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SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

TRATAMIENTOS DE SINCRONIZACIN DE CELOS EN


BOVINOS UTILIZANDO PROGESTGENOS Y ESTRGENOS

INTRODUCCIN
Esta Unidad servir para presentar los fundamentos bsicos y fisiolgicos que
llevarn a utilizar los distintos tratamientos a base de progestgenos promovidos
actualmente.

Se realiza una descripcin de los progestgenos ms frecuentes en el mercado


junto a sus distintas aplicaciones y protocolos de trabajo ms difundidos. Se
utilizaron los trabajos de varios grupos de varios grupos de distintos lugares del
mundo y principalmente lo desarrollado por nuestro grupo (Universidad de
Saskatchewan e IRAC). Se han incluido los sistemas de sincronizacin de celos para
IA a tiempo fijo y programas de resincronizacin de celos. Nuevamente queremos
recalcar que se explican y presentan todos los tratamientos existentes con sus
ventajas y desventajas. No es nuestra intencin indicar que un tratamiento es
mejor que otro ya que se cometera un grave error. Cada profesional deber
decidir cuales son los tratamientos que ms se adecuan a su situacin especfica y
ser discutido con detalle a travs de la plataforma de Internet.

109 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

OBJETIVOS

Entender el concepto de sincronizacin del desarrollo folicular y sus beneficios en la


sincronizacin de celos.

Entender el mecanismo por el cual los estrgenos en combinacin con progestgenos


inducen la atresia del folculo dominante y el crecimiento de una nueva onda
folicular.

Relacionar la dinmica folicular y luteal del ciclo estral con la accin de hormonas
exgenas.

Comprender y ser capaz de fundamentar fisiolgicamente el tratamiento de


sincronizacin de celos y ovulaciones con progestgenos y estrgenos.

Analizar crticamente, ventajas, desventajas y oportunidad de uso de la tcnica de


sincronizacin de la ovulacin en explotaciones bovinas.

Unidad 4 110
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

CONTENIDO
1. MANIPULACIN DEL DESARROLLO FOLICULAR.
1.1. Manipulacin del desarrollo folicular.
1.2 Sincronizacin del desarrollo folicular.

2. EFECTO DE DIFERENTES ESTRGENOS SOBRE EL


DESARROLLO FOLICULAR.
2.1 El estradiol y sus steres
2.2 Estradiol-17
2.3 Benzoato de Estradiol (EB)
2.4 Valerato de Estradiol (EV)
2.5 Cipionato de Estradiol (ECP)

3. TRATAMIENTOS DE SINCRONIZACIN DE CELOS EN BOVINOS


UTILIZANDO PROGESTGENOS.
3.1 Acetato de Melengestrol (MGA)
3.2 Norgestomet
3.2.1 Combinacin de Norgestomet con PGF.
3.2.2 Combinacin de Norgestomet + EV con GnRH.
3.2.3 Combinacin de Norgestomet + EV con EB.
3.2.4 Combinacin de Norgestomet + EV con eCG (PMSG).

4. TRATAMIENTOS DE SINCRONIZACIN DE CELOS Y


OVULACIN UTILIZANDO DISPOSITIVOS INTRAVAGINALES CON
PROGESTERONA.
4.1 Protocolos de sincronizacin de celos con dispositivos intravaginales con
progesterona.
4.2 Sincronizacin de celos utilizando dispositivos intravaginales con
progesterona en combinacin con progesterona, estradiol-17 y PGF.
4.3 Utilizacin de EB para sincronizar la ovulacin y la IA a tiempo fijo.
4.3.1 Vacas con cra.
4.3.2 Vacas secas y vaquillonas.
4.4 Momento de aplicacin de EB en relacin a la remocin del dispositivo.
4.4.1 Evaluacin del Momento de la IATF con Relacin al Retiro del
Dispositivo con P4
4.5 Tratamientos utilizando dispositivos con P4 en combinacin con
Cipionato de Estradiol (ECP).
4.6 Tratamientos utilizando CIDR-B en combinacin con GnRH.
4.6.1 Vacas con Cra.
4.6.2 Vaquillonas
4.7 Tratamiento de vacas utilizando progesterona en combinacin con eCG.
4.7.1 Destete temporario y eCG en vacas con cra en pobre condicin
corporal.
4.7.2 Uso de eCG en vacas cruza ceb secas
4.8 Reutilizacin de dispositivos con P4.

5. SINCRONIZACIN DE LOS RETORNOS AL CELO EN


PROGRAMAS DE IATF.

111 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

BIBLIOGRAFA BSICA UTILIZADA

Bergfelt DR, Lightfoot KC, Adams GP. Ovarian synchronization following


ultrasound-guided transvaginal follicle ablation in heifers. Theriogenology 1994;
42:895-907.

Bo GA, Adams GP, Pierson RA, Mapletoft RJ. Exogenous control of follicular
development in cattle. Theriogenology 1995; 43:31-40.

B, G.A. y Baruselli, P.S. Programas de Inseminacin Artificial a Tiempo Fijo en el


Ganado Bovino en Regiones Subtropicales y Tropicales. Captulo XXXI. En:
Avances en la Gandera doble propsito, C. Gonzalez-Stagnaro, Eleazar Soto
Belloso y Llido Ramrez Iglesia (Editores); Fundacin Girarz, Maracaibo,
Venezuela 2002; 499-514.

Bo, G.A., Cutaia, L., Tribulo, R. Tratamientos hormonales para inseminacin


artificial a tiempo fijo en bovinos para carne: algunas experiencias realizadas en
Argentina. Primera Parte. Taurus 2002; 14: 10-21.

Bo, G.A., Cutaia, L., Tribulo, R. Tratamientos hormonales para inseminacin


artificial a tiempo fijo en bovinos para carne: algunas experiencias realizadas en
Argentina. Segunda Parte. Taurus 2002; 15, 17-32.

B, G.A, Baruselli, P.S., Martinez, M.F. Pattern and manipulation of follicular


development in Bos indicus cattle. Anim Reprod Sci 2003; 78: 307-326.

Mapletoft RJ, Colazo MG, Martnez MF, Kastelic JP. steres de estrgeno para la
sincronizacin de la emergencia de la onda folicular y la ovulacin en animales
tratados con dispositivos con progesterona. Resmenes Quinto Simposio
Internacional de Reproduccin Animal, Huerta Grande, Crdoba, Argentina,
2003; 55-70.

Wiltbank MC, Pursley RJ, Fricke PM, Vasconcelos J, Guenther JN, Gibbons JR,
Ginther OJ. Development of AI and ET programs that do not require detection
of estrus using recent information on follicular growth, Proc. Annual Meeting
American Embryo Transfer Association, 1996; 23-44.

Unidad 4 112
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

1. MANIPULACIN DEL DESARROLLO FOLICULAR


1.1. Dinmica Folicular, Progestgenos y Fertilidad.

La ultrasonografa permiti descubrir qu es lo que suceda con el desarrollo


folicular cuando los animales eran tratados con dispositivos o implantes conteniendo
progesterona o progestgenos sintticos. El nombre genrico de progestgenos se les
da a un grupo de compuestos que son similares a la progesterona. Estos compuestos
estn en el mercado desde hace varios aos, inclusive desde antes que se comenzara
la utilizacin masiva de PGF para sincronizacin de celos. Dentro de estos
compuestos podemos citar los progestgenos de administracin oral como el Acetato de
Melengestrol (MGA), los implantes subcutneos de Norgestomet como el Syncro-
Mate-B y el Crestar y los dispositivos intravaginales con progesterona como el CIDR,-
B y el PRID. Con la irrupcin en el mercado de las PGF los progestgenos dejaron de
usarse en algunos sistemas debido a que con los tratamientos de 14 das (para esperar la
regresin "natural" del CL) se obtena una baja fertilidad (9).

Varios factores fueron originalmente relacionados con esta baja fertilidad entre
los que se contaban defectos en el transporte de espermatozoides y una mala calidad del
ovocito. Este tema ya fue mencionado en la Unidad 2 del Modulo 1 pero vale la pena
recordarlo. Como se dijo en esa unidad las altas concentraciones de progesterona tienen
un efecto supresivo sobre la secrecin pulstil de LH, mientras que la FSH no es
afectada. A su vez, la secrecin pulstil de LH tiene un efecto crtico en el desarrollo del
folculo dominante. Pulsos de alta frecuencia estimularn el crecimiento del folculo
dominante, mientras que pulsos de baja frecuencia afectarn su desarrollo e inducirn su
regresin prematura. Dentro de esta temtica se comenz a estudiar el efecto de los
progestgenos sobre los pulsos de LH y el folculo dominante. En todos los estudios se
observ que los progestgenos no llegaban a "imitar" la accin de los niveles
luteales de progesterona y por lo tanto la secrecin pulstil de LH se encontraba
aumentada, esto haca que el folculo dominante siguiera creciendo y produciendo
grandes cantidades de estrgenos y se transformara en lo que se denomin como
folculo dominante persistente. Este efecto de los progestgenos fue comprobado para
casi todos los disponibles en el mercado (MGA, SMB, Crestar, CIDR, PRID, etc.) y a
modo de ejemplo mostraremos en la tabla siguiente los resultados de un experimento
donde se utiliz SMB (22). El objetivo fue investigar cuantos implantes subcutneos de
Norgestomet eran necesarios para inducir una frecuencia de pulsos de LH similares a
los de la fase luteal. En este experimento se administraron 2 dosis de PGF, una en el Da
7 y otra en el Da 8 para lisar el CL y se colocaron 1, 2, 4 y 8 implantes de SMB en el
Da 7.

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SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Tabla 1. Frecuencia de pulsos de LH y tamao del folculo dominante en vacas implantadas con
Norgestomet por 9 das y en ausencia de un CL funcional. Datos obtenidos en el Da 9 de la
colocacin del implante de Norgestomet (Adaptado de Snchez et al., 1995, 22).

Tratamiento n Pulsos promedio de LH/24 h Folculo Dominante


(mm)
1 Implante 5 19.6 0.6 a 18.6 1.2 a
2 Implantes 5 14.0 1.7 b 17.0 1.0 ab
4 Implantes 5 8.0 4.6 c 15.2 0.6 b
8 Implantes 5 5.2 2.7 c 16.7 0.8 ab
Control (CL) 5 14.4 1.9 b 14.8 0.7 b
abc - Medias con distintas letras son diferentes (P<0.05)

En otro experimento realizado en la misma poca se compararon los implantes


de SMB con el MGA, y los espirales de progesterona PRID (Los PRID liberan la
misma cantidad de progesterona que el CIDR-B). A su vez, el grupo de PRID fue
dividido en vaquillonas que tuvieron 1 PRID o 2 PRID y los resultados fueron similares
al mostrado anteriormente. Se necesitaron 2 PRID para tener niveles de progesterona y
pulsos de LH equivalentes a los de la fase luteal.

Ahora bien, cmo asociamos todos los resultados descriptos con la baja
fertilidad? Las hiptesis de las causas de la baja fertilidad son principalmente dos: 1) el
ovocito del folculo persistente envejece y por lo tanto tiene bajas probabilidades de ser
fertilizado, o en caso de ser fertilizado tiene una baja viabilidad embrionaria; 2) al
producirse altas cantidades de estrgenos por el folculo persistente, estos altos niveles
alteran el medio oviductal y uterino, y este medio hostil produce la muerte del embrin.
Por lo estudiado hasta ahora, la hiptesis 1 parece la ms probable, aunque todava no
se puede descartar la segunda. Datos recientes de dos estudios (19, 21) han sugerido que
se produce una activacin temprana del ovocito. Como Uds. recordarn (Modulo 1), el
pico de LH causa la continuacin de la meiosis y la liberacin del primer cuerpo polar.
Estos estudios sugieren que la alta frecuencia de los pulsos de LH probablemente
inducen una activacin prematura del ovocito.

En el experimento de Revah y Buttler (21) se "crearon" folculos dominantes


persistente mediante la aplicacin de un CIDR en el Da 4 del ciclo estral y PGF en el
Da 6 a la mitad de los animales, mientras que la otra mitad (Grupo Control) no recibi
ningn tratamiento. Los ovocitos fueron obtenidos por aspiracin de los folculos
mediante aspiracin guiada por ultrasonografa transvaginal en el Da 13 del ciclo.
Estos investigadores encontraron las clulas del cmulo compactas y una vescula
germinal intacta (propios de ovocitos que todava no han sido activados por la LH)
en 24/29 de los animales del Grupo Control con folculos dominantes en
crecimiento "normales", mientras que ningn (0/23) ovocito de los folculos
persistentes tena esta apariencia. Por lo tanto, los niveles bajos de progestgenos o
progesterona inducidos por los productos comerciales producen una alta frecuencia de
secrecin de pulsos de LH como para activar al ovocito y que contine con la meiosis,
pero no lo suficientemente altos para causar la ovulacin.

La prxima pregunta es cunto tiempo es demasiado como para afectar el


ovocito del folculo dominante. Los resultados de un trabajo realizado en Irlanda por

Unidad 4 114
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Mihm et al. (19) son ms que reveladores. En este experimento se utilizaron vaquillonas
que fueron examinadas por ultrasonografa para detectar el inicio de la segunda onda de
desarrollo folicular y el da en que el folculo dominante de la segunda onda se
diferenciaba en tamao de los folculos subordinados. Ese momento se determin como
Da 1 de la dominancia folicular. En este momento los animales recibieron una dosis
luteoltica de PGF y fueron separados en tres grupos. El primer grupo recibi solamente
la inyeccin de PGF mientras que los otros dos grupos adems de ser tratados con PGF
fueron implantados con un progestgeno por 6 das o por 10 das. Todas las vaquillonas
fueron inseminadas con semen del mismo toro 12 h despus de detectado el celo. Se
evalu la preez por ultrasonografa a los 30-35 das post IA.

Las vaquillonas que recibieron PGF ms el implante de progestgeno no


tuvieron recambio folicular, es decir que el folculo dominante se mantuvo y sigui
creciendo hasta que se quit el implante y ovul. Los datos fueron evaluados de dos
maneras: de acuerdo a los tratamientos, como esta indicado en la Tabla 2, y de acuerdo
a la duracin del folculo persistente (intervalo desde que se diferenci de los
subordinados hasta la ovulacin) como esta indicado en la Tabla 3.

Tabla 2. Caractersticas del folculo ovulatorio, celo y porcentaje de preez en vaquillonas tratadas con
PGF y/o implantes de progestgenos (P); (Adaptado de Mihm et al. 1994, 19).

Caracterstica PGF solo PGF + P 6 das PGF + P 10 das


Vaquillonas en celo dentro de las 72 h 15/17 19/19 15/16
Dimetro del Fol. Dom. en el celo 12.7 0.4 a 17.2 0.5 b 20.1 0.7 c
(mm)
Duracin de la dominancia (das) 4.1 0.2 a 8.6 0.2 b 12.1 0.2 b
Preez 14/16 a 11/19 a 0/13 b
ab - Medias o proporciones con distintas letras son diferentes P< 0.05.

Tabla 3. Relacin entre la duracin de la dominancia y el porcentaje de preez. (Adaptado de Mihm et al.,
1994, 19).

PGF PGF + Progestgeno


1 - 4 das 7 -10 das 11-13 das
15/17 a 12/19 b 0/16 c
Porcentaje 80% 63% 0%
ab - Proporciones tienden a ser diferentes (P<0.08)
ac - Proporciones significativamente diferentes (P<0.05)

Estos resultados son similares a los obtenidos en experimentos realizados en


otros laboratorios y confirman que la causa de la baja fertilidad en los tratamientos
largos (>14 das) con progestgenos, o en los tratamientos cortos iniciados en la fase
final de ciclo estral (cuando ya el CL est regresando) resultan en una baja fertilidad;
debido principalmente a la ovulacin de un ovocito envejecido.

Para resumir, podemos decir que los implantes de progestgeno administrados


solos no llegan a reemplazar los niveles luteales de P4 producidos por el CL. Estos
niveles subluteales de P4 hacen que no haya recambio folicular y provocan el
mantenimiento del folculo dominante. A su vez, este folculo dominante persistente

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ovular un ovocito envejecido y con bajas probabilidades de ser fertilizado. Se estima


que 4 das de dominancia es el lmite en el cual el ovocito ya comenzar a estar
afectado. Estos efectos se pueden producir en todos los casos en que no hay un CL
funcional en el momento de la colocacin del progestgeno. Estos incluyen el
tratamiento de vacas en anestro con progestgenos solos, los tratamientos largos de ms
de 14 das o los tratamientos cortos pero comenzados en la fase tarda del ciclo, cuando
ya el CL est regresando.

1.2. Sincronizacin del Desarrollo Folicular.

Como ya se dijo anteriormente el crecimiento de un folculo dominante impide


el comienzo de una nueva onda folicular y concentraciones plasmticas bajas de
progesterona producidas por los dispositivos con progestgenos o progesterona en
ausencia de CL e inducen el desarrollo de un folculo dominante persistente que a su
vez ovula un ovocito de mala calidad. Como tambin se dijo anteriormente, el intervalo
entre el tratamiento y el estro (y la ovulacin) est determinado por la fase de desarrollo
del folculo dominante (12). Por lo tanto, el tratamiento ideal sera sincronizar el
desarrollo folicular, de manera que todos los animales tuvieran un folculo en
crecimiento y con capacidad de ovular en el momento de la administracin de PGF o de
la remocin del implante de progesterona.

Hay varios mtodos por los cuales se puede considerar el control de la dinmica
folicular del bovino. La mayora de los tratamientos estudiados han sido orientados
hacia la eliminacin del efecto del folculo dominante (por mtodos fsicos u
hormonales) y de esta manera permitir el comienzo de una nueva onda folicular en un
determinado perodo de tiempo conocido. La bases de este procedimiento derivaron de
estudios en los cuales la eliminacin del folculo dominante mediante cauterizacin (2,
14) o su supresin mediante tratamientos con la fraccin proteica del Fluido Folicular
Bovino (BFF; 13), fueron seguidos de un pico de FSH y el comienzo de una nueva
onda folicular. Un mtodo fsico es la ablacin folicular mediante la aspiracin
guiada por ultrasonografa transvaginal (1). Los tratamientos hormonales pueden
incluir la utilizacin de LH (16) o anlogos de la GnRH (16,23), que inducirn la
ovulacin o la luteinizacin del folculo dominante, como se vio en la Unidad 3, o la
supresin de los folculos antrales presentes mediante la utilizacin de estrgenos y
progestgenos (4). En la seccin dos de esta unidad se har referencia a los
tratamientos que combinan diferentes tipos de estrgenos con progestgenos para
controlar el desarrollo folicular.

Unidad 4 116
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

2. EFECTO DE DIFERENTES ESTRGENOS SOBRE EL


DESARROLLO FOLICULAR

2.1. El estradiol y sus steres

Los estrgenos naturales son esteroides con 18 tomos de carbono y un anillo


fenlico A (anillo aromtico con un grupo hidrfilo carbono 3) y un grupo hidrfilo
cetnico en el carbono 17 del anillo D. El anillo fenlico A es la estructura
responsable de la alta afinidad ligada a receptores de estrgeno. El estradiol-17 es el
ms potente de los principales estrgenos que se encuentran tanto en humanos como
en animales. Es el principal producto secretado por el ovario y se oxida fcilmente y
se transforma en estrona en el hgado y est ligado en ms del 50% a protenas
plasmticas. Los estrgenos estn distribuidos en todo el cuerpo y se acumulan en el
tejido adiposo. La eliminacin de estrgenos esteroides se da principalmente a travs
del metabolismo heptico. El estradiol-17, estrona o estriol son eliminados como
conjugados de glucurnido o sulfato. Los estrgenos y sus metabolitos son
eliminados principalmente a travs de la orina pero adems son eliminados a travs
de la bilis donde la mayora son reabsorbidos desde el tracto intestinal. Debido a la
baja solubilidad en agua, los steres de estradiol se absorben en un intervalo
prolongado.

Los estrgenos en soluciones oleosas son absorbidos rpidamente, aunque la


absorcin puede continuar durante varios das despus de su administracin
intramuscular. Los estrgenos esterificados poseen absorcin retardada despus de
su administracin intramuscular. Dichos steres son absorbidos desde el lugar de
inyeccin y el E-17 activo es liberado despus de la hidrlisis. El estradiol-17 es
la hormona activa que resulta del clivage de los steres de estradiol.

Un ster es una cadena compuesta principalmente por tomos de carbono estn


tpicamente adheridos a la hormona esteroide matriz en la posicin del carbono 17.
La esterificacin del grupo hidrxilo de 17 de estradiol-17 lleva a la proteccin de
este grupo contra el ataque metablico y a la prolongacin del efecto. Por lo tanto, el
cipionato de estradiol (C26H36O3; MW 396,6) producido por la esterificacin del
estradiol con cido ciclopentanepropionico, tiene una actividad biolgica mucho ms
sostenida que el estradiol-17 (C18H24O2; MW 272,4). Por otra parte, el benzoato
de estradiol (C25H28O3; MW 376,5) se produce por la esterificacin del carbono de
la posicin 3 y tiene un periodo de accin ms corto. El valerato de estradiol
(C23H32O3; MW 356,5) es de accin inmediata. Cunto ms larga es la cadena del
ster, ms baja es la solubilidad en agua y ms demorar en absorberse la dosis
completa. Una vez en la circulacin, el ster es clivado por una enzima estearasa (lo
hidroliza) y la actividad biolgica vuelve a ser la del E-17 normal. De lo cual se
desprende que la duracin de la accin depende de la absorcin y no del
metabolismo.


2.2. Estradiol-17

La utilizacin de Progesterona y/o Estrgenos tambin pueden afectar el


desarrollo folicular y el efecto del tratamiento utilizando Progestgenos y Estradiol-
17 (E-17) para suprimir el desarrollo del folculo dominante y de esta manera

117 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

sincronizar el desarrollo de una nueva onda folicular fue investigado crticamente en


una serie de experimentos realizados por nuestro grupo de trabajo (8,9).
Detallaremos a continuacin dos experimentos cuyos resultados llevaron a las
conclusiones ms importantes desde el punto de vista prctico.

El objetivo del primer experimento fue evaluar el efecto del E-17 sobre el
folculo dominante cuando es administrado solo o combinado con un progestgeno
(3). Se utilizaron 12 vaquillonas que fueron ubicadas al azar en dos grupos: el primer
grupo recibi un implante de progestgeno (SMB) en el Da 0 (ovulacin), 5 mg de E-
17 im en el Da 1 y el segundo grupo no fue implantado con SMB pero recibi E-17
en el Da 1. Todos los animales fueron examinados diariamente por ultrasonografa
desde el Da 0 hasta el comienzo de la segunda onda de desarrollo folicular. Los
resultados (Figura 4) demuestran que el tratamiento de E-17 fue ms efectivo cuando
se administr en combinacin con SMB que cuando fue administrado solo. El folculo
dominante de las vaquillonas tratadas con SMB y E-17 detuvo su crecimiento
aproximadamente un da despus del tratamiento y la segunda onda comenz en el
da 5.20.2. Por el contrario, el E-17 administrado solo no suprimi en forma
completa el crecimiento del folculo dominante y por consiguiente la segunda onda
comenz ms tarde (da 9.81.1).

14
E-17 (n=6)
12

10

4 E-17

SMB+ E-17 (n=6)


12

10

4
SMB E-17
2
0 1 3 5 7 9 11 13 15
Nmero de das desde la ovulacin

Figura 4. Efecto del E-17 administrado solo o un da despus de la insercin de un implante de


progestgeno (SMB) en el desarrollo del folculo dominante de la primera onda folicular y
el comienzo de la segunda onda (Adaptado de B et al., 1994; 3)

Unidad 4 118
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

El segundo experimento tuvo como objetivo determinar la eficacia del


tratamiento con progestgeno y E-17 para inducir el comienzo sincrnico de una
nueva onda folicular, cuando estos son administrados en distintos estados de
desarrollo del folculo dominante (2). Se utilizaron 4 grupos: un grupo control, y tres
grupos tratados que recibieron 5 mg E-17 en los Das 3, 6 o 9 del ciclo (ovulacin =
Da 0). Todos los animales de los tres grupos tratados recibieron un implante de
SMB 24 h antes de la inyeccin de E-17. El Da 3 correspondera a la fase de
crecimiento del folculo dominante, el Da 6 al final de la fase de crecimiento y
comienzo de la fase esttica y el Da 9 a la fase de regresin y al comienzo de la
segunda onda de desarrollo folicular. En la Figura 5 se encuentran indicados los
resultados obtenidos. El intervalo entre el tratamiento con E-17 y el comienzo de la
prxima onda no fue diferente entre los grupos y demostraron que el tratamiento con
E-17 en asociacin con un progestgeno (o progesterona) puede ser utilizado para
inducir el crecimiento sincrnico de una onda folicular, aproximadamente 4.3 das
despus que la inyeccin de E-17.

