, em que supostamente

dever ser parenteral. Dados de testes em Farmacologia Clnica Fase II, que

segundo relatos em simpsios e conferncias esto apresentando resultados

promissores, que ainda no foram publicados devido a patentes e sigilo industrial.

3.3. DROGAS ANTIFNGICAS

3.3.1. TERAPUTICA CONVENCIONAL DE ANTIFUNGICOS.

Classificao dos antifngicos baseada na estrutura qumica deste e no do

alvo molculas de ao destes na via metablica do fungo. Os antifngicos so

divididos em: Polinicos, Derivados imidazlicos, 5-Flucitosina,terbinefina e

Griseofulvina.
 42

A)Polinicos

Encontram-se nesta classe as drogas Anfotericina e Nistatina, contendo em

sua estruturas uma diversidade grande, caracterizada por inmeros anis cclicos.

So os principais antifngicos para controle de infeces graves seu espectro de

ao inclui fungos patgenos e oportunistas mais no e efetiva nas dermatofitoses

superficiais, no seu mecanismo de ao ela liga-se aos esteris principalmente ao

ergosterol na membrana celular dos fungos, principalmente aos sensveis alternado

a permeabilidade da membrana fngica com perda de eletrlitos e macromolculas,

com isto o fungo perde a sua capacidade de replicao e ser destrudo pelo

sistema imunolgico do hospedeiro.

Anfotericina B

produto da fermentao do actinomiceto Streptomyces nodosus. um

antifngico polinico introduzido em 1956, com amplo espectro de atividade.

Liga-se a membrana fngica de forma reversvel, independentemente de gasto

energtico e provoca aumento da permeabilidade aos ons potssio, causando

assim, dano celular.

Figura 22. Molcula da Anfotericina

Nistatina

A Nistatina tem ao fungisttica e fungicida "in vitro" contra uma grande

variedade de leveduras. O mecanismo de ao da nistatina se d atravs de ligao

aos esterides existentes na membrana celular dos fungos susceptveis, com

resultante alterao na permeabilidade da membrana celular e conseqente

 43

extravasamento do contedo citoplasmtico. Em subculturas de repetio com

nveis crescentes de nistatina, a Cndida albicans no desenvolve resistncia a

nistatina.

Figura 23. Molcula da Nistatina.

B) Derivados Imidazlicos

So o Cetoconazol, Itraconazol, Fluconazol. Os azis inibem a enzima fngica

3A(CYP3A) do citocromo P450,a lanosina 14 , desmetilase que responsvel pela

converso do lanosterol em ergosterol o principal encontrado na membrana celular

dos fungos. A depleo de ergosterol altera a fluidez da membrana, interferindo na

ao das enzimas associadas membrana. O efeito final consiste em inibio da

replicao.

Os derivados imidazlicos possuem eficcia comprovada em infeces

causadas por dermatfitos, leveduras e outros fungos patognicos, aps

administrao oral. Apresentam atividade fungicida ou fungisttica contra

dermatfitos (Trichophyton spp., Microsporum spp., Epidermophyton floccosum) e

leveduras (Cndida spp, Cryptococcus spp, etc).

Figura 24. Molcula bsica dos Imidazois.

 2 29 28

44

Figuras 25 e 26. Estrutura grfica tridimencional de interao Imidazol enzima

fngica.

Figuras 27,28 e 29. Molcula de A)Fluconazol, B) Voriconazol, C)Itraconazol

Figura 30. Molcula de Cetoconazol.

C) 5-Flucitosina

A 5-Flucitosina foi o primeiro antifngico disponvel para a teraputica oral e

parenteral. uma pirimidina fluorinada enzimaticamente transportada para dentro da

clula fngica, onde transformada em 5-fluorouracil, inibindo assim, sntese de

DNA do fungo.

Figura 31. Molcula de Flucitocina

D) Derivado alilamnico Terbinafina

A Terbinafina altera especificamente uma etapa inicial da biossntese dos

esteris fngicos.

A Terbinefina um composto fungicida ceratinoflico e altamente lipoflico ativa

contra uma ampla variedade de patgenos cutneos. Atua ao inibir seletivamente a

enzima esqualeno epoxidase que esta envolvida na sintaxe de ergosterol a partir do

 45

esqualeno na parede celular dos fungos, o acumulo de esqualeno no interior da

clula e txico para o fungo.

