Microbiologa

Prctica 2: Columna de Winogradsky

INTRODUCCIN
Bacterias y Archaeas (procariotas), exhiben una diversidad metablica tan sorprendente
que difcilmente podremos encontrarla en animales, plantas, hongos u otros organismos
"superiores" (eucariotas). Los procariotas, literalmente, mantienen su sistema biolgico
utilizando y reciclando, una y otra vez, todos los elementos minerales necesarios para su
soporte vital.

Toda la vida sobre la Tierra podra clasificarse en funcin de las fuentes de carbono y
energa de las que depende cada organismo: la energa puede obtenerse de reacciones
luminosas (fottrofos) o de oxidaciones qumicas (a partir de compuestos orgnicos o
inorgnicos); el carbono para la sntesis celular puede obtenerse del CO2 (auttrofos) o de
compuestos orgnicos preformados (hetertrofos). Combinando estas categoras
tendremos las cuatro estrategias bsicas de los seres vivos: fotoauttrofos (plantas),
quimiohetertrofos (animales, hongos), fotohetertrofos y quimioauttrofos. Slo
entre las bacterias se pueden encontrar estas cuatro estrategias bsicas de la vida.

Dos famosos microbilogos fueron pioneros en el estudio de estos procesos: Sergei

Winogradsky (1856- 1953) y Martinus Willen Beijerinck (1851-1931). En contraste con
los estudios sobre cultivos puros de otros microbilogos como Louis Pasteur o Robert
Koch, estos investigadores se centraron en estudiar las relaciones entre diferentes
tipos de microorganismos en comunidades mixtas.

La columna de Winogradsky es una

demostracin clsica de cmo los
microorganismos ocupan
microespacios altamente especficos
de acuerdo con sus tolerancias
medioambientales y sus necesidades
vitales (requerimientos de carbono y
energa) y que, adems, ilustra cmo
diferentes microorganismos desarrollan
sus ciclos, y la interdependencia que
llega a existir entre ellos (las actividades
de un microorganismo permite crecer a
otro microorganismo y viceversa). Esta
columna es un sistema completo y
autnomo de reciclamiento,
mantenido slo por la luz solar.

La columna aqu descrita se enfoca

sobre todo al ciclo del azufre, pero se
podra desarrollar igualmente la
reproduccin de otros ciclos
biogeoqumicos equivalentes para
nitrgeno, carbono y otros elementos.
Procedimiento para el montaje de la columna
El montaje consta de un cilindro ancho de cristal que se llena con lodos ricos en
materia orgnica hasta 1/3 de su volumen.

Se aaden restos orgnicos de diferentes orgenes (tiras de papel de peridico, aserrn,

restos de races de plantas, carne picada, etc).

Se aade a la mezcla un suplemento compuesto de CaSO4 y CaCO3 (que actan como

fuente de sulfato y tampn respectivamente).

La mezcla, debe estar bien empaquetada para que no queden burbujas de aire.
Se cubre con agua procedente de un lago, estanque, acequia (o alguna fuente similar).
Se cubre con papel de aluminio y se deja en una ventana donde reciba la luz del sol.

Microbiologa de la columna de Winogradsky

Entre cuatro y seis semanas despus de su instalacin, la columna debe estabilizarse en
tres ambientes bsicos distintos en los que se desarrollarn comunidades bacterianas
especficas en funcin de sus requisitos medioambientales.

Zona Anaerobia
Hay dos tipos de
organismos que
pueden crecer en
condiciones
anaerobias: los que
fermentan la
materia orgnica o
los que realizan la
r e s p i r a c i n
anaerobia.