Para resumir, las conclusiones ms importantes que se obtuvieron en estos


trabajos en relacin a la sincronizacin de celos es que el tratamiento con progestgeno
y E-17 administrados en cualquier momento del ciclo estral, induce el crecimiento
sincrnico de una onda folicular, aproximadamente 4.3 das despus de la inyeccin de
5 mg E-17 (ver Tabla 4) y que para que el tratamiento de E-17 sea efectivo se debe
administrar un da despus de la colocacin de los implantes de progestgeno. El E-17
inyectado solo (sin progestgeno) o administrado en el mismo momento de la insercin
del implante del progestgeno (sin esperar uno o dos das) no resulta en una
sincronizacin efectiva de la onda folicular (14). Por ltimo, estos experimentos
tambin indicaron que el E-17 suprime el desarrollo de los folculos a travs de la
supresin de las gonadotrofinas circulantes (FSH y LH) y no por un efecto local a nivel
del ovario (5).

Tabla 4. Intervalo entre tratamiento y el crecimiento de una nueva onda folicular en vaquillonas tratadas
con un implante de progestgeno y una inyeccin de 5 mg de estradiol-17 (E-17) un da
despus. Los tratamientos estn indicados en relacin al da en el cual se administr el E-17.
Estradiol-17
Da 1 Da 3 Da 6 Da 9
n 13 15 9 9
E-17 onda (das) 4.5 0.2 4.0 0.3 4.6 0.2 4.1 0.3
(rango) (4 a 5) (3 a 5) (4 a 5) (3 a 5)
Las medias no difieren significativamente. Datos de 3 experimentos combinados (6, 7, 8).

119 Unidad 4
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14 C on trol (n = 9)
mm 12
10
8
6
4
2
D ay 3 (n = 9)
12
10
8
6
4 S M B + E -17
2
D a y 6 (n = 9 )
12
10

8
6
4 S M B + E -17
2 1 3 5 7 9 11 13 15

Nmero de das desde la ovulacin

mm 14 C o n tr o l (n = 8 )
12
10
8
6
4
2
D a y 9 (n = 9 )
12
10
8
6
4 S M B + E -1 7
2
-1 1 3 5 7 9 11 13 15 17

Nmero de das desde la ovulacin


Figura 5. Dimetros promedio del folculo dominante en vacas tratadas con un implante de SMB seguido
de 5 mg de E-17 un da despus. Los tratamientos fueron realizados en tres estados de la
onda de desarrollo folicular. Da 3: fin de crecimiento. Da 6: final de la fase de crecimiento o
esttica temprana. Da 9: fase de regresin del folculo de la primera onda y de crecimiento del
folculo dominante de la segunda onda. El intervalo entre el E-17 y onda no fue diferente
entre los grupos. (Adaptado de B et al., 1995; 2).

Unidad 4 120
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

2.3. Benzoato de Estradiol (EB).

Luego de los trabajos realizados con el E-17, se dise una serie de


experimentos para evaluar la eficacia de otro estrgeno que se encuentran disponible
en el mercado como el Benzoato de Estradiol (EB). A continuacin haremos un
resumen de los resultados ms importantes.

En el primer experimento se compar el efecto de dos dosis de EB y E-17


sobre el desarrollo del folculo dominante y el comienzo de la prxima onda de
desarrollo folicular (6). Se utilizaron 29 vacas que recibieron un dispositivo
intravaginal de progesterona (CIDR, InterAg, Nueva Zelandia) en momentos no
determinados del ciclo estral (Da 0). Al da siguiente (Da 1) las vacas fueron
ubicadas al azar en 4 grupos para recibir una inyeccin de 5 mg E-17, 1 mg E-17,
5 mg EB o 1 mg EB. Los CIDR fueron removidos en el Da 8. Todos los animales
fueron examinados diariamente por ultrasonografa ovrica (Concept MCV,
transductor de 7.5 MHz) desde el Da -2 hasta el Da 8. La caracterstica principal a
evaluar fue el da de comienzo de la nueva onda folicular (post-tratamiento). Los
resultados de este experimento demostraron que de las dos dosis estudiadas en este
trabajo, la dosis de 5 mg (E-17 y EB) es la que indujo el desarrollo de una nueva
onda folicular en forma ms consistente, mientras que la dosis de 1 mg fue marginal.
El intervalo promedio entre el tratamiento con 5 mg EB fue de 5.3 das mientras que
el del tratado con 5 mg E-17 fue de 4.1 das.

Los dos experimentos subsiguientes tuvieron como objetivo evaluar la


efectividad del EB en las dos presentaciones comerciales disponibles en mercado:
solucin oleosa inyectable o cpsulas intravaginales (CIDIROL, InterAg, Nueva
Zelandia). Se compar el efecto de EB administrados en dos momentos distintos
respecto a la colocacin del CIDR (en el mismo momento de la insercin y al da
siguiente) y por va intramuscular (EB im) y en cpsulas intravaginales (EBC). Los
resultados de los dos experimentos se encuentran resumidos en la Tabla 9 e indicaron
que las vacas tratadas con EB im en el Da 1 tuvieron un comienzo de onda ms
sincrnico que en los otros cuatro grupos. La onda de folicular comenz entre los 4 a
6 das post-EB en las vacas tratadas con 5 mg EB im en el Da 1, mientras que el
intervalo fue ms variable (P<0.05) en las vacas de los otros grupos.

Tabla 5. Efecto del EB administrado en dos momentos distintos en relacin a la insercin del CIDR
y por dos vas de administracin.

5 mg EB im 10 mg EBC Control
Da 0 Da 1 Da 0 Da 1
N 8 7 7 7 15
Comienzo de onda 6.0 b 6.0 b 3.0 c 4.0 c 2.0 a
(mediana)
(rango) 3-8 a 5-6 b 2-6 a 0-6 a 1-7 a
EB - Onda (mediana) 6.0 5.0 3.0 3.0 -
abc - Datos en la misma fila con distintas letras son diferentes (P<0.01).
Datos de dos Experimentos combinados.

121 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Los resultados de los trabajos anteriormente descriptos demostraron que el EB es


tan efectivo como el E-17 para sincronizar el desarrollo folicular. As mismo se
demostr tambin que la va im es efectiva mientras que las cpsulas intravaginales
no lo son.

Luego se realiz un nuevo experimento para determinar si es posible sincronizar


el desarrollo folicular con dosis inferiores a 5 mg EB y ver si se poda evitar tener
que encerrar nuevamente los animales al da siguiente para inyectarle el EB
administrando una combinacin de EB con 50 mg de Progesterona por va im el
mismo da de la colocacin del CIDR (Da 0; 9). La intencin principal es tratar de
reducir la dosis debido a la creciente presin pblica para disminuir al mximo los
tratamientos con excesivas cantidades de esteroides sexuales, a pesar que estos
esteroides utilizados tienen una vida media corta y no existiran por los tanto riesgos
de traspaso de residuos al humano si se los utiliza en animales de carne o
vaquillonas. Por otra parte, recientes trabajos presentados (15) sugeran la posibilidad
de suprimir el desarrollo folicular con dosis menores de estradiol, aunque en ambos
trabajos estas eran hiptesis empricas ya que en ninguno se haba realizado un
seguimiento crtico de la dinmica folicular ovrica con ultrasonografa para poder
determinar con exactitud el momento de comienzo de la onda folicular post-
tratamiento.

Se utilizaron 32 vacas Hereford, que recibieron un CIDR-B en momentos no


conocidos del ciclo estral (Da 0) y fueron distribuidos al azar en 4 grupos (n=8 por
grupo): un grupo control (no EB) y 3 grupos que recibieron las siguientes dosis de
EB: 1 mg, 2.5 mg, y 5 mg combinados con 50 mg de progesterona (P4)
administrados va im. Los animales fueron examinados diariamente por
ultrasonografa ovrica para determinar el crecimiento de la prxima onda folicular.
Los resultados estn descriptos en la Tabla 6.

Tabla 6. Efecto de distintas dosis de EB combinadas con 50 mg de progesterona administradas en el


momento de la insercin del CIDR en el comienzo de la prxima onda folicular en vacas
Hereford.

Control 1 mg EB 2,5 mg EB 5 mg EB
N 8 8 8 8
Comienzo de onda (mediana) 2.0 4.0 4.0 4.0
(rango) (-3) - 6 a 3-7b 3-4c 2-5b
EB onda 4 4 4
abc- datos en la misma fila con distintas letras son diferentes (p<0.001).

Este trabajo demostr que la dosis de 2.5 mg es efectiva para inducir el


desarrollo de una nueva onda folicular cuando se lo combina con 50 mg de P4
administrado al mismo momento de la insercin del CIDR-B.

En general hay muchos tcnicos que recomiendan utilizar una dosis de


benzoato de estradiol (EB) en vaquillonas (1 mg) que en vacas (2 mg). Es probable
que slo 1 mg sea necesario en vaquillonas, debido al menor peso y tamao corporal.
Si bien hay datos en la literatura en los que se han usado 2 mg o 1 mg de EB en
vaquillonas con resultados satisfactorios, es necesario realizar trabajos (sobre todo en

Unidad 4 122
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

animales cruza ceb) donde se comparen directamente estas dos dosis. Realizamos
otro trabajo evaluando 2 mg y 1mg de EB combinados con 50 mg de P4 en vaquillonas
Holando de 380 a 420 kg. (10). Los resultados se muestran en la Tabla 7.

Tabla 7. Efecto de distintas dosis de EB combinadas con 50 mg de progesterona administradas en el


momento de la insercin del CIDR en el comienzo de la prxima onda folicular en
vaquillonas Holando de 380 a 420 kg. de peso.

1 mg EB 2 mg EB
+ 50 mg P4 + 50 mg P4
n. 6 6
Da de emergencia de la onda folicular
Mediana 3.0 4.0
Varianza 1.7 1.9
Vaquillonas con onda folicular 3-4 das post EB 4 5

El da de emergencia de la onda folicular pos tratamiento no fue diferente


entre los grupos. No obstante, en una vaquillona tratada con 1 mg EB no se detect la
regresin del folculo dominante que se mantuvo hasta la ovulacin y en otra
vaquillona la nueva onda comenz en el Da 6. En el grupo tratado con 2 mg EB 5/6
vacas tuvieron una nueva onda entre los Das 3 y 4, pero en una vaquillona la onda
comenz en el Da 7. Los resultados sugieren que la dosis de 1 y 2 mg EB, aplicados
junto con 50 mg P4 im en el momento de la colocacin del CIDR-B son marginales
para controlar en forma satisfactoria el desarrollo folicular en animales Holando de
>380 kg. Por lo tanto, se cree que 2 mg puede ser adecuado en vaquillonas de carne y
leche y en vacas de carne pero tal vez se necesiten ms de 2 mg para vacas Holando en
lactancia sobre todo si son de alta produccin.

Recientemente finalizamos un experimento (datos sin publicar) con el objetivo


de determinar el efecto de la utilizacin de 1 2 mg de EB en el momento de
colocado del CIDR en vaquillonas cruza ceb IATF. Se utilizaron 125 vaquillonas
Brangus y Braford de entre 18 y 24 meses de edad, cclicas y con una condicin
corporal (CC) de 2,5 a 3 (Escala 1-5). Se determin la ciclicidad realizando
palpacin rectal con el objetivo de determinar la presencia de CL o de folculos >8
mm de dimetro y presencia de tono uterino. Los animales se dividieron al azar en 2
grupos de tratamiento. El da de comienzo del tratamiento (Da 0) todas las
vaquillonas recibieron un CIDR (1,9 g de P4, Pfizer Sanidad Animal, Argentina)
nuevo y se dividieron al azar en dos grupos de tratamiento, los que recibieron 1 mg
de EB (Grupo 1 mg EB) 2 mg de EB (Grupo 2 mg EB) en el mismo momento de
colocado el CIDR. En ambos grupos se retir el dispositivo en el Da 8, momento en
el cual se aplic una dosis de 500 g de cloprostenol y 24 h ms tarde (Da 9) se
aplic 1 mg de EB. Los animales fueron IATF entre las 52 y 56 h de retirado el
CIDR. Se realiz el diagnstico de preez 30 das despus de la IATF por medio de
ultrasonografa transrectal. Aunque las diferencias numricas favorecen al grupo
tratado con 2 mg de EB al momento de insertar el CIDR (Tabla 8), estas no fueron
significativas.

123 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Tabla 8: Porcentaje de Preez en Vaquillonas todos con CIDR-B y 1 o 2 mg de EB en el da 0

1 mg de EB 2 mg de EB TOTALES
N 62 63 125
Preadas 34 41 75
% Preez 54,84% 65,08% 60,00%
No hubo diferencias significativas (P = 0,24).

En base a estos datos y desde el punto de vista prctico consideramos que no se


justificara recomendar una dosis menor a 2 mg para vaquillonas, sobre todo teniendo
en cuenta el bajo costo del EB.

En otro experimento (20) se evalu el efecto del tratamiento con EB o EB+P4


sobre la sincrona de la emergencia de la onda folicular en vacas de carne tratadas
con dispositivos DIV-B (1,0 g de P4, Syntex, Argentina). Se utilizaron 41 vacas de
carne secas, con un peso de 370-470 Kg. que fueron distribuidas al azar en el
momento de la ovulacin (Da 0) en 8 grupos de tratamiento, en un diseo de 4 x 2
factorial (4 tratamientos administrados en 2 das diferentes). Las vacas del Grupo
Control recibieron un DIV-B blanco (sin P4), mientras que las vacas de los otros 3
tratamientos recibieron un DIV-B insertado solo (Grupo DIV), combinado con 2 mg
de EB im (Grupo DIV+EB) o 2 mg de EB ms 50 mg de P4 im (Grupo
DIV+EB+P4). Los DIV-B fueron removidos 7 das despus. Todas las vacas fueron
examinadas por ultrasonografa desde el momento de la insercin (Da 3 o 7) hasta 3
das despus de la emergencia de la onda folicular. El intervalo entre el tratamiento
hasta la emergencia de la onda folicular (Tabla 12) no fue diferente entre los grupos
(P>0,74). Sin embargo, la emergencia de onda fue menos variable (P<0,05) en las
vacas tratadas con DIV+EB+P4 que en los otros 3 grupos. A su vez, la emergencia
de onda en las vacas tratadas con DIV+EB fue menos variable (P<0,05) que en
aquellas vacas en el grupo control (DIV blanco) o Grupo DIV (solo). Los resultados
sugieren (Tabla 9) que la administracin de 2 mg de EB juntamente con 50 mg de P4
im al momento de la insercin del DIV-B resulta en una sincronizacin ms efectiva
del desarrollo folicular.

Tabla 9: Efecto del EB o EB+P4 en el comienzo de una nueva onda folicular envacas tratadas con
DIV-B

Control DIV DIV+EB DIV+EB+P4


N 9 11 11 10
Intervalo entre tratamiento y emergencia
de la onda (d)
Mediana (d) 3.0 3.0 4.0 4.0
c
Varianza (d) 13.0 10.9 c 1.3 b 0.2 a
Rango (d) (-3) a 7 (-3) a 7 2a5 4a5
abc Varianzas con diferentes superndices son significativamente diferentes (P<0,01).

En otro experimento se compar el efecto de los dispositivos intravaginales


DIV-B nuevos o reutilizados y el uso de EB o EB+P4 en el desarrollo de una nueva
onda folicular y adems de esto se estudio la influencia del comienzo de la onda

Unidad 4 124
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

folicular en el momento de la ovulacin. Se utilizaron 40 vaquillonas de razas de


carne, ciclando y con un peso de 280 a 340 Kg, las vaquillonas tenan una condicin
corporal de entre 2,5 y 3. Se realizaron dos rplicas de 20 animales c/u. Al inicio de
cada rplica los animales fueron examinados por ultrasonografa diaria por 5 das
(Da 5 al Da 0) para determinar el status del ciclo estral y luego fueron agrupadas
en base a su estadio folicular y luteal para ser divididas al azar en 4 grupos en un
diseo de 2 x 2 factorial (DIV-B nuevos vs DIV-B usados y EB + P4 vs EB solo).
Las vaquillonas recibieron en el Da 0 un DIV-B nuevo o re-utilizado y 2 mg de EB
+ 50 mg P4 (Lab. Ro de Janeiro, Argentina) o 2 mg de EB solamente. En el Da 7 se
retiraron los dispositivos y se inyect 500 g de cloprostenol, (Estroplan; Syntex,
Argentina). En el Da 8 los animales recibieron 1 mg de EB (Syntex, Argentina). Los
animales fueron examinados diariamente por medio de ultrasonografa transrectal,
primero para evaluar el estadio folicular y luteal (Da 5 a Da 0) y luego desde la
insercin del DIV-B, con el objetivo de determinar el momento de la emergencia de
una nueva onda folicular (Da 0) hasta el Da 9 (48 h de removido el DIV-B). A
partir del Da 9 se intensificaron los monitoreos a uno cada 12 h para determinar el
momento de la ovulacin.

En la Tabla 10 y Figura 6 se puede observar que a pesar que el inicio de la


nueva onda folicular fue menos sincrnica (P<0,05) en los grupos Nuevos+EB y
Nuevos +EB+P4 que el grupo Usados+EB puede observarse que no hubo diferencias
entre los grupos en el momento y distribucin de las ovulaciones. Las vaquillonas
ovularon entre las 60 y 108 h de la remocin del DIV-B.

Tabla 10. Inicio de onda y momento de ovulacin en vacas tratadas con dispositivos nuevos o reutilizadas
a las que se le aplic o no una dosis de 50 mg de P4.

Nuevos+EB Nuevos+EB + P4 Usados+EB Usados+EB + P4


n 10 10 10 10
Inicio de onda
Mediana (h) 4 5 4 4
Rango (h) 3-6 a 4-6 a (-4)-5 b 0-5 ab
Ovulacin
Ovuladas/tratadas 9/10 7/10 9/10 6/10
Mediana (h) 72 84 72 74
Rango (h) 60-84 72-108 60-108 72-84
ab. Indican diferencias significativas en la varianza del da de comienzo de la nueva onda folicular
(P<0,05).

125 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

80
70

% de ovulaciones
60
50
N+EB n=9
40
30
N+EB+P4 n=7
20 U+EN n=9
10 U+EB+P4 n=6
0
60 72 84 96 108

h de retirado el DIV-B

Figura 6. Distribucin de las ovulaciones en vacas tratadas con DIV-B nuevos o usados y con la
aplicacin o no de 50 mg de P4. No hubo diferencias entre los grupos.

La inexistencia de diferencias significativas entre los grupos en el


momento de la ovulacin, a pesar que haber diferencias en el momento de inicio
de onda, indicaran que si bien es necesario que comience una nueva onda para
evitar el problema del folculo persistente en vacas tratadas con dispositivos con
progesterona, la exacta sincrona de onda no es tan importante para que la vaca
ovule sincrnicamente y por lo tanto no alterara los porcentajes de preez en la
Inseminacin a Tiempo fijo. Estas observaciones se vieron reflejadas en los
resultados de preez de otros experimentos que veremos en la unidad 4 en los que no
se encontraron diferencias significativas entre vacas tratadas con P4 y EB al inicio
del tratamiento con vacas tratadas con EB sin P4 cuando se coloc el dispositivo.
Por lo tanto, desde estos experimentos se resolvi no utilizar 50 mg de P4 en
programas de IATF con dispositivos con P4. Sin embargo el uso de P4 sigue
siendo clave para sincronizar la onda folicular en donantes de embriones que
queremos superovular como se lo ver en el Curso de Transferencia de
Embriones y Nuevas Tecnologas.

2.4. Valerato de Estradiol (EV)

El EV es un estrgeno de vida media larga que se encuentra disponible en el


mercado asociado con implantes que contienen el progestgeno sinttico Norgestomet.
Estos preparados comerciales son el Syncro-Mate-B (SMB, Merial) y el Crestar
(Intervet). Estos preparados consisten en un implante de liberacin lenta de
Norgestomet que se coloca subcutneo en la oreja del animal. El tratamiento incluye
adems una solucin inyectable oleosa que contiene 3 mg de Norgestomet (N) y 5 mg
de EV.

En dos estudios preliminares, se observ que el EV tena un efecto inhibitorio


sobre el desarrollo folicular (7,6). En este experimento el tratamiento con SMB y la
inyeccin de N+EV indujo una disminucin del tamao de los folculos presentes por
un perodo de 5 das, para luego volver a aumentar, aparentemente debido al
crecimiento de los folculos de una nueva onda folicular. Sin embargo, este experimento
se realiz cuando recin estabamos aprendiendo a utilizar la ultrasonografa para el
seguimiento del desarrollo de los folculos individualmente identificados y no se pudo

Unidad 4 126
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

determinar con exactitud cuando comenzaba la onda folicular. Este trabajo fue realizado
nuevamente por Martnez et al (18) donde se tom un grupo de vaquillonas y se las
separ al azar para tratarlas con un implante de SMB o un implante de Crestar en la
oreja y a su vez fueron subdivididas para recibir 5 mg de E-17 y 100 mg de
progesterona (P4) o 5 mg de EV y 3 mg de Norgestomet (N). Las inyecciones fueron
administradas en el mismo momento de la insercin del implante. Los resultados se
encuentran indicados en la Tabla 11.

Tabla 11. Efecto del EV y E-17 en el desarrollo folicular de vaquillonas implantadas con Syncro-Mate-
B o Crestar (Adaptado de Martnez et al, 18).

Syncro-Mate-B Crestar
E-17 + P4 EV + N E-17 + P4 EV + N
N 10 10 9 9
Comienzo de onda 3.7 0.2 a 6.2 0.4 c 3.3 0.2 a 4.7 0.5 b
(media)
Rango 34a 58b 34a 38b
Intervalo tratamiento-celo 2.4 0.1 a 2.1 0.2 ab 2.4 0.2 a 1.8 0.1 b
Rango 2 -3 ab 1.5 4 b 2 3 ab 1.5 2 a
Intervalo tratamiento- 3.6 0.2 a 3.4 0.3 ab 3.6 0.2 ab 2.8 0.1 b
ovulacin
Rango 2.5 4 a 2.5 5.5 b 3 4 ab 2.5 3 b
ab datos en la misma fila con distintas letras son diferentes (P<0.05).

Como se puede observar en la Tabla 11 el intervalo onda tratamiento fue ms


largo con el EV que con el E-17 y a su vez el comienzo de la onda fue ms variable
con el EV que con el E-17. Esta variabilidad adems indujo una ovulacin variable en
las vacas tratadas con EV y SMB y no fue tan as con las tratadas con EV y Crestar.
Como ya veremos ms adelante esto puede tener significado en la IA a tiempo fijo. De
todas maneras creemos que estos son datos experimentales de un grupo pequeo de
animales y por lo tanto los intervalos tratamiento ovulacin pueden variar aqu entre
SMB y Crestar pero no creemos que haya diferencias significativas entre el
comportamiento de ellos en la sincronizacin de celos. Los datos del intervalo onda-EV
ms variables que para E-17 y esta variabilidad se ha repetido en otros estudios
realizados por otros grupos (10).

2.5. Cipionato de Estradiol

A pesar de que el benzoato de estradiol, el valerato de estradiol y el estradiol-


17 mostraron ser muy eficaces para la sincronizacin de la emergencia de la onda
folicular para IA a tiempo fijo en animales tratados con CIDR o con SMB, estas
preparaciones de estrgeno no estn comercialmente disponibles en algunos pases
como Canad y Estados Unidos. Sin embargo, s se encuentra disponible para los
veterinarios un ster de accin ms prolongada, el cipionato de estradiol (ECP). Se
realizaron experimentos para investigar la utilizacin de ECP para sincronizar la
emergencia de la onda folicular y la ovulacin en vaquillonas de carne tratadas con
un dispositivo CIDR. En el primer experimento se investig la eficacia de ECP para
la induccin de la ovulacin del folculo dominante de una onda folicular

127 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

sincronizada. El Da 0 se administr un CIDR y 5 mg de E-17 a vaquillonas


puberales. El Da 7 se quitaron los CIDR y se administr PGF. Se dividi a las
vaquillonas en tres grupos: uno no sera tratado (control), otro recibira 0,5 mg de
ECP al momento de la remocin del CIDR (ECP0) y otro 24 h ms tarde (ECP24).
Se realiz ecografa dos veces al da desde el Da 7 hasta la ovulacin. Las
vaquillonas que recibieron ECP tuvieron un intervalo ms corto desde la remocin
del CIDR hasta la ovulacin que las vaquillonas del grupo control (81,6 5,0 h, 86,4
3,5 h y 98,4 5,6 h en ECP0, ECP24 y el grupo Control, respectivamente), pero
las varianzas no fueron diferentes entre los grupos. Diecinueve de veinte
vaquillonas en los grupos con ECP ovularon entre 72 y 96 h despus de la remocin
del CIDR.

Se dise otro experimento para determinar los efectos de ECP sobre la


emergencia de la onda folicular con IA a tiempo fijo. El Da 0, se insert un CIDR a
las vaquillonas (n = 58), 5 mg de E-17 y 100 mg de progesterona o 1 mg de ECP
ms 100 mg de progesterona. Los Das 7 (E-17) o 9 (ECP), se quitaron los CIDR y
se administr PGF a las vaquillonas. Luego se asignaron las vaquillonas a tres grupos
para administrarles 0,5 mg de ECP al momento de la remocin del CIDR o 24 h ms
tarde o 1 mg de EB 24 h despus de la remocin del CIDR. Se insemin a todas las
vaquillonas alrededor de 58 h luego de la remocin del CIDR. Se realiz ecografa a
diario desde el Da 0 hasta la ovulacin para monitorear los cambios ovricos y 28 d
despus de la IA para detectar preez. El da medio de la emergencia de la onda
folicular, fue ms variable en vaquillonas que recibieron ECP que en aquellas que
recibieron E-17. El tamao de folculo dominante al momento de la remocin del
CIDR fue mayor en vaquillonas tratadas con ECP (11,3 2,1 mm) que en
vaquillonas tratadas con E-17 (9,8 1,5 mm). Esto indica que el ECP no es tan
eficiente como el E-17 para sincronizar la onda folicular. Sin embargo puede ser
una alternativa interesante como conductor de la ovulacin como lo veremos en el
punto 4.5 de esta unidad.