A terbinafina uma alilamina com amplo espectro de atividade contra fungos

patognicos da pele, cabelo e unhas inclusive dermatfitos como Trichophyton (T.

rubrum, T. mentagrophytes, T. tonsurans entre outros), Microsporum (M. canis),

Epidermophyton floccosum e leveduras do gnero Candida (por exemplo, C.

albicans) e Pityrosporum.

E) Griseofulvina

A griseofulvina inibe a mitose da clula fngica atravs do rompimento da

estrutura do fuso mittico impedindo a metfase da diviso celular, por interagir com

estes microtbulos. A griseofulvina depositada em graus variantes nas clulas

precursoras da queratina da pele, cabelos e unhas tornando a queratina resistente

invaso fngica.

Quando a queratina infectada liberada, ela substituda por tecido

saudvel. A Griseofulvina um agente antifngico de espectro estreito isolado de

culturas de Penicillium griscofulvium, em 1939. O composto insolvel em gua.

efetivo aps ingesto oral alcanando a pele, unhas e os cabelos.

Figura 32. Molcula da Griseofulvina.

3.3.2. ALTA TOXICIDADE DAS DROGAS ANTIFUNGICAS

 46

A toxicidade apresentada por estas drogas observada intensamente na

teraputica. Diversos mecanismos so propostos para demonstrar esta toxidade.

Citaremos diversos mecanismos de toxicidade frente, lembrando que este fato

muito drstico para indivduos sos, imagine para pacientes que tem na sua grande

maioria uma doena primria ou uso de imunossupressores que levou a uma

infeco fngica.

Anfotericina B uma das drogas mais txicas da terapia antifngica sendo

bastante raro no surgirem efeitos adversos com seu emprego. Febre e calafrio

acorrem em quase todos os pacientes, os calafrios podem ser intensos e

prolongados causando grande desconforto, de trinta a sessenta minutos ates da

infuso de anfotericina a administrao de antitermicos, antiinflamatrios no

estereroidal reduz bastante os sintomas cefalia, anorexia e vmitos tambm

ocorrem com freqncia, estas reaes podem ser prevenida com uso de anti-

histaminicos.

A Griseofulvina tambm exibe uma variedade de efeitos adversos, o mais

comum e a cefalia que usualmente desaparece com a continuidade do tratamento.

Ocorrem ainda neurites perifricas, letargia, confuso mental dificuldades em tarefas

rotineiras, fadiga, vertigem, viso borrada, edema transitria da macula e sinergia

com lcool. Os efeitos digestivos incluem nuseas, vmitos, derreia, flatulncia,

boca seca e Hepatotoxidade.

O Micanazol intravenoso pode causar flebite, prurido nuseas, vmitos,

calafrios, anemia, trobocitopenia, hiperlipidemia e toxicidade do sistema nervoso

central entre outras, por isso no e mais usado por via sistmico. Topicamente pode

produzir ardncia, prurido, irritao e, raramente clicas uterinas, cefalia, urticria e

outros eczemas de hipersensibilidade.

 47

O Cetoconazol os efeitos adversos em doses usuais so geralmente

discretos, mas aumenta proporcionalmente s doses, nausias e vmitos so

problemas mais comuns seguidos de prurido, abdominal, cefalia, sonolncia,

tonturas, febres e diarria, todos com incidncia de 1% ou menos.

O Fluconazol geralmente bem tolerado os efeitos adversos mais comuns

so: gastrintestinais (nuseas, vmitos, dor abdominal e diarria) cefalia e

erupes tambm acorrem mais no so graves.

O Itraconazol costuma ser bem mais tolerado, desconforto gastrointestinal,

nuseas e vmitos, hipocalemia, aumento das transaminases so os efeitos

adversos mais comuns.

A Terbinafina pode causa nuseas, vmitos, diarria erupes cutneas

alteraes reversveis no paladar e disfuno heptica.

A Nistatina oral pode induzir nuseas vmitos e diarria.

Os Imidazlicos, entre eles o Imidazol o Clotrimazol, parece ter mais adversos

produzindo sensao de queimao prurido hiperemia, descamao, e formao de

vesculas no local da aplicao cutnea. O uso vaginal pode acompanhar-se de

prurido eritema e ardncia.

