UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS

ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE MICROBIOLOGA Y
PARASITOLOGA

PROYECTO DE INVESTIGACIN

SEGUNDO ENRIQUE MORENO GAMBOA

DALIA BRISSET VALQUI CHVEZ

TRUJILLO- PER
2017

1
II. GENERALIDADES:
1. Titulo:
Efecto de Moringa olefera en mejora de la calidad bacteriolgica del agua de
la quebrada el Higuern
2. Autor (es):

Segundo Enrique, Moreno Gamboa

Dalia Brisset, Valqui Chvez
Alumnos

Escuela Acadmico Profesional de Microbiologa y Parasitologa. Facultad de

Ciencias Biolgicas.

E-MAIL:
brisset-104@hotmail.com

3. Asesor

Juan Jos Guevara Gonzales

Doctor

Departamento de Microbiologa y Parasitologa

jjdguevara@unitru.edu.pe

4. Tipo de investigacin:

Investigacin Aplicada

Explicativa Commented [NC1]: Utilizar subttulos del formato

5. Localidad e institucin de donde se desarrollar el proyecto:

Localidad:
Distrito de TrujilloLa Libertad.
Institucin:
Universidad Nacional de Trujillo. Facultad de Ciencias Biolgicas. Departamento
de Microbiologa y Parasitologa. Seccin de Laboratorio de
Av. Juan Pablo II s/n Trujillo La Libertad
2
 6. Duracin de la ejecucin del proyecto:
- 8 meses
- 25 julio - 28 febrero

7. Cronograma de trabajo:
N Actividades Responsable 2017 2018

Julio- Setiembre Octubre Noviembre Diciembre Enero Febrero

Agosto
1 Elaboracin Investigador(es)
del proyecto
Asesor
de
investigacin
2 Recoleccin Investigador(es)
de datos

3 Anlisis de Investigador(es)
datos Asesor

4 Redaccin Investigador(es)
del informe
Asesor
cientfico

5 Sustentacin Investigador(es)

8. Recursos:

8.1. Disponible:

8.1.1.1. Personal:
Investigadores, asesor, personal tcnico

3
 8.1.1.2. Bienes:

8.1.1.2.1. De consumo
Material biolgico:
Agua de la Quebrada el Higuern recolectada del lugar de
Mocan-Casa Grande.
- 3kg de semilla de Moringa olefera

Material de vidrio

Descripcin Cantidad

Mortero 01unid.

Beacker de 100 ml 01unid.

Beacker de 600 ml 01 unid.

Pinzas Fisher 02 unid.

8.1.1.2.2. De inversin
Equipos e instrumentos
- Autoclave American 01 unid.
- Balanza digital 01 unid.
- Estufa esterilizadora Ecocell 01 unid.
- Cocina elctrica s/m 01 unid.
- Sistema soxhlet 01 unid.
- Soporte Universal 01 unid.
- Rejilla de Asbesto 01 unid.
- Laptop Lenovo 01 unid.
- Impresora Brother 01 unid.
9. Presupuesto
2.3.15.12. Papelera en general , tiles y material de oficina

Costo unitario (S/.) Costo total

4
Artculo Marca Cantidad (S/.)

Cuaderno Arco Iris 01 15.00 15.00

empastado

Papel bond A4 Estudio 1millar 13.00 26.00

Archivador Artesco 02 10.00 20.00

Lapiceros Faber Castell 5 2.50 12.50

Plumn Marcador Artesco 5 3.00 15.00

Corrector Faber Castell 3 4.00 12.00

SUBTOTAL

2.3.15.31. Aseo , limpieza y cocina

Costo unitario Costo total

(S/.)
Artculo Marca Cantidad (S/.)