Resumen y Conclusiones

Para realizar un control efectivo del desarrollo folicular existen mtodos


mecnicos como la aspiracin de todos los folculos > 5 mm presentes en el ovario (la
nueva onda comienza aproximadamente 1,5 das despus) o tratamientos hormonales
que incluyen GnRH, o progestgenos ms estradiol. El intervalo entre el tratamiento
con 5 mg de E-17 y el comienzo de la nueva onda folicular es de 3 a 5 das, mientras
que es de 3 a 4 das en el tratamiento con 2 mg de EB y 50 mg de progesterona y de 3 a
8 das (promedio 5.5 Das) con el tratamiento de 5 mg EV y 3 mg de Norgestomet. Es
importante recalcar las soluciones inyectables de EB son ms efectivas que las cpsulas
intravaginales y si vamos a utilizar EB con dispositivos con P4 para un tratamiento de
IATF no sera tan necesario utilizar 50 mg de P4 para tener una sincrona tan precisa del
comienzo de la nueva onda folicular. No obstante utilizar EB junto con la insercin del
dispositivo es muy importante para asegurar el desarrollo de un nuevo folculo que se
encuentre viable y en crecimiento (que no sea un folculo persistente) en el momento de
sacar el dispositivo. Esto evitar la formacin de un folculo persistente y nos permitir
una buena fertilidad a la IA.

Prepar el texto: Gabriel A. B y Lucas E. Cutaia

Unidad 4 128
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

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129 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

16. Macmillan KL, Thatcher WW. Effects of an agonist of gonadotropin


releasing hormone on ovarian follicles in cattle. Biol Reprod 1991; 45:883-
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17. Mapletoft RJ, Colazo MG, Martnez MF, Kastelic JP. steres de estrgeno
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3. TRATAMIENTOS DE SINCRONIZACIN DE CELOS EN


BOVINOS UTILIZANDO PROGESTGENOS.
Esta seccin estar dedicada a la presentacin de los progestgenos y sus
combinaciones en la sincronizacin de celos. Dentro de los progestgenos ms
difundidos podemos citar a los de administracin oral como el Acetato de Melengestrol
(MGA) que fue utilizado incipientemente en algunos pases de Amrica Latina hace
algunos aos, pero que es bastante utilizado en Norteamrica porque es el progestgeno
ms barato. En algunos pases no tuvo mayor difusin debido a que no se tienen
animales estabulados como ocurre en muchos lugares de USA y Canad. La
administracin oral se hace dificultosa en los sistemas de explotaciones pastoriles como
los nuestros. Otros compuestos muy difundidos son los implantes subcutneos de
Norgestomet. A continuacin haremos una descripcin de los progestgenos ms
difundidos en el mercado junto a sus distintas aplicaciones y protocolos de trabajo ms
difundidos, incluidos los sistemas de sincronizacin de celos para IA a tiempo fijo.

3.1. Acetato de Melengestrol (MGA)

Es el progestgeno que ms se ha utilizado en Norteamrica para la


sincronizacin de celos en bovinos. Entre las ventajas del MGA se incluye el bajo
costo, la administracin oral (usualmente mezclada con granos) y su extremadamente
baja toxicidad. Uno de los tratamientos consiste en administrar 0.5mg MGA/cabeza/da

Unidad 4 130
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

por 14 das, seguido de una inyeccin de PGF 17 das despus de suspenderse la


administracin de MGA (45). Se ha reportado que este rgimen resulta en una buena
sincronizacin de celos con buena fertilidad. Adems, este tratamiento es
aparentemente ms efectivo en animales con una condicin corporal buena o moderada
comparados con los de una condicin corporal regular a mala. El destete temporario de
48 h increment el porcentaje de vacas de 2 a 3 aos (primera y segunda paricin) que
quedaron preadas en la primera parte de la poca de servicio comparada con vacas de
la misma edad y el mismo tratamiento pero sin destete temporario o que las vacas que
no recibieron ningn tratamiento (56). La mayora de las vacas estarn en celo unos
pocos das despus de suspendida la racin de MGA; no obstante los animales no
fueron servidos hasta despus de la administracin de PGF. El porcentaje de preez ser
ptimo si se detecta celo e IA 12 h pos celo. La IA a tiempo fijo 72 h despus de la
PGF, ha resultado en buena fertilidad en algunos rodeos y mala en otros (28, 29). Por
lo tanto, una alternativa es IA a todos los animales 72 h despus de la PGF y despus
detectar celo e IA hasta las 120 h o directamente colocar toros a las 96 h de
administrada la PGF (28).

Administrar 0,5 mg de MGA/cabeza/da durante 14 das, sin ningn tratamiento


posterior y solamente colocar los toros con el rodeo aproximadamente 10 das despus
de la ltima administracin de MGA es una manera muy simple de lograr cierto grado
de sincronizacin. En caso de tener animales con alguna suplementacin, ste rgimen
es muy poco costoso, no requiere manejo de animales y no incrementar la necesidad
de toros en el servicio. Adems, este rgimen aumentar la cantidad de energa en la
dieta poco antes del servicio (a travs del grano utilizado como "transportador" del
MGA) y debera iniciar la ciclicidad en vacas en anestro y vaquillonas que estn
prximas a la pubertad.

Otro rgimen que utiliza MGA y PGF es administrar MGA durante 7 a 9 das y
aplicar una inyeccin de PGF el ltimo da. Este protocolo resulta en una fertilidad un
poco ms baja que si se aplica PGF 17 das despus del MGA. En este rgimen, las
vacas que comienzan a consumir MGA cuando se encuentran en el estadio final del
ciclo estral, tienen la regresin luteal normal pero no ovulan debido a los niveles de
MGA en sangre. En estos casos el folculo dominante contina creciendo y se
transforma en un folculo persistente mientras se mantengan los niveles de MGA,
produce altos niveles sricos de estrgeno y ovular un ovocito no viable. Se ha
desarrollado recientemente en Canad una novedosa manera de mejorar la fertilidad con
este rgimen (26). Se administra 0,5 mg/cabeza/da de MGA durante 7 das, y adems
se inyectan 5 mg de E-17 y 100 mg de progesterona el primer da en que se aplica
MGA. El ltimo da de administracin de MGA se aplica una dosis luteoltica de PGF.
Como ya vimos en la Unidad 3, el tratamiento con E-17 y progesterona (P4) suprime
el desarrollo del folculo dominante y sincroniza el crecimiento de un nuevo folculo
ovulatorio, mejorando de esta manera la fertilidad (3,5). Este rgimen utiliza una dosis
simple de PGF y el costo del MGA, E-17 y progesterona es de menos de $ 2/cabeza.
Este rgimen resulta en un estro frtil y bien sincronizado. La mayor parte del servicio
ocurre en un perodo de 3 das, que reduce notablemente el tiempo y el trabajo para la
deteccin de celos comparado con otros tratamientos. En un experimento (26), se
suministr un promedio de 0,5 mg/cabeza/da de MGA durante 7 das (Das 0 a 6) y se
inyect PGF en el Da 6. Adems, la mitad de estos animales recibieron 5 mg de E-17
ms 100 mg de progesterona en el Da 0. Hubo un tercer grupo (designado el grupo
PGF) que fueron servidas por 7 das y aquellas que no fueron servidas hasta el Da 7

131 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

recibieron una PGF. Los resultados de este experimento se encuentran indicados en la


Tabla 1.

Tabla 1. Comportamiento reproductivo de vaquillonas y vacas con cra tratadas con MGA + E-17 y
progesterona. (Adaptado de Kastelic et. al., 1996, 26).

Vaquillonas Vacas
PGF MGA MGA+E-17 PGF MGA MGA+E-17
N 44 44 43 69 72 72
Preez del estro
sincronizado (%)
Total 50 32 49 72 b 49 c 54 c
CL Presente* 58 42 41 74 b 52 c 65 bc
CL Ausente * 40 bc 20 b 52 c 67 46 45
Preez al final
del servicio (%) 89 93 98 91 89 96
bc - Porcentajes con distinta letra son diferentes (P<0,05)
* CL Presente o Ausente indica los animales que tenan un CL (observado por ultrasonografa) en el
momento de la inyeccin con PGF en el Da 6.

Como se ve en la Tabla 1, los porcentajes de preez entre los animales


sincronizados con PGF y los tratados con MGA + E-17 + PGF no fueron diferentes y
en cambio los tratados con MGA + PGF fueron menores. Si tomamos los animales que
no tenan un CL funcional al final del tratamiento (Da 6) el dimetro del folculo
dominante fue 1 a 2 mm menor en los tratados con MGA y E-17 que los tratados con
MGA solo. Por lo tanto, la inclusin de una inyeccin de E-17 y P4 administrada el
primer da del tratamiento de sincronizacin con MGA por 7 das, ms una PGF en el
ltimo da aument el porcentaje de preez en el celo sincronizado y al final del
servicio. La mejor fertilidad fue aparentemente debida a la supresin del desarrollo del
folculo dominante y sincronizacin de una nueva onda en las vacas tratadas con MGA
+ E-17 + PGF cuando no tenan un CL funcional.

Para resumir y concluir con el MGA, decimos que ste es un progestgeno oral,
barato y efectivo para sincronizar celos en vaquillonas o vacas con cra. Para evitar el
efecto negativo de los tratamientos largos o en animales sin CL es posible combinar
este tratamiento con una inyeccin de E-17 y P4 al comenzar el MGA y PGF al
finalizar. Indicamos en la Figura 1 el esquema de tratamiento de sincronizacin segn
los lineamientos generales del trabajo de Kastelic y Mapletoft (26).

Da 0 Da 6 Da 11
MGA 0,5 mg/da Celo -IA
E-17+P4 PGF

Figura 1. Esquema de tratamiento de sincronizacin de celos utilizando MGA.

3.2. Norgestomet

Unidad 4 132
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

El Norgestomet es un progestgeno sinttico que se utiliza en dos productos


comerciales Syncro-Mate-B (SMB, Merial) y Crestar (Intervet). Syncro-Mate-B,
actualmente discontinuado, era un implante de "Hydron" que contiene 6 mg de
Norgestomet y Crestar es un implante "silstico" que contiene 3 mg de Norgestomet.
Estos implantes son colocados subcutneamente en la oreja y ambos productos vienen
acompaados de una inyeccin que contiene 5 mg de valerato de estradiol (EV) y 3 mg
de Norgestomet (N) que se administran en el mismo momento en que se coloca el
implante. Los implantes son extrados 9 das despus. Aunque aparentemente las
cantidades de N en el implante son distintas, la liberacin en la circulacin es similar y
es debido a la diferente composicin qumica del implante.

El uso de estos progestgenos en reproduccin ha sido estudiado por ms de 30


aos. Cuando todava no se contaba con PGF en el mercado, investigadores de esa
poca (Wiltbank et. al., 54) encontraron que la inyeccin de 5 mg de EV poda inducir
la regresin del CL. Posteriormente, con el advenimiento de los progestgenos
sintticos se decidi combinarlos con estrgenos para utilizarse en sincronizacin de
celos en bovinos (53). De esta manera se desarrollo el tratamiento de SMB y Crestar, es
decir, el implante ms la inyeccin de 5 mg de EV y 3 mg de N (43,53). La idea es que
el EV induce la lutelisis por los mecanismos ya descriptos y la inyeccin permite tener
altos niveles inmediatos del progestgeno que luego sern mantenidos con la liberacin
lenta del implante subcutneo. Este tratamiento ha sido utilizado por una gran cantidad
de productores en todo el mundo para sincronizar celos de vaquillonas y vacas pos
parto. En la Tabla 2 se encuentran resumidos muchos de estos experimentos (44).

Tabla 2. Resumen de una seleccin de referencias sobre el uso del Syncro-Mate-B para la
sincronizacin del estro en bovinos. Referencias: SMB-E: IA con celo detectado; SMB-T: IA a
tiempo fijo; CR-48: destete temporario de 48 h; CR-24: destete temporario de 24 h. (Adaptado
de Odde 1990; 44)

Referencia Tipo de E Tratamiento N % de celo a % de % de % de preez a


animal x los 5 das concepcin al preez a los 25-28 das
p primer los 5 das
servicio
Wiltbank y Vaquillonas I SMB-E 16 94 57 50
Gonzalez-Padilla Prepberes de Control 14 0 0
1975 carne
I SMB-E 77 79 56 43
I Control 81 6 4
Vaquillonas de I SMB-E 78 100 33 33 60
un ao Control 77 27 54 14 60
I SMB-E 98 98 63 63 80
I Control 95 27 63 10 74
I SMB-E 56 98 56 55 71
I Control 53 28 60 15 64
I
ISMB-E 39 85 38 31 51
VControl 39 10 63 5 51
VSMB-E 99 96 49 43 56
Control 99 26 45 15 50
V SMB-E 99 96 45 43 56
I Control 99 26 45 15 50
V SMB-E 97 77 40 30 38

133 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

I Control 89 16 52 4 26
I
Mares et. al., Vacas de I SMB-E 39 59
1977 (n total= carne post- SMB-T 51 66
2.332) parto (>50% Control 12 56
ciclando)
Vacas de I SMB-E 16 32
carne post- SMB-T 26 41
parto (<50% Control 3 17
ciclando)
Miksch et. al., Vaquillonas I SMB-E 44 93 39 36 64
1978 pberes de SMB-T 44 89 39 39 73
carne Control 29 38 56 16 62
I SMB-E 23 100 39 39 74
I SMB-T 21 86 62 62 61
Control 21 33 62 28 67
I SMB-E 50 94 34 32 64
I Control 48 25 72 18 58
I
Vacas post- I SMB-E 77 93 68 64 82
parto ciclando Control 71 25 84 20 83
Vacas post- I SMB-E 33 82 60 48 70
parto en Control 38 13 69 8 58
anestro
Kaltenbach y Vacas post- I SMB-T- 70 51
Dunn 1979 parto de carne CR48 69 43
SMB-T-
CR24
I SMB-T- 92 41
I CR48 93 33
SMB-T-
CR24
I SMB-T- 154 42
I CR48 146 51
I SMB-T-
CR24
I SMB-T- 62 47
V CR48 60 47
SMB-T-
CR24
V SMB-T- 95 45
CR48 84 55
SMB-T-
CR24
Peterson et. al., Vacas post- I SMB-T 126 37 75
1979 parto de carne SMB-T- 131 54 86
CR48 91 60
Control
I SMB-T- 600 45 63
I CR48 600 49 65
SMB-T- 288 53
CR24
Control
Kiser et. al., Vacas de I SMB-T 97 23 32 59
1980 carne post- SMB-T- 43 40 28 58
parto CR24 103 77 46 72
SMB-T-
CR48
Spitzer et. al., Vaq de carne I SMB-E 114 98 48 47 70
1981 vrgenes Control 110 26 70 22 71
I SMB-E 54 83 35 30 56
I SMB-T 47 45 45 74
Control 45 44 58 22 69
I SMB-E 48 100 63 63 73
I SMB-T 98 52 52 70
I Control 53 40 49 21 60

Unidad 4 134
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

I SMB-E 56 91 56 52 73
V SMB-T 195 62 62 83
Control 68 25 75 19 69

En la mayora de los trabajos, aproximadamente un 90 % de los animales


tratados mostraron celo poco tiempo despus de la remocin del implante. No obstante,
la fertilidad fue variable, con porcentajes de preez del 33 al 68% (44). Las diferencias
en los ndices de preez entre los experimentos pueden deberse en parte al nivel de
ciclicidad de los animales utilizados. En general, si menos del 50% de las vacas del
rodeo estaban ciclando los resultados de preez a los 5 das eran menores que los de
rodeos en los cuales ms del 50% de las vacas estaban ciclando. Esto es probablemente
debido a que muchas vacas en anestro mostrarn celo despus de la remocin del
implante, pero la fertilidad es menor. Hay un trabajo de Brink y Kiracofe (7) donde el
porcentaje de preez en vacas en anestro post-parto fue del 30% y otro trabajo de
Brown et. al. (44), que report los mismos resultados con vaquillonas prepberes. Sin
embargo los trabajos de Wiltbank y Gonzlez Padilla (55), y Miksch et. al. (41)
reportaron altos ndices de preez con animales en anestro. Nosotros atribuimos esta
diferencia al estado corporal de las vacas que se utilizaron en uno y otro trabajo
respectivamente; observaciones tambin enunciadas en los trabajos de Kaltenbach y
Dunn (44). Estas observaciones nos llevan a la importante conclusin de que la
condicin corporal de los animales tratados afecta significativamente la fertilidad.

Se han reportado tambin diferencias en la fertilidad en relacin al estadio del


ciclo en el cual se administra el tratamiento. Se ha encontrado una fertilidad del 47%
cuando los tratamientos son iniciados antes del Da 14 del ciclo y de un 37% en los
iniciados despus del da 14 del ciclo (7). Estos resultados fueron relacionados con la
posibilidad del efecto negativo de la exposicin prolongada a los progestgenos y la
formacin de folculos persistentes.

Como se ve en la Tabla 2 una buena porcin de los trabajos realizados con IA a


tiempo fijo tuvieron buenos resultados, sin embargo los resultados de las pruebas de
campo han sido variables. Recientemente se observ que esta variable respuesta
puede estar influenciada por el intervalo entre la remocin del implante y la
ovulacin especialmente si volvemos a observar los resultados del experimento
realizado por Marcelo Martnez (36) donde el intervalo tratamiento-ovulacin fue
bastante variable en uno de los grupos tratados con EV y SMB. Esto llev a estudiar
otras alternativas y/o combinaciones de tratamientos de SMB con otras hormonas que
veremos a continuacin. En la Figura 2 indicaremos el tratamiento ms utilizado con el
Crestar o SMB.

Da 0 Da 9 Da 11
Norgestomet IA
EV+N

Figura 2. Tratamientos de sincronizacin utilizando los implantes de Norgestomet (Syncro-Mate-B o


Crestar) con IA 12 h despus del estro o a tiempo fijo, 48 a 54 h despus de la remocin del
implante. En el caso de ser utilizado en vacas post-parto se asocia un destete temporario de 48
h comenzando en el momento de quitarse el implante de Norgestomet. Intervet recomienda la

135 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

IA a las 48 h en vaquillonas y a las 56 h en vacas (43). Merial no hace distinciones en el


momento de la IA entre vacas y vaquillonas.

3.2.1. Combinacin de Norgestomet con PGF.

Recientemente se ha cuestionado la accin luteoltica del estradiol cuando se lo


aplica en las fases tempranas del ciclo. En un estudio se encontr que el 50% de las
vacas tratadas en la fase temprana del ciclo estral no mostraron celo y tenan altos
niveles de progesterona cuando se quit el implante (46). Estos resultados fueron
tambin observados por nuestro grupo utilizando SMB en programas de superovulacin
(6,4). Por lo tanto algunos trabajos recomiendan inyectar PGF, 2 das antes de la
remocin del implante para aumentar los ndices de preez.

En general estimamos que un 10% de los animales tratados pueden presentar un


CL al momento de la remocin (y por lo tanto no tendr celos y ovulacin) y esto es
ms significativo en vacas grandes y no tanto en vaquillonas. En general, se ha
observado en vaquillonas que la mayora entraran en celo y ovularan, por lo que en esta
categora no se justificara el uso de PGF. La mejora en los ndices de preez mediante
la aplicacin de PGF fue reportado por Odde (44) y tambin ha sido publicado por
Intervet en vacas lecheras en lactacin (43). En este ltimo trabajo hubo un 10 % de
preez favorable a las vacas que recibieron PGF comparado con las que no recibieron
PGF. Los datos se muestran en la Tabla 3. En este experimento tambin se combin el
tratamiento con 500 IU eCG (PMSG) al quitar el implante.

Tabla 3. Porcentaje de Preez en vacas en lactancia utilizando diferentes programas de sincronizacin


con Crestar (Adaptado de PC Nelis, Compendium of Animal Reproduction, Intervet, 1995, 32).

n Crestar PGF 2 das antes 500 UI eCG % preez con IA


+ EV + N de remocin a la remocin
56 + - - 47
64 + - + 50
60 + + - 59
60 + + + 65

3.2.2. Combinacin de Norgestomet + EV con GnRH.

Este protocolo fue desarrollado en un experimento en el cual se combin GnRH


al final del tratamiento para inducir la ovulacin (51). En este experimento se utilizaron
20 vaquillonas Holstein que fueron tratadas con SMB (implante ms inyeccin) y
monitoreadas por ultrasonografa. El da de la insercin del SMB (y la inyeccin de EV
y N) fue denominado Da 0. Los implantes fueron removidos en el Da 9 y la mitad de
las vaquillonas recibieron una inyeccin de 100 g de gonadorelin (Cystorelin, Merial)
30 h despus. El tratamiento alternativo con GnRH est indicado en la Figura 3.

Da 0 Da 9 Da 11
SMB IATF
EV+N GnRH
Unidad 4 136
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Figura 3. Tratamiento de sincronizacin utilizando los implantes de Norgestomet (SMB) con GnRH a las
30 h de removido el SMB e IA a tiempo fijo, 54 h despus de la remocin del implante.
(Adaptado de Vasconcelos et. al., 1994; 51)

Como en el experimento de Martnez (36) visto en la Unidad 3, el tratamiento


de EV y N indujo la regresin del folculo dominante existente y el crecimiento de una
nueva onda entre 4 y 7 das despus. En cuanto al CL, todas las vacas tratadas despus
del Da 5 del ciclo tuvieron regresin luteal, en cambio solamente la mitad de las vacas
tratadas entre los Das 0 y 4 del ciclo estral tuvieron regresin luteal. Si evaluamos lo
que puede ocurrir en una situacin de campo, podemos predecir que
aproximadamente un 20% de las vacas ciclando estarn en fase luteal temprana; en la
mitad de ellas el CL regresar por accin del EV y en otras no. Debemos entonces
evaluar econmicamente el beneficio de tener un 10 % ms de preez por la adicin
de PGF en el sistema. Tal vez en este caso sea una decisin ms econmica que
fisiolgica, dependiendo principalmente del precio del semen que utilizamos.

En cuanto a la ovulacin, esta fue ms sincrnica (56-64 h) y la preez fue


numricamente (no significativamente) mayor (7/8) en las vaquillonas tratadas con
GnRH que en las no tratadas con GnRH (ovulacin 60-76 h y 4/8 preadas). En cuanto
a este anlisis hay que destacar que las 3 vaquillonas que no tuvieron regresin luteal y
una vaquillona que se enferm durante el trabajo no fueron inseminadas y es por eso
que de 10 animales tratados por grupo se IA 8 por grupo. Este protocolo tambin fue
utilizado en otro experimento (50), donde la administracin de 250 g de GnRH en una
cpsula de gelatina a las 30 h de quitado el implante result en un mayor porcentaje de
preez a la IA a tiempo fijo en vacas con cra ciclando (61 vs 22 %) o en anestro (31 vs
14%). Los autores concluyeron que este tratamiento es una buena alternativa para IA a
tiempo fijo. Un protocolo parecido fue utilizado en un experimento realizado por
nosotros, donde se administro 10 g de Buserelina a las 48 h de retirado el SMB e IA a
las 60 h pos SMB, con un porcentaje de preez del 64 %; vs. 56,6 % del grupo control
(9).

3.2.3. Combinacin de Norgestomet + EV con EB.

Otra alternativa de induccin de la ovulacin es utilizar 0.5 o 1 mg de EB a


las 24 h de la remocin del SMB e IA a las 50-52 h pos SMB. Recientemente
realizamos un trabajo preliminar utilizando 11 vaquillonas Holando de 2 aos de
edad que recibieron un SMB + 2 ml de la porcin inyectable (EV+N) en momentos
no conocidos del ciclo estral (Da 0). El Da 9 se quitaron los implantes y 24 h
despus 6 vaquillonas recibieron 1 mg EB mientras que las 5 restantes no recibieron
ningn otro tratamiento. Las vaquillonas fueron examinadas por ultrasonografa cada
12 h para determinar el momento de la ovulacin. La distribucin de la ovulacin se
encuentra presentada en la Figura 4.

137 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Nmero de vaquillonas
4

3 SMB + EB
SMB
2

0
48-60 60-72 72-84 84-96 96- 108- >120
108 120
Intervalo SMB - Ovulacin (h)

Figura 4. Distribucin de la ovulacin en vaquillonas Holstein tratadas con SMB por 9 das y 1 mg de EB
im 24 h despus.

