RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS

Maria Isabel Ramirez, Ana Amelia Feria

Laboratorio de Bioqumica
Facultad de Ingeniera
Ingeniera Agroindustrial
Universidad de Sucre

RESUMEN

En esta prctica sobre Protenas la misma que tuvo como objetivo lograr el reconocimiento e
importancia de las protenas

PALABRAS CLAVES: Protenas, Coagulacin, Biuret, Peptdicos.

ABSTRACT

KEYWORDS: Proteins, Coagulation, Biuret, Peptides.

INTRODUCCION existen veinte especies diferentes y que se

MARCO TEORICO
Las protenas son biopolmeros, estn
formadas por gran nmero de unidades
estructurales simples repetitivas
(monmeros). Debido a su gran tamao,
cuando estas molculas se dispersan en un
disolvente adecuado, forman siempre
dispersiones coloidales, con caractersticas
que las diferencian de las disoluciones de
molculas ms pequeas.
Por hidrlisis, las molculas de protena se
dividen en numerosos compuestos
relativamente simples, de masa molecular
pequea, que son las unidades fundamentales
constituyentes de la macromolcula. Estas
unidades son los aminocidos, de los cuales
unen entre s mediante enlaces peptdicos.
Cientos y miles de estos aminocidos pueden
participar en la formacin de la gran
molcula polimrica de una protena.
Todas las protenas
tienen carbono, hidrgeno, oxgeno y
nitrgeno, y casi todas poseen tambin
azufre. Si bien hay ligeras variaciones en
diferentes protenas, el contenido de
nitrgeno representa, por trmino medio,
16% de la masa total de la molcula; es decir,
cada 6,25 g de protena contienen 1 g de N.
El factor 6,25 se utiliza para estimar la
cantidad de protena existente en
una muestra a partir de la medicin de N de
la misma.
La sntesis proteica es un proceso complejo
cumplido por las clulas segn las directrices
de la informacin suministrada por los genes.
Las protenas son largas cadenas de
aminocidos unidas por enlaces peptdicos
entre el grupo carboxilo (-COOH) y el grupo
 amino (-NH2) de residuos de aminocido
adyacentes. La secuencia de aminocidos en
una protena est codificada en su gen (una
porcin de ADN) mediante el cdigo
gentico. Aunque este cdigo gentico
especifica los 20 aminocidos "estndar" ms
la selenocistena y en ciertos Rachear la
pirrolisina, los residuos en una protena
sufren a veces modificaciones qumicas en la
modificacin postraduccional: antes de que la
protena sea funcional en la clula, o como
parte de mecanismos de control. Las
protenas tambin pueden trabajar juntas para
cumplir una funcin particular, a menudo
asocindose para formar complejos proteicos
estables.
FUNCIONES
Las protenas ocupan un lugar de mxima
importancia entre las molculas
constituyentes de los seres vivos
(biomolculas). Prcticamente todos
los procesos biolgicos dependen de la
presencia o la actividad de este tipo de
molculas. Bastan algunos ejemplos para dar
idea de la variedad y trascendencia de las
funciones que desempean. Son protenas:
Casi todas las enzimas, catalizadores
de reacciones qumicas en organismos
vivientes;
Muchas hormonas, reguladores de
actividades celulares;
La hemoglobina y otras molculas con
funciones de transporte en la sangre;
Los anticuerpos, encargados de acciones de
defensa natural contra infecciones o agentes
patgenos;
Los receptores de las clulas, a los cuales se
fijan molculas capaces de desencadenar una
respuesta determinada;
La actina y la miosina, responsables finales
del acortamiento del msculo durante la
contraccin;
El colgeno, integrante de fibras altamente
resistentes en tejidos de sostn.
Funciones de reserva. Como la ovoalbmina
en el huevo, o la casena de la leche.
Todas las protenas realizan elementales
funciones para la vida celular, pero adems
cada una de stas cuenta con una funcin ms
especfica de cara a nuestro organismo.
Debido a sus funciones, se pueden clasificar
en:
- Catlisis: Est formado por enzimas
proteicas que se encargan de realizar
reacciones qumicas de una manera ms
rpida y eficiente. Procesos que resultan de
suma importancia para el organismo. Por
ejemplo la pepsina, esta enzima se encuentra
en el sistema digestivo y se encargan de
degradar los alimentos.
- Reguladoras: Las hormonas son un tipo de
protenas las cuales ayudan a que exista
un equilibrio entre las funciones que realiza
el cuerpo. Tal es el caso de la insulina que se
encarga de regular la glucosa que se
encuentra en la sangre.
- Estructural: Este tipo de protenas tienen la
funcin de dar resistencia y elasticidad que
permite formar tejidos as como la de dar
soporte a otras estructuras. Este es el caso de
la tubulina que se encuentra en el
citoesqueleto.
- Defensiva: Son las encargadas de defender
al organismo. Glicoprotenas que se encargan
de producir inmunoglobulinas que defienden
al organismo contra cuerpos extraos, o la
queratina que protege la piel, as como el
fibringeno y protrombina que forman
cogulos.
- Transporte: La funcin de estas protenas
es llevar sustancias a travs de todo el
organismo donde son requeridas. Protenas
como la hemoglobina que lleva el oxgeno
por medio de la sangre.
- Receptoras: Este tipo de protenas se
encuentran en la membrana celular y llevan a
cabo la funcin de recibir seales y para que
la clula as pueda realizar su funcin. El
acetilcolina que recibe seales para producir cadenas polipeptdicas con estructura
la contraccin muscular. terciaria, para formar un complejo proteico.
Cada una de estas cadenas polipeptdicas
ESTRUCTURA DE LA PROTEINAS recibe el nombre de protmero. []
Es la manera como se organiza una protena
para adquirir cierta forma. Presentan una
disposicin caracterstica en condiciones
fisiolgicas, pero si se cambian estas METODOLOGIA
condiciones como temperatura, pH, etc.
pierde la conformacin y su funcin, proceso
denominado desnaturalizacin. La funcin Para el reconocimiento de protenas se
depende de la conformacin y sta viene procedi de la siguiente forma:
determinada por la secuencia de
aminocidos.
Para el estudio de la estructura es frecuente En la primera prueba que fue la
considerar una divisin en cuatro niveles
(Coagulacin de protenas) se coloc
de organizacin, aunque el cuarto no siempre
est presente. en un tubo de ensayo una pequea
cantidad de clara de huevo, luego se
Conformaciones o niveles estructurales de
la disposicin tridimensional: le aadi 5 gotas de cido actico y
calentamos el tubo en la llama del
ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS:
Estructura primaria: mechero.
es la secuencia de aminocidos de la protena
Para la segunda prueba (Reaccin
(en forma lineal).
Estructura secundaria: Xantoproteica) se coloc en un tubo
La estructura secundaria es la disposicin de
de ensayo un poco de clara de huevo
la secuencia de aminocidos en el espacio.
La a (alfa)-hlice aadindose 1cc, de HNO3
Esta estructura seforma al enrollarse
concentrado, se calent a bao de
helicoidalmente sobre s misma la estructura
primaria. Mara a unos 100C, luego se enfri
La conformacin beta
en agua fra y se aadi gota a gota
En esta disposicin los aminocidos no
forman una hlice sino una cadena en forma una disolucin de NaOH.
de zigzag.
Estructura terciaria: Para la tercera prueba (Reaccin de
Informa sobre la disposicin de la estructura Biuret) se tom nuevamente un tubo
secundaria de un polipptido al plegarse
sobre s misma originando una conformacin de ensayo, agregndosele a este una
globular. pequea cantidad de albmina de
Aparecen varios tipos de enlaces
Estructura cuaternaria: huevo, procedimos a aadir 2cc. De
Esta estructura informa de la unin, mediante solucin hidrxido sdico, a
enlaces dbiles (no covalentes) de varias
continuacin se le agregaron 5 gotas
 de solucin de sulfato cprico diluida - Tabla 1. Coagulacin de protenas
al 1%.
En la ltima prueba (Reaccin de los Clara de huevo.
aminocidos azufrados) se tom un
tubo de ensayo se le adicion una 5 gotas de cido Esta tom una