Detergente Ariel (1k) 04 7.00 28.00

Jabn germicida Aval 04 5.00 20.00

Lavavajilla 500g Sapolio 04 3.50 14.00

Desinfectante Limpia todo 03 7.00 21.00

(1L)

Leja Clorox (572ml) 05 2.00 10.00

Papel toalla Elite (metro) 05 4.00 20.00

5
 SUBTOTAL

2.3.18.21. Material , insumo , instrumental y accesorio mdicos , quirrgicos

,odontolgicos y de laboratorio
Costo
Costo total
Material Marca Presentacin Cantidad unitario (S/.)
(S/.)
Caja de 100
Gorritos Dago 1 14.00 14.00
unidades

Caja de 100
Guantes Cudimex 1 17.00 17.00
unidades

Caja de 40
Mascarilla Bioprotection 1 10.00 10.00
unidades

Mandil de 5
Sin Marca Unidad personal 0.00 0.00
laboratorio

SUB TOTAL 41

2.3.21.299. Movilidad local

Tipo de Servicio N de personas Costo Total

Movilidad local 2 20.00 40.00

SUB TOTAL 40.00

2.3.27. Servicios profesionales y tcnicos (Servicio de terceros)

Tipo de Servicio Total (S/.)

Procesamiento estadstico de datos 100.00

Impresiones 40.00

6
 Fotocopias 20.00

Impresin de trabajo 50.00

Empastado de informe de Tesis 110.00

Impresin de fotografas 30.00

SUB TOTAL 359.00

Resumen de Presupuesto

Tipo de Servicio Cantidad Total (S/.)

2.3.15.12. Papelera en general , tiles y materiales de oficina

2.3.15.31.Aseo , limpieza y cocina

2.3.18.21.Material , insumos , instrumental y accesorios mdicos

, quirrgicos , odontolgicos y de laboratorio

2.3.21.299. Movilidad Local

2.3.27. Servicios profesionales y tcnicos (Servicio de terceros) 359.00

TOTAL

Financiamiento

Con recursos propios:

Autofinanciamiento, en total se gastara alrededor de s/ 00 nuevos soles solo en
recursos no disponibles.
Con recursos de la UNT:
Laboratorio de , del Departamento de Microbiologa y Parasitologa
de la Universidad Nacional de Trujillo.

7
 PLAN DE INVESTIGACIN
1. Antecedentes

Desde tiempo antiguos ,la efectividad de las semillas de M. olefera para la remocin de materias
en suspensin contenidas en aguas turbias ha sido convincentemente demostrada 1 Adems, se ha
comprobado que la moringa no solo tiene propiedades coagulantes, sino tambin accin
bactericida2,lo que avala su uso en la potabilizacin de agua.

El uso de M. olefera para el control de diversas infecciones provocadas por microorganismos es

bien conocido, y en aos recientes se han generado resultados cientficos que confirman su
actividad antimicrobiana. Estudios in vitro han comprobado la actividad de diferentes partes de la
planta sobre los microorganismos patgenos.3,4. El principal ingrediente responsable de dicha
actividad es el 4-(4-O-acetil- -L-ramnopiranosiloxi)-isotiocionato de bencilo,.5

Moringa olefera tambin puede ser til en el control de vectores en aguas estancadas. La actividad
larvicida se atribuye a la lecitina hidrosoluble contenida en los extractos, la cual promueve el
retardo en el crecimiento de las larvas y su mortalidad 6

La semilla de M. olefera tiene la capacidad de eliminar iones de calcio, magnesio y otros cationes
divalentes 7. Esa propiedad se descubri en un estudio de clarificacin que revel una reduccin
del 60-70 % de la dureza del agua despus de coagulacin y dos horas de sedimentacin. 8
El polvo de la semilla bien triturada, al mezclarse con el agua, produce protenas solubles con una
carga neta positiva . La dosis de soluciones (por lo general del 1-3%) acta como un polielctrolito
catinico durante el tratamiento .9
Las semillas de Moringa oleifera en diversas formas ya sea extradas (en polvo) o purificadas
(mezcladas con agua destilada) han probado ser eficaz en remover material suspendido (materia
orgnica) 10
Anteriormete se han utilizado elementos naturales para la remocin de
turbidez de las aguas para consumo humano, lo que avala su uso en la potabilizacin de agua. En
una investigacin realizada con aguas turbias del Nilo, en dos horas de tratamiento se logr hasta
un 99,5 % de reduccin de la turbidez y la eliminacin de hasta el 99,99 % de las bacterias 11,12
8
En la Universidad Libre de Bogot Sede Bosque Popular se realiz un proyecto de grado titulado
Evaluacin de la semillas de Moringa olefera como coagulante natural para el tratamiento de
aguas en el departamento del meta, en donde se determinaron que las condiciones ms adecuadas
para para eliminar finalmente de una forma eficaz la turbiedad del agua del Rio Guatiquia 13

