DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS

FILIAL NORTE

Gua de Seminarios
BIOLOGA CELULAR Y MOLECULAR

2017-II

Personal Docente :
Bil. Lezama Vigo, Hlmer, MSc. (Responsable)
Md. Llimpe Mitma, Rafael (Coordinador)
Md. Gordillo Carbonel, Johnny
Md. Snchez Castillo, Jampieer
Bil. Murrugarra Bringas, Victoria.
Bil. Nolasco Crdenas, Oscar, MSc.
Ing.Qum. Quiones Chapon, Liliana
Bil. Quionez Esquerre, Jess
Bil. Loayza Estrada, Carolina
Md. Soto Cabanillas, Rosario
Bil. Morales Ramos, Jorge, Mg
Qum. Pumachagua Huertas, Rodolfo

1
 INTRODUCCIN

La gua de seminarios del curso de Biologa Celular y Molecular tiene como

objetivo fomentar en el estudiante la lectura cientfica y el razonamiento de casos
prcticos y reales relacionados con las bases tericas.

Esta gua rene una lista de preguntas relacionadas con cada tema
expuesto en la conferencia magistral terica. Dichas preguntas sern resueltas
por los alumnos durante cada sesin de seminarios, con la tutora del profesor y
valindose de la bibliografa recomendada en el slabo y sugerida por cada
profesor as como de informacin actualizada reunida por el alumno. Al final de
cada seminario el alumno debe ser capaz de razonar y resolver cuestionamientos
aplicativos similares a los desarrollados en el seminario.

La gua se ha dividido en 3 partes de acuerdo a la estructura del slabo. La

primera parte comprende la clula y componentes celulares. La segunda parte
incluye procesos celulares. La tercera parte trata sobre la genmica y las tcnicas
moleculares.

Se tomar un paso corto al inicio del seminario, basado en los temas a tratar
ese mismo da. El alumno debe contar con su respectiva bibliografa (libros,
artculos cientficos, separatas, etc.) para solucionar cada seminario; adems
participar activamente durante la clase, Los alumnos trabajarn en grupos de 4 a
5 personas y deben traer resueltas las preguntas del cuestionario. As mismo, el
grupo responsable del tema de la semana debe presentar un informe sobre un
artculo cientfico de revisin y presentarlo en Power Point a sus compaeros de
clase y entregar una copia del artculo al docente del seminario y a cada uno de
los grupos de clase de seminario.

La duracin del seminario es de dos horas acadmicas (45 minutos cada

hora) y la distribucin del tiempo durante el seminario ser el que sigue:

Paso corto: 10 min

Desarrollo de cuestionario, mapa conceptual y discusin: 50 minutos
Presentacin de artculo por grupo encargado: 10 minutos
Discusin del artculo: 10 minutos

PAUTAS PARA EL DESARROLLO DE LOS SEMINARIOS

CONCEPTO DE SEMINARIO:

El Seminario es una actividad acadmica, que tiene como propsito principal

introducir al estudiante de nivel superior en la reflexin y prctica investigativa, al
tiempo que contribuye al avance del saber en su rea.

2
 El seminario es una actividad de aprendizaje activo y colaborativo, centrada
en el trabajo del estudiante.

Es una tcnica de capacitacin grupal, en la que participan todos los

integrantes y estudian intensivamente un tema en sesiones planificadas
recurriendo a fuentes originales de informacin.

OBJETIVOS DEL SEMINARIO:

1. Investigar, analizar y estudiar un tema para sacar conclusiones aprobadas

por todos los asistentes.

2. Desarrollar habilidades de bsqueda de informacin, interpretacin y

sntesis de la misma.

3. Fomentar el trabajo en grupo. Trabajar en grupo no es realizar varias

partes de forma independiente y fusionarlas al final. Es preparar y discutir
el esquema, analizar los contenidos, valorar y opinar sobre la literatura
revisada e integrar los conceptos obtenidos (todos los miembros del grupo
deben conocer todo el tema).

4. Desarrollar la capacidad de comunicacin cientfica, y sustentacin oral de

un tema a exponer.