 48

3.3.3. NOVAS DROGAS ANTIFUNGICAS COMERCIAIS.

A) CASPOFUNGINA

A caspofungina um lipopptideo semi-sinttico (ciclohexapeptdeo ligado a

um cido gordo ramificado) derivado do fungo Glarea lozoyensis que apresenta um

mecanismo de ao completamente novo. Inibe a sntese do 1,3-- D-glucano

(componente essencial da parede celular de numerosas espcies fngicas

patognicas, que no existe nas clulas humanas), este homopolissacrideo confere

estabilidade osmtica parede celular, sendo determinante para o crescimento e

diviso celular, ( NEVES & FANICA, 2004).

Este frmaco possui duplo efeito: por um lado fungisttico, porque do

bloqueio da sntese da parede celular resulta uma reduo do crescimento do fungo;

por outro lado, fungicida; por alterao da integridade da parede celular, a clula

perde a fora mecnica, tornando-se incapaz de resistir presso osmtica

intracelular, ocorrendo a sua lise, (NEVES & FANICA, 2004).

A eficcia e segurana clnica foram demonstradas em doentes

imunodeprimidos com aspergilose invasiva resistente a outros tratamentos

antifngicos, resultando numa eficcia clnica que vai desde 35% a 50% de doentes

refratrios anfotericina B. Demonstrou ter uma maior eficcia em relao

anfotericina B nos quadros de candidase esofgica (indicao aprovada apenas

pela FDA). A caspofungina tambm possui atividade na candidase invasiva

incluindo candidmia, sendo altamente eficaz nas situaes de resistncia aos

azis, e nas infeces por Candida no albicans (NEVES & FANICA, 2004).
 49

Ao apresentar um mecanismo de ao nico, qumica e farmacologicamente

no relacionado com outros frmacos antifngicos, tem como vantagem a ausncia

de resistncia cruzada com os mesmos. Produz um efeito ps-antifngico

prolongado. O seu perfil farmacocintico permite uma nica dose diria,

apresentando como via principal de eliminao a heptica, e no necessrio

ajustar a dose em doentes com insuficincia renal, (NEVES & FANICA, 2004).

As principais limitaes da utilizao da caspofungina so: a penetrao

pouco significativa no sistema nervoso central, a no existncia de uma formulao

oral (peso molecular elevado), e o seu elevado custo.

Figura 33. Molcula de Caspofungina

VORICONAZOL

Molcula derivada do fluconazol, atravs de alteraes na estrutura molecular,

com a substituio do anel triazlico por um grupo de pirimidina com um tomo de

flor, e ainda a adio de um grupo -metil, que lhe conferem uma maior potncia e
 50

atividade antifngica. Apresenta um espectro de atividade maior, essencialmente a

espcies de fungos filamentosos como Aspergillus spp. e frente a espcies de

Candida com resistncia intrnseca ao fluconazol (ex Candida krusei), e uma

atividade intrnseca superior frente a espcies de Candida e Cryptococcus

neoformans. O seu mecanismo consiste na inibio do ergosterol, que corresponde

a uma estrutura lipdica semelhante ao colesterol nos mamferos, que confere

estabilidade membrana celular fngica. interessante destacar que o voriconazol

apresenta atividade fungisttica para as leveduras e fungicida frente aos fungos

filamentosos. Este comportamento explica-se devido a dois fatores: maior atividade

intrnseca na inibio da enzima 14-alfa-esterol desmetilase nos fungos filamentosos

e devido acumulao dos precursores do ergosterol, que so mais txicos nos

fungos filamentosos do que nas leveduras, (NEVES & FANICA, 2004).

Em estudos aleatrios comparou-se a administrao de voriconazol com a

anfotericina B no tratamento primrio da aspergilose invasiva; observou-se uma taxa

de xito teraputico de 32% com anfotericina B contra 53% com voriconazol,

demonstrando este maior eficcia. Outros ensaios em doentes imunodeprimidos

com candidase esofgica comparou-se o voriconazol com o fluconazol, tendo-se

demonstrado taxas de eficcia muito similares. No entanto, o voriconazol

demonstrou ter mais efeitos secundrios e interaes medicamentosas, (NEVES &

FANICA, 2004).

Os pontos fortes do voriconazol so o seu potente e largo espectro

antifngico, e a apresentao de uma formulao oral com excelente

biodisponibilidade, o que permite a transio precoce da via intravenosa para a via

oral, sem prejuzo da eficcia teraputica. Os aspectos limitantes da utilizao do

voriconazol so: que apesar de estar demonstrada a sua eficcia em espcies de

 51

Candida resistentes ao fluconazol no est imune aos fenmenos de resistncia

cruzada; em doentes insuficientes renais com clearance da creatinina inferior a

50ml/min, est contra-indicada a utilizao da formulao intravenosa, dado que

esta incorpora como veculo sulfobutilter--ciclodextrina (SBECD) ocorrendo o risco

de toxicidade por acumulao deste excipiente; e o seu custo elevado, (NEVES &

FANICA, 2004).