Como se puede ver en la Figura 4 la inyeccin de EB sincroniz la ovulacin


en estas vaquillonas. No obstante, estos datos son preliminares y realizados en un
pequeo nmero de animales. Este ao estamos realizando pruebas de campo para
comparar los ndices de preez en vacas tratadas con EB, con aquellas no tratadas
con EB. Los resultados estn presentados en la Tabla siguiente. Como se ve, hubo
mucha diversidad de resultados en las distintas pruebas pero los nmeros tienden a
favorecer a los animales tratados con EB. Sera necesario realizar ms trabajos para
confirmar estos resultados.

Tabla 4. Porcentaje de preez de vacas y vaquillonas tratadas con SMB ms la administracin de EB


a las 24 h de la remocin del SMB.

SMB + EB SMB
Preadas (%) Preadas (%)
Vaquillonas Angus Colorado 10/18 (55,5)a 4/17 (23,5)b
Vacas Cruza 14/25 (56,0)a 12/25 (48,0)a
Vacas Cruza 24/42 (57,1)a 6/21 (28,6)b
Vaquillonas Cruza 19/52 (36,5)a 11/32 (35,5)a
Total 67/137 (48,9)a 33/95 (34,73)b
Proporciones con distinta letra difieren (P<0.05)

Da 0 Da 9 Da 10 Da 11

IATF

(+ EV + N) 1 mg EB

Figura 5. Tratamiento de sincronizacin de celos e IA a tiempo fijo con SMB y EB.

Unidad 4 138
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

3.2.4. Combinacin de Norgestomet + EV con eCG (PMSG).

La combinacin de eCG para estimular el desarrollo folicular fue estudiada en


vaquillonas prepberes, vacas con cra, o vacas lecheras en lactancia. La dosis de eCG
utilizada por los distintos grupos ha variado desde 400 a 700 UI. Para nosotros con 700
UI se corre peligro de aumentar los porcentajes de mellizos. El uso de eCG en vacas
Holstein ya fue mostrado en la Tabla 3. En la Tabla 5 mostramos datos publicados por
Intervet para vacas con cra (43).

Tabla 5. Efecto del Crestar y 700 UI de eCG sobre la induccin del celo en vacas post-parto (Adaptado
de PC Nelis, Compendium of Animal Reproduction, Intervet, 1995; 43).

Ao % de vacas ciclando* % parto % parto + 30 das % mellizos


Antes de Crestar Despus de **
Crestar
1978 23 94 63 (99/157) 83 4
1979 17 93 50 (63/127) 76 11
1980 19 96 63 (102/161) 76 4
1981 38 95 65 (99/153) 81 2
1982 27 100 62 (56/90) 81 9
Total 23 95 61 (419/688) 79 5
* Medidos a travs de RIA para progesterona en plasma de dos muestras de sangre tomadas con 10 das
de intervalo. (>1ng/ml P4=ciclando)
** Porcentaje acumulado de vacas que resultaron preadas y parieron a consecuencia de la IA pos
tratamiento ms los servicios ocurridos en los 30 das siguientes.

Se ha publicado una revisin por parte de investigadores europeos (24) que


indicaron que con este tratamiento el grado de ciclicidad de los animales influye
dramticamente el porcentaje de preez, siendo de aproximadamente un 60 % en vacas
que se encontraban ciclando y de un 40 % en las vacas en anestro. Estos autores
estudiaron aspectos como la condicin corporal (BCS), la dificultad del parto y el
intervalo posparto en vacas con cra tratadas con Crestar + PMSG y los resultados se
encuentran resumidos en la Tabla 6.

Tabla 6. Efecto del tratamiento temprano (antes de los 70 das post-parto), dificultades de parto y baja
condicin corporal (BCS) sobre el % de ciclicidad y respuesta al tratamiento de sincronizacin
en vacas Charolis primparas (Humbolt et. al., 1996; 24).

Condicin % Ciclicidad % Ovulacin % Preez


Tratamiento < 70 das
Dificultad de parto 5% 55 % 30 %
BCS < 2.5 (n=170)
Tratamiento > 70 das
Parto fcil 40 % 95 % 75 %
BCS > 2.5 (n=18)

139 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Estos datos concuerdan con nuestros resultados de campo donde hemos


tenido porcentajes de preez del 30 % en vacas con cra, 60-90 das pos parto y pobre
condicin corporal ( 2, escala del 1 al 5); y un 50 a 60 % de preez en vacas con
una condicin corporal 2,5. No obstante estas vacas con baja condicin corporal
tuvieron un 95% de preez final despus de 3 meses de servicio con toros, mientras
que el porcentaje de preez en el resto del rodeo que no fue tratado con SMB fue de
85%. Esto sugiere que si bien no se obtuvo un buen porcentaje de preez a la IA
sincronizada, el tratamiento ayud a estas vacas a ciclar y tener ms chances de
quedar preadas durante el servicio con toros.

Tambin realizamos un experimento para determinar si era posible aumentar


el porcentaje de preez de los tratamientos con eCG mediante la sincronizacin de la
ovulacin con EB. El experimento se realiz en el establecimiento El Gaviln
(Esquina, Corrientes) y se utilizaron 200 vacas cruza ceb con 70 a 90 das posparto
y con una condicin corporal de 3 (escala 1 a 9). Los animales recibieron un SMB y
la inyeccin de EV+N en el Da 0. Los animales fueron separados al azar en 4
grupos: el Grupo 1 recibi 500 g de D+Cloprostenol (PGF, Emefur, Merial) en el
Da 6, 400 UI eCG (Novormn, Syntex) en el Da 9, 1 mg EB (Laboratorio Ro de
Janeiro) en el Da 10 y fue IATF en el Da 11; el Grupo 2 recibi PGF en el Da 6,
eCG en el Da 6, EB en el Da 10 y fue IATF en el Da 11, el Grupo 3 recibi PGF
en el Da 6, eCG en el Da 9 y fueron IATF en el Da 11; el Grupo 4 recibi PGF y
eCG en el Da 6 y fue IATF en el Da 11. Los implantes fueron retirados en el Da 9.
A los 30 das de la IA todos los animales fueron revisados por ultrasonografa para
detectar la preez. Los tratamientos y los resultados estn indicados en la Tabla 7.

Tabla 7. Tratamientos y porcentajes de preez de vacas cruza ceb tratadas con Progestgenos y
ECG con o sin EB.

Grupos Da 0 Da 6 Da 9 Da 10 Da 11 n Preadas %
Grupo 1 SMB PGF eCG EB IATF 50 20 40
Grupo 2 SMB PGF+eCG -- EB IATF 50 21 42
Grupo 3 SMB PGF eCG -- IATF 50 25 50
Grupo 4 SMB PGF+eCG -- -- IATF 50 23 46
Los porcentajes no difieren.

Como se puede ver en la tabla la combinacin de eCG y EB no mejor los


ndices de preez. Sin embargo, datos de experimentos realizados comparando EB y
eCG en vacas en anestro tratadas con CIDR-B demostraron que no hay diferencias
significativas entre ellos cuando se los usa solos. En este momento estamos haciendo
algunas pruebas preliminares utilizando eCG en combinacin con GnRH en el
momento de la IA con buenos resultados, aunque estos deben ser evaluados
crticamente para justificar el gasto extra de la GnRH. En una prueba realizada el ao
pasado se compar la preez de 106 vacas sincronizadas con CRESTAR + eCG +
GnRH. Se prearon 62 (58.5%) mientras que de 49 vacas IA con eCG pero sin

Unidad 4 140
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

GnRH resultaron preadas 25 (51.0%). Por supuesto habra que hacer nuevas
comparaciones con un nmero mayor de animales para obtener resultados concretos.

a. Uso del Norgestomet + eCG en vaquillonas cruza Indicas.

La combinacin de Norgestomet y eCG tambin ha sido bastante utilizada en


Australia para la sincronizacin e IA a tiempo fijo de vaquillonas cruza Brahman. Estos
trabajos fueron realizados principalmente por el grupo de Queensland (Mike McGowan
et. al.; 27). En un experimento (27), se utilizaron 169 vaquillonas cruza Brahman de 12
a 15 meses y >280 Kg. de peso (promedio 326 Kg.) y fueron tratadas con tres
tratamientos. El Grupo Control recibi media dosis de PGF (7.5 mg Luprostiol,
Intervet, Australia) cada 12 das e IA a las 72 h. El Grupo CIDR-B recibi un CIDR-B
por 10 das y 400 UI de eCG ms 7.5 mg Luprostiol en el momento de quitar el
implante e IA a las 50 h. El Grupo SMB recibi un SMB por 10 das (se administr EV
y N en el momento de la insercin del SMB) y 400 UI eCG ms 7.5 mg Luprostiol en el
momento de quitar el implante e IA a las 50 h.

En estos animales se utiliz el sistema de la franja de pintura desarrollado por


Macmillan (35). Todos los animales fueron pintados con una franja de 20 cm de
longitud y 5 cm de ancho color azul en la base de la cola. Luego sobre esta franja se
pinto una lnea de 3 cm con un aerosol de color rojo. En el momento de la IA se evalu
la presentacin de celo mediante un score indicando la cantidad de pintura perdida.
Scores: 6= pinturas intactas; 5= 90 a 100 % de la pintura azul intacta y sin pintura roja;
4= 70 al 90 % de pintura intacta; 3= 50 a 70 % de pintura intacta; 2= 30 a 50 % de
pintura intacta; 1= 10 al 30 % de pintura intacta; 0= menos del 10 % de pintura intacta.

Tabla 8. Porcentaje de preez en relacin al tratamiento y a la expresin de celo medidos de acuerdo a la


prdida de pintura en la base de cola. (Adaptado de Kerr et. al., 1991; 27).

Score de pintura PGF (%) CIDR-B (%) SMB (%)


0-4 13/40 (32,5) 9/18 (50,0) 20/36 (55,6)
5 2/35 (5,7) 7/14 (50,0) 2/6 (33,3)
6 1/10 (10,0) 4/9 (44,4) 1/1 (100)
Total 16/85 (18,8) 20/41 (48,8) 23/43 (53,5)

Una interesante observacin de este trabajo es que las vaquillonas que no fueron
montadas o dudosas (score 5 y 6) y que fueron tratadas con CIDR-B o SMB tambin
resultaron preadas mientras que muy pocas de las tratadas con PGF sola quedaron
preadas.

Da 0 Da 9 Da 11

SMB IATF

(+ EV + N) 141 eCG Unidad 4


SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Figura 6. Tratamiento de sincronizacin de celos e IA a tiempo fijo con SMB y eCG.

Para resumir, los implantes subcutneos de progestgenos son tratamientos muy


tiles para la sincronizacin de celos en vacas y vaquillonas. Existen dos implantes en
el mercado (SMB y Crestar) y ambos vienen acompaados con una dosis de 5 mg de
EV y 3 mg de Norgestomet. Los tratamientos tradicionales consisten en la aplicacin
del implante (ms inyeccin) en el da 0 y la remocin en el da 9. En caso de utilizarlos
en vacas con cra se puede combinar con un destete temporario de 48 h. La mayora de
los animales estarn en celo a las 36-48 h de quitado el implante. Se han desarrollado
otros protocolos que combinan los progestgenos con PGF para asegurar la lutelisis y
aumentar los ndices de preez. Tambin se los ha combinado con 400-500 UI de eCG
en vacas posparto y vaquillonas Bos indicus. Los ltimos tratamientos desarrollados
incluyen la administracin de GnRH a las 30-36 h de removido el implante e IA a
tiempo fijo a los 52-54 h pos implante, 1 mg de EB a las 24 h del removido el implante
e IA a las 5052 h pos implante o GnRH en el momento de la IA (50-54 h post
implante). Toda esta batera de tratamientos hace de estos implantes una herramienta
muy til en los programas reproductivos.

Unidad 4 142
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

4. TRATAMIENTOS DE SINCRONIZACIN DE CELOS Y OVULACIN


UTILIZANDO DISPOSOTIVOS INTRAVAGINALES CON
PROGESTERONA.

Existen actualmente en el mercado diferentes dispositivos intravaginales con


progesterona (PRID, Sanofi; CIDR-B, Pfizer; DIB, Syntex; Cue-Mate, Bioniche y
TRIU-B, Biogenesis) para ser utilizados en programas de sincronizacin de celos. Los
PRID son espirales que contienen 1,55 g de progesterona y son los ms antiguos.
Actualmente se los usa mucho en Europa y prximamente estarn disponibles en
Argentina. Los CIDR-B son unos dispositivos desarrollados en Nueva Zelanda que
contienen tambin 1,9 g de Progesterona y tienen una forma de Y. Ahora hay una
presentacin nueva que contienen 1.63 g de progesterona (disponibles en algunos
pases). Los DIB y los TRIU-B son dispositivos nuevos fabricados en la Argentina y
que contienen 1 g de progesterona.

Estos dispositivos son tal vez los que mayor publicidad han tenido en los
ltimos aos, tanto en Sudamrica como en Norteamrica. Desde que se crearon estos
dispositivos se han desarrollado una gran cantidad de protocolos (32). Los primeros
tratamientos evaluados fueron los tratamientos de 14 a 21 das que resultaban en una
buena sincrona de celos pero baja fertilidad, principalmente debido a la formacin de
los folculos persistentes como ya se describi anteriormente en la seccin anterior. Para
inducir la regresin luteal, se combino a estos dispositivos con una cpsula que contiene
10 mg de benzoato de estradiol (EB) que se administraba en el momento de insercin
del dispositivo. Posteriormente, con el aumento del conocimiento y el desarrollo de
nuevos trabajos, se opt por recomendar la administracin de PGF. Estos tratamientos
tenan un resultado variable debido a que si eran comenzados en la fase luteal tarda
(despus del Da 14) resultaban en una baja fertilidad (35,49).

Una gran cantidad de protocolos preliminares utilizando CIDR-B fueron


llevados a cabo por el grupo de Nueva Zelanda (Macmillan et. al.; 30). Para resumir y
conocer los resultados ms importantes presentaremos algunos resultados de diferentes
trabajos de campo realizados con CIDR-B (33).

4.1. Protocolos de sincronizacin de celos con dispositivos intravaginales con


progesterona.

El primer trabajo tuvo como objetivo estudiar el efecto del tratamiento con
CIDR-B y el momento de la aplicacin de PGF en los porcentajes de celos y de preez
en vaquillonas Holstein. En este trabajo se utilizaron 370 animales que se encontraban
en 6 rodeos y que fueron tratados con CIDR-B por 10 das y luego subdivididos para
recibir 1/2 o una dosis luteoltica de PGF en el momento de la remocin del CIDR
(CIDR-B 10 + PGF 10) o dos das antes de la remocin del CIDR-B (CIDR-B 10 +
PGF 8). No hubo diferencia entre media dosis y dosis completa de PGF. Los resultados
de expresin de celo y preez (Figura 7) fueron similares. Sin embargo la
administracin de PGF en el Da 8 tuvo ms sincrona de expresin de celos. Un 82%
de las vaquillonas en el grupo PGF 8 mostraron signos de celo a las 48 h pos CIDR,
mientras que slo un 67% lo hicieron en el grupo PGF 10 (P<0.01). Esta tendencia fue
observada en los 6 rodeos tratados y en general, el grupo CIDR-B 10 + PGF 8 tuvo un
nmero mayor de vaquillonas que ya haban sido IA para las 72 h pos CIDR-B. En
cuanto a los ndices de preez, a pesar que las diferencias no fueron significativas, las

143 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

vaquillonas del grupo PGF 8 tuvieron un menor porcentaje de preez (61.0 % vs


67.4%) y esta menor fertilidad fue pareja para todos los rodeos. Se pens que esta
menor fertilidad se poda deber al desarrollo de folculos persistentes,
especialmente en vacas tratadas con el CIDR-B en la ltima fase del ciclo estral.
Debemos recordar aqu que la insercin del CIDR-B no fue acompaado de estradiol y
si insertamos el CIDR-B despus del Da 16 o 18 del ciclo (cuando ya ha ocurrido la
lutelisis) los niveles de progesterona mantendrn el crecimiento del folculo dominante
y este ovular un ovocito alterado o envejecido (47)

100
90
% de vaquillonas en celo

80
70
60
CIDR 10 + PGF 10
50
CIDR 10 + PGF 8
40
30
20
10
0
48 72 96
Intervalo CIDR - Celo (h)

Figura 7. Distribucin de celos en vaquillonas Holstein tratadas con CIDR por 10 das y PGF en el da de
la remocin del CIDR o 2 das antes.

Estos resultados evidenciaron una vez ms la necesidad de desarrollar


protocolos que sincronicen el desarrollo folicular, de manera que todos los animales
tengan un folculo en crecimiento y con capacidad de ovular en el momento de la
remocin del dispositivo y la administracin de PGF. Por esta poca se comenz a
discutir la posibilidad de que el estradiol poda sincronizar el desarrollo folicular
resultando en el comienzo de una nueva onda aproximadamente 4 das despus (B et.
al., 1989; 6). Entonces se decidi incluir en el protocolo la cpsula intravaginal que
contena 10 mg de EB (EBC) para ver si de esta manera se poda sincronizar el
desarrollo de una nueva onda folicular y aumentar la sincrona de celos y porcentaje de
preez con el tratamiento de CIDR-B.

Se realizaron pruebas de campo para evaluar el efecto del tratamiento con


CIDR-B combinado con la EBC en la fertilidad y sincrona de los celos. En un trabajo
se compar el tratamiento de CIDR-B 10 + EBC + PGF 10, con el de CIDR-B 10 +
PGF 10 y un grupo al cual se administr la PGF en el da 6 (CIDR-B 10 + PGF 6) sin
EBC. Los resultados de este experimento se resumen en la Figura 8.

Unidad 4 144
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

100
90

% de vaquillonas en celo
80
70
60 CIDR 10 + EBC + PGF 10
50 CIDR 10 + PGF 10
40 CIDR 10 + PGF 6
30
20
10
0
48 72 96
Intervalo CIDR - Celo (h)
Figura 8. Distribucin de celos en vaquillonas Holstein tratadas con CIDR por 10 das.

Como ustedes pueden ver, la sincrona de celos fue mayor el grupo CIDR-B 10 +
EBC + PGF 10 que en el CIDR-B 10 + PGF 10 con un 15% de diferencia en favor de
los animales que recibieron EBC. Los animales tratados con PGF en el Da 6 tuvieron
la mayor sincrona de celos pero la fertilidad de este grupo fue un 10% menor (62,3%
vs 52,5 %; P<0.1).

En otra prueba de campo se evalu el beneficio de incluir la EBC en tratamiento


de CIDR-B por 10 das e inyectando la PGF en el Da 6 para maximizar la
sincronizacin de celos. En este experimento se utilizaron un total de 483 vaquillonas
en 5 rodeos y el resumen de los resultados se encuentra en la Figura 9.

100
90
% de vaquillonas en celo

80
70
60
CIDR 10 + EBC + PGF 6
50
CIDR 10 + PGF 6
40
30
20
10
0
48 72 96
Intervalo CIDR - Celo (h)

Figura 9. Distribucin de celos en vaquillonas Holstein tratadas con CIDR por 10 das.

Los resultados de este experimento mostraron que la inclusin del EBC


aument el porcentaje de vaquillonas en celo dentro de las primeras 48 h y el porcentaje
de preez del 45 % al 56 % (P<0.05). Solamente en un rodeo el grupo EBC tuvo una
menor sincrona de celo y en todos los rodeos el grupo EBC tuvo un mayor ndice de
preez, a pesar que los porcentajes variaron entre 36 % al 63 %. De estos estudios
salieron las recomendaciones antiguas del uso del CIDR-B que como veremos mas
adelante se han dejado de lado en este momento, debido a que las cpsulas son

145 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

menos efectivas para sincronizar el desarrollo folicular que las soluciones


inyectables.

4.2. Sincronizacin de celos utilizando dispositivos intravaginales con progesterona


en combinacin con progesterona, estradiol-17 y PGF

En esta parte haremos una descripcin de trabajos realizados en la


sincronizacin de celos tendientes obtener un protocolo viable y repetible de
sincronizacin de celos e IA a tiempo fijo. Para llegar e estos tratamientos nos basamos
en los siguientes datos:

1. El intervalo entre el tratamiento y el estro (y la ovulacin) est determinado por la


fase de desarrollo del folculo dominante en el momento del tratamiento, que en
consecuencia afecta los porcentajes de preez en programas de IA a tiempo fijo.
Cuando el folculo dominante se encontraba en la fase de crecimiento o esttica
temprana, las vaquillonas mostraron celo a las 48-60 h del tratamiento. En cambio,
cuando el folculo se encontraba en la fase de regresin, el folculo dominante de la
prxima onda fue el que ovul y por lo tanto estos animales mostraron celo a los 5 a 7
das despus del tratamiento (25).

2. Se han desarrollado varios protocolos de sincronizacin de celos utilizando


dispositivos con progestgenos o progesterona, aunque la fertilidad est disminuida con
los tratamientos de ms de 14 das o con tratamientos cortos comenzados en la fase
luteal tarda (despus del Da 14). La baja fertilidad con los tratamientos largos, as
como de los tratamientos cortos iniciados en la fase tarda del ciclo estral ha sido
adjudicada al mantenimiento de un folculo dominante por mucho tiempo y la
ovulacin de un ovocito envejecido (40).

Estos resultados puntualizan la necesidad de desarrollar protocolos que


sincronicen el desarrollo folicular, de manera que todos los animales tengan un folculo
en crecimiento y con capacidad de ovular en el momento de la remocin del dispositivo
y/o la administracin de PGF y fueron los que movieron a nuestro grupo de trabajo a
utilizar los conocimientos adquiridos con el E-17 y P4 en el desarrollo folicular y
estudiar su aplicacin en sistemas de sincronizacin de celos (Ver referencias 5).

Se realiz un buen nmero de experimentos. En este caso plantearemos algunos


que ejemplifican los resultados obtenidos. Recordaremos tambin que el tratamiento E-
17, en combinacin con progesterona/progestgeno resulta en el comienzo sincrnico
de una nueva onda folicular, en promedio 4.3 das despus, sin tener en cuenta el
momento del ciclo estral en cual se administr. El objetivo general fue evaluar si el
tratamiento con E-17 en vaquillonas implantadas con CIDR-B reduce la variacin en
el intervalo entre el tratamiento y la ovulacin, comparado con los sistemas ms
tradicionales de sincronizacin de celos.

En el primer experimento (preliminar), se utilizaron 34 vaquillonas Hereford


que fueron separadas al azar en tres grupos. Las vaquillonas del grupo control fueron
tratadas con dos inyecciones de PGF cada 11 das (PGF). Las vaquillonas en los otros
dos grupos recibieron un CIDR-B durante 7 das. Uno de los grupos CIDR-B recibi
100 mg de progesterona (P4) combinado con 5 mg de E-17 en el momento de la
colocacin del CIDR-B y el otro grupo recibi la inyeccin de P4 solamente. Estos dos

Unidad 4 146
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

grupos recibieron adems una dosis de PGF en el momento de quitar los CIDR-B.
Todos los animales fueron examinados diariamente por ultrasonografa transrectal. Los
resultados de este experimento se encuentran en la Tabla 9 y Figura 10.

Tabla 9. Caractersticas del folculo ovulatorio en vaquillonas Hereford tratadas con dos inyecciones de
PGF cada 11 das (PGF), o con CIDR-B por 7 das combinados con 100 mg de P4 (CIDR-B +
P4); o P4 y 5 mg E-17 (CIDR + P4 + E-17).

PG F C ID R + P 4 C ID R + P 4
+E17

O n d a o v u lato ria (d a ) 2 .3 1 .5 3 .8
ran g o 0 - 4 ab (-)3 - 5 a 2 -5 b

D im etro a la P G F (m m ) 1 1 .8 1 0 .6 1 0 .1
ran g o 9 -1 6 b 7 -1 5 a 9 -1 2 b

F o lc u lo D o m in a n te en fa se
d e crecim ien to 4 /5 a 8 /4 ab * 1 1 /0 b*

ab M ed ias o p ro p o rc io n es co n d istin ta letra so n d iferen tes (P < 0 .0 5 )


* P ro p o rcio n es tien d en a se r d ife re n tes (P < 0 .0 9 )

100
90 PGF (media 94.7 h)
a
% vaquillonas ovulandox

80
CIDR + P4 (media 90.0 h)
70
60 CIDR + P4 + E-17B *(media 87.3h)
50 b
40 * Menos variable (P<0.1)
30 ab P<0.05
20
10
0
48 60 72 84 96 108 120
Intervalo PGF - Celo (h)

Figura 10. Distribucin de la ovulacin en vaquillonas Hereford tratadas con dos inyecciones de PGF
cada 11 das (PGF), o con CIDR-B por 7 das combinados con 100 mg de P4 (CIDR-B + P4);
o P4 y 5 mg E-17 (CIDR + P4 + E-17).

Como se puede ver en la Tabla 9 el tratamiento de CIDR-B E-17 result en un


comienzo sincrnico de una nueva onda folicular y por consiguiente todas las

147 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

vaquillonas tuvieron un folculo dominante nuevo en la fase de crecimiento en el


momento de la remocin del CIDR-B. Como se ve en los resultados mostrados en la
Figura 10, el 75% de las vaquillonas tratadas con CIDR-B +E-17 ovularon entre las 72
y 84 h pos tratamiento, mientras que solamente un 40% de las tratadas con PGF y 33%
de las tratadas con CIDR-B pero sin E-17 ovularon en el mismo perodo (P<0.05).
Resultados similares, se obtuvieron en otros dos experimentos donde se
sincronizaron vacas Brahman y confirm nuestra hiptesis de que es posible
conseguir una alta sincrona de celos con tratamientos que sincronicen el desarrollo
folicular. No obstante, se observ en estudios posteriores que para tener una
sincrona mayor de celos para la IA a tiempo fijo es necesario sincronizar la
ovulacin utilizando estradiol o GnRH.

