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UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

TASAS DE GESTACIN EN NOVILLONAS PERIPBERES


Bos taurus / Bos indicus DESPUS DE UN TRATAMIENTO
SINCRONIZADOR DE LA OVULACIN CON NORGESTOMET
(CRESTAR) Y GnRH Y PGF2 (CO-SYNCH)

TESIS

QUE PARA OBTENER EL TTULO DE:


MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

PRESENTA:
JUAN POLO STEVENS JUSTO

ASESORES:

DR. FELIPE MONTIEL PALACIOS


DR. RODOLFO CANSECO SEDANO

H. VERACRUZ, VER., 2OO2


CONTENIDO PAGINAS

I. Resumen. 1

II. Introduccin. 2

III. Antecedentes. 4

Agentes Farmacolgicos. 4

Progestgenos. 4

Estrgenos. 6

Prostaglandinas. 7

Hormona Liberadora de Gonadotropinas. 8

Sincronizacin del estro con progestgenos. 9

Sincronizacin del estro y de la ovulacin con el protocolo

GnRH-PG-GnRH (CO-Synch). 13

IV. Hiptesis. 14

V. Objetivo. 14

General. 14

Particular. 14

VI. Material y Mtodos. 15

Localizacin. 15

Caractersticas y Manejo de los animales experimentales. 15

Caractersticas de estudio. 16

Tratamientos. 16
Condicin corporal. 16

Actividad folicular luteal. 16

Sincronizacin de la ovulacin. 17

Inseminacin artificial. 18

Diagnostico de gestacin. 18

Variable de estudio. 18

Anlisis estadstico. 19

Modelo estadstico. 19

VII. Resultados y Discusin. 20

VIII. Conclusiones. 28

IX. Literatura citada. 29


I. RESUMEN
Tasa de gestacin en novillonas peripuberes Bos indicus y Bos taurus / Bos
indicus despus del tratamiento sincronizador de la ovulacin que emplea GnRH y
PGF2 (CO-Synch). Asesores: Dr. Felipe Montiel Palacios, Dr. Rodolfo Canseco
Sedano.

El objetivo del presente estudio fue determinar si el empleo del protocolo


CO-Synch como tratamiento para la sincronizacin de la ovulacin en novillonas
peripberes Bos taurus / Bos indicus conduce a un mayor porcentaje de gestacin
utilizando inseminacin artificial, en comparacin con las hembras tratadas con
Norgestomet, bajo condiciones de trpico hmedo localizado en el municipio de
Tres Valles, Ver.. Se utilizaron 47 hembras, de las cuales 19 fueron para el Co-
Synch y se les administr al da 0, 100 g de GnRH, al da 7, 150 g de PGF2, y
al da 9, 100 g de GnRH e Inseminacin artificial (IA), a 13 hembras que se les
adminstr concomitantemente 3 mg de Norgestomet por va subcutnea e IA de
las 48-54 h post-retiro del implante y 15 como testigos. El diagnostico de gestacin
se realiz 45 das despus de la IA. Los resultados se evaluaron a travs de Xi2,
disponible esta prueba en el paquete estadstico SAS. La tasa general de
induccin a la ciclicidad fue del 25% (P<0.05) y la tasa general de gestacin fue
del 2.1% (P>0.05). Por lo tanto, se concluye que ambos tratamientos no
resultaron ser efectivos en la induccin a la ciclicidad y esto se reflej en la tasa de
gestacin obtenida en novillonas peripberes Bos taurus / Bos indicus.

Palabras clave: Doble propsito, Novillonas, Norgestomet, GnRH y Co-Synch.

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II. INTRODUCCIN

La principal razn por la cual las novillonas no se gestan a edad temprana

es su retraso para alcanzar la pubertad (Yelich et al., 1996). La pubertad es, por

tanto, un factor que limita la eficiencia productiva de las vacas. Investigaciones

realizadas han documentado los principales eventos endocrinos que preceden la

primera ovulacin en las novillonas, pareciendo ser el evento crtico un incremento

prepuberal en la secrecin pulstil de la LH. Diversos factores ambientales

influyen de manera importante en el inicio de la pubertad en las novillonas de

carne; la nutricin y la poca de ao son dos variables importantes a tomar en

cuenta.

Existe un efecto de genotipo en el trpico mexicano; los grupos genticos

ms comunes en estas zonas son razas Bos indicus y sus cruzamientos con Bos

taurus. Se ha comprobado que las hembras de las razas de la especie Bos indicus

alcanzan la pubertad mas tardamente que las Bos taurus y en los animales

hbridos este retraso se incrementa conforme aumenta la proporcin de sangre

Bos indicus (Martin et al., 1992).

El desarrollo de mtodos para el control del ciclo estral en las hembras

bovinas se ha dado en cinco fases distintas. La base fisiolgica para la

sincronizacin del estro sigui al descubrimiento de que la progesterona inhiba la

maduracin folicular preovulatoria y la ovulacin (Lammond, 1964). Se crey que

la regulacin de los ciclos estrales estaba asociada con el control del cuerpo lteo

(CL), cuyo tiempo de vida y actividad secretoria estn regulados por mecanismos

trficos y lticos (Thimonier et al., 1975). La fase I incluy esfuerzos para prolongar

la fase luteal del ciclo estral o para establecer una fase luteal artificial al

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administrar progesterona exgena. Ms tarde, en la fase II se combinaron agentes

progestacionales con estrgenos o gonadotropinas. La fase III involucr a la

prostaglandina F2 (PGF2) y a sus anlogos como agentes luteolticos. La fase IV

se caracteriz por tratamientos que combinaron agentes progestacionales con

PGF2. A travs del tiempo, el monitoreo preciso de los folculos ovricos y de los

CLs mediante la ultrasonografa transrectal ampli el entendimiento del ciclo estral

bovino y particularmente del cambio que ocurre durante una oleada folicular. El

crecimiento folicular en ganado se da en distintos patrones semejantes a oleadas,

con nuevas oleadas foliculares ocurriendo aproximadamente cada 10 das

(promedio de 6 a 15 das). Actualmente se da la fase V en el desarrollo de

mtodos para controlar el ciclo estral de la vaca, y se sabe que el control preciso

requiere de la manipulacin tanto de las oleadas foliculares como de la duracin

de la vida del CL (Patterson et al., 2000).