Figura 34. Molcula de Voriconazol

Tabela-2 Mostra indicaes, doses, via de administrao e farmacintica da Caspofungina e

Voriconazol.
Medicamento Caspofungina Voriconazol
Indicaes aprovadas Candidase invasiva em Aspergilose,
doentes adultos, Invasiva.infeces
Aspergilose Invasivaem invasivas graves por
doentes adultos refractrio cndidas resistentes ao
ou intolerantes a fluconazol (C. krusei)
anfotericina B, infeces graves
formulaes lipidicas de Scedosporium spp. E
anfotericina B e/ou Fusarium spp
itraconazol.teraputica
emprica de presumveis
infeces fngicas em
doentes dultos
neutropendicos e febris.
Doses ( adultos ), via de Dose de carga de 70mg Perfuso intravenosa (1-2
administrao e seguida de dose de horas) dose de carga IV
freqncia manuteno de 50mg/dia. 6mg/KG, 12/12 h-1dia,
Em doentes maior que dose de manuteno
80KG a dose de 4mg/KG 12/12 h.
manuteno Via oral: 100mg, 12/12 h
recomendada de 70mg. doentes menor que 40 KG
A administrao nica ou 200mg doentes
diria em perfuso maiores de 40 KG.
intravenosa lenta durante
1 hora.
Dados farmacocintico (Aps dose nica de Vd: superior a 4
70mg ) L/KG.ligao a protena
Vd: 9,67 L/KG.Ligao as plasmtica: 60%. tempo
protenas plasmtica: 96% de semi-vida 6h.
Cl plasmtico e sistmico biodisponibilidade de 96%
0,72 L/h.Tempo de semi- processo metablico
 52

vida:9-11h.Excreo: saturado farmacocintico

metabolismo heptico a no linear. Administrar o
principal via de excreo. frmaco em jejum porque
No necessrio ajuste a presena de cidos
de dose em doentes graxos pode diminuir a
idosos e nem em situao concentrao plasmtica
de insuficincia renal. No em cerca de
dialisvel.Em doentes 30%.eliminao:
com insuficincia heptica metabolismo heptico
moderada a dose deve atravs do complexo
ser de 35 mg aps a dose enzimtico P450.
de carga.com hemodialisvel.
administrao com alguns
indutores enzimticos, a
dose de manuteno
recomendada de 70mg.

Tabela 2. Adaptada da fonte: Boletim do CIM (Centro de Informao do

Medicamento ). ORDEM DOS FARMACUTICOS. ed. Maio/Junior de 2004.

3.3.4. RESISTNCIA

A infeco hospitalar vem despertando interesse no somente para a rea

sanitria como tambm para a econmica, devido, sobretudo, versatilidade com

que os microorganismos causadores tm driblado a ao de drogas. A infeco

hospitalar atinge dois milhes de norte-americanos a cada ano e cerca de setenta

mil acabam morrendo.

O mesmo quadro pode ser verificado no que diz respeito aos fitopatgenos. O

surgimento de resistncia de fungos fitopatognicos de importncia agronmica

considerado um fator limitante na eficcia e na vida til das mais variadas

estratgias de controle de doenas. Muitos gneros tais como Aspergillus, Botrytis,

Venturia, Ustilago, Marnaporte, Colletotrichum, Alternaria, Cercospora,

Cladosporium e Penicillium, tm desenvolvido estratgias elegantes de resistncia

contra os fungicidas mais amplamente empregados como os da classe dos

benzimidazis, das estrobilurinas, das fenoxiquinolinas e das anilinopirimidinas.

 53

Nos ltimos anos, tem-se constatado que mesmo fungicidas de amplo

espectro de ao como o Benomyl, tornou-se alvo de resistncia. O emprego deste

fungicida tem-se mostrado cada vez mais ineficiente para combater a antracnose,

doena provocada pelo gnero Colletotrichum sp., em culturas de diversas fruteiras

susceptveis e, sobretudo, contra a doena da flor preta em morango. Conforme

comentado anteriormente, o uso indiscriminado de drogas o principal fator de

induo resistncia; contudo, a preveno desse abuso no garantia de que a

susceptibilidade seja um fator reversvel, uma vez que os efeitos provocados pelos

antimicrobianos na fisiologia e ecologia dos microrganismos impossibilitam, cada vez

mais, o retorno ao estado de susceptibilidade anterior.