4.3. Utilizacin de EB para sincronizar la ovulacin y la IA a tiempo fijo

La idea de inducir el pico preovulatorio de LH a travs del feed-back positivo


del estradiol sobre la GnRH y LH fue estudiada en Nueva Zelanda, donde se
recomienda colocar 0.75 mg o 1 mg de EB a las 24 h de removido el CIDR-B (30).
En un estudio se observ que el pico de LH ocurre en promedio 16,1 h pos-EB y la
ovulacin a las 40 h pos-EB (64 h despus de la remocin del CIDR-B). Esto
significa que se deberan IA a los animales a las 52 h pos-CIDR-B (8 a 12 h antes de
la ovulacin) para obtener mxima fertilidad. A continuacin mostraremos trabajos
que ejemplifican los resultados que se pueden obtener usando estos esquemas de IA a
tiempo fijo.

4.3.1. Vacas con cra

En un trabajo hecho en Canad (23) se evalu la preez en vacas tratadas con


CIDR-B+EB por 7 das, PGF en el Da 6 y 1 mg de EB al medioda del Da 8 (24 h de
removido el CIDR-B) e IA a tiempo fijo a partir de las 4 PM del Da 9 (52 h pos CIDR-
B). El otro tratamiento consisti en una inyeccin de GnRH en el Da 0 y una inyeccin
PGF en el Da 6, IA 12 h despus de la observacin de celos. Se utilizaron vacas de
carne con cra en muy buena condicin corporal y se realizaron dos rplicas, uno en la
primavera y otra en el otoo. Los resultados se encuentran indicados en la Tabla 10.

Tabla 10. Porcentajes de preez en vacas de carne tratadas con CIDR-B + PGF + EB e IA a tiempo fijo o
con GnRH + PGF e IA a las 12 h de detectado el celo.

Primavera Otoo
GnRH + PGF CIDR+PGF +EB GnRH + PGF CIDR+PGF +EB
N 26 26 26 28
% vacas ciclando 65 65 79 72
% celo 48-96 h 81 --- 65 ---
% Preez IA 69 69 50 61
Los porcentajes no difieren significativamente.

En conclusin se obtuvo un porcentaje de preez similar en los dos grupos. No


obstante, si consideramos la preez final sobre el total de vacas, el tratamiento con

Unidad 4 148
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

CIDR-B result en 35/54 (64 %) vacas preadas mientras que el otro grupo result en
23/52 (44 %) preadas. La otra ventaja del grupo CIDR-B es que la IA fue a tiempo
fijo. En una recopilacin de datos de trabajos realizados en Victoria, Australia (1), en
1997 se trataron 2342 vacas con cra con CIDR-B por 10 das y se IA a celo detectado.
Se IA un 73% de vacas que fueron observadas en celo y se obtuvo una preez final del
42%. Al ao siguiente (1998) se trataron 3145 vacas en el mismo establecimiento con
CIDR-B por 9 das pero con la adicin de 1 mg de EB a las 24 h e IA a tiempo fijo a las
48 h post-CIDR-B con una preez final del 60,7%. En otros trabajos realizados
recientemente en Florida (1), utilizando Vacas Brangus con cra al pie, los porcentajes
de preez fueron equivalentes entre las IA a celo detectado (55,9%) y las IA a tiempo
fijo (53,8%). En este caso todas las vacas fueron tratadas con CIDR-B por 8 das con 2
mg de EB inyectados en el momento de la insercin del CIDR-B y 1 mg de EB a las 24
h post-CIDR-B. Estos trabajos demuestran que en vacas con cra los tratamientos con
CIDR-B + EB a las 24 h e IA a tiempo fijo resultan en aceptables porcentajes de preez
que no justifican la necesidad de detectar celos. Los protocolos entonces seran los que
estn indicados en la Figura 11.

Da 0 Da 7 Da 8
CIDR-B Celo e IA
(2mg EB) 1 mg EB

Figura 11. Tratamientos de IA para vacas con cra con CIDR-B y EB.

4.3.2. Vaquillonas y vacas secas

Los esquemas de IA a tiempo fijo utilizando dispositivos intravaginales con


progesterona tambin fueron estudiados en vaquillonas y vacas secas. En un trabajo
se utilizaron 84 vacas y 56 vaquillonas que fueron tratadas con CIDR-B por 7 das y
PGF en el momento de la remocin del CIDR-B. La mitad de los animales recibieron
5 mg E-17 + 100 mg progesterona im y la otra mitad recibieron 1 mg EB + 100 mg
progesterona im. A las 24 h de la remocin del CIDR-B la mitad los grupos fueron
subdivididos nuevamente para recibir 1 mg E-17 o 1 mg EB im. La IA se realiz a
las 30 h pos- E-17 o EB.

Tabla 11. Porcentaje de animales en celo e ndices de preez en vacas y vaquillonas tratadas con
CIDR-B en combinacin con EB o E-17.

E17/E17 E17/EB EB/E17 EB/EB


n 29 31 38 34
Animales en celo 23 (79%) 29 (94%) 30 (79%) 28 (82%)
Animales Preados 16 (55%) 16 (52%) 17 (45%) 20 (59%)

149 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Como se puede ver, cualquiera de los 2 estrgenos sealados pueden ser


utilizados para estos esquemas de IA a tiempo fijo en vaquillonas. Debido a que el
EB es ms fcil de conseguir comercialmente, de aqu en adelante realizamos todos
los trabajos de IA utilizando EB en lugar de E-17.

Se realizaron dos experimentos en Argentina. En el primer experimento se


utilizaron 308 vaquillonas Bos indicus en dos replicas, con una condicin corporal
promedio de 5 (1 emaciada, 9 obesa), distribuidas al azar en cuatro diferentes
tratamientos (10). Las vaquillonas de los Grupos 1 y 2 recibieron CIDR-B en el Da
0, 2 mg de EB en el Da 1. Los CIDR-B fueron removidos en Da 8 (Grupo 1) o Da
9 (Grupo 2). Las vaquillonas de los Grupos 3 y 4 un CIDR-B con 50 mg de
progesterona y 2 mg de EB y se retiraron en el Da 7 (Grupo 3) y Da 8 (Grupo 4).
Todas las vaquillonas recibieron PGF cuando se sacaron los CIDR-B y 1 mg de EB a
las 24 h. Las IA de los cuatro tratamientos se realiz entre las 52-54 h de retirado el
CIDR-B. La preez fue determinada por ultrasonografa a los 45 das pos-IA. Los
resultados se presentan en la tabla 12.

Tabla 12. Porcentajes de preez en vaquillonas cruza ceb tratadas con CIDR en el Da 0 + EB en el
Da 1 o CIDR+EB+P4 en el Da 0.

GRUPOS n Preadas % Preez


Grupo 1-CIDR 8 das + EB Da 1 81 38 46,9
Grupo 2-CIDR 9 das + EB Da 1 81 33 40,7
Grupo 3-CIDR 7 das + EB+P4 Da 0 71 28 39,4
Grupo 4-CIDR 8 das +EB+P4 Da 0 74 40 54,0

Los resultados indican que si bien el protocolo de tratamiento del Grupo 4


tuvo un porcentaje de preez un poco mayor (no significativa) a los dems, e
indicara que la utilizacin de un protocolo de ocho das podra ser ms aconsejable
que el de siete das para vaquillonas Bos indicus. Sin embargo, las diferencias no
fueron significativas y estos datos deben ser confirmados para hacer alguna
recomendacin, sobre todo teniendo en cuenta los resultados que se indican a
continuacin para vaquillonas Bos taurus.

El objetivo del segundo experimento fue evaluar el porcentaje de preez de


cuatro protocolos con o sin EB a las 24 h de la remocin del CIDR-B. Se utilizaron
242 vaquillonas A. Angus de 15-17 meses de edad con un peso de 28223 Kg. con
una condicin corporal de 6-7 (1 emaciada a 9 obesa). Todas las vaquillonas
recibieron un CIDR-B, 50 mg de progesterona y 2 mg de EB en el Da 0 y PGF en el
da del retiro del CIDR-B. Los CIDR-B fueron removidos en el Da 7 en las
vaquillonas del Grupo 1 y 3 y en el Da 8 en las del Grupo 2 y 4. Los grupos variaron
en la inyeccin de PGF y el tratamiento con EB post-CIDR-B. Los animales de los
Grupos 1 y 2 recibieron PGF a la remocin del CIDR-B y 1 mg EB 24 h despus,
mientras que los de los Grupos 3 y 4 recibieron PGF en el Da 4 y no recibieron EB.
La IA en todos los tratamientos se llevo a cabo a partir de las 50-52 h de retirado los
dispositivos. El diagnstico de gestacin se realiz por ultrasonografa a los 30 das
pos-IA. Los resultados se observan en la Tabla 13.

Unidad 4 150
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Tabla 13. Porcentaje de Preez en vaquillonas de carne tratadas con CIDR-B con o sin EB.

GRUPOS N Preadas % Preez


CIDR 7 das + EB 58 40 68,9a
CIDR 8 das + EB 62 39 62,9a
CIDR 7 das 62 32 51,6b
CIDR 8 das 60 32 53,3b
ab
Porcentajes con superndices diferentes difieren (P<0.05)

Estos resultados confirman por un lado la utilidad de administrar EB a las 24h


del CIDR-B y por otro lado, estos experimentos demuestran que los esquemas de
CIDR-B con 7 u 8 das resultan en porcentajes similares de preez y esta posibilidad
tiene una gran aplicacin prctica, ya que se puede tratar un grupo grande de
vaquillonas un mismo da y despus variar el retiro del CIDR-B para IA a tiempo fijo
en dos das distintos. Este esquema parecido fue recientemente repetido en uno de los
proyectos del Curso de Post-grado de 1999 (Mujica y Ben) con resultados similares
que se indican en la Tabla 14. La utilizacin de protocolos de 7 vs. 8 das se ha
generado cierta discusin recientemente. En nuestros trabajos no hemos visto
diferencias, pero principalmente porque se han respetado los horarios, sobre todo el
intervalo entre la insercin del CIDR-B y la remocin del mismo. Para tener una
buena fertilidad hay que tener un folculo dominante de 3 das (8 mm de dimetro) al
momento de la remocin del CIDR-B. Si por diversas causas, como la cantidad de
animales que debemos tratar, los tratamientos se terminan a la tarde del Da 0, y
sacamos el dispositivo a la maana temprano del da 7, en realidad estamos sacando
los dispositivos a los 6.5 das, lo cual puede afectar la fertilidad. Por eso cuando
tratamos un grupo grande de animales, el hecho de hacerlo en 8 das nos puede
ayudar a que todas las vacas estn en el da 7,5 como mnimo y por lo tanto tendrn
un folculo dominante desarrollado y con capacidad de ovular, lo que resultar en un
mayor porcentaje de preez.

Tabla 14. Porcentaje de Preez en vaquillonas de carne tratadas con CIDR-B por 7 u 8 das.

CIDR 7 das CIDR 8 das Total


% Preez 1 IA 68/115: 59.1 % 59/115: 51.3 % 127/230: 55.2 %
% Preez 2 IA 19/32: 59.3 % 17/28: 60.7 % 36/60: 60.0 %
% Preez Final IA 87/115: 75.6 % 76/115: 66.0 % 163/230: 70.8 %
% Preez Toro 25/28: 89.2% 35/39: 89.7% 60/67: 89,5 %
% Preez Final 223/230: 96.9 %

151 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Realizamos recientemente dos experimentos para evaluar la utilizacin de los


dispositivos intravaginales en tratamientos por 7, 8 y 9 das. En el Experimento 1 se
utilizaron DIB (DIB ,Syntex, Argentina; 1g de progesterona) por 7 u 8 das. Se
utilizaron 292 vaquillonas cruza Bos taurus x Bos indicus de entre 18 y 24 meses de
edad y con una condicin corporal promedio de 2,5 (escala 1 a 5). En el Da 0
(comienzo del tratamiento, todas las vaquillonas recibieron un dispositivo
intravaginal DIB y 2 mg de benzoato de estradiol im (EB; Syntex, Argentina) y
fueron divididas al azar en dos grupos, en las que se extrajo el DIB en el Da 7
(n=146) o el Da 8 (n=146). Todos los animales recibieron una dosis luteoltica de
150 g de D(+) cloprostenol (Celar, Zoovet, Argentina) en el momento de retirado el
DIB y 1 mg de EB 24 h ms tarde. En ambos grupos las vaquillonas fueron IATF
entre las 52 y 56 h de retirado el DIB por dos inseminadores, los cuales rotaron cada
30 vaquillonas. Se realiz diagnstico de preez por medio de ultrasonografa
transrectal a los 45 das de la IATF. Las proporciones fueron comparadas por
regresin logstica (Infostat, 2002) teniendo en cuenta el efecto inseminador y semen
utilizado. No se encontraron diferencias significativas entre los porcentajes de preez
de ambos inseminadores (50,7% vs. 49,7%; P=0,84) ni entre los tres toros utilizados,
(55,2%; 49,9% y 51,9%; P=0,3).

En el Experimento 2 se utilizaron dispositivos TRIU-B (1 g de P4,


Biognesis, Argentina) por 7, 8 9 das en un total de 788 vacas secas y
vaquillonas. Todos los animales fueron tratados con un TRIU-B nuevo, reutilizado u
utilizado por 3 vez (con la adicin de 3 camisas con 100 mg de P4 cada una) junto
con 2 mg de EB en el da 0. Los dispositivos se retiraron 7, 8 9 momento en el cual
se aplic PGF. En todos los casos se inyect 1 mg de EB 24 h luego del retiro del
dispositivo y las animales fueron IATF entre las 52 y 56 h de retirado el TRIU-B. No
se encontraron diferencias (P=0,09) entre los porcentajes de preez obtenidos con
TRIU-B nuevos, de 2 o 3 uso por los que los datos fueron agrupados para su
anlisis. Los porcentajes de preez de ambos Experimentos son presentados en la
Tabla 15.

Tabla 15. Porcentajes de preez en vaquillonas cruza Bos taurus x Bos indicus tratadas con
dispositivos intravaginales con P4 por 7, 8 9 das e inseminadas a tiempo fijo.

7 DIAS 8 DIAS 9 DIAS

Experimento 1 71/146 77/146


(DIB) (46,6%) (52,7%) ---

Experimento 2 148/276 135/282 120/230


(TRIU-B) (53,6%) (49,9%) (52,2%)

TOTAL 219/422 212/428 120/230


(51,8%) (48,5%) (52,2%)
Las proporciones no difieren (P=0,95)

Se concluy que es factible tratar vaquillonas y vacas secas con dispositivos


con P4 por 7, 8 9 das, sin que esto afecte los porcentajes de preez. Esto es de

Unidad 4 152
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

gran utilidad en casos en los que es necesario tratar un nmero grande de animales
porque se puede dividir el trabajo de inseminacin en tres das.

Los tratamientos recomendados estn indicados en la Figura 12.

Da 0 Da 7 Da 8 Da 9 (52-56 h )
P4 IATF

(2mg EB) PGF 1 mg EB

Da 0 Da 8 Da 9 Da 10 (52-56 h)
P4 IATF

(2mg EB) PGF 1 mg EB

Da 0 Da 9 Da 10 Da 11 (52-56 h)

P4 IATF

(2mg EB) PGF 1 mg EB

Figura 12. Tratamiento de sincronizacin de celos e IA a tiempo fijo en vaquillonas y vacas de carne por
7, 8 9 das.

4.4 Momento de aplicacin de EB en relacin a la remocin del dispositivo.

En los ltimos tiempos se ha generado una discusin entre los tcnicos sobre la
necesidad de la administracin de EB a las 24 h de removido el dispositivo o en su
defecto ahorrar un encierre y administrar el EB en el momento de la remocin del
dispositivo. Por lo tanto realizamos recientemente una serie de experimentos con el
objetivo de determinar el momento de la ovulacin (13) en relacin al momento de
momento de aplicacin de la segunda inyeccin de EB en la sincrona de ovulacin en
vacas tratadas con dispositivos DIB (Syntex, Argentina). En el Experimento 1 se
utilizaron 35 vacas (4 a 6 aos de edad) de razas de carne, ciclando. Al inicio de la
rplica las vacas fueron tratadas con un DIB y 2 mg de EB (Da 0). En el Da 7 se
sacaron los dispositivos y se inyecto PGF (Estroplan, Australia) y se dividieron los
animales al azar (bloqueado por estadio de desarrollo folicular y CL) en 3 Grupos. Un
Grupo control (sin EB) y 2 grupos de tratamiento que recibieron 1 mg de EB en el
momento de remocin del DIV-B (EB 0H) o a las 24 h de removido el DIV-B (EB 24
H). Los animales fueron examinados por ultrasonografa diaria desde la insercin del
dispositivo hasta su remocin y de all en adelante cada seis horas hasta el momento de
la ovulacin. En el Experimento 2 se utilizaron 39 vacas Angus cclicas con una
condicin corporal (CC) de 3 (Escala 1-5) en promedio. Se aplic una dosis de PGF
(Ciclase, Syntex) en el Da 10 del tratamiento a 30 vacas y se detect celo dos veces al
da por 72 h. Se utilizaron 20 vacas que mostraron celo en ese perodo de tiempo, con el

153 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

objetivo de que todas las vacas se encuentren en fase luteal al momento de la aplicacin
del DIB (1 g de P4, Syntex). En el Da 0 del tratamiento las vacas fueron tratadas con
un DIB junto con 2 mg de EB. En el Da 8 las vacas fueron subdivididas para recibir 1
mg de EB (Grupo EB 0h) en el momento de retirado el dispositivo o 24 h mas tarde
(Grupo EB 24h). La ultrasonografa se realiz de la misma forma que en el
Experimento 1. En estos trabajos se evalu sobre todo el momento y variabilidad de la
ovulacin para posteriormente evaluar el momento ideal de IA con estos esquemas. Los
resultados se presentan en la Tabla 16.

Tabla 16. Intervalo entre la remocin del dispositivo DIB y la ovulacin en vacas de carne tratadas
con EB en el momento de la remocin del dispositivo o 24 h despus. (Grupo control no
EB).

EB EB
Control 0h 24 h Valor P
N 12 21 21
Vacas que ovularon 10 19 20
Experimento 1
(Trat. 7 das)
Media (h) 89,0 68,0 70.0 P>0,05
a a b
Varianza (h) 394,8 700,8 52,8 P<0,05
Rango (h) 66 120 48-102 66 84 --

Experimento 2
(Trat. 8 das)
Media (h) -- 69,0 75,3 P=0,6
Varianza (h) -- 236,6
a
46b P=0,04
Rango (h) -- 54-96 66-84 P=0,001

Como se puede ver en la Tabla 16, la variabilidad fue menor en las vacas que
recibieron EB a las 24 h post DIB tanto en vacas tratadas con DIB por 7 como por 8
das. Los datos confirman que la utilizacin de EB a las 24 h post dispositivo de
progesterona sincroniza la ovulacin. Tambin los resultados preliminares indican
que el EB administrado junto con la insercin del DIV-B induce una onda folicular,
en promedio a los 3,7 das. Sin embargo hubo una menor homogeneidad que cuando
se uso EB+P4 al inicio del tratamiento (42). No obstante trabajos recientes realizados
con CIDR-B indicaran que si tenemos una onda entre los das 2 y 5 del tratamiento
como se obtiene con EB, los resultados de preez son aceptables.

Recientemente realizamos un experimento (Cutaia et al., SBTE, en prensa)


para determinar el efecto de la aplicacin de EB en el momento de retirado el
dispositivo o 24h mas tarde sobre los porcentajes de preez. Se realizaron 2 rplicas,
en la Rplica 1 se utilizaron 96 vaquillonas cruza ceb de entre 18 y 24 meses de
edad, con una condicin corporal (CC) media de 3 (Escala 1-5) y en la Replica 2 se
utilizaron 221 vacas con cra (60 a 90 das pos parto), con una CC de 2,5. En todos
los casos los animales fueron tratados con un DIB (1 g de P4, Syntex, Argentina) y
2mg de EB en el Da 0 del tratamiento. En el Da 8 se retiraron los DIB y se aplic

Unidad 4 154
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

una dosis de 150 g de D(+) cloprostenol (Ciclase, Syntex), en este momento los
animales fueron divididos para recibir 1 mg de EB cuando se retir el DIB (Grupo
0h) o 24h mas tarde (Grupo 24h). Los animales del Grupo 0h fueron IATF entre las
47 y 50h de retirado el DIB y los animales del Grupo 24h fueron IATF entre las 52 y
56h de retirado el DIB. El momento de la ITAF se fij en funcin de la media del
momento de ovulacin observado en cada grupo de tratamiento en el experimento
anteriormente citado. Los diagnsticos de preez se realizaron por medio de
ultrasonografa entre los 60 y 90 das pos IATF. Los datos fueron analizados por
regresin logstica para determinar el efecto rplica y tratamiento sobre los
porcentajes de preez. No se encontr un efecto rplica significativo (P=0,54), por lo
que los datos fueron agrupados. Se obtuvo un menor porcentaje de preez (P=0,04)
en los animales del Grupo 0h (64/158; 40,5%) con respecto a los animales del Grupo
24h (79/149; 53,0%). Concluimos que la aplicacin de 1 mg de EB en el momento de
retirado el DIB resulta en porcentajes de preez menores a los obtenidos con la
aplicacin de 1 mg de EB a las 24h. Se deberan utilizar otras hormonas o sales de
estrgeno para reducir el nmero de pasajes por la manga para la aplicacin de los
tratamientos en programas de IATF como veremos en los puntos 4.5 y 4.6

4.4.1. Evaluacin del Momento de la IATF con Relacin al Retiro del


Dispositivo con P4

Segn datos vistos anteriormente las vacas tratadas con el tratamiento


convencional con dispositivo con P4 por 7 das y EB ovulan en promedio a las 66 h
de retirado el implante. Teniendo en cuenta que los espermatozoides tardan entre 8 a
12 h en llegar al sitio de fertilizacin se aconseja IATF entre las 52 y 56 h. Sin
embargo, hay divergencias en la literatura en cuanto al momento que se recomienda
realizar la IATF, que vara entre las 48 h de la remocin del dispositivo hasta las 60
h. Se disearon 2 experimentos para determinar el efecto del momento de la IATF
sobre los ndices de preez en vacas tratadas con dispositivos DIB (DIB, 1 g de
progesterona; Syntex, Argentina) y EB (Benzoato de Estradiol, Syntex, Argentina).
En el Experimento 1 se utilizaron vacas Hereford (n=151) y cruza ceb (n=82) con cra al
pie, 60 a 90 das posparto y con una condicin corporal entre 2,5 y 3,5 (escala 1-5).
En el Da 0, todas las vacas recibieron un dispositivo DIB y 2 mg de EB im. En el
Da 7 los dispositivos fueron retirados y todas las vacas recibieron 500 g de
cloprostenol (Estroplan, Syntex). En el Da 8 las vacas recibieron 1 mg de EB im y
fueron divididas al azar en dos grupos para ser IATF a las 48 o a las 54 h de retirado
el DIB (18 12 h antes de la ovulacin, respectivamente). En el Experimento 2 se
utilizaron 188 vacas con cra cruza ceb con una condicin corporal de 3 en
promedio. Todos los animales recibieron el mismo tratamiento que los del
Experimento 1 excepto que el DIB se retir en el Da 8, momento en el cual se aplic
PGF y en el Da 9 se inyect 1 mg de EB im. Las vacas fueron divididas en dos
grupos e IATF a las 48 o 54 h como en el Experimento 1. En ambos experimentos se
realiz ultrasonografa a los 45 das de la IATF para diagnstico de preez. Las
proporciones fueron comparadas por Chi-cuadrado. Los resultados son presentados
en la Tabla 17.

155 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Tabla 17. Porcentajes de preez de vacas con cra tratadas con un dispositivo DIB y EB para
sincronizar las ondas foliculares y la ovulacin e IATF a las 48 54 h de retirado el
DIB.

48 h 54 h Valor P

Experimento 1 54/114 63/119 P=0,39


(47,3%) (52,9%)

Experimento 2 42/97 45/91 P=0,39


(43, 3%) (49,5%)

TOTAL 96/211 108/210 P=0,22


(45,5%) (51,4%)

Si bien no se encontraron diferencias significativas en los porcentajes de


preez de vacas IATF a las 48 54 h de retirado el DIB en los dos experimentos, las
diferencias numricas siempre favorecieron al grupo IATF a las 54 h.