De acuerdo con Patterson et al. (2000), recientemente se prob un

protocolo sincronizador de la ovulacin llamado CO-Synch en vacas de carne

postparto. El CO-Synch (Geary et al., 1998) incluye la aplicacin de GnRH-PG-

GnRH y las vacas son inseminadas cuando se administra la segunda inyeccin de

GnRH.

Por lo antes expuesto, el objetivo del presente estudio fue evaluar la

efectividad de dos tratamientos sincronizadores de la ovulacin, uno con base en

progestgenos y el otro que emplea una combinacin de GnRH con PGF2, en

novillonas peripberes Bos taurus / Bos indicus en condiciones del trpico hmedo

de Mxico.

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III. ANTECEDENTES

Agentes farmacolgicos

Progestgenos

Los mtodos originales usados para el control del ciclo estral implicaban la

extensin del periodo de diestro con progestgenos, suficiente para permitir la

ocurrencia espontnea de la lutelisis durante el periodo de tratamiento (Roche,

1979). Estos tratamientos de al menos 14 das de duracin producan una

sincrona aceptable pero con fertilidad reducida (Wishart, 1977a). Algunos

incorporaban dosis farmacolgicas de estradiol, permitiendo que los periodos de

tratamiento se acortaran a 9 a 12 das (Mauleon, 1974; Roche, 1979). La sincrona

y la fertilidad tendan a ser variables porque el estradiol administrado tena efectos

diferentes en diferentes etapas del ciclo (Lemon, 1975).

El principal progestgeno natural es la progesterona, una hormona

esteroidal producida por el cuerpo lteo. Se presenta en la sangre en forma libre y

ligada a protenas. Estudios sobre la vida media revelan componentes de

desaparicin rpida (2-3 min), media (10-28 min) y lenta (54 min) (Imori, 1967;

Watson, 1986). La progesterona es metabolizada en el hgado y los metabolitos

son excretados en la bilis. Parte de la progesterona tambin es metabolizada en el

tero y glndula mamaria y en la sangre (Gomes y Erb, 1965). Las

concentraciones sanguneas de progesterona resultantes de algn tratamiento se

ven afectadas por la tasa de desaparicin, dosis, mtodo de aplicacin, madurez

sexual, y anterior exposicin de la hembra a estrgenos y progestgenos. La

progesterona prepara al cerebro para permitir que los estrgenos produzcan

4
comportamiento estral, suprime la secrecin de hormona liberadora de

gonadotropinas (GnRH) y es necesaria para el mantenimiento de la gestacin. El

pretratamiento con progesterona es necesario para una funcin luteal normal

subsecuente a la induccin de maduracin folicular y ovulacin en respuesta a

gonadotropinas o GnRH. El pretratamiento con progesterona es necesario para un

adecuado desarrollo de los receptores de LH en los folculos preovulatorios

(Hunter et al., 1986; Inskeep et al., 1988), y esto puede ser necesario para una

funcin luteal normal subsecuente. Estudios en ovejas demostraron que una

inyeccin de progesterona en aceite (20 mg) es suficiente para una funcin luteal

normal, y que el tratamiento por varios das es necesario para que haya

comportamiento estral (Signoret, 1990).

Clnicamente los progestgenos sintticos tiles tienen una vida media

mayor que la progesterona y pueden ser activos si se administran oralmente. La

progesterona en aceite administrada por va intramuscular resulta en

concentraciones sanguneas detectables por 18 horas. Duraciones mayores

(9 a >14 das) de progesterona plasmtica detectable pueden lograrse usando

dispositivos intravaginales liberadores de progesterona. Las concentraciones

plasmticas de progesterona resultantes de dichos dispositivos, son mayores por

ms tiempo en novillonas prepberes que en novillonas maduras

ovariectomizadas, y las concentraciones se ven aumentadas los primeros 2 a 3

das despus de la insercin por pretratamiento con estradiol y progesterona

(Munro y Moore, 1986). Los progestgenos son usados en programas para inducir

o sincronizar el estro y la ovulacin. Los progestgenos pueden ser administrados

oralmente, tales como el acetato de melengestrol (MGA), 6 metil-17 acetoxi-

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progesterona (MAP) y 6 cloro-g-dehidro-17 acetoxi progesterona (CAP); como

implantes subcutneos, tales como los que contienen norgestomet (Syncromate-B,

Ceva Laboratories, Overland Park, KS); como dispositivos colocados en la vagina,

tales como los dispositivos intravaginales liberadores de progesterona (PRID,

Ceva, Australia); o como dispositivos de liberacin controlada interna del frmaco

desarrollados en Nueva Zelanda (Eazibreed CIDR-B, CHH Plastic Moulding Co.,

Hamilton, Nueva Zelanda) (Macmillan y Peterson, 1991). Ambos, los PRID y los

CIDR, inducen patrones similares de progesterona plasmtica. Por 7 das, se

logran concentraciones de la fase luteal (6-8 ng/mL); las concentraciones declinan

a 2 a 4 ng/mL o menos a los 12 a 14 das (Roche e Ireland, 1981; Munro y Moore,

1986; Munro, 1987; Sirois y Fortune, 1990; Macmillan y Peterson, 1991).

