UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

Clnica de Diagnosis de Fitopatologa y Nematologa

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Telefax: 349-6631 rpm # 9470-14023
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GUIA DE INSTRUCCIONES PARA COLECTAR MUESTRAS DE PLANTAS

ENFERMAS CON FINES DE DIAGNSTICO FITOPATOLOGICO

Blgo. Juan Flores T.

Abril, 2017

Generalmente el personal de la Clnica de Diagnosis no conoce el lugar ni

las condiciones en que se desarrolla las enfermedades de los cultivos, por lo que
el diagnstico y las medidas de control que se entreguen a los agricultores est
basado en la muestra que traen al laboratorio por lo que se hace necesario dar
ciertas pautas para un buen muestreo y su traslado al laboratorio. Los
especimenes o muestras de plantas enfermas con fines de diagnstico debern
ser muestreadas de preferencia el mismo da en que se envan al laboratorio y
asegurarse de que lleguen en condiciones adecuadas de tal manera que puedan
ser bien utilizados en los anlisis respectivos. Los especimenes demasiado secos
o en estado avanzado de pudricin no son apropiados porque contienen
organismos secundarios los cuales dificultan el aislamiento del agente causal
durante los anlisis respectivos y hasta frecuentemente hace intil el esfuerzo
realizado. Las siguientes recomendaciones lo ayudarn a colectar muestras que
sean tiles tanto para el laboratorista como para el agricultor en su deseo de
obtener una consulta provechosa.

Las muestras a ser enviadas pueden ser de especies vegetales muy

variadas como rboles y arbustos ornamentales o frutales, hortalizas, gramneas,
csped, plantines, plantones, semillas, championes, o incluso suelo agrcola,
agua de riego, sustrato, etc. pudiendo proceder de fundos, viveros, invernaderos,
parques, jardines, huertos, etc.

La forma de seleccionar y enviar la muestra depender del tipo de sntoma

a ser analizado: para casos de marchitez es la planta completa (incluido races
con su suelo); y cuando se trata de sntomas localizados (mancha foliar, manchas
en frutos, cancros en tallos, pudricin de flores, mosaicos etc.) se enva la parte
afectada; de igual forma para sntomas ocasionadas por virus (deformaciones de
los brotes con presencia de diferentes tonos de color verde). Si sus platines estn
aparentemente sanos y desea cerciorarse de su buen estado sanitario antes del
transplante a campo definitivo se enviar las plantitas completas o en su defecto
hacer una consulta previa a nuestro laboratorio.

Las siguientes recomendaciones le servirn de gua para su muestreo y

envo.
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I. ELECCION DE LA MUESTRA

La poca adecuada de coleccin de muestras ser cuando el cultivo se

encuentre en crecimiento activo (floracin o fructificacin) ya que el
microorganismo tambin lo estar. Hacer el muestreo despus de las 4 de la tarde
cuando la radiacin solar comienza a disminuir. Si el suelo est seco regar el da
anterior. Elija especmenes de plantas que muestren diferentes estadios de
desarrollo de la enfermedad desde sntomas iniciales, medianos hasta avanzados
todo lo cual constituir una sola muestra ya que se trata de la misma enfermedad.
No colectar plantas muertas o partes vegetales en descomposicin ni tampoco
plantas que en las ltimas dos semanas hayan recibido aplicaciones de fungicidas
porque esto dificulta grandemente el aislamiento del patgeno, en caso de ser
inevitable lo anterior cubrir con bolsas plsticas las plantas a ser enviadas al
laboratorio antes de la aplicacin. Los especimenes debern mostrar los sntomas
con la mayor claridad posible. Adjuntar muestra sana como testigo de
comparacin.