NORMAS PARA LA REALIZACIN DE UN SEMINARIO:

1. Los Seminarios son de realizacin obligatoria.

2. El profesor tutorizar la realizacin de cada seminario.

3. Los temas sern propuestos por el profesor, en forma de cuestionarios, los

cuales se entregarn resuelto como trabajo escrito por el grupo
responsable (cuatro cinco alumnos) Se utilizarn fuentes bibliogrficas
editadas y electrnicas.

4. Los temas sern asignados a los grupos de alumnos para ser expuestos y
presentados durante la sesin.

5. La presentacin y el desarrollo de los cuestionarios fomentar la discusin

con la participacin de los alumnos de la seccin.

PRESENTACIN DEL TRABAJO ESCRITO:

Deber ser presentado de manera manuscrita (con buena caligrafa y

ortografa) al Profesor al iniciar cada sesin para su discusin y evaluacin. Este
deber responder a las preguntas formuladas en el cuestionario del tema a tratar.
3
EL INFORME DEBER ESTAR COMPUESTO DE LAS SIGUIENTES PARTES:

Portada
En el encabezado al lado izquierdo arriba:
Universidad de San Martn de Porres
Facultad de Medicina Humana
En la mitad de la pgina (aproximadamente) centrado
Ttulo del seminario
Semestre / Ao
Bajo el ttulo y centrado a la derecha
Autores del trabajo
Grupo de Seminario
Nombre del profesor

Resolucin del cuestionario en forma ordenada

El cuestionario deber resolverse en forma ordenada clara, concreta,
fundamentado lo expuesto y podr hacerse uso de esquemas,
figuras cuadros tablas etc.

CALIFICACIN DEL INFORME ESCRITO

La calificacin del Informe escrito considerar:

1. Presentacin, orden, coherencia del esquema.

2. Grado de elaboracin de los contenidos.

3. Fuentes bibliogrficas consultadas.

4. NO SE ACEPTARA COMO REFERENCIA BIBLIOGRFICA CUALQUIER

PAGINA DE INTERNET QUE NO CUENTE CON UN SOPORTE
CIENTFICO CONFIABLE; as mismo, NO SE ACEPTARN TRABAJOS
IGUALES NI PLAGIOS DE LIBROS, REVISTAS U OTRA FUENTE
BIBLIOGRFICA EMPLEADA.

5. Redaccin, estilo, ortografa.

6. Cada grupo es responsable de la entrega del trabajo, si alguno de los

integrantes no participa, el grupo tiene la libertad de no incluirlo en el
trabajo, en este caso, este integrante tiene la nota de 00 (cero)

LA CALIFICACIN DE LA PARTICIPACIN ORAL VALORAR:

Un grupo de alumnos presentara el tema de la sesin, Se resolvern las

preguntas del cuestionario con la participacin de los asistentes. La intervencin
4
 es personal se responde a la pregunta, se argumenta, se cuestiona, o se corrige,
se fomenta una discusin sobre la misma.

Se valorar:

1. Presentacin. Claridad y orden. Capacidad de sntesis en la presentacin

del tema. (Respecto al tiempo designado).

2. Discusin, claridad, orden, vocabulario.

3. Actitud y motivacin durante el desarrollo del seminario.

4. Puntualidad, consultas realizadas al profesor, integracin del equipo.

Conducta en el desarrollo del seminario.

EVALUACIN DE LOS PASOS CORTOS:

1. Al inicio de la sesin se tomar una Prueba Escrita de 4 5 preguntas

sobre el tema del seminario, la que incluir conceptos de las clases
tericas relacionadas al tema.

2. Se calificar con cero (00) al alumno que no est presente, as como

tambin se calificar con cero (00), toda prueba escrita no rendida. No se
podr recuperar un PASO CORTO no efectuado.

MECNICA DEL TRABAJO DE SEMINARIO:

1. Duracin del seminario: dos (02) horas acadmicas (45 minutos cada hora).

2. Distribucin del tiempo durante el seminario ser el que sigue:

Tiempo (minutos) Parte del Seminario

10 Registro de asistencia (10 minutos de tolerancia).
Entrega de Informes.
10 Paso corto.
50 Desarrollo de cuestionario, mapas conceptuales
y discusin. (Aproximadamente cada pregunta se
resolver en 10 minutos).
10 Presentacin y discusin de Lecturas.