Estrgenos

Los principales estrgenos naturales en la vaca son el estradiol y la estrona.

Los estrgenos son hormonas esteroidales. Las principales fuentes de estrgenos

son las clulas de la granulosa de los folculos maduros y la placenta en la

gestacin avanzada. En la sangre se presentan libres y ligados a protenas. Su

vida media es corta (<5 minutos) (Dieleman y Bevers, 1987). Los estrgenos son

metabolizados en el hgado (y en menor grado, en muchos otros tejidos) y sus

metabolitos son excretados en la orina y las heces. Los estrgenos sintticos son

metabolizados ms lentamente por el hgado, resultando en una accin de

duracin mayor a la del estradiol. La duracin del efecto tambin est influenciada

por la tasa de absorcin del sitio de administracin. Los estrgenos son luteolticos

(Wiltbank et al., 1961; Lemon, 1975; Munro y Moore, 1985) y se administran al

inicio del tratamiento con progestgenos en programas para sincronizar estros. La

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lutelisis generalmente ocurre 5 a 7 das despus de su administracin. Los

estrgenos aplicados a vacas en el diestro tardo pueden inducir quistes foliculares

asociados con una oleada prematura de LH (Refsal et al., 1987). Existe evidencia

de que los estrgenos causan atresia folicular (Engelhardt et al., 1989), y pueden

servir como un mtodo de control de las ondas foliculares para mejorar la

sincronicidad estral despus de la lutelisis.

Prostaglandinas

Las prostaglandinas son cidos grasos no saturados de 20 carbonos,

originados en muchos tejidos y con una gran variedad de funciones (Stabenfeldt et

al., 1980; Edqvist y Kindahl, 1981; Boothe, 1991). La prostaglandina F2 (PGF2)

del tero es la que tiene accin luteoltica en la vaca. Las prostaglandinas son

eliminadas rpidamente de la circulacin y son metabolizadas particular y

rpidamente por el pulmn (Stefflug et al., 1975; Edqvist y Kindahl, 1981).

Una vez que la PGF2 fue identificada como un factor luteoltico uterino en

el ciclo estral de la oveja y vaca (McCracken et al., 1972; Knickerbocker et al.,

1988), se desarrollaron formas sintticas que podan usarse para inducir lutelisis

prematura durante el diestro (Nancarrow y Cox, 1976). Se desarrollaron

regmenes de dos inyecciones para incrementar la probabilidad de la presencia de

un cuerpo lteo que respondiera a la prostaglandina al momento de la segunda

inyeccin (Lauderdale, 1975). Sin embargo, no producan una sincrona

suficientemente precisa para ignorar la necesidad de inseminar despus del estro

pero antes de la ovulacin (Macmillan y Henderson, 1984; Savio et al., 1990b;

Macmillan y Peterson, 1993). El nivel de fertilidad del estro siguiente a la lutelisis

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inducida fue aceptable, y en algunos casos ms alto que las posteriores lutelisis

espontneas (Macmillan y Day, 1982). Las mejoras en la precisin de la sincrona

seguida a la lutelisis inducida con prostaglandinas por inyeccin de bajas dosis

de estradiol (0.4 a 0.5 mg de benzoato de estradiol) u hormonas liberadoras de

gonadotropinas (GnRH) durante el periodo de proestro, no han sido de utilidad

rutinaria (Britt, 1975; Nancarrow y Radford, 1975; Nancarrow y Cox, 1976; Peters

et al., 1977).

Los anlogos de las prostaglandinas se usan por su accin luteoltica y por

su efecto estimulador del miometrio en programas para la sincronizacin de estros

y ovulacin, y para la induccin del aborto y parto. Las preparaciones disponibles y

sus rangos de dosis luteolticas son: Dinoprost (Lutalyse, Upjohn, Kalamazoo, MI)

25 mg, Cloprostenol (Estrumate, ICI, Mobay, Shawnee, KS) 500 g, Fenprostaleno

(Bovilene, Syntex, West Des Moines, IA) 1 mg y Alfaprostol (Alfavet, Hoffman-La

Roche, Nutley, NJ) 5 mg.

Hormona Liberadora de Gonadotropinas (GnRH)

La GnRH es un decapptido sintetizado por las neuronas en el hipotlamo,

almacenado en l, y llevado a la hipfisis por los vasos sanguneos del sistema

portal hipofisiario (Bosu, 1982). La GnRH desaparece rpidamente de la

circulacin (vida media de 4-7 minutos en ratas) (Redding et al., 1972). Se han

desarrollado anlogos ms potentes con menores tasas de desaparicin y con una

mayor afinidad de unin a receptores hipofisiarios de GnRH (Swift y Crighton,

1979; Perrin et al., 1980; Loumaye et al., 1982); stos incluyen Deslorelin ([D-

Trp6]-GnRH) y Buserelin ([D-Ser(tBu)6, Pro9 Net])-GnRH. Con GnRH (2.5 g IV)

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se obtienen pulsos plasmticos de LH similares a los pulsos que ocurren

naturalmente (Jagger et al., 1987). Dosis mayores (100 a 250 g [hasta 0.5-1.5

mg]) producen liberacin de una oleada de LH que puede causar ovulacin de

folculos maduros (Kesler y Garverick, 1982; Ijaz et al., 1987). En vacas acclicas,

tales folculos son de 10 mm de dimetro o mayores (Garverick et al., 1980). La

respuesta de los folculos inmaduros a la liberacin de una oleada de LH es la

luteinizacin o atresia (Macmillan et al., 1989; Thatcher et al., 1989). La formacin

de un cuerpo lteo normal despus de la ovulacin inducida de folculos maduros

requiere pretratamiento con progesterona (Garverick y Smith, 1986; Smith et al.,

1987). La GnRH se usa a dosis altas para obtener la liberacin de una oleada de

LH para inducir la ovulacin de folculos maduros, para tratar folculos qusticos, y,

por su accin luteoprotectora, para reducir las prdidas embrionarias. A la fecha,

estudios sobre la administracin de GnRH a bajas dosis para estimular el

desarrollo y maduracin folicular no han aportado un tratamiento efectivo y

confiable para la induccin de estros frtiles en vacas acclicas. Tales tratamientos

son efectivos en ovejas (McLeod et al., 1983; Wright et al., 1983) y yeguas (Hyland

et al., 1987).