En Honduras en el ao 2010, se realiz un estudio en donde se cita que una de las limitantes en el
consumo de agua en zonas rurales a nivel mundial es la presencia de partculas en suspensin que
se reflejan en turbiedades medias y elevadas. Se evaluaron alternativas de bajo costo en extraccin
del coagulante de la semilla de Moringa olefera para el tratamiento de aguas con turbidez en un
mbito de 50- 100 UNT. Se realizaron ensayos con tratamientos para evaluar la adicin de cloruro
de sodio (NaCl) y la cascara de la semilla, en una dosis de 25 mL/L que resulta en una eficiencia
de 69% 14

En Brasil en el ao 2009, se determin la eficiencia de dos coagulantes, el sulfato de aluminio y

semillas de Moringa olefera, para remover de la turbiedad en aguas con baja turbidez. La
dosificacin aproximada fue de 25 gramos de semilla por cada litro de agua realizando pruebas de
test de jarras y determinando los posibles mecanismos que se pueden ver involucrados en el
proceso de la coagulacin 15

En la Universidad Industrial de Santander se realiz una prueba de jarras con agua tomada del Rio
Frio en zona urbana del municipio de Floridablanca, para verificar la capacidad coagulante de la
Moringa Olefera, tomando la turbidez inicial y la turbidez final de la prueba para hallar el
porcentaje de remocin, siendo as los datos iniciales fueron de 689 NTU y pH de 7,54, con lo cual
se obtuvo un porcentaje de remocin de 59,4% con una dosis de 2,5ml de solucin por litro de
muestra 16

Un estudio dirigido a examinar los efectos del sulfato de aluminio en unin con la Moringa olefera
como coadyudante de la coagulacin enfocado en la eliminacin de turbiedad, dureza y bacterias,
se desarrollaron pruebas, con el cual se observ que la mejor eliminacin se realiz con un pH
entre 7 y 7,5 para todas las turbiedades, con una eficiencia de eliminacin de turbidez entre 80 %
a 99 %. Se pudo concluir que la Moringa olefera como coadyudante de la coagulacin se puede
utilizar para el tratamiento de agua potable sin el riesgo de liberacin de nutrientes 17,18.

9
 2. Justificacin
La evaluacin para el tratamiento de aguas es de gran importancia en el campo de la ingeniera
ambiental y sanitaria. Encontrar sustancias en la naturaleza que provean remociones similares
a las sales metlicas tradicionalmente usadas, que adems sean de fcil adquisicin y bajo costo
motiva la investigacin en el rea del tratamiento de aguas naturales19

La investigacin en el uso de alternativas naturales ha tenido un gran desarrollo en los ltimos

aos, llegando a obtener altas remociones con bajas dosis de sustancias de origen natural 19.

Dentro de este material vegetal se encuentra la Moringa olefera, la cual ha tenido un importante
aumento en su produccin en el pas en los ltimos cinco aos 20 ,haciendo que los costos de la
misma disminuyan a medida que la demanda sea suplida por el mercado creciente.

Teniendo en cuenta adems que la moringa es biodegradable, no es txica, no afecta el pH ni

la conductividad del agua, y el lodo producido por la coagulacin es inocuo y poco voluminoso,
puede considerarse un sustituto viable del alumbre. Aunque la no toxicidad de las semillas est
confirmada, 22

Por ello ,ste trabajo de investigacin busca adquirir conocimiento sobre el efecto del extracto
de la semilla de Moringa olefera en bacterias indicadoras de contaminacin y la reduccin de
la materia orgnica.

3. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Cul es el efecto de las concentraciones de 80,130 y 180ppm del extracto de Moringa
olefera sobre la supervivencia de coliformes totales, coliformes fecales, carga
bacteriana heterotrfica y sobre la Demanda bioqumica de oxgeno del agua de la
quebrada El Higuern?