CALENDARIO Y TEMAS DE SEMINARIOS

SEMINARIOS R. Llimpe
1 LU-07/MA-08-08 Introduccin y normas. Organizacin de grupos J. Gordillo
2 LU-14/MA-15-08 1. Origen y evolucin de la clula. Fundamentos de la Biologa Molecular J. Snchez
3 LU-21/MA-22-08 2. Composicin y organizacin molecular de la membrana celular
4 LU-28/MA-29-08 3. Microorganismos patgenos y beneficiosos. Bacterias, Virus y priones

5
5 LU-04/MA-05-09 4. Membrana celular. Factor y grupos sanguneos. Diabetes tipos 1 y 2.
6 LU-11/MA-12-09 5. Citoesqueleto, matriz extracelular y contactos celulares. Bases moleculares
de la contraccin muscular
7 LU-18/MA-19-09 1. ADN mitocondrial, aplicaciones en medicina forense. Mitocondriopatas.
8 LU-25/MA-26-09 SEMANA DE EVALUACIONES
9 LU-02/MA-03-10 SEMANA DE LA MEDICINA
10 LU-09/MA-10-10 2. Muerte celular. Apoptosis y necrosis
11 LU-16/MA-17-10 3. Desrdenes en receptores celulares. Hipercolesterolemia familiar.
12 LU-23/MA-24-10 1. Cncer. Oncogenes y protooncogenes.
13 LU-30/MA-31-10 2. Tcnicas en Biologa molecular, aplicacin en medicina.
14 LU-06/MA-07-11 3. Expresin gnica en procariotes y en eucariotes. Regulacin
15 LU-13/MA-14-11 4. Terapia gnica. Clulas madre
16 LU-20/MA-21-11 SEMANA DE EVALUACIONES FINALES
EVALUACION CONTINUA

GUA PARA LA PRESENTACIN DEL INFORME DE SEMINARIO:

El alumno debe presentar un informe de seminario, que incluya las siguientes

partes:

1. Portada

En el encabezado al lado izquierdo arriba:

Universidad de San Martn de Porres
Facultad de Medicina Humana
En la mitad de la pgina (aproximadamente) centrado:
Ttulo del seminario
Semestre / Ao
Bajo el ttulo y centrado a la derecha:
Autores del trabajo
Grupo de Seminario
Nombre del profesor

Universidad de San Martn de Porres
Facultad de Medicina Humana

Ttulo del seminario

Semestre / Ao

Autores del trabajo

Grupo de Seminario
Nombre del
profesor

6
 2. Resolucin del cuestionario en forma ordenada
El cuestionario deber resolverse en forma ordenada clara, concreta,
fundamentado lo expuesto y podr hacerse uso de esquemas, figuras
cuadros tablas etc.

3. Artculo(s): Impreso si es de una revista virtual y/o fotocopiado si es de

una revista impresa.

4. Resumen del artculo: el alumno debe ser capaz de redactar un resumen

con los puntos ms relevantes del artculo.

5. Comentario y conclusiones.

6. Referencias bibliogrficas: libros y artculos de revisin a los que ha

consultado. Las referencias bibliogrficas deben ser citadas como
corresponde.

Los docentes estn en la obligacin de brindar la ayuda necesaria que

requieran los alumnos para que el desarrollo de cada una de las actividades del
seminario sean resueltas de la mejor manera posible.

7
 SEMANA N 1

INTRODUCCIN Y ORGANIZACIN DE GRUPOS

SEMINARIO N 1 (I-1) SEMANA N 2

ORIGEN DE LA VIDA, TEORIAS. EVOLUCION BIOLOGICA

1. Qu condiciones atmosfricas presentaba la tierra primitiva y cmo estas

condiciones fueron cambiando hasta permitir el surgimiento del primer
protobionte?
2. En qu consiste el experimento de Miller y Urey y qu trataron de
explicar?
3. Qu principios o razones sustentan la hiptesis del mundo ARN?
4. Qu explica la teora endosimbitica y en qu se sustenta?
5. En qu se fundamenta el Lamarkismo y el Darwinismo y cules son las
semejanzas y diferencias entre ambas teoras?