Sincronizacion del estro con progestgenos

Se han desarrollado diversos tratamientos hormonales basados en

progesterona y sus derivados con el fin de reducir el anestro posparto. Los

esteroides ovricos (progesterona y 17-estradil) actan como moduladores de la

secrecin de hormona lueinizante (LH) y las concentraciones de LH plasmticas

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fluctan de una manera pulstil a travs de todos los perodos del ciclo estral

(Rahe et al., 1980). Existe una correlacin negativa entre la administracin de

progesterona (P4) y la secrecin de LH. Bajos niveles de progesterona estn

asociados con un incremento en la frecuencia de pulsos de LH; la administracin

de progesterona o sus anlogos en dosis reducidas no inhibe la frecuencia pulstil

de LH en comparacin con la utilizacin de dosis altas que al parecer si la inhiben

(Stumpf et al., 1991).

El uso de progestgenos para el reincio del ciclo estral en bovinos ha sido

asociado con una fertilidad variable, probablemente debido a que niveles elevados

de LH durante el tratamiento con norgestomet estn asociados con niveles

elevados de estrgenos cuando finaliza el tratamiento (Hutz et al., 1988).

Asimismo, recientes trabajos han mostrado que bajas concentraciones de

progesterona en ausencia de un cuerpo lteo no suprimen totalmente la liberacin

de LH, e impiden el reemplazo de los folculos dominantes (Adams et al., 1995), lo

que podra explicar la fertilidad baja.

Ireland y Roche (1982) indican que la progesterona y los progestgenos

sintticos suprimen el estro y la ovulacin, actuando a travs de un mecanismo de

retroalimentacin negativa sobre la liberacin de LH, por lo mismo, probablemente

se reduce la frecuencia de los pulsos de esta hormona, y se impide que algn

folculo complete su desarrollo y ovule. Al retirar el frmaco, los folculos de todas

las vacas tratadas completan su desarrollo al mismo tiempo, lo que provoca el

estro sincronizado (Britt y Roche, 1985).

Se han utilizado muchos progestgenos sintticos para sincronizar celos,

aplicados por diferentes vas. Inicialmente las sustancias progestacionales se

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aplicaban en inyecciones diarias, haciendo poco prctico el sistema (Wiltbank,

1969). Ms tarde, Christian y Casida (1980) demostraron que las inyecciones de

progesterona prolongaban la fase del diestro por tanto como fueran aplicadas.

Despus de que las inyecciones eran finalizadas, las hembras entraban en calor y

ovulaban con una sincrona razonable. Con el descubrimiento de progestgenos

activos por va oral (Lamond, 1964), se hizo posible su administracin en el

alimento. La mayor desventaja de esta va es la de no tener un control preciso del

consumo de la dosis diaria para cada animal tratado, lo que ocasiona respuestas

variables en la sincronizacin (Kesler y Troxel, 1983; Peters, 1986). Dziuk y Cook

(1966) demostraron que hormonas esteroidales colocadas en un dispositivo de

silicn en forma de implante, se liberaban de manera constante y uniforme durante

varios das. En bovinos productores de carne, uno de los progestgenos ms

populares es el Norgestomet, impregnado en un implante siliconado de aplicacin

auricular subcutnea acompaado de una inyeccin de valerato de estradiol

(Synchromate B). Este producto se ha empleado para la sincronizacin de estros y

para la induccin del estro en hembras anstricas. En este caso, cabe mencionar

que la principal ventaja de los sistemas basados en progestgenos sintticos es

que pueden aplicarse en hembras anstricas y al ser retirados favorecen la

liberacin de gonadotropinas y los animales comienzan a ciclar (Smith et al.,

1983). Este efecto inductor de la actividad ovrica se ha probado tanto en

vaquillas prepberes como en vacas en anestro lactacional (Gonzlez-Padilla et

al., 1975; Smith et al., 1979).

En el primer caso, al emplearse el progestgeno en un tratamiento inductor

de la pubertad en vaquillas prepberes, se han obtenido porcentajes de hembras

11
en calor de 79 al 94% en periodos de 4 das de observacin despus de retirado el

implante, con porcentajes de gestacin de 43 a 56% (Gonzlez-Padilla et al.,

1975), demostrando que es posible utilizar este tratamiento para inducir el estro

frtil en vaquillas prepberes. Dichos autores sealan que el tratamiento es

particularmente prctico en vaquillas menos precoces, como es el caso de algunos

tipos de razas cebuinas.

Gonzlez-Padilla et al. (1975), sealan que la segunda posibilidad de uso

de estos tratamientos con progestgenos, es como inductores de la actividad

ovrica en grupos de hembras posparto, las cuales probablemente se encuentran

en anestro. En una investigacin se estudi el efecto de un tratamiento con

Synchromate B en vaquillas y vacas con actividad ovrica o en anestro; el estro se

detect en mayor proporcin en hembras que se encontraban ciclando al inicio del

tratamiento (88%), que en aqullas que no lo estaban (77%). La fertilidad de las

vaquillas en un periodo de cinco das fue similar si se encontraban ciclando (42%)

o en anestro (47%), evento que no sucedi en el grupo de las vacas, donde las

que estaban en anestro tuvieron una tasa de gestacin del 38%, menor al de

aquellas vacas que se encontraban ciclando (Beal et al., 1984). Por tal razn,

dichos autores sealan que la condicin de la vaca antes del tratamiento (ciclando

o en anestro) pudiera limitar la efectividad del progestgeno.