II. COLECCIN

a) Plantas que muestran marchitez, amarillamiento, chupadera,

enanismo, etc.
Extraiga las plantas completas sin arrancar las races, con toda la rizsfera. No
es aconsejable enviar plantas a raz desnuda ya que se irn deshidratando en
el camino; en el mismo lugar de extraccin envolver la rizsfera con papel
toalla o peridico (Fig. 1) y colocar la planta dentro de una bolsa plstica
grande de polietileno (Fig. 2) y anudar con una cuerda por encima de la bola
radicular, a nivel del cuello de la planta, quedando la parte superior de la planta
libre para volver anudar por encima de la planta con la misma bolsa (en esta
parte hacer agujeros en la bolsa para transpiracin de las hojas). Esta forma de
enviar la muestra asegura que el follaje y las ramas queden libres de
contaminacin con el suelo de las rizsfera. Mantenerlas en un lugar fresco
evitando que reciban la luz solar directa.
En caso de plantas muy grandes como arbustos o rboles; extraer una muestra
compuesta de dos kilogramos de 3 partes equidistantes de porciones de races
con rizsfera. Las muestras de races con suelo se colectan en la lnea
proyectada verticalmente del borde de la copa del rbol hacia el suelo.
Tambin haga una mezcla compuesta del follaje con sntomas (ej. ramas con
muerte regresiva); ambas muestras (races y follaje) se colocarn en bolsas
plsticas sin cerrar por separado.

b) Manchas foliares
Estos tipos de sntomas se refieren a lesiones necrticas que se sitan al
interior de la lmina foliar. Las muestras slo consistirn de hojas y se

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colectarn en buena cantidad (20 aproximadamente) y sern envueltas en

papel toalla colocndose en bolsas de papel.

c) Mosaico, clorosis y encrespamiento de hojas

Estos sntomas se manifiestan en las hojas nuevas o brotes como alternancia
de diferentes tonalidades de color verde hasta amarillamiento y puede incluir
deformaciones los cuales pueden ser causados por virus. La muestra consiste
de hojas o brotes foliares tiernos los ms frescos posibles y es necesario que
lleguen ese mismo da al laboratorio para su anlisis virolgico. Debern
tambin estar envueltas en papel toalla colocadas en bolsas de plstico sin
cerrar.

d) rganos carnosos
Las pudriciones de frutos carnosos y hortalizas (tomates, fresas, melocotones,
chirimoyas, ctricos, etc.) Necesitan una atencin especial. Los especimenes
deben mostrar slo sntomas iniciales. Envulvalas individualmente en papel
toalla o peridico sin humedecer, y acondicinelos dentro de una caja de
tecnopor la cual se rellena con aserrn, papel peridico o algn otro material
que impida que las muestras se aplasten entre s. Nunca los introduzca en
bolsas plsticas. Gurdelos en refrigeracin o en un lugar fresco hasta su
envo, el cual deber ser en poco tiempo.

e) Cancros y tumores
Seleccionar cancros y tumores (agallas) en estadios jvenes y que no estn
secos y extrigalos con una navaja de tal manera que contenga tejido sano
tambin. Envolverlo en papel toalla ligeramente humedecido y ponerlos dentro
de una bolsa plstica sin cerrar.
.
f) Muestras de suelo
Dividir el campo en lotes segn la uniformidad del terreno, edad del cultivo,
tipo de suelo, pendiente, etc. y codifique cada lote. Cada lote no debera
exceder las 3 hectreas
En cada lote colecte una muestra compuesta de suelo (27 submuestras
tomadas al azar) en una bolsa plstica. La colecta ser har hasta una
profundidad de 30 cm, descartando los primeros 10 cm donde la presencia de
microorganismos suele ser baja. Mzclelas bien y redzcala hasta la cantidad
de dos kilos por muestra (bolsa). Para la coleccin del suelo puede seguir el
patrn de la Fig. 3.
Cada muestra estar colocada en doble bolsa de plstico y entre las dos
bolsas se colocar una etiqueta con el cdigo del lote, el cultivo a sembrar y el
cultivo anterior escrito con lpiz.

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En trminos generales se puede afirmar que para muestreo con fines de

anlisis fitopatolgico de ser posible se enviar la planta completa y acondicionada
para su envo en una bolsa plstica lo suficientemente grande para que quepa
totalmente cuidando de que el suelo no est en contacto con la parte area. Otra
forma es poner las races envuelta en una bolsa plstica y la parte area en otra
bolsa (con agujeros) de tal manera que el suelo de las races no est en contacto
con la parte area. Nos ayudara bastante el envo a nuestro e-mail de fotos de
plantas afectadas.