Dessa forma, o uso de novas tecnologias para o desenvolvimento de drogas

mais eficazes constitui uma estratgia promissora no campo da biotecnologia, uma

vez que possibilitar a iniciativa de prospeco de novas classes de molculas

naturais e/ou sintticas, capazes de neutralizar ou de danificar o patgeno-alvo ao

invs de inviabiliz-lo geneticamente, inibindo assim o desenvolvimento da

resistncia.

Vimos que drogas utilizadas em agricultura e outras aes como desinfeco,

que utilizam mecanismos de ao iguais aos das drogas utilizadas na teraputica,

proporciona uma resistncia a este mecanismo, o que provavelmente ir tambm

levar a resistncia as drogas utilizadas na clnica mdica.

Alm deste mecanismo, observamos tambm a mutao gnica, a

conjugao de leveduras, reproduo sexuada de fungos filamentosos e a produo

de biofilmes por estes microorganismos, geram tambm meios de torn-los

resistentes a estas drogas.

 54

4. NOVAS DROGAS POTENCIALMENTE ANTIFUNGICAS EM ESTUDOS.

Atualmente, peptdeos antimicrobianos de origem animal esto sendo

utilizados como modelos para o desenho de novas drogas com aplicao nas reas

agrcola e de sade. Para tanto, seqncias anfiflicas de peptdeos vm sendo

desenhadas, sintetizadas e testadas in vitro, a fim de permitirem a obteno de

genes com potencial de resistncia a fitopatgenos, bem como compostos ativos

para a fabricao de drogas de amplo espectro e de mltipla aplicabilidade.

Um exemplo dessa abordagem os anlogos sintticos da magainina II,

peptdeo proveniente da secreo da pele do anfbio africano Xenopus laevis

(Zasloff, M., 1987) que foram testados com sucesso na inibio da germinao de

condios de Cryphonectria parasitica, Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici, e

eptoria musiva, e que no provocaram nenhuma interferncia detectvel na

germinao de plen dos organismos hospedeiros, alm de serem eficazes tambm

contra as bactrias Agrobacterium tumefaciens, Erwinia amylovora e Pseudomonas

syringae. As diferenas significativas encontradas na sensibilidade entre os

microrganismos e as clulas vegetais tm mostrado que tais peptdeos podem ser

teis como modelos para o desenho de genes de resistncia (Powell, W. A., et al.,

1995).

O uso das magaininas na agricultura no se restringe a cultivares frutferos ou

alimentcios de um modo geral, mas abrange tambm o ramo de plantas

ornamentais geneticamente modificadas, as quais expressam genes de magaininas

resistentes a fungos e outros patgenos causadores de leses. Da mesma forma, a

magainina II j vem sendo utilizada como princpio ativo na fabricao de drogas

 55

como o LOCILEX., que um creme de uso tpico com ao microbicida e

empregado no tratamento da infeco de lceras diabticas. Alm disso, derivados

da magainina II tm sido amplamente aplicados nas terapias contra o cncer, no

tratamento de conjuntivites, de acne, de doenas sexualmente transmissveis, de

micoses, alm de serem drogas promissoras no tratamento da gripe

(http://www.magainin.com).

Estes novos mecanismos observados de atividade antimicrobiana envolvendo

peptdeos demonstram ser bastante promissor para aplicao clinica, visto a alta

seletividade para as membranas de fungos e os outros microorganismos, no

invadindo as membranas de clulas humanas. O que hoje ainda torna-se este

medicamento no disponvel para utilizao clnica o alto custo para produo

destes peptdeos e as vias de administrao, em que supostamente dever ser

parenteral. Dados de testes em Farmacologia Clnica Fase II, que segundo relatos

em simpsios e conferncias esto apresentando resultados promissores, que ainda

no foram publicados devido a patentes e sigilo industrial.

A eficcia destes peptdeos in vitro pode ser demonstrada na figura abaixo.

Figura 35. Micrografia eletrnica de clulas leveduras colocadas em meio com

20g/ml de Magainina.

5. METODOLOGIA

A referida pesquisa uma anlise sistemtica descritiva, de artigos

cientficos e textos acadmicos e de livros sobre drogas antifngicas.