Aunque casi todas las hembras responden manifestando estro despus de

remover el implante, las expectativas en cuanto a la fertilidad son moderadas,

sobre todo en hembras que al inicio del tratamiento se encuentran en anestro y

lactando. Lo anterior est corroborado en una amplia revisin sobre el tema y en

condiciones de trpico, donde se estima que el porcentaje de concepcin a primer

12
servicio es mayor (48%) en hembras que al momento de la sincronizacin se

encuentran sin lactar, comparado con aqullas que s lo estn (32%) (Galina y

Arthur, 1990). Adems, Wishart et al. (1977) sealan que la condicin corporal de

la vaca al momento de recibir el tratamiento es un factor que determina su

respuesta al frmaco sincronizador, ya que se induce el estro pero la fertilidad se

ve seriamente disminuida cuando la hembra se encuentra lactando y con baja

condicin corporal.

Sincronizacin del estro y de la ovulacin con el protocolo GnRH-PG-GnRH

(CO-Synch)

De acuerdo con Patterson et al. (2000), en vacas de carne postparto

recientemente se ha utilizado ampliamente un protocolo de induccin y

sincronizacin de la ovulacin llamado CO-Synch. El CO-Synch (Geary et al.,

1998b) incluye la aplicacin de dos inyecciones de GnRH y una inyeccin de

PGF2, as como inseminacin artificial a tiempo fijo al momento de aplicar la

segunda inyeccin de GnRH.

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IV. HIPTESIS

La utilizacin del protocolo CO-Synch para la sincronizacin de la ovulacin

en novillonas peripberes Bos taurus / Bos indicus, conduce a un mayor

porcentaje de gestacin mediante inseminacin artificial, en comparacin con las

hembras que reciben un tratamiento con Norgestomet, bajo condiciones de trpico

hmedo.

V. OBJETIVOS

GENERAL

Determinar si el empleo del protocolo CO-Synch como tratamiento para la

sincronizacin de la ovulacin en novillonas peripberes Bos taurus / Bos indicus

conduce a un mayor porcentaje de gestacin utilizando inseminacin artificial, en

comparacin con las hembras tratadas con Norgestomet, bajo condiciones de

trpico hmedo.

PARTICULARES

1. Evaluar el estado ovrico inicial en las novillonas peripberes Bos taurus / Bos

indicus que sern tratadas hormonalmente.

2. Determinar la tasa de sincronizacin de la ovulacin en las novillonas

peripberes Bos taurus / Bos indicus taratadas con GnRH y PGF2 en

comparacin con hembras tratadas con Norgestomet.

3. Comparar la tasa de gestacin a primer servicio de inseminacin artificial de

las novillonas peripberes Bos taurus / Bos indicus tratadas con GnRH y

PGF2 con relacin a las hembras tratadas con Norgestomet.

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VI. MATERIALES Y MTODOS

Localizacin

El presente proyecto de investigacin se realiz en una explotacin

comercial de bovinos de doble propsito (Bos taurus / Bos indicus), ubicada en el

municipio de Tres Valles, Veracruz, localizado a 1814 latitud norte y 9608

longitud oeste, a una altura de 25 msnm, con clima Aw2, temperatura anual

promedio de 24.7C y precipitacin pluvial anual media de 1510.6 mm (Garca,

1981).

Caractersticas y manejo de los animales experimentales

Se utilizaron 47 novillonas Bos taurus / Bos indicus peripberes de

aproximadamente 320 kg.

Al inicio del estudio todas las hembras fueron identificadas de acuerdo a los

registros utilizados en la explotacin. Posteriormente, todas se palparon va rectal

para determinar la etapa reproductiva en que se encontraban y as conformar los

grupos, colocndoles despus para la identificacin dentro del estudio un arete

plstico con numeracin progresiva, segn el grupo experimental en que se les

incluy.

Todas las novillonas se manejaron en un sistema de pastoreo rotacional,

con una carga animal de 2 UA/ha en una superficie promedio de 100 ha,

sembradas con pasto Estrella de frica (Cynodon plectostachyus), Estrella Santo

Domingo (Cynodon nlemfuensis), Pangola (Digitaria decumbens), estando

presentes algunos pastos nativos como el Paspalum spp. y Axonopus spp.,

15
predominando las praderas mixtas dentro de las instalaciones de los productores

ubicados en estas reas del trpico.

Caractersticas del estudio

El estudio se realiz del mes de febrero al mes de abril en condiciones del

trpico hmedo mexicano.

Tratamientos

Las novillonas Bos taurus / Bos indicus peripberes fueron distribuidas en

un diseo completamente al azar, con diferentes repeticiones por tratamiento,

siendo el primero el empleo del protocolo CO-Synch, el segundo el empleo del

implante de Norgestomet y por ltimo el grupo testigo negativo para ambos

tratamientos.

Condicin corporal

El da en que se inici el experimento se evalu la condicin corporal de las

novillonas, utilizando para esto la escala del 1 al 5 descrita por Edmonson et al.

(1989), siendo 1 un animal emaciado y 5 un animal gordo.