4. HIPTESIS:

Las concentraciones de 130 y 180ppm del extracto de Moringa oleifera reduce

significativamente la supervivencia de coliformes totales, coliformes fecales, carga

10
 bacteriana heterotrfica y la Demanda bioqumica de oxgeno; mientras que, la
concentracin de 80ppm no reduce significativamente.
. Variable independiente: La concentracin de 80,130 y 180ppm de extractos
vegetales de Moringa.
Variable dependiente: La supervivencia de coliformes totales, coliformes fecales
,bacterias heterotrficas as como tambin de DBO en el cuerpo de agua en estudio

5. Diseo de Experiencias:

Universo Muestral

reas de cultivo con Moringa olefera del centro poblado de Mocan,

Distrito Casa Grande, provincia Ascope.

Aguas procedente de la quebrada El Higuern ubicado en el centro poblado de

Mocan- La Libertad .

Muestra

3kg de semilla de Moringa olefera para el extracto

4 depsitos de agua,conteniendo 30L c/u de la quebrada el Higuern.

Unidad de Muestra:

1 ppm del extracto vegetal de Moringa olefera

1L de agua de la quebrada.

Muestreo

El tipo de muestreo que se usar para ejecutar la investigacin es el muestreo aleatorio

simple .En la recoleccin de la muestra se extraer volmenes de agua(30 L ) de cuatro
zonas diferentes de la laguna.

11
Estimulo creciente
Antes Despus

TESTIGO
Coliformes totales, Coliformes totales, coliformes
coliformes fecales, carga Estmulo nulo fecales, carga bacteriana
bacteriana heterotrfica, heterotrfica, cantidad de DBO
cantidad de DBO

Coliformes totales, Coliformes totales, coliformes

coliformes fecales, carga
bacteriana heterotrfica,
cantidad de DBO
Coliformes totales,
coliformes fecales, carga
bacteriana heterotrfica,
cantidad de DBO
Extracto 80 ppm fecales, carga bacteriana
heterotrfica, cantidad de DBO
Coliformes totales, coliformes
Extracto 130 ppm fecales, carga bacteriana
heterotrfica, cantidad de DBO

Coliformes totales,
Coliformes totales, coliformes
coliformes fecales, carga Extracto 180ppm fecales, carga bacteriana
bacteriana heterotrfica,
heterotrfica, cantidad de DBO
cantidad de DBO

6. Procedimiento:

6.1 Recoleccin de agua

Se recolectar agua de la quebrada El Higuern , en cuatro recipientes de 30 L de

capacidad, donde se almacenar 20 L de volumen en cada uno. Estos envases se
distribuirn : en un sistema control y tres sistemas prueba.

6.2 Recoleccin e identificacin taxonmica de la especie vegetal

Se recolectaran 3 kilogramos de semillas del distrito de Casa Grande de la provincia de

Ascope, regin La Libertad

12
Un ejemplar completo de la especie ser llevada al Herbarium Truxillense de la Universidad
Nacional de Trujillo, para su identificacin y verificacin taxonmica.

6.3 Seleccin, lavado y desinfeccin

Se seleccionarn las semillas que estn en buenas condiciones (sin ataque de hongos, insectos
o decoloradas). Luego se proceder a lavar con agua y se desinfectar con hipoclorito de
sodio a una concentracin de 80 ppm23.

6.4 Secado, molienda y tamizacin

Se quitar la cubierta de las semillas y se llevarn a secar en una estufa de conveccin
forzada (40 C). Una vez secadas, se triturarn en un molino hasta obtener un polvo fino,
que se tamizar a travs de un set de tamices.

6.5 Preparacin del extracto de las semillas de Moringa olefera

Se pesarn 10 g del polvo de semilla y se disolvern en 1 L. de solucin salina al 1% p/v).
Luego se mezclarn durante una hora con agitador magntico. Posteriormente se llevar a
centrifugar a 3500 rpm durante 10 minutos. Finalmente se filtrar al vaco con papel de filtro
whatman # 1. El filtrado ser el extracto salino coagulante. A partir de este extracto se
preparn las concentraciones de 80, 130 y 180 ppm. Luego se guardar en un frasco de vidrio
color mbar y en refrigeracin a 4C, hasta su posterior utilizacin. 23,24.