pequea cantidad de clara de huevo, actico coagulacin en la

le aadimos 2cc. De solucin de parte superior.

hidrxido sdico, despus de esto se

Al calentarse en la Se coagulo
le agreg 10 gotas de solucin de
Llama del totalmente en el
acetato de plomo al 5%, calentamos el
mechero tubo de ensayo.
tubo hasta ebullicin.
Como objetivos se tienen:
Identificar la presencia de protenas en la
-Tabla 2. Reaccin Xantoproteica
clara de huevo por medio de varias
pruebas, observando la desnaturalizacin
de una protena. Clara de huevo.
Observar el comportamiento de la
HNO3 concentrado La protena se
protena de la albumina de huevo en
coagulo tomando
diferentes medios (temperatura
una coloracin
y PH extremos) observar los cambios en
amarilla en el fondo
su estructura.
y a su alrededor
Ejemplificar la desnaturalizacin de
blanca.
protenas.
Al calentarse en Se coagulo
RESULTADOS bao Mara

Una vez realizado todo el procedimiento Disolucin de Tom una

mencionado anteriormente, se analizaron NaOH coloracin naranja a
cada una de las muestras de las diferentes su alrededor.
pruebas y se obtuvieron los siguientes
resultados:
-Tabla 3. Reaccin de Biuret coagulacin al aplicarle cido actico,
observar en la fig1.