Actividad folicular y luteal

Con el fin de caracterizar los cambios en las estructuras ovricas presentes,

todas las novillonas fueron examinadas con ultrasonografa los das en que se

aplicaron los tratamientos sincronizadores de la ovulacin. Se utiliz un ultrasonido

porttil Aloka modelo SSD500, con un transductor de 5.0 Mhz, el cual se insert

16
por va rectal y se coloc a lo largo de la superficie dorsal del cuerno del tero,

realizndose movimientos laterales para examinar los ovarios. El tracto

reproductivo no fue manipulado directamente antes o durante el examen

ultrasonogrfico. Los folculos y cuerpos lteos presentes fueron medidos para

evaluar la talla folicular y luteal antes y despus del empleo de los tratamientos

farmacolgicos (Sirois y Fortune, 1988; Ginther et al., 1989; Taylor et al., 1993).

Sincronizacin de la ovulacin

A 13 novillonas Bos taurus / Bos indicus se les aplicaron 3 mg de

Norgestomet, contenidos en un implante auricular administrado por va

subcutnea, y una inyeccin intramuscular de 2 ml con 5 mg de valerato de

estradiol y 3 mg de Norgestomet (Crestar, Lab. Intervet). El implante permaneci

in situ durante 9 das.

A 19 novillonas Bos taurus / Bos indicus se les asign el protocolo que

emplea GnRH + PGF2 + GnRH para sincronizar la ovulacin (CO-Synch, Geary et

al., 1998), el cual consiste en una inyeccin intramuscular de 100 g de GnRH

(Gonadorelina, Fertagyl, Lab. Intervet) al presentar folculos iguales o mayores a

10 mm de dimetro; siete das ms tarde se les aplic una inyeccin intramuscular

de 150 g de PGF2 (Cloprostenol, Prosolvin C, Lab. Intervet), seguida a las 48

horas por una segunda inyeccin de 100 g de GnRH y 15 fueron testigos

negativos de ambos tratamientos.

17
Inseminacin artificial

Las novillonas que recibieron Norgestomet fueron inseminadas de 48 a 54 h

posteriores al retiro de los implantes auriculares, mientras que las hembras que

recibieron el tratamiento CO-Synch fueron inseminadas al momento de aplicar la

ultima inyeccin de GnRH de acuerdo con la metodologa preestablecida. La

inseminacin artificial de todas las hembras en estudio la realiz el mismo tcnico

inseminador.

Diagnstico de gestacin

Se realiz mediante palpacin rectal a los 45 das post-inseminacin

artificial.

Variables en estudio

Se evalu el efecto de la sincronizacin de la ovulacin con los mtodos

Crestar y CO-Synch en las novillonas Bos indicus y Bos taurus / Bos indicus con

respecto a las hembras pertenecientes a los grupos testigo, de acuerdo a los

cambios obtenidos durante la fase experimental sobre:

Comportamiento reproductivo: tasa general de sincronizacin de la

ovulacin (%) y tasa general de gestacin (%).

18
Anlisis estadstico

Se analizaron estadsticamente las variables nominales u ordinales

(inducidas o no a la ovulacin y vacas gestantes) empleando Chi-cuadrada y la

prueba exacta de Fisher, disponible sta en el paquete estadstico SAS (Gody y

Smith, 1991).

Modelo estadstico

Yi = + MSi + E

Y = Variable de respuesta

= Media general de la variable de respuesta

MSi = Efecto del i-simo mtodo de sincronizacin, i = 1, 2, 3

E = Error experimental

19
VII. RESULTADOS Y DISCUSIN

En la Tabla 1 se presentan los resultados de la respuesta al tratamiento

inductor y sincronizador de la ovulacin con norgestomet (Crestar) en las

novillonas peripberes de doble propsito utilizadas en el presente experimento.

En la Tabla 2 se presentan los resultados de la respuesta al tratamiento

inductor y sincronizador de la ovulacin segn el protocolo CO-Synch, en las

novillonas peripberes de doble propsito utilizadas en el presente experimento.

En lo que respecta a las hembras que presentaron celo o permanecieron en

anestro despus de ambos tratamientos en el presente estudio, el 15.4% de las

novillonas tratadas con norgestomet present celo despus de la inseminacin

artificial y el 84.6% permaneci en anestro, mientras que de las novillonas tratadas

segn el protocolo CO-Synch el 52.6% present celo despus de la inseminacin

artificial y el 42.1% permaneci en anestro (Tabla 3). La tasa general de induccin

a la ciclicidad fue del 25% y se encontr diferencia estadstica por el empleo del

CO-Synch (P<0.05).

En cuanto a la tasa de gestacin, en el presente estudio se obtuvo 0% en las

novillonas tratadas con norgestomet (Crestar) (Tabla 3), siendo este resultado

inferior al obtenido por Miranda et al. (2000) en vaquillas Ceb a las cuales se les

dio el mismo tratamiento, logrando el 50% de gestacin a primer servicio. La tasa

general de gestacin fue del 2.1%, y no se encontr diferencia estadstica para

los tratamientos empleados (P>0.05).

La determinacin de las estructuras ovricas presentes en las novillonas

peripberes antes y despus de los tratamientos inductores y sincronizadores de

la ovulacin en el presente experimento se hizo mediante ultrasonografa. En la

20
Tabla 4 se mencionan las estructuras ovricas presentes a la evaluacin

ultrasonogrfica en las novillonas a las cuales se les aplic el implante de

norgestomet; en estas hembras se realizaron dos evaluaciones, la primera, el da

del inicio del tratamiento antes de la colocacin del implante, y la segunda, 45 das

despus de la inseminacin artificial al realizar el diagnstico de gestacin. En

este mismo sentido, en la Tabla 5 se presentan las estructuras ovricas halladas a

la evaluacin ultrasonogrfica en las novillonas a las cuales se les asign el

protocolo CO-Synch; en stas se realizaron tres evaluaciones: la primera, el da

del inicio del experimento antes de aplicar la primera dosis de GnRH, la segunda,

siete das despus al aplicar la PGF2, y la tercera, 45 das despus de la

inseminacin artificial al realizar el diagnstico de gestacin.