La tendencia a una mayor preez en las vacas IATF a las 54 h concuerda con
un experimento realizado recientemente en Canad, en el que se utilizaron vacas con
cra tratadas con CIDR-B+EB o EB+P4 y una segunda inyeccin de EB a las 24 h
pos CIDR-B. Las vacas IATF entre las 53,5 y las 57,5 h de la remocin del CIDR-B
tuvieron una tendencia numrica a una mayor preez que las vacas IATF entre las 47
y 50 h pos CIDR-B (57% vs 45%, respectivamente; 52). Estos resultados indicaran
que la IATF tarda al menos no resulta en una baja preez. Habra que realizar ms
trabajos para confirmar si esta diferencia favorable a la IATF despus de las 53 h de
la remocin del dispositivo se mantiene. Sobre la base de estos datos se podra
inseminar hasta casi las 58 h de la remocin del dispositivo sin afectar los ndices de
preez.

4.5. Tratamientos utilizando dispositivos con P4 en combinacin con Cipionato


de Estradiol (ECP).

Como alternativa para reducir el nmero de veces que los animales pasan por
la manga es posible utilizar ECP, como induractor de la ovulacin. Como ya
descrivimos el ECP es una sal de estradiol con mayor vida media que el EB.

Para evaluar el efecto de la utilizacin de ECP sobre los porcentajes de


preez a la IATF se realizaron 3 experimentos. Se dise el primer experimento (11)
para comparar ECP, adems de una fuente comercial de progesterona con GnRH en
un programa de IA a tiempo fijo con CIDR. El Da 0, se administr a las vaquillonas
(n = 979) un CIDR y 100 g de GnRH (n = 491) o 1 mg de ECP adems de 50 mg de
progesterona (Progesterona 5%, Vtoquinol N-A Inc., Lavaltrie, QC, Canad; n =
488). Se quitaron los CIDR y se administr PGF los Das 7 y 8,5 en los grupos con
GnRH y con ECP respectivamente. Luego se subdividi a las vaquillonas para
administrarles 0,5 mg de ECP al momento de quitar el CIDR, o 24 h ms tarde (con
IA 58 a 60 h despus de quitar el CIDR), o una segunda inyeccin de GnRH al

Unidad 4 156
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

momento de la IA (52 a 54 h despus de quitar el CIDR). No hubo diferencia en las


tasas de preez entre grupos tratados con GnRH (276/491, 56%) o con ECP
(277/488, 57%) el Da 0. Sin embargo, la tasa de preez fue mayor (P<0,01) en
vaquillonas que recibieron ECP 24 h despus de quitar el CIDR (216/331, 65%) que
al momento de quitar el CIDR (168/320, 52%) o GnRH al momento de la IA
(169/328, 51%).

En el segundo experimento (10) se utilizaron 300 vaquillonas Angus de 13 a 15


meses de edad y con un peso de entre 350-500 Kg. Todas las vaquillonas recibieron
un CIDR-B junto con 5 mg de E17 y 100 mg de P4 im. Los CIDR-B fueron
retirados en el Da 7 y aplic PGF. El da de retirado el CIDR-B las vaquillonas
fueron divididas para recibir 0,5 mg de ECP (ECP 0h ECP 24h) o 1 mg de EB a
las 24 h de retirado el CIDR-B (EB 24 h). Las tasas de preez no difirieron entre los
grupos (P=0,7) resultando 62/98, 63,3%; 64/99, 64,6% y 65/103, 63,1% para los
grupos ECP0h, ECP24h y EB 24h respectivamente.

En el tercer experimento se utilizaron (Cutaia et al., sin publicar) 191


vaquillonas cruza Bonsmara (1/2 ceb x Bonsmara), de 18 a 24 meses de edad y con
una condicin corporal de 3 (Escala 1-5). En el Dia 0, todas las vaquillonas
recibieron un DIB junto con 2 mg de EB (Syntex). En el Da 8 se retiraron los DIB y
se inyectaron 0.15 mg de D (+) cloprostenol (Ciclase, Syntex). Las vaquillonas
fueron asignadas al azar a uno de cuatro tratamientos para recibir 1 mg EB 0,5 mg
ECP en el momento de retirado el DIB (0h) 24h mas tarde. Las vaquillonas que
recibieron EB a las 0h fueron IATF entre las 47 y 49h de retirado el DIB, mientras
que aquellas tratadas con EB 24h con ECP (0 24h) fueron IATF entre las 52 y
54h luego de retirado el DIB. No hubo efecto significativo del momento de aplicado
el estradiol (P=0,4), pero el tipo de estradiol utilizado tendi a afectar los resultados
(P=0,09). El porcentaje de preez tendi a ser mayor (P=0,08) en aquellas tratadas
con ECP a las 24h (30/49; 61,2%) que en aquellas tratadas con EB a las 0h (21/48;
43,8%). Sin embargo, los porcentajes de preez de las vaquillonas tratadas con ECP
a las 0h (25/46; 54,3%) EB a las 24h (23/48; 47,9%) no difiri con respecto a las
tratadas con ECP a las 24h EB a las 0h (P>0,18). El uso de ECP podra ser una
alternativa interesante en programas de IATF en vaquillonas tratadas con
dispositivos con P4. Por otra parte, el uso ECP en el momento de retirado el
dispositivo podra reducir el nmero de veces que los animales pasan por la manga
sin que esto afecte los resultados de preez. Sin embargo como se dijo el punto 2 de
esta unidad es importante que en este tipo de tratamientos se utilice un estrgeno de
vida media corta como el E17 o el EB para sincronizar efectivamente la emergencia
de una nueva onda folicular

4.6. Tratamientos utilizando CIDR-B en combinacin con GnRH.

4.6.1. Vacas con cra

Otra alternativa es la utilizacin de GnRH despus de removido el CIDR-B. En


un trabajo realizado recientemente (48) se utilizaron vacas de carne raza A. Angus que
estaban entre 25 a 40 das post-parto y se separaron al azar en cuatro grupos: un grupo
Control, un grupo que tuvo destete temporario por 48 h (CR), y dos grupos que
recibieron CIDR-B por 8 das administrado solo (CIDR-B) o en combinacin con la
administracin de 5 mg de E-17 en el Da 1. Estos dos ltimos grupos tambin

157 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

tuvieron destete temporario por 48 h y los grupos CR, CIDR-B y CIDR-B+E-17


recibieron una inyeccin de 8 g de Buserelina (GnRH, Hoechst) a las 42 h de la
remocin del CIDR-B y/o iniciacin del destete temporario. Los terneros se encerraron
en corrales ubicados fuera de la vista y odo de las madres. Todos los animales fueron
examinados por ultrasonografa desde el comienzo del experimento hasta la ovulacin.
Los resultados se encuentran indicados en la Figura 13. El comienzo de la onda
folicular pos tratamiento fue ms sincrnico en las vacas tratadas con CIDR-B + E-17
confirmando los resultados obtenidos anteriormente. La proporcin de vacas ovulando
dentro de las 24 a 48 h pos GnRH tendi a ser mayor (P<0.08) en las vacas del grupo
CIDR-B + E-17 y esto estuvo tambin asociado con un mayor porcentaje de folculos
dominantes que se encontraban en la fase de crecimiento en el momento de la remocin
del CIDR-B.

100 a
80 b
% vacas ovulando

CR
60
CIDR
40 CIDR + E-17B

20

0
0-24 24-48 48-72
Intervalo GnRH - Ovulacin
ab - Porcentajes tienden a ser diferentes (P<0.08)

Figura 13. Distribucin de la ovulacin en vacas pos parto tratadas con GnRH a las 42 h de comenzado
el destete temporario y/o la remocin del CIDR.

En este experimento se evaluaron tambin las fases luteales pos tratamientos.


Las vacas que ovularon en los grupos Control y CR tuvieron una fase luteal corta (< 10
das) mientras que todos los animales tratados con CIDR-B solo y con CIDR-B+E-17
tuvieron una fase luteal normal, evidenciado por niveles de P4 >1 ng/ml por ms de 10
das. La fertilidad despus de la IA con este tratamiento fue evaluada en otro
experimento posterior y el porcentaje de preez del grupo tratado con CIDR-B
solo+GnRH fue inferior (14/33, 42,4%) que el de las vacas tratadas con CIDR-B+E-
17+GnRH (33/43, 76,7%). Por lo tanto, el tratamiento con CIDR-B+E-17 +GnRH
es otra alternativa para sincronizar la ovulacin.

La opcin de usar GnRH en lugar de EB sera interesante especialmente si la


utilizamos en el momento de la IA y con esto nos ahorramos un encierre. En un trabajo
realizado con vacas Brangus en Florida (1) se utilizaron 6 tratamientos distintos que
incluyeron IA con celo detectado e IA a tiempo fijo en vacas tratadas con BE o GnRH.
Los tratamientos y resultados de preez se encuentran indicados en la Tabla 18.

Unidad 4 158
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Tabla 18. Porcentaje de Preez en vacas Brangus con cra al pie tratadas con CIDR e IA a celo detectado
(DC e IA) o a tiempo fijo (IATF).

Grupo DIA 0 DIA 7 DIA 8 DIA 9 DIA 10 Preez


Retiro
1 n=70 CIDR 1mg EB DC e IA DC e IA 38,6 %
CIDR+PGF
Retiro
2 n=68 CIDR+EB 1mg EB DC e IA DC e IA 55,9 %
CIDR+PGF
Retiro IATF 60h pos
3 n=65 CIDR 1mg EB 30,8 %
CIDR+PGF CIDR
Retiro IATF 60h pos
4 n =71 CIDR+EB 1mg EB 53,5 %
CIDR+PGF CIDR
Retiro GnRH + IATF 60
5 n=70 CIDR 38,6 %
CIDR+PGF h pos CIDR
Retiro GnRH + IATF 60
6 n=71 CIDR+EB 50,7 %
CIDR+PGF h pos CIDR

Los resultados mostrados en la tabla confirman por un lado que la


sincronizacin del desarrollo folicular con EB y P4 resulta en un mayor porcentaje de
preez que las no tratadas con EB y P4. Por el otro lado los datos sugieren que el
tratamiento con GnRH en el momento de la IA a tiempo fijo resulta en una fertilidad
equivalente a la lograda con la inyeccin de EB a las 24 pos CIDR-B e IA a tiempo fijo.
No obstante era necesario seguir trabajando para confirmar estos datos y nosotros
realizamos recientemente un trabajo donde se utilizaron 433 vacas de carne con cra,
que tenan entre 35 y 120 das pos parto (22). Todas las vacas recibieron un CIDR-B
y 2 mg de EB en el Da 0. Adems, la mitad de las vacas recibieron 50 mg de P4 al
mismo tiempo. En el Da 8 se removieron los CIDR-B y se inyect una dosis de
PGF. Las vacas, fueron subdivididas nuevamente para recibir 1 mg de EB a las 24 h
de quitado el CIDR-B o una inyeccin de 50 g de GnRH (1/2 dosis) (Cystorelin,
Merial) en el momento de la IA. Todas las vacas fueron IA entre las 50 y 55 horas
pos CIDR-B. No hubo diferencias en los ndices de preez entre los tratamientos y
los resultados se encuentran resumidos en la Tabla 19.

Tabla 19. ndices de preez en vacas de carne con cra que fueron tratadas con CIDR-B y su ovulacin
inducida con EB o GnRH.

Grupo n Preadas % de Preez


CIDR + (EB+P4) + EB 113 62 54.9 %
CIDR + (EB+P4) + GnRH 115 67 58.3 %
CIDR + (EB) + EB 100 61 61.0 %
CIDR + (EB) + GnRH 105 57 54.3 %
Los porcentajes no difieren (P>0.1).

En este experimento se observan dos puntos importantes. Primero que si el


semen es de buena calidad puede fertilizar aunque las vacas ovulen a un tiempo mayor

159 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

al que nosotros esperamos. En un experimento preliminar a este trabajo observamos que


las ovulaciones ocurren en promedio entre 60 y 84 h despus de retirado el CIDR-B
(Tabla 20) con una vaca ovulando a las 60 h, 4 entre las 60 y 72 h y 3 entre las 72 y 84
h lo que indica que el semen debe mantenerse viable y en condiciones de fertilizar en el
tracto reproductivo femenino 24 h o ms. No obstante en otro trabajo donde se utiliz
semen de distintos toros se vio que algunos toros fertilizaron bien con el protocolo de
EB pero no tan bien con el protocolo GnRH, como se ve en la Tabla 21.

Tabla 20. Momento de la ovulacin de vacas tratadas con 50 o 100 g de GnRH en el momento de la IA.

Control 50 g GnRH 100 g GnRH


n 7 8 7
Vacas que ovularon 7 8 7
Ovulacin
Mediana (h) 84.0 72.0 84.0
Varianza (h) 288.0 a 72.0 b 41.1 b
Rango (h) 60 108 60 - 84 72 - 84

Tabla 21. Fertilidad de distintos toros en vacas cruza bos indicus tratadas con CIDR y EB y combinados
con EB a las 24 h post CIDR o GnRH en el momento de la IA.

Toro Grupo CIDR+EB+EB Grupo CIDR+EB+GnRH


1 14/19 (73,7 %) 10/20 (50,0%)
2 20/36 (55,6 %) 21/34 (61,8%)
3 6/10 (60,0 %) 6/10 (60,0%)
4 7/10 (70,0%) 1/10 (10,0%)
5 11/21 (52,4 %) 4/20 (20,0%)
6 14/34 (41,2 %) 22/35 (62,9%)
7 16/20 (80.0%) 4/17 (23,5%)

Como se ve en la Tabla 20 la fertilidad fue igual para los toros 1, 2, 3, 6 y 7 en


los dos grupos y menor en el grupo GnRH para los toros 4 y 5. Como conclusin se
puede decir que este esquema de sincronizacin tiene la ventaja de ahorrar un encierre
pero hay que usar semen de mxima calidad.

En la Figura 14 presentamos el esquema de tratamiento utilizando EB+P4 y


GnRH.

Da 0 Da 8 Da 10
CIDR-B IATF

2 mg EB CR GnRH

Figura 14. Tratamiento de sincronizacin de celos para vacas con cra utilizando CIDR +EB+P4+GnRH.

Unidad 4 160
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

4.5.2. Vaquillonas

La utilizacin de GnRH o LH en combinacin con un progestgeno tambin fue


estudiada en vaquillonas. En un estudio se evalu la eficacia del uso de CIDR-B y de
acetato de melengestrol (MGA) va oral en la dieta, y diferentes mtodos de
sincronizacin de onda folicular, estro y ovulacin en vaquillonas para carne (39,41).
Al comienzo del experimento (Da 0), la mitad de los animales recibi CIDR-B y la
otra mitad MGA (0.5 mg/cabeza/da x 6 das) y stos, a su vez, fueron asignados a 3
diferentes grupos de tratamiento: GnRH (100 g gonadorelin, Cystorelin, Merial Can
Inc), pLH (12.5 mg Lutropin-V, Vetrepharm Can. Inc) y EB+P4 (2 mg EB + 50 mg
P4). En el Da 7, los CIDR-B fueron retirados y se inyect PGF en todas las
vaquillonas. El grupo EB+P4 recibi 1 mg EB 24 h despus de la PGF y fue IA 52 h
post CIDR-B. Los otros grupos recibieron LH (12.5 mg Lutropin-V) o GnRH (100
g Cystorelin) a las 48 h post CIDR-B y se IA simultneamente. Los resultados se
presentan en la Tabla 22.

Tabla 22. Porcentajes de estro y preez despus de IA a tiempo fijo en vaquillonas tratadas con
CIDR-B o MGA en las que la ovulacin fue sincronizada con GnRH, pLH o benzoato de
estradiol (EB).

CIDR-B MGA
GnRH pLH EB GnRH pLH EB

n 103 102 52 101 97 48

Estro (%) 66a 61 a 92b 36c 33c 92 b

Concepcin con IA (%) 65 56 62 52 56 60

Concepcin con toros (%)* 67 62 70 70 63 74

Tasa de preez total (%) 88 83 88 85 84 90

abc Porcentajes con diferentes letras difieren (P<0.01).


Vaquillonas recibiendo servicio con toros.

Estos resultados sugieren que el progestgeno de administracin oral (MGA)


y el dispositivo intravaginal (CIDR-B) son igualmente eficaces y tambin que, en
combinacin con GnRH, pLH o EB, pueden ser usados de manera efectiva en la
sincronizacin de estro y ovulacin para programas de IA a tiempo fijo.

Por ltimo, en otro trabajo se compar el uso de la LH porcina (pLH) en un


programa similar al Ovsynch con el tratamiento de EB+P4. Se usaron 51 vaquillonas
que fueron asignadas a tres tratamientos. Las vaquillonas del Grupo CIDR-B + EB
recibieron CIDR-B y 1 mg de EB + 100 mg de P4 (Laboratorio Ro de Janeiro) im en
el Da 0, PGF y remocin del CIDR-B en el Da 7, 1 mg de EB a las 24 h (Da 8) y se
IA 28 h despus (52 h pos CIDR-B). En el CIDR-B + pLH las vaquillonas recibieron
un CIDR-B ms 12.5 mg de pLH (Lutropin-V, Vetrepharm Canada Inc.) en el Da 0,
PGF y remocin del CIDR-B en el Da 7, pLH a las 48 h (Da 9) y se IA 24 h

161 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

despus (72 h pos CIDR-B). Las vaquillonas del tercer grupo fueron tratadas con un
esquema similar al ovsynch pero utilizando 12.5 mg de pLH im en el Da 0, PGF en
el Da 7, pLH en el Da 9 e IA 24 h pos pLH (Da 10). Los porcentajes de animales
en celo y el porcentaje de preez estn indicados en la Figura 15.

100
90 % de estro
94
Porcentaje de vaquillonas

80 % de prenez

70 75 71
60
65
50
40
41 36
30
20
10
0
I) CIDR-B +EB II) CIDR-B + pLH III) pLH
Grupos de tratamiento

Figura 15. Porcentaje de vaquillonas en celo y porcentaje de preez en vaquillonas de carne tratadas
con CIDR-B en combinacin con EB, CIDR-B en combinacin con pLH, o
pLH+PGF+pLH.

Como se observa en la Figura, los porcentajes de celos y de preez fueron


significativamente mayores (P<0.05) en los animales tratados con CIDR-B+EB que
los tratados con pLH, mientras que los tratados con CIDR-B+pLH fueron
intermedios. Se concluy que el tratamiento con EB+P4 o pLH combinados con la
insercin de un progestgeno son altamente satisfactorios para la realizacin de
programas de IA a tiempo fijo. No obstante el tratamiento de LH+PGF+LH result
en un porcentaje de preez significativamente menor. Este experimento confirma
nuevamente que la utilizacin de un progestgeno en un programa similar al
Ovsynch mejorara la proporcin de animales preados como lo vimos en el captulo
anterior.

4.7. Tratamiento de vacas utilizando progesterona en combinacin con eCG.

Como ya se discuti anteriormente cuando se plante la utilizacin de eCG y


SMB en vacas posparto, la utilizacin de los dispositivos intravaginales en estas
situaciones de manejo tambin fueron estudiadas. Como sabemos las condiciones de
anestro estn ntimamente relacionadas con las condiciones nutricionales de las vacas
en el post-parto. Si la condicin corporal de los animales es media (2,5 a 3 en la escala
de 1 a 5) esta condicin est caracterizada por la existencia de ondas foliculares y la
presencia de folculos dominantes que no llegan a ovular. Generalmente esto es debido
a una inhibicin de la liberacin pulstil de GnRH y consecuentemente el folculo
dominante no llega a producir suficiente cantidad de estradiol para inducir el feed back
positivo que desencadenar el pico de LH y la ovulacin. La ovulacin de estos
folculos puede ser inducida con la administracin exgena de estradiol, GnRH, hCG o

Unidad 4 162
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

directamente LH. No obstante, la condicin nutricional puede hacer que los folculos
necesiten de un estmulo para crecer y llegar a ovular, y esto se podra conseguir
administrando eCG.

En Nueva Zelanda se estudiaron tres protocolos para sincronizar el celo de


animales en anestro (tanto sea de carne o de leche). Dos de estos tratamientos incluyen
la administracin de 400 UI de eCG en el momento de la remocin del CIDR-B o la
administracin de 1 mg de benzoato de estradiol (EB) im despus de la remocin del
CIDR-B. Estos tratamientos fueron resumidos por Macmillan y Burke en el Congreso
Internacional de Reproduccin Animal del 96 y sus resultados se encuentran indicados
en la Tabla 23.

Tabla 23. Respuesta de vacas Holstein en anestro a diferentes tratamientos utilizando CIDR en
combinacin con EB o eCG (Adaptado de Macmillan y Burke, 1996; 31).

Exp. # n Tratamiento % en celo Anestro Ovulacin sin celo


CIDR eCG EB <5 5-14 Persistente detectado
(das) (UI) (h) (das) (das) (%)* (%) **
1 88 7 52 16 22 10
90 7 400 57 18 20 5
87 5 48 78 12 3 7

2 81 5 48 19 21 12
105 5 24 91 4 2 3
121 5 48 82 9 3 6
* Vacas que se encontraban todava en anestro a los 14 das pos CIDR.
** Vacas que tenan un CL a los 14 das pos CIDR pero no haban sido observadas en Celo.

La conclusin de este trabajo es que la administracin de EB a las 24 h pos


CIDR resulta en un porcentaje mayor de vacas en celo. En un resumen de varios
estudios realizados en Nueva Zelanda, vacas Holstein diagnosticadas en anestro y que
se trataron con CIDR-B por 7 das ms la aplicacin de 1 mg EB im a las 24 h de
retirado el CIDR-B, result entre un 70 a un 85% de celos durante los 5 das
subsiguientes, con una preez promedio de 33 al 55% a la primera IA. Sin embargo, es
posible que estas vacas en anestro no estuvieran en una condicin corporal muy
comprometida.

La adicin de eCG para estimular el desarrollo folicular en vacas con cra


tratadas con dispositivos con P4 y EB e inseminando a tiempo fijo fueron estudiados
recientemente. Realizamos trabajos preliminares en los aos 1999 y 2000 para
evaluar el efecto del tratamiento con eCG en un esquema de sincronizacin con
progestgenos. En ambos casos se utilizaron vacas Angus (n=108) con una condicin
corporal de 2 a 2,5 (escala 1-5) que recibieron CIDR-B+EB+P4 en el Da 0. Las
vacas del grupo eCG recibieron 300 UI de eCG y una dosis de PGF en el Da 5. Los
CIDR-B fueron retirados en el Da 8 y las vacas del grupo sin eCG recibieron PGF
en ese momento. Todas las vacas recibieron 1 mg EB 24 horas pos CIDR-B y fueron
IATF a las 54 horas de removido el CIDR-B. El porcentaje de preez fue del 41,7%
en los dos grupos (20 preadas de 48 IATF en ambos grupos). En el otro trabajo ya
mencionado (18), 481 vacas de carne britnicas con cra que fueron tratadas con 2
163 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

mg EB en el momento de la insercin de dispositivos TRIUB y una dosis de PGF en


el momento de la remocin del TRIUB (Da 8). Las vacas fueron divididas al azar en
3 grupos para recibir 1 mg de EB a la 24 horas de removido el TRIUB, 400 UI de
eCG al momento de la remocin del TRIUB o una combinacin de 400 UI de eCG a
la remocin del TRIUB y 1 mg EB 24 horas despus. Como se ve en la tabla 24
tampoco en este caso hubo diferencias significativas en los porcentajes de preez
entre las vacas tratadas con EB (101/163, 62,0%) o con eCG+EB (89/160, 55,6%),
pero ambos grupos fueron superiores al grupo tratado con eCG solo (76/158, 48,1%;
P<0,03). En este caso las diferencias entre los grupos se mantuvieron tanto para las
vacas cclicas como para las vacas en anestro.

Tabla 24. Porcentajes de preez en vacas tratadas con Triu-b y EB y cuya ovulacin fue inducida
por EB o eCG, o por la combinacin de los dos (EB + eCG).

Grupo EB Grupo EB + eCG Grupo eCG


a
Rplica 1 37/54 (68,5%) 34/49 (69,4%) 27/47 (57,4 %)
Rplica 2a 15/24 (62,5%) 13/23 (56,5%) 12/22 (54,5%)
b
Rplica 3 24/47 (51,0%) 18/48 (37,5%) 17/48 (35,4%)
Rplica 4a 25/38 (65,8%) 24/40 (60,0%) 20/41 (48,8%)
a a
Total 101/163 (62,0%) 89/160 (55,6%) 76/158 (48,1%)b
ab
Porcentajes con superndices diferentes difieren (P<0,03)

Cabe aclarar que en ese lote de animales haba un 60% de vacas ciclando y
las que se encontraban en anestro tenan buena condicin corporal y no fue necesario
un estmulo extra para el crecimiento folicular, confirmando los resultados de otros
trabajos ya mencionados. Tal vez la adicin de eCG tenga resultados positivos en
vacas en una condicin corporal ms comprometida que la que utilizamos en este
experimento. Cuando evaluamos la adicin de eCG en vacas con una condicin
corporal ms comprometida la adicin de 400 UI de eCG en el Da 8 aument
significativamente los porcentajes de preez en vacas que se encontraban en plano de
aumento de peso. En 3 experimentos (17) se evalu la aplicacin de 400 UI de eCG
en el momento de retirado el dispositivo en vacas con cra Braford (n=181), Nelore
(2; n=215), Angus (n=114) y cruza ndica (n=290) con una condicin corporal
promedio de 2 y entre 60 a 80 d posparto. Todas las vacas fueron tratadas con 2 mg
de EB en el momento de la insercin de un dispositivo intravaginal con P4 (Da 0),
una dosis de PGF en el momento de la remocin del dispositivo (Da 8) y 1 mg de
EB en el Da 9. Las IATF fueron realizadas entre las 52 y 56 h de la remocin del
dispositivo con P4. Las vacas del Grupo eCG recibieron adems 400 UI de eCG en el
Da 8. En este caso, todas las vacas fueron palpadas o examinadas por
ultrasonografa el Da 0 para determinar el estatus ovrico y se dividieron en 3
categoras: vacas con un CL, vacas con folculos palpables (> 8 mm de dimetro) y
vacas que tenan ovarios sin estructuras palpables (folculos < 8 mm de dimetro). A
pesar que en los 3 experimentos se utilizaron diferentes dispositivos con P4 (PRID,
Sanofi, Francia n=181; CIDR-B, Pharmacia, Brazil, n=215 y DIB, Syntex,
Argentina n=404) no se encontraron diferencias significativas debido al efecto del
dispositivo utilizado (P=0,11), ni al efecto experimento (P=0,13) y por este motivo
los resultados fueron agrupados para su anlisis.