SEMINARIO N2 (I-2) SEMANA N3

COMPOSICION Y ORGANIZACIN MOLECULAR DE LA MEMBRANA

CELULAR

1. Las propiedades de una bicapa lipdica se determinan por las estructuras

de sus molculas de lpidos. Predecir las propiedades de las bicapas
lipdicas que resultaran si lo siguiente fuera cierto:
A. Los fosfolpidos slo tienen una cadena de hidrocarburo en lugar de
dos.
B. Las cadenas de hidrocarburos son ms cortos de lo normal,
digamos de unos 10 tomos de carbono de longitud.
C. Todas las cadenas de hidrocarburos son saturadas.
D. Todas las cadenas de hidrocarburos son insaturados.
E. La bicapa contiene una mezcla de dos tipos de molculas lipdicas,
uno con dos colas de hidrocarburos saturados y el otro con dos
colas de hidrocarburos insaturados.
8
 F. Cada molcula de lpido se une covalentemente hasta el tomo de
carbono final de una de sus cadenas hidrocarbonadas a una
molcula lipdica en la monocapa opuesta.
2. Debido a que caracterstica una porina (una protena presente en
bacterias y en la membrana externa mitocondrial) puede atravesar la
membrana celular? Seale adems la diferencia con una protena que
atraviesa la membrana con un hlice alfa.
3. Ordene las molculas en la siguiente lista en funcin de su capacidad para
difundir a travs de una bicapa lipdica, empezando por la que atraviesa la
bicapa con mayor facilidad. Explique su orden.
a. Ca2++
b. CO2
c. Etanol
d. Glucosa
e. ARN
f. H2O
4. Describa las propiedades de las tres clases de protenas de membrana
(integral, perifrica y lpidos anclado), cmo se diferencian unos de otros, y
la forma en que varan entre s.

SEMINARIO N 3 (I-3) SEMANA N 4

MICROORGANISMOS PATGENOS Y BENEFICIOSOS. BACTERIAS, VIRUS

Y PRIONES

1. Qu tipo de microorganismos sobreviven en condiciones letales para

cualquier otro ser vivo?, explicar y dar ejemplos.
2. Mencione las diferencias moleculares entre una bacteria gram positiva y otra
gram negativa.
3. Qu son los virus?
Cul es su estructura general?
Explique el ciclo de crecimiento lisognico y el ltico de los virus
5. Acerca de los priones:
a. Qu son los priones y cuntos tipos se conocen?
b. Cumplen los priones con el dogma central de la biologa molecular?
c. Investigar acerca de una enfermedad producida por los priones en seres
humanos.

SEMINARIO N 4 (I-4) SEMANA N 5

9
MEMBRANA CELULAR. TRANSPORTE. FACTOR Y GRUPOS SANGUINEOS.
DIABETES TIPOS I Y II

1. La membrana plasmtica es muy impermeable a todas las molculas

cargadas. Explique por qu
2. Las propiedades de la bicapa lipdica estn determinadas por las estructuras
de sus molculas lipdicas. Predecir cuales seran las propiedades de la
bicapa lipdica si sucediera lo siguiente (cada una en forma independiente):
a. Todas las cadenas de cidos grasos fueran saturadas.
b. Todas las cadenas de cidos grasos fueran saturadas.
3. Los rafts contienen gran cantidad de colesterol y esfingolpidos y se piensa
que el colesterol juega un rol principal en la formacin de rafts pues
aparentemente los rafts no se forman en ausencia del colesterol. Por qu
cree que el colesterol es esencial en la formacin de rafts lipdicos?
(SUGERENCIA) Los esfingolpidos (a parte de la esfingomielina) tienen una cabeza muy
grande compuesta por varias molculas de azcares.
4. Si un huevo de rana y un glbulo rojo se colocan en agua destilada, el glbulo
rojo se hinchar hasta reventar, pero el huevo de rana permanecer intacto.
Aunque el huevo es casi un milln de veces el tamao del glbulo rojo, ambos
tienen concentraciones idnticas de iones por lo que las fuerzas osmticas
trabajando son las mismas. Por qu cree usted que el glbulo rojo se rompe
y el huevo no?
5. Los canales de K+ tpicamente transporta iones de K+ ms de 1000 veces
mejor que los iones de Na+. Sin embargo ambos iones tiene la misma carga
positiva y son casi del mismo tamao (0.133nm para el K+ y 0.095nm para
Na+). Describa brevemente cmo un canal de K+ logra discriminar los iones
de Na+.

SEMINARIO N 5 (I-5) SEMANA N 6

CITOESQUELETO, MATRIZ EXTRACELULAR Y CONTACTOS CELULARES.