En el presente experimento, con respecto a las estructuras ovricas

halladas en las novillonas antes y despus de aplicar ambos tratamientos

inductores y sincronizadores de la ovulacin, al realizarse las ultrasonografas se

encontr que el da en que se inici el tratamiento con norgestomet, antes de

colocar el implante, el 69.2% de las novillonas se encontraban en anestro sin

indicios de actividad folicular, mientras que el 30.8% presentaba folculos de

diferentes tamaos. Cuarenta y cinco das despus de la inseminacin artificial y

al momento de realizar el diagnstico de gestacin, se encontr que de estas

hembras el 84.6% permaneca en anestro y el 15.4% presentaba CL. Dicho 15.4%

estaba representado por 2 hembras, de las cuales una probablemente qued

gestante del semental del rancho en subsecuentes montas no consideradas en

este experimento (Tabla 4).

21
Por otro lado, de las novillonas a las cuales se les aplic el protocolo CO-

Synch para inducir y sincronizar la ovulacin en este experimento, el da en que se

inici el tratamiento y antes de aplicarles la primera dosis de GnRH, el 78.9% de

ellas se encontraba en anestro sin indicios de actividad folicular, mientras que el

21.1% presentaba folculos de diversos tamaos as como CLs. Siete das

despus, antes de aplicar la dosis de PGF2, el 21.1% de las novillonas

permaneca en anestro, mientras que el 78.9% presentaba folculos de diferentes

tamaos, as como tambin CLs. A los dos das despus de aplicar la PGF2 y

antes de administrar la segunda dosis de GnRH y de realizar la inseminacin

artificial, el 36.84% de las hembras fue observada con signos de estro. Al llevar a

cabo el diagnstico de gestacin, 45 das despus de la inseminacin artificial, se

encontr al realizar ultrasonografa que el 47.4% de las hembras permaneca en

anestro, mientras que el 52.6% presentaba CL o gestaciones. De este 52.6% (10

hembras), cuatro novillonas (40%) se diagnosticaron como posibles gestantes por

el semental del rancho, por montas subsecuentes no consideradas en este estudio

y no por la inseminacin artificial realizada como parte del experimento (Tabla 5).

En el presente experimento, aunque slo el 21.1% de las novillonas a las

cuales se les aplic el protocolo CO-Synch presentaban actividad folicular al inicio

del tratamiento, a diferencia del 30.8% de las novillonas pertenecientes al

tratamiento con norgestomet, las primeras tuvieron una mayor respuesta de

induccin a la ciclicidad al final del tratamiento cuando se realiz el diagnstico de

gestacin, ya que en ese momento se encontr el 42.1% de ellas ciclando, de las

cuales 4 haban sido posiblemente preadas por el semental del rancho, lo que

22
indica que ciclaron y entraron en calor despus del tratamiento, mientras que el

47.4% segua en anestro, a diferencia de las novillonas tratadas con norgestomet,

de las cuales 45 das despus de la inseminacin artificial y al realizar el

diagnstico de gestacin slo el 15.4% se encontraba ciclando al presentar CL, y

el restante 84.6% permaneci en anestro (Tabla 6).

Aunque no se evalu el efecto de poca del ao, existe la posibilidad de

que sta jugara un papel importante en el desempeo reproductivo de las vacas

de doble propsito, como ha sido documentado en otros estudios realizados por

Galina et al. (1989), Galina et al. (1990), Porras y Galina (1993) y Montiel (2001).

Aunque estos estudios fueron realizados en celo sincronizado con progestgenos

y en celo natural y demuestran una tendencia de efecto estacional, en el presente

estudio es probable que se haya presentado esta misma evidencia estacional

independientemente de la aplicacin del tratamiento inductor. Esto probablemente

repercuti en el desempeo reproductivo de las vacas, ya que posiblemente

pudieron sufrir estrs ambiental por las altas temperaturas y la falta de

disponibilidad forrajera, que aportara solamente energa de mantenimiento y no

energa para gestacin, haciendo que de manera general la eficiencia reproductiva

disminuyera como un mecanismo natural de defensa en contra de condiciones

climatolgicas adversas, pudiendo entonces el medio ambiente influir tambin

sobre el perfil hormonal de estos animales.

23
Tabla 1. Tasa de induccin a la ciclicidad y gestacin en novillonas peripberes de
doble propsito inducidas y sincronizadas a la ovulacin con un implante de
norgestomet (Crestar), en el trpico hmedo mexicano.

Novillona Condicin Inseminacin Presentacin Permanencia Gestante


corporal artificial (IA) de celo en anestro
(1 a 5) despus de despus de
la IA la IA
A2 3 S No S No
A7 3 S No S No
A35 3 S No S No
A38 3 S No S No
A55 3 S No S No
A88 3 S No S No
A89 3 S S No No
A93 3 S No S No
A109 3 S S No No
A134 3 S No S No
A141 3 S No S No
A143 3 S No S No
A144 3 S No S No
Total 13 19 (100%) 2 (15.4%) 11 (84.6%) 0

24
Tabla 2. Tasa de induccin a la ciclicidad y gestacin en novillonas peripberes de
doble propsito inducidas y sincronizadas a la ovulacin con el protocolo CO-
Synch, en el trpico hmedo mexicano.