Unidad 4 164
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Como se puede ver claramente en la Figura 16, no hubo diferencias entre los
tratamientos cuando las vacas estaban ciclando al inicio del tratamiento (presentaron
un CL). Sin embargo, se obtuvo un mayor porcentaje de preez en las vacas tratadas
con eCG en el Da 8 que presentaron folculos y en las que no tenan estructuras
ovricas palpables (P=0,03).

70% eCG Da 8
59,6%
60% 52,7% 54,2% Control
50,9%
50%
40% 31,3% 30,6%
30%
20% a b a b
10%
0%
CL n=181 FOL n=291 SE n=134

Figura 16. Porcentajes de preez en vacas con cra tratadas con eCG en el Da 8 del tratamiento en
funcin del status ovrico al inicio del tratamiento. ab Columnas con diferentes letras
difieren (P=0,03).

Siguiendo con la misma lnea de trabajo realizamos otro experimento (17) en


el cual evaluamos la aplicacin de 400 UI de eCG en 118 vacas Braford, 60 a 90 das
post parto y con una condicin corporal 2 en promedio. En este caso, a diferencia de
las vacas del los 3 experimentos citados anteriormente, las vacas no se encontraban
en un plano de aumento de peso. Todas las vacas recibieron un dispositivo PRID
junto con 2 mg de EB en el Da 0 del tratamiento. Los dispositivos fueron retirados
en el Da 8, momento en el cual todos los animales recibieron una dosis de PGF y
fueron divididos para recibir 400 UI de eCG (Grupo eCG) 2 ml de solucin salina
(Grupo Control). En todos los casos se aplic 1 mg de EB 24 h mas tarde y las vacas
fueron IATF entre las 52 y 56 h de retirado del PRID. En este caso los porcentajes de
preez fueron bajos y no se encontraron diferencias significativas entre los Grupos
Control y eCG (15/56; 26,7% y 22/62; 35,5%, respectivamente); creemos que esto
fue debido a que las vacas no tuvieron un plano de aumento de peso y confirman que
son necesarias condiciones mnimas de alimentacin para realizar IATF.

165 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

PGF +
400 UI
eCG
2 mgEB 1 mg EB

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Dispositivo Intravaginal con P4
IATF 52
a 56 h

Figura 17. Esquema de tratamientos con dispositivos intravaginales con progesterona (P4) para
vacas en anestro posparto. El tratamiento bsico consiste en la insercin del dispositivo y
la administracin de 2 mg de benzoato de estradiol (EB; Da 0). En el Da 8 se aplica
PGF ms 400 UI de eCG y se quita el dispositivo y en el Da 9 se aplica 1 mg de EB. Se
realiza IATF a las 54 h de la remocin del dispositivo.

Sobre la base de los resultados concluimos en que la aplicacin de una dosis


de 400 UI de eCG en el momento de retirado el dispositivo con P4 no aumenta los
porcentajes de preez en vacas britnicas con cra y con una buena condicin
corporal. Sin embargo en los experimentos en los cuales se utilizaron vacas con pobre o
moderada condicin corporal y se encontraban en un plano de aumento de peso, la
aplicacin de eCG aument significativamente los porcentajes de preez.

Es tambin importante notar que si la eCG se utiliza a la remocin del


dispositivo y no se utiliza EB para sincronizar la ovulacin los ndices de preez a la
IATF van a depender del tipo de dispositivo y sal de estradiol utilizada al inicio del
tratamiento de sincronizacin. El uso de eCG result en un mayor porcentaje de
preez que el EB en vacas Nelore tratadas con Crestar (44,8% vs. 27,3%,
respectivamente). Sin embargo en tres experimentos realizados con vacas secas y con
cra tratadas con dispositivos con P4 (DIV-B, TRIU-B y PRID). El porcentaje de
preez del grupo tratado con eCG (109/270; 40,4%) fue menor que el obtenido con
los animales tratados con EB (146/267; 54,7%; P<0,05). La causa de esta diferencia
podra estar en que el tratamiento con EB producira una mayor sincrona de las
ovulaciones que la eCG (M. Marquez, comunicacin personal).

4.7.1. Destete temporario, enlatado y eCG en vacas con cra en pobre condicin
corporal.

En el ltimo ao realizamos una serie de experimentos con el objetivo de


evaluar el efecto de un destete temporario, el enlatado y la aplicacin de eCG en
vacas cruza ceb con cra y en pobre condicin corporal. En el primer experimento
se utilizaron 393 vacas de carne con cra al pie (60 a 80 das pos parto) y con una CC
de entre 2 y 2,5 (Escala 1-5). Las vacas fueron asignadas a uno de 4 grupos de
tratamiento en un diseo 2x2 factorial. Todas las vacas recibieron en el Da 0 un DIB
nuevo o reutilizado, asignados en forma equitativa en cada uno de los grupos de
tratamiento. En el momento de colocado el DIB se inyectaron 2 mg de EB im (Da

Unidad 4 166
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

0), en el Da 8 se aplic una dosis de 150 g de D(+)Cloprostenol im (Ciclase,


Syntex) y las vacas fueron divididas para recibir o no 400 UI de eCG im (Novormon
5000, Syntex). A su vez a cada grupo de tratamiento se lo subdividi en dos
subgrupos, en uno se mantuvieron los terneros con sus madres mientras que en el
otro subgrupo se realiz un destete temporario de los terneros desde el momento de
retirado el DIB hasta el momento de la IATF. Los terneros fueron separados de sus
madres por una distancia de aproximadamente 1000 m. para evitar cualquier tipo de
contacto, visual, auditivo u olfatorio entre vacas y terneros. Todas las vacas
recibieron 1 mg de EB im 24 h luego de retirado el DIB y fueron IATF entre las 52 y
56 h de retirado el mismo. Se realiz diagnstico precoz de preez por medio de
ultrasonografa a los 42 das de la IATF. Los datos fueron analizados por medio de
regresin logstica teniendo en cuenta diferentes factores que pudieran afectar los
resultados. No se encontraron diferencias (P=0,1) entre los dispositivos nuevos
(85/204; 41,6%) y reutilizados (87/195; 44,5%) por lo que los datos fueron
combinados para su anlisis. Como puede observarse en la Tabla 25 se encontr un
efecto principal (P=0,07) del uso de eCG, sin embargo no hubo diferencias (P=0,3)
en los porcentajes de preez entre las vacas a las cuales se les realiz destete
temporario o no.

Tabla 25. Efecto de la aplicacin de 400 UI de eCG y destete temporario sobre los porcentajes de
preez en vacas cruza ceb con cra e IATF.

eCG a Control b

Destete Control Destete Control

45/94 49/98 41/97 38/104

47,9% 50,0% 42,3% 36,5%

ab. (P=0,07)

En el segundo experimento se utilizaron 399 vacas de carne de segundo


servicio, con cra al pie (60 a 80 das pos parto) y con una CC de entre 2 y 2,5 (Escala
1-5). Las vacas fueron asignadas a uno de los 4 grupos de tratamiento en un diseo 2x2
factorial. Todas las vacas recibieron un DIB nuevo o reutilizado, se asignaron
dispositivos nuevos o reutilizados en forma equitativa en cada uno de los grupos de
tratamiento. En el momento de colocado el DIB se inyectaron 2 mg de EB im (Da 0),
en el Da 8 se aplic una dosis de PGF y las vacas fueron divididas para recibir o no 400
UI de eCG im (Novormon 5000, Syntex). A su vez a cada grupo de tratamiento se lo
subdividi en dos subgrupos, en uno se realiz enlatado de los terneros desde el
momento de iniciado el tratamiento hasta el momento de la IATF, y en el otro subgrupo
no se realiz enlatado de los terneros. Todas las vacas recibieron 1 mg de EB 24 h luego
de retirado el DIB y fueron IATF entre las 52 y 56 h de retirado el mismo. Se realiz

167 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

diagnstico de preez por medio de ultrasonografa a los 60 das de la IATF. Los datos
fueron analizados de la misma forma que para el experimento anterior No se
encontraron diferencias (P=0,1) entre los dispositivos nuevos (87/195; 44,5%) y
reutilizados (86/196; 43,9%) por lo que los datos fueron combinados para su anlisis.
Como puede observarse en la Tabla 26 el Grupo Lata result en mayores porcentajes
de preez que el Grupo Control (P=0,03), mientras que los Grupos eCG y eCG+Lata
resultaron en porcentajes intermedios entre los otros dos grupos de tratamiento (Tabla
24)

Tabla 26. Porcentajes de preez en vacas con cra tratadas con DIB por 8 das, combinadas o no con 400
UI de eCG y Enlatado por 10 das.

Lata Control Lata+eCG eCG


53/106 37/101 38/89 45/103
(50,0%) a (36,6%) b (42,3%) ab (43,7%)ab
(P=0,03)

Concluimos que el enlatado de los terneros por un perodo de 10 das mejora


significativamente los resultados de preez, comparado con un tratamiento
convencional de IATF. Sin embargo, se encontraron diferencias numricas que
indicaran que la aplicacin de 400 UI de eCG tambin aumentan los porcentajes de
preez. Se debera repetir este experimento con el objetivo de aumentar el tamao
muestral.

4.7.2 Uso de eCG en vacas cruza ceb secas

Recientemente realizamos un trabajo con el objetivo de comparar el


porcentaje de preez de vacas secas Braford tratadas con un dispositivo intravaginal
con P4 combinado con la aplicacin de eCG en el momento de retirar el dispositivo o
con la aplicacin de EB 24 horas ms tarde (21). El objetivo de este trabajo fue
evaluar si la adicin de eCG al retirar el dispositivo permitieron suprimir el encierre
de las 24 horas pos remocin del dispositivo para la administracin del EB, sin
afectar los ndices de preez. A su vez se compar el porcentaje de preez de vacas
tratadas con DIV-B o vacas tratadas con CIDR-B. Se utilizaron 140 vacas Braford
(3/8 Brahman y 5/8 Hereford) secas, ciclando y con condicin corporal >2,5 (escala
1 a 5). Al comienzo del experimento (Da 0), las vacas fueron distribuidas al azar en
tres grupos de tratamiento. Las vacas del Grupo 1 y 2 (n=114) recibieron un
dispositivo DIV-B ms 2 mg EB, mientras que las del Grupo 3 (n = 26) recibieron
un CIDR-B ms 2 mg EB. En el Da 8, se retiraron todos los dispositivos y todas las
vacas fueron tratadas con 150 g D (+) cloprostenol (Preloban, Intervet, Argentina).
Las vacas del Grupo 1 recibieron 300 UI eCG (Novormn, Syntex, Argentina) en el
momento de la remocin del DIV-B y las del Grupo 2 y 3 recibieron 1 mg EB 24
horas ms tarde. Todas las vacas fueron IATF 50 a 55 horas despus de la remocin
del dispositivo y la preez fue diagnosticada por ultrasonografa a los 30 das. Los
datos fueron analizados por Regresin Logstica y se encuentran resumidos en la
Tabla 27.

Unidad 4 168
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Tabla 27. Porcentaje de preez de vacas Braford tratadas con un dispositivo con progesterona y EB ms
eCG en el momento de retirar el dispositivo o EB 24 horas despus (adaptado de B y col.,
2000; 21)

Tratamiento n Preadas (%)


Grupo 1. DIV-B+eCG 58 26 (44,8) a
Grupo 2. DIV-B+EB 56 34 (60,7) b
Grupo 3. CIDR-B+EB 26 16 (61,5) b
ab - Porcentajes con distinta letra difieren (P = 0.08)

Aunque los resultados fueron aceptables, la supresin de un pasaje por la


manga de los animales del grupo tratado con eCG result en un menor porcentaje de
preez. Esto se puede deber a que como estas vacas tenan buena condicin corporal,
la necesidad de un estmulo para el crecimiento folicular no fue necesaria. Por otro
lado, los resultados estaran indicando que el tratamiento con EB produce una mayor
sincrona de las ovulaciones que con eCG y esto result en un mayor porcentaje de
preez en las vacas tratadas con EB.

Los resultados de estos experimentos evidencian que la utilizacin de eCG y EB


en los tratamientos de sincronizacin con dispositivos con P4 son una alternativa
interesante para realizar IATF en grupos de animales en anestro y debern realizarse
ms experimentos para confirmar estos datos alentadores. Adems, los datos confirman
que el tratamiento con EB a las 24 h de sacar el dispositivo intravaginal con P4 resulta
en mayores porcentajes de preez a la IATF que el tratamiento con eCG a la remocin.

4.7. Reutilizacin de dispositivos con P4

La adopcin de la tcnica de IATF por muchos productores esta condicionada


por el costo del tratamiento. La reutilizacin de los dispositivos intravaginales significa
una reduccin aproximada del 40% en el costo de drogas utilizadas en el tratamiento.
Datos preliminares indican que la utilizacin de los dispositivos con P4 por segunda vez
en programas de IA resulta en porcentajes de preez similares a los de los tratamientos
donde se utilizan dispositivos nuevos, a pesar de que el nivel de P4 podra diferir.

Realizamos un experimento (14) con el objetivo de comparar los porcentajes de


preez de vacas tratadas con dispositivos DIV-B nuevos y dispositivos que haban sido
previamente utilizados por 7 d. Se utilizaron vacas Bos taurus x Bos indicus y
vaquillonas Bos taurus provenientes de tres establecimientos de cra. Las vacas Bos
taurus x Bos indicus utilizadas en los establecimientos 2 y 3 estaban sin cra y las
vaquillonas Bos taurus del establecimiento 1 tenan 15 a 18 meses de edad. En cada
establecimiento, los animales fueron divididos al azar en 4 grupos en un diseo 2 x 2
factorial. En el Da 0 los animales fueron divididos para recibir un dispositivo DIV-B
nuevo o usado y 2 mg de EB im o 2 mg EB + 50 mg P4 im. Los DIV-B fueron retirados
y los animales recibieron PGF en el Da 7, 1 mg de EB im en el Da 8 y fueron IATF
entre las 52 y 56 h despus de retirado el DIV-B. Los dispositivos usados previamente
fueron lavados con agua y cepillados para retirar todo tipo de suciedad, luego fueron y
desinfectados utilizando con una solucin de amonio cuaternario al 2% (Bagodryl, San
Jorge Bag, Argentina). El anlisis de los datos (regresin logstica) demostr un efecto

169 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

establecimiento significativo (P<0,05), debido a un menor porcentaje de preez en el


establecimiento 2 (vacas cruza ndicas) y un efecto DIV-B significativo (P<0,05),
debido a un mayor porcentaje de preez en las vacas que recibieron un DIV-B usado.
Por el contrario, no hubo diferencias entre agregar o no P4 en el Da 0 y por lo tanto los
resultados de estos tratamientos (EB vs EB+P4) se combinaron. Se obtuvo un 49,5% de
preez con los dispositivos nuevos y un 59,7% en los animales en los cuales se
aplicaron DIB de segundo uso.

Basndose en estos resultados podemos concluir que es factible reutilizar los


dispositivos DIV-B por segunda vez en tratamientos de sincronizacin de celos para
IATF y que el tratamiento con P4 im en el momento de inicio del tratamiento no afecta
los resultados de fertilidad.

Recientemente realizamos otro experimento (16) en el cual se compararon los


porcentajes de preez de vacas (n=98) y vaquillonas (n=95) Brangus y Braford. Los
animales fueron divididos en dos grupos, que recibieron un DIB (1 g de P4; Syntex,
Argentina) nuevo o un DIB previamente utilizado y desinfectado como se describi
anteriormente. Todos los animales recibieron 2 mg de EB en el Da 0 del tratamiento y
una dosis de PGF en el Da 8 (momento de retirado el DIB). En el Da 9 se inyect 1
mg de EB y todos los animales fueron IATF entre las 52 y 58 h de retirado el DIB. En
este experimento no se encontraron diferencias significativas (P=0,12) entre los
porcentajes de preez. Se obtuvo un 57,9% (55/95) de preez en los animales tratados
con DIB nuevo contra un 51,0% (50/98) en los animales tratados con DIB usados.

En otros trabajos realizados en Canad se trataron vacas con cra al pie y


vaquillonas de 15 meses con CIDR-B nuevos o usados por 7 d y a su vez fueron
divididas para recibir en el Da 0 del tratamiento 2 mg de EB; 2 mg de EB + 50 mg de
P4 o 2 mg de EB + 100 mg de P4. Todas las vacas recibieron una dosis de PGF en el
momento de retirado el CIDR-B (Da 7) y 1 mg de EB 24 h ms tarde. Las tasas de
preez no difirieron (P=0,2) entre los dispositivos nuevos o reutilizados (39 y 45%,
respectivamente). En el segundo experimento (52) se compar en un diseo 2x2
factorial el porcentaje de preez en vacas tratadas con un CIDR-B reutilizados por
segunda o tercera vez. A su vez, las vacas fueron divididas para recibir 1 mg de EB o 1
mg de EB + 100 mg de P4 en el da de inicio del tratamiento. En todos los casos se
retir el CIDR-B en el Da 7 junto con la aplicacin de 500 g de cloprostenol y en el
Da 8 se inyect 1 mg de EB. Todas las vacas fueron IATF entre las 54 y 56 h de
retirado el CIDR-B. No hubo diferencias entre los porcentajes de preez de vacas
tratadas con un dispositivo reutilizado por segunda o tercera vez (32/66; 48,5% vs.
31/71; 43,6%; P=0,5), tampoco hubo diferencias entre los porcentajes de preez en
vacas tratadas con 1 mg de EB o 1 mg de EB + 100 mg de P4, (33/69; 47,8% vs. 30/68;
44,1%; P=0,6).

En otro experimento realizado por el mismo grupo se trataron 363 vaquillonas


de carne entre 12 y 15 (350 a 500 Kg.) meses de edad con CIDR-B de 1 o de 2 usos en
un diseo 2x2 factorial para recibir o no 50 mg de P4. Se obtuvo un (P<0,05) menor
porcentaje de preez en las vaquillonas tratadas con un CIDR-B- de segundo uso sin P4
que en las vaquillonas tratadas con un CIDR-B de un uso sin P4 (Figura 18).

Unidad 4 170
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

70%
60%
50%
40%
30%
a
ab a
20% b
10%
0%
Un Uso + P4 Dos Usos + P4 Un Uso Dos Usos

Figura 18. Porcentajes de preez en vaquillonas tratadas con CIDR-B-B de 1 o de dos usos y con la
adicin o no de 50 mg de P4.

Estos resultados demuestran que es necesaria la aplicacin de 50 mg de P4 en


protocolos que utilizan CDR-B previamente usados por 2 veces. Sin embargo en una
experimento finalizado recientemente por nuestro grupo se compararon los porcentajes
de preez en vacas secas (cruza ceb); n=120 y vacas con cras (n=70) tratadas con
CIDR-B nuevos o de segundo uso sin la adicin de P4 im. No se encontraron
diferencias significativas (P>0,7) entre los porcentajes de preez de ambos grupos,
siendo del 48,1% (39/81) para los CIDR-B nuevos y del 50,9% (55/108) para los
CIDR-B usados previamente por 2 veces.

Probablemente la diferencia de resultados encontrados en estos dos ltimos


experimentos se deba a la diferencia de peso de los animales utilizados en cada uno de
ellos y a que unos son Bostaurus y los otros cruza Ceb. Probablemente la utilizacin
de CIDR-B de usado por 3 vez sea recomendable en categoras o razas de animales ms
livianos, de lo contrario se la debera combinar con 50 mg de P4 im. Por su puesto estos
trabajos deben ser confirmados con un mayor cantidad de datos.

Tambin se realizaron 3 experimentos (8) con el objetivo de evaluar el


desempeo de los dispositivos intravaginales con progesterona (P4) Triu-B (1g de
P4; Biognesis, Argentina). En el Experimento 1 se utilizaron 167 vaquillonas
Brangus de 24 meses y con una condicin corporal (CC) de 3 a 3,5 (Escala 1-5). El
da de inicio del tratamiento las vaquillonas fueron divididas en tres grupos para
recibir un Triu-B nuevo (n=67; Grupo Triu-B Nuevo); un Triu-B usado por segunda
vez (n=65; Grupo 2 Uso) o un Triu-B reutilizado por tercera vez con la adicin de 2
camisas con 100 mg de P4 cada una (n=35; Grupo Triuso). Todas las vaquillonas
recibieron 2 mg de benzoato de estradiol (EB; Syntex, Argentina) en el Da 0. Los
dispositivos fueron retirados en el Da 7 junto con la aplicacin de una dosis de PGF,
en el Da 8 se inyect 1 mg de EB y las vaquillonas fueron IATF entre las 48 y 52 h
de retirado el Triu-B. No se encontraron diferencias entre los porcentajes de preez
entre los grupos (P=0,42; Tabla 28). En el Experimento 2 se utilizaron 256
vaquillonas cruza ceb de 24 meses y con una CC de entre 3,5 y 4. Las vaquillonas
fueron divididas en dos grupos para recibir un Triu-B nuevo (n=108; Grupo Triu-B
Nuevo) o un Triu-B usado por segunda vez (n=138; Grupo 2 Uso). A partir de
colocado el dispositivo todas las vaquillonas recibieron el mismo tratamiento que en
el Experimento 1. No hubo diferencias entre los porcentajes de preez de ambos
grupos (P=0,74; Tabla 28). En el Experimento 3 utilizaron 140 vaquillonas de 24

171 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

meses y 99 vacas secas con una CC de 3,5 en promedio. En cada categora (vacas y
vaquillonas) los animales fueron tratados con un Triu-B nuevo (n=77; Grupo Triu-B
Nuevo) o un Triu-B reutilizado por tercera vez con la adicin de 2 camisas con 100
mg de P4 cada una (n=162; Grupo Triuso). El tratamiento subsiguiente fue igual al
descripto para los experimentos anteriores. No hubo diferencias entre los grupos
(P=0,42) ni entre los porcentajes de preez de vaquillonas y vacas secas (P=0,78;
Tabla 28).

Tabla 28. Porcentajes de preez en vacas y vaquillonas tratadas con dispositivos Triu-B nuevos,
reutilizados (2 uso) o reutilizados por tercera vez con 2 camisas con 100 mg de P4 cada
una (Triuso).

Grupo Nuevo Grupo 2 Uso Grupo Triuso Valor P


Experimento 1
Vaquillonas 28/67 29/65 18/35 0,42
(41,8%) (44,6%) (51,4%)
Experimento 2
Vaquillonas 52/108 61/138 --- 0,74
(47,8%) (44,2%)
Experimento 3
Vacas --- 20/35 36/64 0,93
Secas (57,1%) (56,2%)
Vaquillonas --- 26/42 58/98 0,76
(61,9%) (59,2%)

Concluimos que la reutilizacin de dispositivos Triu-B por segunda o por


tercera vez (junto con 2 camisas con 100 mg de P4 cada una) result en porcentajes
de preez a la IATF comparables con los obtenidos con tratamientos con Triu-B
usados por primera vez. Para evitar inconvenientes de diferencias en la absorcin
entre vacas y vaquillonas Biognesis recomienda utilizar 3 camisas de 100 mg en
lugar de 2 camisas durante el tercer uso.

Unidad 4 172
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

5. SINCRONIZACIN DE LOS RETORNOS AL CELO EN


PROGRAMAS DE IATF.
La idea de sincronizar el celo de los animales que no quedan gestantes despus
de la primera IA fue una de las preocupaciones de varios grupos de trabajo, en especial
de Nueva Zelanda. Esto indudablemente posibilita maximizar el trabajo de IA y
disminuir los problemas de deteccin de celos posteriores a la IA. Se observ que si se
coloca un dispositivo CIDR-B (nuevo o usado) entre el Da 16 al 21, se podra hacer
que los animales repitieran celo entre 22 a 25 das pos IA en lugar del citado de los 18 a
25 das tradicionales. Para resumir estos trabajos utilizaremos datos de 514 vacas que
fueron tratadas con un CIDR-B a los 14-17 das pos IA y los CIDR-B fueron quitados a
los 21 das pos IA. Estos datos se compararon con animales que no recibieron un
CIDR-B y fueron IA a la aparicin del celo.