Clara de huevo

Solucin de Qued una

hidrxido sdico coloracin igual a la
que traa

5 gotas de solucin Tom una

de sulfato cprico coloracin violeta

Tabla 4. Reaccin de aminocidos

azufrados.

Clara de huevo

Fig1. Clara de huevo+cido actico

Solucin de .
Este resultado es un proceso
hidrxido sdico
irreversible se bebe a su
Acetato de plomo Al mezclarse slo se desnaturalizacin y debido al cido
coagulo en la parte actico que se le aadi que al actuar
superior sobre la protena la desordenan por la
destruccin de su estructura terciaria
Se calent el tubo Coloracin negrura
y cuaternaria. Tambin dio este
hasta ebullicin a su alrededor
resultado al ser calentada a altas
temperaturas, como es posible
observar en la fig2.
ANALISIS DE RESULTADO

o Coagulacin de protenas:
La clara de huevo (protena) dio como
resultado una formacin de
 con cido ntrico concentrado.
Observar fig3.

Fig2. Calentada a altas temperaturas

Al observar la fig2 se puede observar

Fig3. Clara de huevo+HNO3
que La clara del huevo est
concentrado.
compuesta en gran parte por agua y
albminas, un tipo de protenas. Al
La interaccin entre cido ntrico con
aumentar la temperatura las protenas
NaOH y la clara de huevo produjo
de la clara del huevo se
una solucin con coloracin naranja,
desnaturalizan, pierden su solubilidad
esto producto de la reaccin con los
y la clara del huevo deja ser lquida y
aminocidos aromticos de las
transparente, pasa a ser opaca de color
protenas de la clara, los cuales
blanco y slida.
formaron posteriormente
nitroderivados de anillos aromticos.
o Reaccin Xantoproteica
Como puede observarse en la fig4.
Da ese color debido a la formacin de
un compuesto aromtico de color
amarillo ya que la protena fue tratada
 Fig4. Clara de huevo+HNO3 Fig5. Clara de huevo+Hidroxido
concentrado y disolucin de NaOH. sdico y solucin de sulfato cprico.

La protena tiene contacto con una

o Reaccin de Biuret
En esta prctica da como resultado
una coloracin violeta caracterstica,
observar fig5.
solucin de sulfato cprico diluida.
Esta reaccin la producen las
protenas y los pptidos. Pero no los
aminocidos ya que se debe a la
presencia de del enlace pptido que se
destruye al liberarse los aminocidos.
Ecuacin de la reaccin:
o Reaccin de aminocidos azufrados
En esta prctica da como resultado
una coloracin como negrura, como
se puede observar en la fig6.
Fig6. Clara de huevo+ solucin de
hidrxido sdico y solucin de
acetato de plomo.
La reaccin de acetato de plomo
alcalino con la clara de huevo se torn
de un color oscuro a causa de la
reaccin entre los aminocidos
azufrados (principalmente Cisteina y
Metionina) de las protenas (en
especial Ovoalbumina) presentes en
la clara de huevo y el acetato de
plomo, debido a que estos se
presentara una separacin mediante
un lcali, del azufre de los
aminocidos, el cual al reaccionar con
una solucin de acetato de plomo,
forma el sulfuro de plomo y
cualitativamente un olor
caracterstico fuerte y un precipitado
negro, que permite su reconocimiento
en el laboratorio
Ecuacin de la reaccin:
CONCLUSIONES
Las protenas debido a su gran
tamao forman con el agua
soluciones coloidales
La reaccin biuret no ocurrira
en los aminocidos, porque estos no
presentan enlaces peptdicos en su
estructuras, y la reaccin biuret
reconoce los enlaces peptdicos de las
protenas.
La propiedad fundamental de
las protenas es su desnaturalizacin.
REFERENCIAS
[2]
Principios de Bioqumica: Lehninger 4 Ed
[3]
Bohinski: Bioqumica 1Ed
[4]
Introduccin a la Biologa celular 2 Edicin
de Alberts. Editorial medica panamericana
[5]
Biologa: la vida en la tierra 6 Ed Audesirk
[6]
Bioqumica de Harper 2 Ed. Cap.16
[7]
http://farmacia.udea.edu.co/~ff/esteroles200
1.pdf
[8]
Biologa: la vida en la tierra 6 Ed Audesirk
[9]https://mazzally.wordpress.com/tag/sapon
ificacion