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MTODOS MODERNOS DE ANLISIS

UNIDAD 3. SEPARACIONES CROMATOGRFICAS


Prctica 3: Cromatografa en papel

OBJETIVO: Identificar las variables experimentales que permiten la optimizacin de un


anlisis cromatogrfico.

INTRODUCCIN

FUNDAMENTO TERICO
Investigar sobre el fundamento de la cromatografa en papel.

MATERIAL, REACTIVOS, SOLUCIONES Y EQUIPO

MATERIAL 1 micropipeta de 10 l
Bolsa de chocolates M&Ms Puntas para micropipeta de 5 ml y 10 l
5 vasos de precipitados de 50 ml 1 Lpiz
1 bolsa de plstico de 15 x 20 cm Tijeras
1 pinzas de diseccin 1 Regla
1 vaso de precipitados de 500 ml
Papel cromatogrfico REACTIVOS
1 micropipeta de 5 ml Cloruro de sodio al 5%

DESARROLLO EXPERIMENTAL

1. Preparar las 5 muestras problema poniendo 10 grageas de M&Ms de un solo


color en cada vaso de precipitados de 50 ml y aadir con una pipeta de agua
destilada, de modo que cubra las grageas totalmente. Cuando todo el color se haya
disuelto, sacar las grageas con unas pinzas para evitar que la capa protectora de
chocolate se disuelva, y en seguida agitar la solucin para uniformarla.
2. Preparar la cmara cromatogrfica; para ello aadir al vaso de precipitados grande
10 ml de la solucin de cloruro de sodio con una pipeta, colocando su punta en el
fondo del centro del vaso para evitar salpicaduras en la pared interior; terminado
esto, cubrir el vaso con la bolsa de plstico.
3. Cortar un rectngulo de papel filtro de 10 x 20 cm y trazar con lpiz una lnea recta
a una distancia de 1 cm de una de las orillas ms largas.
4. Marcar con lpiz cinco X sobre una de las lneas trazadas, y cuidar que dichas
marcas queden bien distribuidas.
5. Las muestras de colorante a estudiar debern aplicarse sobre el papel en el lado
opuesto al sitio donde se marcaron las X; esto se hace con el objeto de que el
polvo del lpiz no contamine las muestras.
6. Con una micropipeta tomar una pequea cantidad de una de las muestras
problema y, con sumo cuidado, depositar en una de las X (lado opuesto) una gota
pequea de manera que se forme un crculo colorido con un dimetro no mayor de
5 mm.
7. Repetir esta operacin con cada muestra problema usando una punta diferente
para cada una; dejar secar y repetir el proceso para aumentar la concentracin de
cada gota (intensidad de la coloracin).
8. Formar con el papel filtro un cilindro de manera que las muestras queden en su
interior; para formarlo, se debe enrollar el papel y dejando las muestras en la parte
inferior, introducir el cilindro con mucho cuidado dentro de la cmara
cromatogrfica. En seguida tapar el vaso con el plstico.
9. Una vez colocado el cilindro, cuando las bandas coloridas ya no asciendan ms,
destapar el vaso, sacar el cromatograma con cuidado.
10. Marque el nivel del disolvente con un lpiz y dejar secar el cilindro extendido sobre
una hoja limpia.
11. Una vez seco, medir las distancias para calcular el RF de cada colorante con la
siguiente frmula:

=

Donde:
X= distancia media desde el origen hasta el centro de la mancha en centmetros
S = distancia desde el origen hasta el frente del disolvente en centmetros

12. Anotar las observaciones y los resultados del experimento en una tabla donde
indique el colorante, dimetro de muestra (cm), distancia del cada muestra medida
desde el origen hasta el centro dela mancha (cm), la distancia recorrida por el
disolvente y RF. Calcule, midiendo desde la parte superior de la mancha, el RF de
cada una de las manchas separadas. Incluya sus cromatogramas en el reporte.

ESQUEMAS O IMGENES
Agregue en este segmento los esquemas o imgenes correctamente descritas sobre el
procedimiento y resultados obtenidos en la prctica.

RESULTADOS
Presente en este segmento la tabla de resultados obtenidos.
OBSERVACIONES

CUESTIONARIO
Investiga la importancia y aplicacin de los anlisis cromatogrficos en la industria
alimentaria.
CONCLUSIONES

BIBLIOGRAFA