Tabla 29. Distribucin de los retornos al servicio en vacas tratadas con un CIDR-B entre los das 14 a 17
pos IA y removidos a los 21 das pos IA versus vacas que fueron IA sin ningn tratamiento
(Control; Adaptado de Macmillan y Peterson; 1993; (32).

Intervalo entre celos CIDR-B (%) Control (%)


N 186 172
18-19 0 13.9
20-22 2.2 33.5
23-24 67.4 15.8
25-35 13.0 10.8
36-50 8.2 15.2
> 50 9.2 10.8
Preez (%) 65.6 70.9

Estos resultados demuestran que es viable utilizar los CIDR-B para sincronizar
los retornos. Datos de Nueva Zelanda indican que utilizando la combinacin del
tratamiento de IA a tiempo fijo, junto con la sincronizacin de los retornos podremos
obtener aproximadamente un 70-80% de preez con pocos das de trabajo de IA. El
esquema completo de trabajo sera el que se muestra en la Figura 19.

Da 0 Da 8 Da 10 Da 26 Da 30
CIDR-B IA CIDR-B Celo -IA

(EB) PGF EB

Figura 19. Esquema de sincronizacin y re-sincronizacin de los celos utilizando CIDR.

Otros experimentos demostraron que si bien este tratamiento es fcil de aplicar


y bastante efectivo, no todas las vacas vacas vuelven a entrar en celo. En un trabajo
realizado por Dick et al., en vacas de la Cuenca Mar y Sierras en Bs.As Argentina (19),

173 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

slo un 78.2% del total se detect en celo e IA en 3 das; siendo el 46.6% a las 48 h, un
15% a las 72 h y un 16.6% a las 96 h de retirados los dispositivos CIDR-B. Se observ
que en animales multparos, el retorno al servicio fue en algunos casos un poco ms
variable que en otros.

En un ensayo realizado por nuestro grupo se realiz una IA a tiempo fijo en


164 vacas secas cruza ceb con el protocolo de la Figura 16. Resultaron preadas a la
primera IA 94 (57,3%). De las 80 vacas que resultaron vacas a la primera IA solo 43
(53,7%) repitieron celo con la re-sincronizacin y 36/43 (83,7%) resultaron preadas.
En total 121/164 (73,7%) de las vacas tratadas resultaron preadas con las dos IA. En
otro trabajo con 150 vacas con cra con pobre condicin corporal, resultaron preadas
a la primera IA 39 (26%). De las 111 vacas que resultaron vacas a la primera IA solo
60 (54%) repitieron celo con la re-sincronizacin y 42/60 (70%) resultaron preadas a
la segunda IA. En total 81/150 (54%) de las vacas tratadas resultaron preadas con las
dos IA. La ventaja de la resincronizacin en este segundo caso es que recuperamos una
baja preez inicial con una mejor preez a la segunda IA y terminar el programa con
resultados ms o menos aceptables.

Otra posibilidad recientemente estudiada es la utilizacin de una dosis baja de


EB durante la fase luteal (34). El objetivo es utilizar una dosis baja de EB que no llegue
a desencadenar el mecanismo luteoltico pero que sea suficiente para actuar
sinrgicamente con la progesterona secretada por el CL e inducir, a travs de la
supresin de la FSH y LH, la regresin del folculo dominante de la segunda onda y de
esta manera transformar a 3 ondas a todos los animales, con intervalos interovulatorios
de 23-24 das.

En estos experimentos se insertaron dispositivos CIDR-B 13 a 15 das


despus de la 1ra IA y los retiraron a 18-21 das despus de la IA. Esto dio como
resultado que el 95% de las vacas vacas despus de la primera IA estuvieran en celo
entre los 3 das posteriores a la remocin del CIDR-B (10% el 1er da; 82% el 2do da;
8% el 3er da). La fertilidad fue similar o ms alta en los grupos tratados que en los
grupos controles.

Fueron realizados dos experimentos por nuestro grupo de trabajo para evaluar el
efecto de la reinsercin del DIV-B combinado con EB para sincronizar los retornos al
estro, en el primer experimento (15) se utilizaron 185 vacas Braford, ciclando, sin cra
al pie, de 3 a 5 aos de edad y con una condicin corporal de 2,5 a 3,5 (Escala 1-5)
que recibieron un dispositivo DIV-B durante 7 das para sincronizar el celo y que se
inseminaron 52 a 56 hs despus de su remocin. Trece das despus de la IA los
animales fueron subdivididos al azar en dos grupos. En el primer Grupo (Grupo
DIV-B+EB Da 13) a los animales se les aplic durante 7 das un DIV-B
previamente utilizado y 1 mg de EB im. Se detect celo desde el Da 21 al 25. En el
segundo Grupo (Grupo Control) los animales no recibieron tratamiento y se detect
celo desde el Da 17 a 25 pos-IA. Todas las vacas fueron IA 8 a 12 h despus de
detectado el celo. Se realiz el diagnstico de preez por medio de ultrasonografa
transrectal 30 das despus de la segunda IA con el objetivo de determinar el
porcentaje de preez en la sincronizacin y en la re-sincronizacin. Los datos fueron
analizados por regresin logstica (Infostat, 1999) segn corresponda. La distribucin
de los celos en la resincronizacin fue evaluada por el mtodo de Bartletts de
homogeneidad de varianza. No se encontraron diferencias en el porcentaje de preez

Unidad 4 174
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

a primo IA entre las vacas del Grupo Control y el Grupo DIV-B+EB Da 13 (36/94;
38.3% vs. 40/91; 43.9%, respectivamente), tampoco fueron encontradas diferencias
entre los porcentajes de preez de ambos grupos en la 2 IA (18/36; 50.0% vs. 23/41;
54.7%). Sin embargo, como puede observarse en la Figura 20, hubo una mayor
concentracin en la presentacin de celos en las vacas del grupo DIV-B+EB Da13
con respecto a las del grupo Control (P=0,0002; Bartletts test).

Grupo Control Grupo DIV+EB Da 13


60

50
Celo diario (%)

40

30

20

10

0
17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28

Da del ciclo

Figura 20. Distribucin de los celos en vacas tratadas con DIV-B+BE Da 13 o grupo control.

El patrn de distribucin de celos en el experimento anterior fue similar al


observado recientemente en un trabajo donde se utilizaron vacas Brangus con cra
que fueron resincronizadas con el mismo esquema anterior, utilizando dispositivos
Triu-B (15). El 89% (24/27) de las vacas que resultaron vacas a la primera IA y
fueron resincronizadas con TRIUB entre los Das 13 a 20 y 1 mg de EB en el Da 13
retornaron al celo entre los Das 21 a 26 pos IATF. Adems, el 88,9% (21/24) de las
vacas que retornaron presentaron celo entre el Da 21 a la tarde y el Da 22 por la
tarde. El porcentaje de preez final, despus de las dos IA, en este grupo fue del
81%. Por su parte en las vacas del Grupo Control, que recibieron solo el TRIUB
entre los Das 13 a 20, hubo un menor (P<0,08) porcentaje de retorno (16/23,
69,3%), distribuido entre los Das 21 y 25 (Figura 21). El porcentaje final de preez
en el Grupo Control fue del 74%. En las vaquillonas tratadas con un TRIUB entre los
Das 13 al 20 (sin EB en el Da 13), el 74% (23/31) retornaron al celo, de las cuales,
el 91,3% (21/23) present el celo entre el Da 21 a la tarde y el 23 a la maana.

175 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

VACAS Triub (n=16) VACAS Triub+EB (n=24)


VAQUILLONAS Triub (n=23)
80
70
Animales en celo (%)

60
50
40
30
20
10
0
21 PM 22 AM 22 PM 23 AM 23 PM 24 AM 24 PM 25 AM
Das despus de la primera IA

Figura 21. Distribucin de los celos en vacas con cra y vaquillonas Brangus que recibieron un
TRIUB entre los Das 13 a 20, solo o combinado con 1 mg BE im en el Da 13
(TRIUB+EB). Entre las vacas, el porcentaje de animales que retornaron al celo fue
mayor (P<0,08) en el Grupo TRIUB+EB (21/24, 88,9%) que en el Grupo TRIUB (16/23,
69,3%). En las vaquillonas el porcentaje de retorno fue de un 74,2% (23/31; P>0,2
comparado con las vacas; adaptado de Cutaia y col.; 15)

En base a estos datos concluimos que la resincronizacin con dispositivos con


progesterona y EB en vacas produce retorno al estro ms sincrnico, sin afectar los
porcentajes de preez. Esto permite reducir considerablemente el tiempo de
observacin de los animales para la deteccin de celos y obtener altos porcentajes de
preez finales despus de dos IA.

De esta manera los nuevos esquemas de re-sincronizacin para vacas con cra
estn indicados en la Figura 22.

Da 0 Da 8 Da 10 Da 23 Da 30

CIDR-B IA CIDR-B Celo -IA

(2 mg EB) PGF EB (1mg)EB

Figura 22. Esquema de sincronizacin y re-sincronizacin de los celos utilizando CIDR-B y EB.

Recientemente se ha incluido a este tratamiento de re-sincronizacin la adicin


de 0.5 o 1 mg de EB las 24 h de removido el CIDR-B. Esta nueva alternativa ha
resultado en un mayor porcentaje de vacas que mostraron celo tal cual lo muestra la
Tabla 26. Este experimento se realizo con 591 vacas Holstein en Australia que fueron
tratadas con CIDR-B por 7 das e IA a celo detectado. Todas las vacas en celo e IA
despus del primer tratamiento recibieron 1 mg de EB y el CIDR-B usado en el Da 13
post IA. Los CIDR-B fueron removidos en el Da 21 y en ese momento las vacas fueron

Unidad 4 176
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

divididas y la mitad de ellas recibieron otra inyeccin de 0.5 mg de EB a las 24 h post


CIDR-B (Grupo EB x 2) mientras que las otras no recibieron nada mas luego de la
remocin del CIDR-B (Grupo EB x 1). Luego, los animales detectados en celo fueron
IA y estos a su vez fueron resincronizados por tercera vez utilizando el mismo esquema
descripto. Los datos que se ven en la Tabla 30 muestran que hubo un mayor (P>0,05)
porcentaje de vacas en el Grupo EB x 2 que fueron IA por segunda vez, pero sin afectar
los niveles de concepcin al primer servicio. Por otro lado hubo ms vacas IA durante
el primer da de deteccin en el Grupo EB x 2 que en el EB x 1. Lo interesante es que
no hubo diferencias en los niveles de concepcin entre los grupos en la primera,
segunda o tercera IA. La preez final del rodeo fue mayor en el Grupo EB x 2,
simplemente porque ms animales vacos mostraron celo y fueron IA durante los das
de observacin.

Tabla 30. Efecto de la administracin de 0,5 mg EB a las 24 h de la remocin del CIDR para la re-
sincronizacin de celos.

EB x 1 EB x 2

Primera Ronda 591


n
% no retorno 60,5 a 46,9 b
% concepcin Primera IA 49,2 a 48,3 b

Segunda Ronda
N 119 154
% en celo sobre total de vacas 39,5 a 53,1 b

Distribucin de los retornos 42,9 a 70.8 b


% IA Da 1
% IA Da 2 42,0 a 23,4 b
% IA Da 3 15,1 a 5,8 b

% vacas IA sobre posibles vacas 77,8 a 102,7 b


% concepcin a la Segunda IA 53,8 a 53,2 a
% Preez acumulada 70,4 a 76,6 a

Tercera Ronda
N 49 54
% concepcin a la Tercera IA 32,6 a 44,4 b
% Preez acumulada 75,7 c 84,8 d
Porcentajes con distintas letras difieren. ab P<0,05; cd P<0.1

Realizamos un trabajo (20) con el objetivo de evaluar la eficiencia


reproductiva en una explotacin comercial de leche, mediante la implementacin de
la sincronizacin de celo con dispositivos con P4 e IATF. El estudio se realiz en un
establecimiento de la provincia de Santa Fe, Argentina, el cual cuenta con 90 vacas

177 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

en ordee, con una condicin corporal (CC) de 2,5 en promedio al inicio del
experimento. Se utilizaron vacas de una produccin entre 18 y 20 litros / da y que
pesaron entre 480 y 550 kg. Las vacas fueron divididas en dos grupos, las del Grupo
Control (n=40) recibieron el tratamiento convencional de deteccin de celo (DC)
dos veces al da a partir de los 42 das del periodo de espera voluntaria (PEV) y
fueron IA entre las 8 y 12 h de observado el celo. Las vacas del Grupo DIB (n=50)
recibieron en el da 42 del PEV el siguiente tratamiento: Da 0: un dispositivo
intravaginal DIB (1g de P4, Syntex, Argentina) junto con una dosis de 2 mg de
benzoato de estradiol (EB, Syntex); Da 8: se retiraron los DIB y aplico una dosis de
500 g de cloprostenol (Estroplan, Syntex); Da 9: 1 mg de EB im; Da 10: (52 h
luego de retirado el DIB) IATF; Da 23: se reinsert un DIB usado a todas las vacas
junto con 1 mg de EB; Da 30: se retir el DIB; Da 31: 0,5 mg de EB im; Da 31 al
35: DC y se reinseminaron los retornos; Da 42: se realiz palpacin rectal para el
diagnstico de preez de la primera IATF; Da 46: se reinsert un DIB reusado por
tercera vez a todas las vacas vacas a la palpacin y las que retornaron al celo entre
los das 31 y 35 Da 53: se retir el DIB; Da 54: 0,5 mg de EB im y Da 54 al 58:
DC y se reinseminaron los retornos. Las tasas de concepcin fueron comparados por
Chi cuadrado y los intervalos por Test T de Student. Como puede observarse en la
Tabla 31, se obtuvo un mayor porcentaje de concepcin en la primera IA en el Grupo
DIB que en el Grupo Control. No hubo diferencias en los porcentajes de preez
finales entre ambos grupos ni entre el intervalo parto 1 IA. Sin embargo, el intervalo
parto-concepcin y parto-parto fue menor en el Grupo DIB que en el Grupo Control
(Tabla 31).

Tabla 31. Efecto de la utilizacin de un programa de IATF con resincronizacin de los retornos en un
tambo comercial.

Grupo DIB Grupo Control Valor P


N 50 40
% concepcin 1 IA 56% 25% 0,0031
% concepcin 2 IA 75% 67% 0,647
% concepcin 3 IA 60% 60% 0,509
% preez final 86% 90% 0,5648
Int. Parto 1 IA (d) 65,2 70,3 0,135
Int. Parto Concepcin (d) 86,3 111,7 0,0088
Int. Parto Parto (d) 365,6 393,7 0,0037

Los resultados de experimento sugieren que la programacin de la IA con


dispositivos con P4 y EB permiten un ptimo manejo reproductivo del tambo,
restringiendo la necesidad de DC a perodos de tiempo cortos y preestablecidos.

Con el objetivo de evaluar el efecto de la utilizacin de 0,5 mg de EB al


momento de retirado un CIDR-B en un protocolo de resincronizacin en vacas de
carne, se utilizaron 98 vacas Brangus y Braford con cra. Trece das luego de la IATF
todas las vacas recibieron un CIDR de segundo uso junto con 1 mg de EB, el cual se
mantuvo por 7 das. Al da siguiente de retirado el CIDR (Da 20) las vacas se
dividieron en dos grupos, uno de los cuales no recibi ningn tratamiento (Grupo
CIDR+EB 13) y el otro grupo recibi 0,5 mg de EB a las 24 h de retirado el CIDR
(Grupo CIDR+EB 13 y 20). Las vacas se observaron para detectar celo por 5 das, a

Unidad 4 178
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

partir del momento de retirado el CIDR y se IA 8 a 12 h ms tarde. El diagnstico de


preez se realiz, por medio de ultrasonografa, a los 28 das de finalizado el perodo
de deteccin de celos e IA.

No hubo diferencias entre los grupos en el porcentaje de preez a primo IA


(Tabla 32), pero hubo una tendencia (P=0,0831) a un mayor porcentaje de retorno en
las vacas tratadas con EB en el momento de sacar el CIDR. Sin embargo, esas
diferencias no afectaron el porcentaje de preez final debido a una aparente menor
concepcin (no significativa) en la segunda IA en las vacas resincronizadas con
CIDR + 1 mg EB en el Da 13 y 0,5 mg EB en el da de la remocin del CIDR (Da
20).

Tabla 32. Re-sincronizacin en Vacas tratadas con 0,5 mg de EB al momento de retirar el CIDR-B
en la resincronizacin de celos.

CIDR+EB 13 y 20 CIDR+EB 13
47 51
Concepcin a la 1 I.A. 24/47 (51,06%) 29/51 (56,86%)
Retornos (sobre vacas 1 I.A.) 19/23 (82,61%) a 13/22 (59,09%) b
Concepcin a la 2 I.A. 8 (42,11%) 7 (53,85%)
Preez Final 32/47 (68,09%) 36/51 (70,59%)
ab
Porcentajes en la misma fila con distinta letra tienden a ser diferentes (P=0,819).

El mayor retorno encontrado en el grupo que recibi EB en el Da 20


concuerda con los datos de la literatura. Sin embargo la menor preez obtenida en
este grupo en la segunda IA coincide con datos recientemente reportados y pensamos
debern ser ms estudiados en el futuro, utilizando un mayor nmero de animales.
Por lo tanto, en vacas de carne no reconocemos el uso de 0,5 y EB en el da 21 y
nos limitamos al uso de 1 mg de EB en el da 13 cuando se inserta el CIDR.

El tratamiento con estradiol puede ser negativo si lo utilizamos en vaquillonas


de carne (12). En la resincronizacin se utilizaron 97 vaquillonas Hereford de 15
meses, con un peso de 270 a 300 Kg y una condicin corporal de 3 a 3,5 (Escala 1-
5). El ciclo de las vaquillonas fue sincronizado mediante un dispositivo intravaginal
conteniendo progesterona (DIV-B, Syntex, Argentina) durante 7 das. A su retirada
se aplic 500g de cloprostenol im (Estroplan, Syntex, Argentina) a cada vaca y en
el Da 8, recibieron 1mg de EB im y fueron IATF 52 a 56 h luego de retirado el DIV-
B (Da 0). Trece das despus de la IATF las vaquillonas fueron subdivididas en dos
grupos. La mitad (Grupo Resincronizacin) recibi el DIV-B previamente utilizado y
1 mg de EB im. En el Da 20 se retiraron los dispositivos y en el Da 21 se inyect
0,5 mg de EB im. Se detect celo desde el Da 21 al 25. La otra mitad de los
animales (Grupo Control) no recibieron ningn tratamiento y se detect celo desde el
Da 17 a 25. Todas las vaquillonas fueron IA 8 a 12 h despus de detectado el celo.
Se realiz el diagnstico de preez por medio de ultrasonografa transrectal 30 das
despus de la segunda IA, con el objetivo de determinar el porcentaje de preez en la
sincronizacin y en la re-sincronizacin. Los datos fueron analizados por regresin
logstica (Infostat, 1999). Se encontr un mayor nmero de animales que retornaron
al estro en el Grupo de Resincronizacin que en el Grupo Control (46,9% vs 6,2%
respectivamente; P<0,05). La distribucin del retorno al celo se present de la
179 Unidad 4
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

siguiente manera: Grupo Control, 2 vaquillonas en el Da 22 PM y 1 en el Da 23


AM; con respecto al Grupo de resincronizacin, 3 en el Da 22 PM, 17 en el Da 23
AM y 3 en el Da 23 PM. Resultaron preadas 1/3 (33,3%) en el Grupo Control y
16/23 (69,5%) en el Grupo de resincronizacin (P<0,05). Como puede observarse en
la Tabla 33, no hubo diferencias significativas en el porcentaje de preez final, pero
el porcentaje de preez a primo IATF fue menor (P<0,05) en el Grupo de
Resincronizacin.

Tabla 33. Porcentajes de preez en vaquillonas sincronizadas con DIV-B (Syntex, Argentina) y
resincronizadas utilizando el mismo dispositivo entre los Das 13 a 20 y benzoato de
estradiol im en los das 13 y 21.

Grupo Control Grupo de Resincronizacin


% de preez a 1 IA 30/49 (61.2%)a 20/48 (41.6%)b
% de preez final 31/49 (63.2 %)a 36/48 (75.0%)a
ab
Porcentajes con diferentes superndices difieren (P<0,05)

El menor porcentaje de preez obtenido a la IATF en el Grupo Resincrizacin


puede deberse a un efecto luteoltico por la aplicacin de 1 mg de EB el da 13 pos
IATF y luego 0,5 mg en el Da 20 pos IATF.

Con el objetivo de evaluar el impacto de una dosis menor de EB el los programas


de resincronizacin de celos en vaquillonas realizamos otro experimento el cual se
utilizaron 121 vaquillonas cruza ceb (22 a 24 meses de edad). Trece das luego de la
IATF las vaquillonas recibieron un CIDR de segundo uso por 7 das. En ese momento
las vaquillonas de cada Grupo del Experimento 1 se subdividieron al azar para recibir
0,5 mg de EB (Grupo CIDR+0,5 EB 13) o un placebo (Grupo CIDR solo). Las
vaquillonas fueron observadas para detectar celo por 5 das a partir del momento de
retirado el CIDR (Da 20 pos IATF) y fueron IA 8 a 12 h ms tarde. El diagnstico de
preez se realiz por medio de ultrasonografa a los 28 das de finalizado el perodo de
deteccin de celos e IA y los datos se analizaron como en el experimento anterior.

Como se puede ver en la Tabla 34, no hubo diferencias significativas entre los
grupos en los ndices de concepcin a la primera y segunda IA. Tampoco hubo
diferencias en el porcentaje de vaquillonas vacas a la primera IA que retornaron al
celo luego de la re-sincronizacin.

Tabla 34. Re-sincronizacin en Vaquillonas tratadas con 0,5 mg de EB y un CIDR-B de segundo uso.

CIDR+0,5 EB
CIDR solo
Da 13
n 60 61
Concepcin a la 1 I.A. 35/60 (58,33%) 39/61 (63,93%)
Retornos (sobre vacas 1 I.A.) 18/25 (72,00%) 15/22 (68,18%)
Concepcin a la 2 I.A. 11 (61,11%) 10 (66,67%)
Preez Final 46/60 (76,67%) 49/61 (80,33%)
Los valores no difieren significativamente (P = 0,6240)

Unidad 4 180
SINCRONIZACIN DE CELOS E INSEMINACIN ARTIFICIAL - IRAC - 2004

Basndose en los resultados, podemos concluir que la resincronizacin de los


retornos al estro utilizando progestgenos y EB en vacas, es una herramienta que nos
permite IA gran parte del rodeo en un perodo de 25 das, desde la primera IA, con una
mnima cantidad de encierres y con solo 3 o 4 das de deteccin de celos. Esto permite
reducir considerablemente la cantidad y disponibilidad de personal necesario para
inseminar un lote de animales. Otra de las ventajas del sistema consiste en la sincrona
con la que se producirn los partos, lo cual facilita an ms el manejo. De esta manera
se obtiene un gran nmero de animales inseminados por ao con el consecuente
progreso gentico que esto provoca y se reduce considerablemente el nmero de toros
necesarios anualmente. En vaquillonas es necesario realizar mas estudios a cerca del
efecto luteoltico del EB. Por lo tanto por ahora, en esta categora, solo recomendamos
el uso de CIDR entre los das 13 y 20.

Resumen y conclusiones

Los trabajos presentados en esta parte indican que para obtener una mxima
fertilidad en los esquemas de IA a tiempo fijo es necesario controlar: el CL, el
desarrollo folicular y la ovulacin. Para controlar la fase luteal se puede inducir la
regresin del CL con PGF o estrgenos, o prolongarla mediante dispositivos con
liberacin lenta de progestgenos. Para controlar el desarrollo folicular se puede
utilizar estrgenos ms progestgenos que suprimen, mediante un feed-back negativo
sobre las gonadotrofinas, el desarrollo folicular y resulta en el comienzo de una
nueva onda folicular. Los trabajos presentados demuestran que los progestgenos
(CIDR-B, PRID, DI-B, Crestar o SMB) son efectivos para sincronizar el celo en
vaquillonas y vacas. Los tratamientos utilizando EB+P4 o E-17+P4 o EV+N
resultan en la sincronizacin de una nueva onda folicular. La administracin de 1 mg
EB im a las 24 h pos CIDR-B resulta en la ovulacin sincrnica del folculo
dominante y aceptables ndices de preez a la IA a tiempo fijo. Alternativamente, se
puede usar GnRH en el momento de la IA y/o utilizar tratamientos con eCG que
estimulan el desarrollo final del folculo dominante en vacas posparto. Los
conocimientos desarrollados en dinmica folicular y luteal tambin han permitido
desarrollar tratamientos que posibilitan la re-sincronizacin de los animales no preados
luego de la primera IA. Esto puede realizarse con la reinsercin del dispositivo de
progesterona a los 13 o 16 das pos IA y remocin a los 21 das despus de la IA. Todos
estos trabajos demuestran que es posible, mediante la manipulacin del desarrollo
folicular y de la fase luteal, obtener tratamientos efectivos de sincronizacin de celos
y ovulacin para la IA a tiempo fijo. Toda esta batera de tratamientos es una
herramienta muy til en los programas reproductivos de rodeos de carne y leche.

Prepar el texto: Gabriel A. B Lucas Cutaia

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