BIOPRODUCTION :

FABRICATION DETHANOL PAR FERMENTATION

T.P. N 1

Objectif dapprentissage : Prparer, organiser, conduire et effectuer le suivi (relevs, rapport

dopration, analyses) dune fermentation en respectant les rgles spcifiques dasepsie lies
une bio-production.

MANIPULATION :

Objectifs de production : Fabriquer 5 Kg de jus sucr alcoolis.

Principe : Strilisation de la cuve du fermenteur. Fermentation alcoolique de 5 Kg de solution

aqueuse de saccharose 10% par la levure saccharomyce cerevisiae (levure de bire, levure
de boulanger..).

Appareillage : Pilote de fermentation ; filtre buchner.

Techniques danalyse Rfractomtrie, densimtrie.

Ractifs - Produits : Saccharose, levure de bire - thanol.

HSE :

Hygine : Interdiction de boire et de manger en atelier. Port des gants pendant la

manipulation. Se laver les mains avant et aprs la manipulation. Maintenir un environnement
de travail propre.

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Scurit :
- Port des protections individuelles en
atelier (vtements de protection, gants,
lunettes).
- Maintenir rang lenvironnement du poste de travail.

- Risque produit : nant

- Risque matriel :
o lectrique : ne pas ouvrir larmoire lectrique.
o thermique : viter tout contact direct avec les parties chaudes de lappareil
(vapeur)
o mcanique (agitation) : attacher les cheveux longs, pas de vtements flottants.
Ne pas introduire dlments autres que les produits dans la cuve.

- Risque procd : nant

Environnement : Le jus alcoolique produit est stock pour tre distill ultrieurement et
rcuprer lthanol avant dliminer le reste du jus lgout.

CE QUIL FAUT SAVOIR :

Production dthanol par fermentation alcoolique du saccharose par la levure

Saccharomice cerevisiae :

Le saccharose (sucre de la betterave 12 atomes de carbone) est hydrolys en glucose (sucre

6 atomes de carbone) grce aux enzymes de la levure.
En labsence dair (en anarobie), la levure met en uvre un mtabolisme fermentatif qui
conduit la formation de gaz carbonique, dthanol et dun peu dnergie :

C6H12O6 2 C02 + 2 C2H5OH + 27 kcal

Glucose Gaz carbonique + Ethanol + Energie

En fermentation anarobie 95% des sucres consomms par la levure sont transforms en
CO2 et thanol. Chaleur

Biomasse
(levures)

Substrat
(glucose) FERMENTATION Alcool Ethylique

CO2
Intermdiaires de synthse et matires premires :
Industrie chimique
Industrie pharmaceutique
1 Tonne de sucre 0,5 Tonne dthanol Industrie agroalimentaire

Produits finis :
Carburant
Boissons alcoolises

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MODE OPERATOIRE :

Strilisation du fermenteur :

- Raliser la strilisation du fermenteur en (voir dossier technique).

- Ds que V9 est ferme (voir procdure du dossier technique) Complter toutes les 10
minutes pendant 1h le tableau de suivi de la strilisation.
- Arrter la strilisation (voir dossier technique)

Prparation des ractifs :

- Nettoyer lasepto-liquide un dcalitre, un entonnoir datelier, un bcher mtallique

de 1L, un bcher en verre de 250 mL et une spatule. Rincer abondamment.
- Peser 4,5 Kg deau dans le dcalitre nettoy.
- Charger par gravit leau dans la cuve du fermenteur en utilisant lentonnoir nettoy.
- Lancer lagitation 10 trs/min
- Rguler la temprature du fermenteur 30C (voir dossier technique).
- Peser dans le bcher mtallique 0,5 Kg de saccharose.
- Charger le sucre petit petit par gravit dans la cuve en utilisant l'entonnoir et la
spatule.
- Effectuer un recyclage denviron L par la vanne de fond de cuve avec le bcher
mtallique nettoy.
- Laisser sous agitation pendant 10 minutes.
- Prlever environ 500 mL de solution sucre par la vanne de fond. Vrifier que le sucre
est compltement dissous (sinon, recycler nouveau).
- Peser dans le bcher en verre 20 g de levure sche. (utiliser la spatule nettoye pour
prlever la levure).
- Introduire la levure dans le bcher mtallique avec la solution sucre et mlanger avec
la spatule jusqu' obtention d'une suspension homogne.
- Introduire la suspension de levure par gravit dans le racteur.

Fermentation :

- Isoler lintrieur de la cuve de lair extrieur en fermant les vannes A5, 8, 10 (voir
dossier technique). Ne laisser ouvert que la vanne A6 de dgazage du CO2.
- Conduire la fermentation pendant 3h.
- Toutes les 20 minutes, complter le tableau de suivi de la fermentation. Indiquez dans
la colonne remarque lheure de dbut de bullage (dgagement de CO2)

Filtration :

- Peser 200 g de clite

- Sous agitation, en vous aidant dun entonnoir, introduire la clite par le trou de poing
dans la cuve.
- Vider la suspension dans un dcalitre.
- Filtrer la suspension sur filtre Buchner.

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Peses, contrles et stockage des produits :

- Peser le gteau puis lliminer la poubelle.

- Peser le jus filtr.
- Mesurer sa temprature et sa masse volumique (feuille quantit)
- Qualifiez lodeur du jus (complter le tableau de produits finis)
- Qualifiez la clart du jus : clair, opalescent, trouble. (tableau de produits finis)
- Mesurer le taux de sucres au rfractomtre. (tableau de produits finis)
- Aprs accord de lenseignant, stocker le jus dans le bidon tiquet jus thanolique
de fermentation .

Nettoyage :

- Nettoyer lextrieur du poste en respectant la procdure du dossier technique.

- Complter et faire valider le tableau de nettoyage par le binme gestion

COMPTE-RENDU :

Pendant la manipulation :

Rdiger le rapport dopration, complter la feuille quantits (masses), complter les

tableaux de suivi.

Conduite des installations et/ou raction en cas de dysfonctionnement :

Compltez le tableau dysfonctionnements (voir documents de suivi).

Analyse qualit produit et assurance qualit :

Compltez les tableaux produits finis (voir documents de suivi).

Exploitation des rsultats :

Directement sur la feuille quantits :

- Calculer le rendement massique global de lensemble de la manipulation
- Calculer (dans le cadre rendements spcifiques ) lattnuation du taux de sucre en
fin de fermentation :
E Ea
Attenuation 100
E
E = Taux de sucres dans la solution initiale ; Ea = Taux de sucres dans les jus de ferments

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Sur le mme graphe (voir documents de suivi) : tracer les courbes du taux doxygne et du
pH en fonction du temps.

Analyse conclusion :

- Pourquoi strilise-t-on avant la fermentation ?

- Quelle est la fonction de ladjuvant dans la filtration ?
- Sur les courbes observez-vous une diminution du pH et du taux doxygne ? Comment
peut-on expliquer ces diminutions pendant la fermentation ?

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