BASES MOLECULARES DE LA CONTRACCIN MUSCULAR

1. Qu es el colgeno? Explique su estructura y en que tejidos se encuentra.

Explique brevemente las bases moleculares de la Osteognesis imperfecta.
2. Explique la estructura de la unidad funcional del msculo esqueltico y los
acontecimientos moleculares implicados en la contraccin muscular.
3. Explique las bases moleculares de la diapdesis.
4. Qu son los desmosomas? Cul es su estructura? Explique las bases
moleculares del Sndrome Estafiloccico de piel escaldada.
5. Explique detalladamente la estructura y funcin de los cilios y flagelos. Qu
sucede a nivel molecular en el Sndrome de kartagener o Sndrome de los
cilios inmviles?
10
 SEMINARIO N 6 (II-1) SEMANA N 7

ADN MITOCONDRIAL. APLICACIONES EN MEDICINA FORENSE.

MITOCONDRIOPATAS

1. Mencione las caractersticas del ADN mitocondrial que lo diferencian del ADN
nuclear y explique cmo se hereda.
2. Mencione las caractersticas comunes de las mitocondriopatas: investigue las
bases moleculares de 1 enfermedad producida por estos defectos.
3. Mencione las diferencias estructurales y funcionales entre la membrana
mitocondrial interna y externa.
4. Si existe un dao en las mitocondrias de una persona cul de los siguientes
procesos se veran directamente afectados?, explquelos brevemente a cada
uno de los procesos afectados:
a. Glucolisis.
b. Ciclo de krebs.
c. Transporte de electrones.
d. Fosforilacin oxidativa.
e. Fermentacin.
5. La medicina forense y el ADN mitocondrial. Aplicaciones.

SEMANA N 8

SEMANA DE EVALUACIONES

SEMANA N9

SEMANA DE LA MEDICINA

11
 SEMINARIO N 7 (II-2) SEMANA N 10

MUERTE CELULAR. APOPTOSIS Y NECROSIS

1. Defina y explique lo que sucede a nivel molecular en la apoptosis.

2. Defina y explique lo que sucede a nivel molecular en la necrosis.
3. Explique las 2 formas de activacin de la apoptosis.
4. Seale ejemplos de molculas que inhiben o inducen la apoptosis.
5. La apoptosis y necrosis son procesos fisiolgicos, patolgicos o ambos?.
Fundamente su respuesta.

SEMINARIO N 8 (II-3) SEMANA N 11

DESRDENES EN RECEPTORES CELULARES. HIPERCOLESTEROLEMIA

FAMILIAR

1. Defina y de ejemplos de: primer mensajero, segundo mensajero y

transduccin de seal.
2. La Protena G: tipos, estructura y funcin.
3. Cmo se afecta la actividad de la protena G en las clulas intestinales
despus de la unin de la toxina del clera a su receptor?
4. GMPc (Guanil Monofosfato Cclico) como segundo mensajero y su relacin
con el xido ntrico en la dilatacin de los vasos sanguneos.
5. Explique la funcin de la fosfolipasa C en la transduccin de seales.
6. Analice el siguiente grfico y responda:

12
 a. Cul es la estructura del receptor LDL?
b. Qu eventos ocurren, a nivel de la membrana plasmtica y
citoslicamente, en la internalizacin y degradacin del LDL?.
c. Qu es la Hipercolesterolemia Familiar y que alteracin a nivel
molecular se presenta?
d. Qu elementos participan?

SEMINARIO N 9 (III-1) SEMANA N 12

CNCER. ONCOGENES Y PROTOONCOGENES

1. Mencione las diferencias entre un tumor benigno y uno maligno.

2. Explique las bases moleculares de las siguientes caractersticas de un tumor
maligno: invasin, adhesividad celular, angiognesis, metstasis y motilidad
celular
3. Defina: proto-oncogen y gen supresor de tumor. Discuta en qu que genes,
ocurren mutaciones de ganancia de actividad y en qu casos ocurren
mutaciones de prdida de funcin, relacionados con el cncer.
4. Mencione 2 oncogenes y 2 genes supresores de tumores y los cnceres a los
que se les ha asociado.
5. Explique la estructura y el rol de la telomerasa. Por qu se relaciona el cncer
con la actividad de sta?