 56

O perodo analisado dos materiais bibliogrficos foi de 1990 a agosto de

2004. Aps anlise dos peridicos com referncia a novos antifngicos, foram

selecionados os que apresentaram maior consistncias e volume de dados, bem

como a incluso destas drogas em revises de revistas de grande impacto, como a

Pharmacological Reviews.

Os dados depois de estruturados na reviso ou desenvolvimento, foram

destacados sob atualidades e discorridos como resultado desta anlise.

 57

6- RESULTADOS E DISCUSSO DOS RESULTADOS

O desenrolar de novos frmacos antifngicos tem sido lento se comparado

com os antibacterianos e antivirais. As drogas atualmente disponveis para

tratamento de infeces fngicas podem ser divididas em: antifngicos que atuam

na membrana citoplasmtica, polienos, triazois, antufungicos que atuam na parede e

inibidores da sntese de glucanos.

De modo geral existe muita pesquisa na investigao de novos frmacos

antifngica, no entanto, o pequeno arsenal existente justificado pelo grande

nmero de problemas encontrados durante as fases de testes desses frmacos. A

maior problemtica a avaliao da relao risco-benefcio, pois, ndice de

toxicidade e de resistncias que geralmente aparecem so grandes. Alm disso, o

problema da resistncia introduz questes relacionadas como a durao e

intensidade do tratamento, com as estratgias que envolvem o uso de vrias drogas

concomitantemente e com o rigor que deve ser obedecido por parte do paciente.

Vale lembrar que muitos usurios desses medicamentos so

imunodeprimidos, o que aumenta a necessidade de frmacos inteligentes, ou seja,

com ao seletiva aos patgenos, e com menos efeitos adversos para o usurio.

Com essas caractersticas j temos no mercado alguns frmacos, como

caspofungina e voriconazol. Porm, por serem drogas novas, ainda no esto

totalmente elucidados os seus efeitos colaterais. De outro lado o espectro de ao

dessas duas drogas est restrito a algumas cepas de fungos.

Mas o que realmente est revolucionando a teraputica so os peptdeos,

sintetizados por seres vivos (bioativos). Uma das descobertas mais interessantes a

esse respeito revelou que, alm da resposta imune celular altamente especfica, os
 58

vertebrados possuem um mecanismo qumico de defesa, composto por peptdeos

antimicrobianos, anlogos aos encontrados em invertebrados, essas estruturas tem

como principal mecanismo a formao de canais na parede celular e membrana

celular do microorganismo, provocando o extravasamento do lquido celular. A

vantagem dos bioativos em relao a frmacos usuais o fato de possurem grande

espectro de ao, podendo atingir organismos: gram-positivos, gram-negativos e

fungos.
 59

7. CONCLUSO

A pesquisa de novas drogas antifngicas tem aumentado significativamente

nos ltimos anos, conseqncia do surgimento de resistncia aos frmacos

convencionais e, alta toxicidade que caracterstico desse tipo de droga. Haja vista,

que seus mecanismos de ao tm como alvo principal sntese do ergosterol, que

formado de maneira semelhante ao colesterol humano, explicando os problemas

relacionados a essa classe de medicamentos.

As reaes adversas so mais evidentes em pacientes imunocomprometidos

(por exemplo: portadores de doenas auto-imune, transplantados e aidticos).

A resistncia dos fungos aos agentes teraputicos disponveis est

aumentando, como reflexo do crescimento da populao imunodeprimida e uso cada

vez mais freqente de profilaxia e tratamento emprico com antifngico.

As novas linhas de pesquisas procuram drogas que tenha ao seletiva aos

microorganismos, com uma menor quantidade de efeitos colaterais para os usurios.

A busca se volta para frmacos que tenham como alvo especfico as seguintes

estruturas que so exclusivas dos fungos: 1,3-beta-glicano sintetase e 1,6-beta-

glicano sintetase, quitina sintetase e peptidios antimicrobianos.

O futuro do tratamento de infeces fngicas est sendo revolucionado pelos

avanos da gentica e descobrimento de novas fontes de estruturas como, por

exemplo, os peptdeos isolados de algumas espcies de invertebrados. A ao

dessas novas modalidades de drogas se d devido a estrutura sua terciria

apresenta-se como ducto podendo interagir com a parede levando a lise celular.
 60

8. REFERNCIA BIBLIOGRFICA

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