III. EMPAQUE

Acondicionar la muestra embolsada dentro de una caja de tecnopor, madera o de

cartn gruesa. En el interior deber contener adems un sobre manila con la Ficha
Fitopatolgica debidamente llenada (la cual puede solicitarla con anticipacin a
nuestro e-mail). El sobre manila ser protegido con una envoltura plstica para
evitar su deterioro por la humedad. En caso de que la muestra demore ms de dos
das en llegar al laboratorio sta deber ser enviada en una caja de tecnopor con
gel refrigerante de esta manera se mantendr refrigerada durante su transporte.
Finalmente se debe sellar slo la tapa con cinta de embalaje y ser enviada a la
siguiente direccin:

Clnica de Diagnosis de Fitopatologa y Nematologa

Universidad Nacional Agraria La Molina
Av. La Molina S/N (ex Av. La Universidad)
Aptdo 12- 056
Lima 12,
Lima

No olvidar que las muestras deber ser enviadas de tal manera que lleguen en das
laborables, para lo cual es conveniente enviarlas los primeros das de la semana
(lunes o martes).

IV. TRANSPORTE

Es recomendable que el mismo agricultor o ingeniero de campo traiga la muestra.

De no ser esto posible utilizar el servicio de mensajeras (Courier) o similares y
luego comunicarse con el laboratorio para cerciorarse de que haya llegado
adecuadamente la muestra.

Tomar precauciones para prevenir que durante el trnsito el embalaje conteniendo

la muestra no vaya apiado con otros paquetes y se aplasten las muestras.
Tambin que en ningn momento le llegue la radiacin solar directa o est cerca al
calor que origina el motor del vehculo

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V. HISTORIAL DEL CULTIVO

Esta informacin ser entregada por el responsable del cultivo. Lo siguiente es

necesario tanto para un diagnstico preciso como para recomendar medidas de
control eficientes: datos de aplicaciones de agroqumicos realizados (ingrediente
activo, dosis, fechas de aplicacin), fertilizaciones, condiciones climticas, clase
de material propagativo usado, intensidad de la enfermedad (incidencia,
severidad) sntomas en campo, distribucin de las plantas enfermas, etc. Para
cumplir con tal necesaria informacin pueden solicitar un formulario a nuestro e-
mail (clinica@lamolina.edu.pe).

A B

Fig. 1. Plantn de olivo enviada a Laboratorio para anlisis fitopatolgico. A la

izquierda (A) se observa el sistema radicular completo con suelo (rizsfera) dentro
de un saco de rafia y cerrado en la parte inferior del tallo con cinta de embalaje. A
la derecha (B) se observa que al ser retirado el saco de rafia dicha planta muestra
en su interior la rizsfera envuelta en papel peridico humedecido con agua.

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B
A

Fig. 2. Forma de acondicionar una planta con sntomas de marchitez. Al

centro la planta extrada con su rizsfera. A la derecha la planta dentro de
una bolsa plstica a la cual se anud con una cuerda a la altura del cuello
de planta y tambin con otro nudo en el extremo superior. A la izquierda
contenedor donde se embalar la planta conteniendo soporte y alambres
para mantener inmvil la muestra.

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Final

Inicio

Fig.3. Patrn para muestreo de suelo. El tamao del lote ser de 3 Ha y se toma
una muestra compuesta de un total de 27 puntos colectando el suelo hasta una
profundidad de 30 cm (eliminar los primeros 10 cm)

VI. Referencias Bibliogrficas

Mont Koc, R. Gua de Instrucciones para colectar muestras de plantas
enfermas con fines de diagnstico fitopatolgico. UNALM.
Shurtleff, M. C. & Averre, C. W. 1997. The plant disease clinic and field
diagnosis of abiotic diseases. APS. 245 p.
Yeves, A., et al. 1991. Manual de laboratorio: diagnstico de hongos,
bacterias y nematodos fitopatgenos. Minist. de Agricultura y Alimentacin.
Espaa. 485 p.