UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA Asignatura:

SANTANDER
FACULTAD CIENCIA AGRARIAS Y DEL AMBIENTE MICROBIOLOGIA
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

PRCTICA No 1

NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

1. INTRODUCCIN:

Un laboratorio de microbiologa es un lugar convenientemente habilitado donde se pueden manejar y

examinar microorganismos. Este tipo de trabajo debe ser llevado a cabo con una buena tcnica asptica
y por tanto se requiere de un ambiente limpio y ordenado y es por ello que se debe trabajar en
condiciones adecuadas de esterilidad.

2. OBJETIVOS:

Dar a conocer a los estudiantes de microbiologa las normas de bioseguridad que se deben tener
en cuenta, para una correcta manipulacin de microorganismos en el laboratorio.

Minimizar los riesgos relacionados con una infeccin debido a mala manipulacin en el
laboratorio de microbiologa

3. MATERIALES Y/O INSUMOS, REACTIVOS, MAQUINARIA Y/O EQUIPOS

NOTA: Para cada laboratorio de manera individual, cada estudiante debe traer: Como elemento de
proteccin personal.
Nombre Cantidad
Bata manga larga con 1
cierre hasta el cuello y en
material antifluido.
Maquinaria y/o Equipos Guantes 2 Pares
Gafas de proteccin 1
Cofia o gorro 1
sharpie 1
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NOTA: Para cada laboratorio en grupo, los estudiante debe traer:

Nombre Cantidad
Asa redonda 1
Portaobjetos 1
Cubreobjetos 1
Alcohol de 96 1
Alcohol de 70 envasado n 1
atomizador entre 100-150
ml
Jabn detergente en un 1
recipiente de orina
Maquinaria y/o Equipos Jabn antibacterial para 1
lavarse las manos.
Esponja 1
Rollo de Scott de cocina 1
Cinta tirro de 1 cm 1
Rollo envoplast partido 4 1
veces
Fsforos o encendedor 1
Paquete de 20-50 hisopos 1
Bolsa de descarte 1
:

4. DESARROLLO O METODOLOGA DE LA PRCTICA:

Todos los microorganismos que sean manipulados deben considerarse patgenos aunque no lo sean y
por ello todos los cultivos deben ser manejados con precaucin. Es importante tener en cuenta dos de los
siguientes requisitos:

Se debe restringir la presencia de microorganismos en estudio a los recipientes, materiales de

laboratorio, cuadernos, lapiceros y medios de cultivos estriles con el fin de evitar el riesgo por
contaminacin.

Evitar que los microorganismos ambientales presentes en la piel, pelo, aire, ropa, etc.,
contaminen las muestras obtenidas durante los procedimientos.

4.1 BUENAS PRCTICAS EN EL LABORATORIO:

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a. Todo el personal que ingrese al laboratorio de microbiologa debe conocer y estar en capacidad de
actuar de acuerdo a cada una de LAS NORMAS DE BIOSEGURIDAD EXIGIDAS PARA EL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGA.

b. Es indispensable el uso de bata (se recomienda manga larga y en tela antifluidos), guantes,
tapabocas y gafas protectoras.

c. Al inicio y al final del laboratorio, lavarse las manos con agua y jabn antibacterial
preferiblemente.

d. Antes de comenzar es conveniente desinfectar la superficie de trabajo teniendo en cuenta las

concentraciones de los desinfectantes y detergentes.

e. El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y organizado. Cualquier material que no se utilice en
la realizacin de la prctica (lpices, cuadernos, bolsos, etc.), debe estar apartado del lugar del
trabajo.

f. Trabajar con calma y concentracin y teniendo en cuenta todas las recomendaciones de manejo
dadas por el docente.

g. Est terminantemente prohibido comer, beber, fumar y maquillarse. Cuando se manipulan

microorganismos hay que evitar llevarse las manos a la boca nariz, ojos u odos. Si es necesario
hacerlo se deben lavar los guantes y descartarlos y posteriormente lavarse las manos.

h. Se deben retirar objetos que se tengan en las manos tales como anillos, relojes, pulseras, etc.

i. No se debe pipetear con la boca, utilizar siempre pipeteadores manuales o pipetas automticas.

j. El asa debe ser esterilizada en llama (hasta que est roja) antes del iniciar el trabajo, entre repique
y repique y al terminar el trabajo.

k. Los microorganismos SIEMPRE deben manejarse siempre alrededor de la llama del mechero o en
una campana de seguridad.

l. Teniendo en cuenta que uno de los mayores riesgos en el laboratorio de microbiologa es la

generacin de aerosoles pues en stos pueden ir microorganismos o esporas de stos, por lo tanto,
se deben evitar las operaciones bruscas en las que se manejan lquidos y que puedan generar
aerosoles: centrifugaciones, vertidos rpidos (pipeteos y trasvases, etc.).
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m. Es conveniente evitar movimientos bruscos, desplazamientos innecesarios en el laboratorio o

trabajar con ventanas abiertas que generen corrientes de aire que originen contaminaciones o
produzcan accidentes.