SEMINARIO N 10 (III-2) SEMANA N 13

TCNICAS EN BIOLOGA MOLECULAR, APLICACIN EN MEDICINA

1.Explique la tcnica PCR (Reaccin en cadena de polimerasa). Aplicaciones en

medicina.
2. Explique la tcnica de ELISA (Enzyme-Linked Inmuno Sorbent Assay) directo y
sus aplicaciones en medicina.
3. Explique la tcnica de ELISA (Enzyme-Linked Inmuno Sorbent Assay) indirecto
y sus aplicaciones en medicina.
4. Explique la tcnica de microarrays y sus aplicaciones en medicina.
5.Marcadores celulares: protena verde fluorescente..

13
 SEMINARIO N 11 (III-3) SEMANA N 14

TRANSCRIPCIN Y TRADUCCIN. GENMICA ESTRUCTURAL Y

FUNCIONAL. REGULACION EN LA EXPRESION GENICA

1. Defina genmica estructural y funcional.

2. El gen que codifica la calcitonina en la tiroides y a la protena relacionada
con la calcitonina en el cerebro (CGRP) es el mismo. Como es posible que
un mismo gen pueda codificar estas 2 protenas diferentes? (emplee el
siguiente dibujo para su anlisis)

3. Una enzima presente en el hgado de rata tiene una cadena polipeptdica de

452 aminocidos y est codificada por un gen de 1896 pares de bases (pb).
Interpretar la relacin existente entre el nmero de residuos de aminocidos
de la protena y el nmero de pares de bases del gen.
4. La Hb de las clulas falciformes tiene un residuo Val en la posicin 6 de la
cadena de globina, en vez de un residuo de Glu encontrado en la Hb A
normal Qu cambio se produce en el codn que codifica para el
aminocido en cuestin?
5. Mediante que mecanismo se explica que la apolipoprotena B (Apo-B) en el
hgado no tenga el mismo tamao que la apolipoprotena B en el intestino.
Emplee el siguiente dibujo para evaluar su respuesta.

14
 SEMINARIO N 12 (III-4) SEMANA N 15

TERAPIA GENICA Y CELULAS MADRE

1. Cules son las 2 caractersticas ms importantes para reconocer una

clula madre? Explquelas.
2. Cules son los tipos de clulas madre que existen (segn clasificacin:
totipotentes, pluripotentes, multipotentes, unipotentes)?.
3. Cules son los tipos de clulas madre que existen (segn clasificacin por
etapa del desarrollo: embrionaria y adulta)?.
4. En la mdula sea existen una gran variedad de clulas madre. Describa
las Hematopoyticas, Mesenquimales y VSEL.
5. Qu es un marcador celular? Explicar brevemente la Protena verde
fluorescente (GFP).
6. Describa brevemente la tcnica de FISH.
7. Describa y grafique brevemente el estudio: Cell differentiation:
Hepatocytes from non-hepatic adult stem cells Malcolm R. Alison, Richard
Poulsom, Rosemary Jeffery, Amar P. Dhillon, Alberto Quaglia, Joe Jacob,

15
 Marco Novelli, Grant Prentice, Jill Williamson and Nicholas A. Wright
Nature 406, 257 (20 July 2000) doi:10.1038/35018642.
8. Describa y grafique brevemente el estudio Chimerism of the transplanted heart.
De Quaini F, Urbanek K, Beltrami AP, Finato N, Beltrami CA, Nadal-Ginard B,
Kajstura J, Leri A, Anversa P. N Engl J Med 2002 Jan 3;346(1):5-15.
9. Describa y grafique brevemente el estudio: Allogeneic mesenchymal stem cells
restore cardiac function in chronic ischemic cardiomyopathy via trilineage
differentiating capacity PNAS 2009 106 (33) 14022-14027;
doi:10.1073/pnas.0903201106, vol. 106 no. 33, p. 1402227.
10. Cules son las diferencias entre:
a. Terapia Regenerativa: Regeneracin rganos y tejidos
b. Ingeniera de Tejidos: Reemplazo de rganos y tejidos slidos
c. Terapia Gnica: Implante clulas manipuladas genticamente?
Explique brevemente cada una.

SEMANA N 16

SEMANA DE EVALUACIONES EVALUACION CONTINUA

16