En el nivel ms bajo de la columna, en un ambiente con alta concentracin de H2S,

aparecen varios grupos diferentes de bacterias:
 En el fondo de la columna, dependiendo del tipo de barro utilizado, puede aparecer una
capa de color rosado formada por bacterias prpura del azufre portadoras de vesculas
de gas. Una especie caracterstica es Amoebobacter.
En esta misma zona, en condiciones estrictamente anaerobias al cabo de unas
semanas, y utilizando la carga de celulosa aportada por los restos de papel
incorporados en el sedimento como fuente primaria para su metabolismo, aparecen las
bacterias del gnero Clostridium.
Un poco por encima, las bacterias reductoras del azufre, que se visualizan como una
profunda capa negra y estn representadas por Desulfovibrio, pueden utilizar estos
subproductos de la fermentacin para su respiracin anaerobia, usando sulfato, u otras
formas parcialmente oxidadas de azufre como el tiosulfato, generando grandes
cantidades de H2S en el proceso. Este H2S reaccionar con cualquier hierro presente
en el sedimento, produciendo sulfuro ferroso, que da color negro. Es por esto que los
sedimentos acuticos son frecuentemente negros.

Sin embargo, no todo el H2S es utilizado. Ciertas cantidades difunde hacia arriba a lo
largo de la columna de agua y son utilizados por otros organismos que crecen en las
zonas superiores. Este crecimiento se visualiza bajo la forma de dos bandas estrechas,
brillantemente coloreadas, inmediatamente por encima del sedimento:
En una primera franja, las bacterias verdes del azufre (como Chlorobium) procesan los
sulfatos a azufre y aparecen en una franja verdosa. En otras zonas cercanas, bacterias
como Gallionella procesan el Hierro formando una capa negra que se forma
justamente por debajo de la anterior.
Un poco ms arriba, algo ms alejadas por tanto de las altas concentraciones de
sulfdrico se desarrolla una zona de bacterias prpuras del azufre, como Chromatium,
caracterizada por su color rojo-prpura.
Un poco por encima de esta zona nos encontramos una franja de bacterias prpuras no
del azufre, como Rhodospirillum y Rhodopseudomonas, que adquiere un color rojo-
anaranjado. Su mayor o menor abundancia depender de la cantidad de sulfhdrico que
se haya producido y de la cantidad que, no utilizada por otros organismos, difunda
hacia arriba, ya que su presencia inhibe a estas bacterias. Son anaerobios
fotoorganotrofos que slo pueden realizar la fotosntesis en presencia de una fuente de
carbono orgnico.

Zona aerobia
La parte superior de la columna de
agua puede contener abundantes
poblaciones de bacterias de
diferentes tipos. Son organismos
aerobios que se encuentran
habitualmente en los hbitats
acuticos ricos en materia
orgnica (estanques poco
profundos, arroyos contaminados,
etc).
 Suelen ser flagelados, lo que les permite moverse y establecerse en nuevas reas.
Puede desarrollarse tambin microorganismos fototrficos variados procedentes
directamente del agua o del barro utilizados originalmente en el montaje.
En las zonas superiores pueden crecer tambin cianobacterias fotosintticas, lo que
se visualizara cmo un tapete de csped de color verde. stas bacterias se
caracterizan por ser las nicas que realizan una fotosntesis similar a la de las plantas.

Cuestionario
1. Qu es un medio de cultivo?
2. Cules son las diferentes condiciones de crecimiento que se generaron dentro de
la columna de Winogradsky?
3. Qu son las eubacterias?
4. Qu son las arqueobacterias?
5. Cules son las diferencias entre las eubacterias y las arqueobacterias?
6. En qu nivel taxonmico se encuentra las eubacterias y las arqueobacterias?
7. Mencione 3 ejemplos de cada grupo (eubacterias y arqueobacterias)

ANEXO: Teora Endosimbitica

Hay evidencias plausibles de que los cloroplastos de las plantas proceden de

cianobacterias ancestrales que se establecieron como simbiontes dentro de clulas de
algn eucariota primitivo. De forma paralela, hay tambin evidencias igualmente fuertes
de que las mitocondrias de los eucariotas actuales se derivaron de bacterias prpuras
ancestrales por un sistema similar de endosimbiosis.