No. de Condicin Inseminacin Presentacin Permanencia Gestante


novillona corporal artificial de celo en anestro
(1 a 5) despus de despus de
la IA la IA
03 3 S S No No
05 3 S S No No
011 3 S No S No
025 3 S S No No
027 3 S S No No
033 3 S No S No
037 3 S S No No
039 3 S No S No
043 3 S No No S
045 3 S No S No
049 3 S S No No
053 3 S S No No
055 3 S S No No
065 3 S No S No
067 3 S No S No
069 3 S No S No
071 3 S No S No
077 3 S S No No
079 3 S S No No
Total 19 19 (100%) 10 (52.6%) 8 (42.1%) 1 (5.2%)

Tabla 3. Tasa de induccin a la ciclicidad y gestacin en novillonas peripberes de


doble propsito inducidas y sincronizadas a la ovulacin con un implante de
norgestomet (Crestar) y con el protocolo Co-Synch, en el trpico hmedo
mexicano.

Mtodo de Novillonas Novillonas Novillonas Novillonas que Novillonas


sincronizacin tratadas inseminadas que permanecen en gestantes
de la (%) presentan anestro (%)
ovulacin celo despus despus de la
de la IA (%) IA (%)
Crestar 13 13 (100) 2 (15.4)a 11 (84.6) 0c
Co-Synch 19 19 (100) 10 (52.6)b 8 (42.1) 1 (5.2)d
a
Testigo 15 0 0 15 0c
a b
, Diferencia estadstica (P<0.05)
c d
, Diferencia estadstica (P>0.05)

25
Tabla 4. Estructuras ovricas presentes a la evaluacin ultrasonogrfica en
novillonas peripberes de doble propsito antes de la induccin y sincronizacin
de la ovulacin con un implante de norgestomet (Crestar) y 45 das despus de la
inseminacin artificial al realizar el diagnstico de gestacion.

Inicio tratamiento, antes de colocar 45 das despus de la inseminacin


el implante artificial (diagnstico de gestacin)
No. de Estructuras Localizacin Estructuras Localizacin
novillona VA Folculos (ovario) VA CL (ovario)
A2 VA --- VA ---
A7 VA --- VA ---
A35 VA --- VA ---
A38 Folculos Derecho VA ---
A55 F 15 mm Derecho VA ---
A88 VA --- VA ---
A89 VA --- CL, PC* Derecho
A93 VA --- VA ---
A109 Folculos Derecho CL Derecho
A134 F 10 mm Derecho VA ---
A141 VA --- VA ---
A143 VA --- VA ---
A144 VA --- VA ---
Total 9 4 11 2
(69.2%) (30.8%) (84.6%) (15.4%)
*Posiblemente gestante por el toro, no por la AI correspondiente al experimento

26
Tabla 5. Estructuras ovricas presentes a la evaluacin ultrasonogrfica en
novillonas peripberes de doble propsito antes de la induccin y sincronizacin
de la ovulacin con el protocolo CO-Synch, el da de aplicacin de la PGF2a y 45
das despus de la inseminacin artificial al realizar el diagnstico de gestacin.

Inicio tratamiento, antes de Despus 1 GnRH; aplicacin Despus de 45 das despus


1 GnRH PGF PGF; 2 de IA (DxG)
GnRH e IA
Noillona Estructura Ovario Estructura Ovario Observacin Estructuras
VA F/CL VA F/CL VA F/CL
03 CL Izquierdo CL Derecho Estro CL De
05 VA --- F 15 mm Izquierdo Estro CL Iz
011 VA --- VA --- --- VA
025 VA --- F 20 mm Ambos --- G 1 m*
027 Folculos Derecho F 15 mm Izquierdo --- CL De
033 VA --- F 15 mm Ambos --- VA
037 VA --- CL Derecho Estro CL De,
PC*
039 VA --- VA --- --- VA
043 VA --- F 5 mm Izquierdo --- G2m
045 Folculos Derecho F 10 mm Izquierdo --- VA
F 5 mm Derecho
049 VA --- VA --- --- PC*
053 VA --- F 10 mm Izquierdo --- VA
055 VA --- CL Izquierdo Estro CL De
065 VA --- F 15 mm Ambos --- VA
067 VA --- F 10 mm Derecho Estro VA
069 Folculos Ambos VA --- --- VA
071 VA --- F 15 mm Ambos --- VA
077 VA --- CL Derecho Estro CL De
F 5 mm Izquierdo
079 VA --- CL Derecho Estro PC*
Total 15 4 4 15 9 10
(78.9%) (21.1%) (21.1%) (78.9%) (47.4) (52.6%)
*Gestantes por el toro, no por la IA correspondiente al experimento.

Tabla 6. Estructuras ovricas presentes a la evaluacin ultrasonogrfica en


novillonas peripberes de doble propsito antes de la induccin y sincronizacin
de la ovulacin con un implante de norgestomet (Crestar) y con el protocolo CO-
Synch, as como 45 das despus de la inseminacin artificial al realizar el
diagnstico de gestacin.

Da de inicio del 45 das despus de la IA


tratamiento (diagnstico de gestacin)
Tratamiento Estructuras Estructuras
VA Folculos VA CL
Norgestomet 69.2% 30.8% 84.6% 15.4%
CO-Synch 78.9% 21.1% 47.4% 42.1%*
Testigo 100% 0 100% 0
*Cuatro novillonas posiblemente cargadas por el toro, no por la IA perteneciente al experimento.

27
VIII. CONCLUSIONES

Del presente estudio se puede concluir que el protocolo CO-Synch result

ser ms efectivo que el Norgestomet para la induccin a la ciclicidad en novillonas

peripberes de doble propsito; sin embargo, ningn tratamiento result ser

efectivo para mejorar las tasas de gestacin.

La poca del ao, a pesar de no haber sido evaluada, pudo influenciar de

manera directa sobre el comportamiento reproductivo de las novillonas

peripberes de doble propsito.

28
IX. LITERATURA CITADA

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