INTRODUCCION El diagnstico definitivo de las enfermedades infecciosas causadas por

micobacterias se basa en la demostracin de su agente etiolgico. Esto se consigue, entre

otras formas, por histopatologa, mediante la tincin de los bacilos cido alcohol resistentes
(BAAR) en los tejidos obtenidos in vivo o en la autopsia. Las tcnicas de coloracin para
micobactenas son conocidas desde hace ms de un siglo y han sido ampliamente difundidas
(1). Vanos laboratorios de patologa del pas tienen dificultad para demostrar en los tejidos
estos BAAR

METODOS Tinciones
Tincin de cido-alcohol Encontrar informacin ms completa sobre
resistencia (tcnica de los componentesespecficos de las paredes de las bacterias
Kinyoun modificada) cido-alcohol resistente en los apuntes on line del
Profesor E. Iaez
Fundamento: envuelt Las bacterias cido alcohol resistentes son
a bacterias Gram positivas que resisten la decoloracin con
decolorantes enrgicos, como las soluciones de etanol en
cido clorhdrico (de donde deriva la denominacin).
cidos miclicos Esta resistencia se debe a cidos grasos especficos de la
pared (cidos miclicos). Los cidos se encuentran
esterificando hidroxilos de glcidos de diferente tamao.
Pulsa aqu para ver el esquema de la pared celular

Hidrofobia El resultado es la formacin de una pared lipdica

(hidrfoba). En consecuencia la pared dificulta la difusin
de molculas hidroflicas (nutrientes y colorantes)a
travs de su envuelta celular
Grumos en los cultivos El aspecto de los cultivos sobre medios
slidos es caracterstico: se forman
grumos (en la imagen a la izquierda
cultivo de Mycobacterium smegmatis y
a la derecha de E. coli).
Grumos al Si las bacterias AAR no se extienden con
fruicin, quedan agrupadas dificultando
la definicin de su forma (en ambas
imgenes cultivos de M. smegmatis).
microscopio
Crecimiento lento La impermeabilidad a molculas hidroflicas determina un
crecimiento (lento) caracterstico (formacin de grumos) y
la dificultad de tincin por colorantes convencionales, pero
como las endosporas, una vez teidas son difciles de
decolorar
Alteracin de la Solo se tien bien forzando la tincin (con calor como en
envuelta con calor o con la endospora o con una solucin muy concentrada de
fenol colorante (fuchina) en fenol).
Alcohol-clorhdrico El Alcohol-clorhdrico no las decolora, por lo que se
observan de color rojo. Cualquier otra clula (excepto de
algunas Nocardia, o endosporas) es decolorada, por lo que
admite la tincin por un segundo colorante (azul de
metileno) .
Azul de metileno
Modalidades Puede hacerse segn dos tcnicas: tincin de Ziehl-
Neelsen o tincin de Kinyoun
Material necesario Cultivos de Mycobacterium smegmatis o de M.
phlei. Fuchina bsica (fuchina (1 g), fenol (5 g), etanol (15
ml) y agua destilada 100 ml). Etanol-HCl : HCI 12N (3 ml),
agua destilada 100 ml.
Mtodo: tincin de Teir con fuchina durante 2 minutos. Lavar
Kinyoun modificada) con agua
Decolorar con etanol-HCI . Lavar con agua

Teir con azul de metileno durante 1

minuto. Lavar con agua. Observar con
objetivo de inmersin
Resultado Las bacterias cido-alcohol resistente se
ven de color violeta y las no acido-alcohol
resistentes de color azul. (en la imagen M.
smegmatis)