6.6. Extracto en la muestra de agua

6.7. Tres Anlisis de coliformes totales ,coliformes fecales, carga bacteriana heterotrfica
y cantidad de DBO

6.8. Eleccin del diseo estadstico

Elegimos trabajar el anlisis de varianza (ANOVA) , ya que sirva para comparar si las
diferentes concetraciones (80 , 130 y 180ppm) difieren en la reduccin de coliformes
totales, colifirmes fecales carga bacteriana heterotrfica y cantidad de DBO en tiempo de
24horas y 48horas.
13
7. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

1. Jahn S.Using Moringa seeds as coagulants in developing countries. :Water Works Assoc.
1988 ;80:43.

2. Folkard G, Sutherland J, Grant, W .Natural coagulants at pilot scale. In Water environment

and management Proceedings of the 18th WEDC Conference. (Ed. J. Pickford)
Loughborough University Press Kathmandu. 1992;51

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antimicrobial activity.1991;33;213.

4. Surez M, Entenza J , Doerries C.Expression of a plant-derived peptide harboring water

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5. Fahey J.Moringa oleifera: A review of the medical evidence for its nutritional .2005;1;5.

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9. Sutrland J. Oil and coagulant extraction from M.oleifera seed Draf report to te ODA,
London. 1993

10.Madsen M, Schlundt J.Effect of water coagulated by seeds of Moringa oleifera on

bacterial concentrations.1987;90:101.

11. Marquetotti A, Vieira M, Silva G, Arajo A,Fagundes M, Veit M . Use of Moringa

oleifera Seed as a Natural Adsorbent for Wastewater Treatment: Water Air Soil Pollution
Brazi. 2010;206: 273281.

12. Ghebremichael A. Moringa seed and pumice as alternative natural materials for drinking
water treatment, KTH Land and Water Resources Engineering. . 2004

14
13. Pedroza N. Evaluacin de la semillas de Moringa olefera como coagulante natural para
el tratamiento de aguas en el departamento del meta: Trabajo de grado para optar al ttulo de
Ingeniero Ambiental Universidad Libre, Bogot . 2012

14. Gmez K. Eficiencia del coagulante de la semilla de Moringa olefera en el tratamiento

de agua con baja turbidez. Proyecto especial presentado como requisito parcial para optar al
ttulo de Ingeniera en Desarrollo y Ambiente en el Grado Acadmico de Licenciatura.
Zamorano, Honduras. Diciembre, 2010

15. Patricia G, Raquel F, Joao B , Marco A. Estudio comparativo de sulfato de aluminio y

semillas de Moringa Olefera para la depuracin de aguas con baja turbiedad :Revista
informacin tecnolgica.Universidad Federal de Rio Grande del Norte.2009; 20(5): 3-12.

16. . Molano M. Las semillas de Moringa Olefera como alternativa de coagulante natural
para purificacin de agua. Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga. 2011.

17. Bina B, Mehdinejad M, Gunnel D, Guna, R, Nikaeen M ,Movahedian A. Effectiveness

of Moringa oleifera coagulant protein as natural coagulant aid in removal of turbidity and
bacteria from turbid waters. World Academy of Science Engineering and technology,.
2010:43

18 Pritchard M, Craven T, Mkandawire T, Edmonson A, ONeill J. A comparison between

Moringa oleifera and chemical coagulants in the purification of drinking wter Analternative
sustainable solution for developing countries. 2010.

19. Mendoza I,Fernndez N,Ettiene G,Daz A.Uso de la Moringa oleifera como coagulante
en la potabilizacin de las aguas.2000;8:235.

20. Muthuraman, G. Sasikala, S. Removal of turbidity from drinking water using natural
coagulants. Journal of Industrial and Engineering Chemistry. 2013

21 . Toro J, Martnez A, Carballo L , Rocha R. Valoracin de las propiedades nutricionales

de Moringa olefera en el departamento de Bolvar: Revista de Ciencias. 2011; 15: 23-30

22. Ndabigengesere A,Narasiah K, Talbot B.Active agents and mechanism of coagulation if

turbid waters using Moringa oleifera.1995;29:703.

23. Feria-Daz J , Polo-Corrales L , and Hernandez-Ramos E. Evaluation of coagulation

sludge from raw water treated with Moringa oleifera for agricultural use. Ingeniera e
Investigacin. 2016; 36(2):14-20.
15
24. Aldana A. Uso del extracto de la semilla de Moringa oleifera como coagulante natural
primario y ayudante de coagulacin en el tratamiento de agua para consumo humano.
Para optar el ttulo profesional de ingeniero sanitario. Universidad de Ingeniera. Lima-
Per. 2012

16
17