n. El transporte y almacenamiento de placas y recipientes que contienen cultivos representan un riesgo

evidente; por lo tanto, al sacar el material de la incubadora o al introducirlo en ella se debe realizar en una
sola operacin.

o. Cuando el material se coloque en la incubadora se debe tener especial cuidado de que este se ubique de
manera segura para que no se caiga y se produzcan derrames.

p. No se debe sacar ninguna muestra contaminada del laboratorio.

q. El material contaminado NO se debe descartar en la fregadera, papelera o basura comn. Todo material
contaminado se debe esterilizar en el laboratorio antes de procesarlos como residuos.

Por ejemplo: el material contaminado contenido en cajas de Petri se debe autoclavar antes de tirarlo a la
basura, el material de vidrio contaminado (portaobjetos, tubos, etc.) se debe autoclavar para luego lavar,
secar y volverse a emplear.

El material corto punzante (agujas, lancetas, etc.) se debe descartar en contenedores

r. En un laboratorio de microbiologa debe estar disponible un botiqun bsico de primeros auxilios.

s. En caso de accidente (rotura o derrame del contenido de un tubo o recipiente que contenga
microorganismos) se debe avisar inmediatamente al auxiliar o asistente del laboratorio, dejando una persona
responsable que vigile para evitar que otros se contaminen. El derrame debe cubrirse con un lquido
desinfectante.

t. El suministro de gas para los mecheros de Bunsen requiere tomar las precauciones propias de estas
instalaciones.

Los escapes de gas son muy peligrosos, por lo tanto, hay que asegurarse de cerrar todas las llaves de paso de gas
al finalizar el trabajo, evitar la presencia de sustancias inflamables y revisar peridicamente las conducciones.
Cuando se maneja ste tipo de mecheros, se deben tener detectores de humo, extintores y mantas ignfugas
fcilmente visibles desde cualquier lugar del laboratorio. Los extintores se emplean sobre objetos pero, por su
potencia pueden derribar los recipientes con disolventes, por lo que conviene cerrar el gas de la zona. Las mantas
se usarn sobre la persona cuya ropa se haya incendiado o sobre el que haya cado un disolvente inflamado.
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u. Normalmente los mecheros de Bunsen tienen un regulador de entrada de la cantidad de aire con el que hay
que obtener una mezcla de aire-gas, de forma que la llama tenga la temperatura suficiente. Las llamas
fras son anaranjadas y se ven bien, pero no esterilizan; las llamas muy calientes son de un azul
prcticamente invisible, lo cual supone un riesgo si no se trabaja con cuidado, pero esterilizan.

v. En un laboratorio de microbiologa es frecuente el empleo de disolventes inflamables (alcohol, acetona,

xylol, etc.). Es conveniente tener los recipientes con este tipo de disolventes sobre una pequea bandeja de
forma que si se incendia y se derrama, el disolvente no se extienda por el laboratorio.

w. Cuando se trabaje con luz ultravioleta debe tenerse en cuenta que la exposicin a este tipo de radiacin es
peligrosa, puede producir graves quemaduras e incluso tiene poder mutagnico. Por lo tanto, nunca se debe
mirar al foco emisor. Debern protegerse los ojos con gafas y cualquier zona de la piel expuesta a la
radiacin con guantes, mscaras, etc.

4.2 CLASIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS INFECCIOSOS POR GRUPOS DE

RIESGO

Grupo de Riesgo 1: Riesgo individual o poblacional escaso o nulo:

Tienen pocas probabilidades de provocar enfermedades en el ser humano o los animales.

Grupo de Riesgo 2: Riesgo individual moderado, riesgo poblacional bajo:

Agentes patgenos que pueden provocar enfermedades humanas o animales pero tienen pocas
probabilidades de entraar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la poblacin el ganado
o el medio ambiente. La exposicin en el laboratorio puede provocar una infeccin grave pero
existen medidas preventivas y teraputicas eficaces y el riesgo de propagacin es limitado.

Grupo de Riesgo 3: Riesgo individual elevado, riesgo poblacional bajo:

Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades humanas animales graves, pero que de
ordinario no se propagan de un individuo a otro. Existen medidas preventivas y teraputicas
eficaces.

Grupo de Riesgo 4: Riesgo individual y poblacional elevado:

Agentes patgenos que suelen provocar enfermedades graves en el ser humano o los animales y
que se transmiten fcilmente de un individuo a otro, directa o indirectamente. Normalmente no
existen medidas preventivas y teraputicas eficaces.

4.3 RELACIN DE LOS GRUPOS DE RIESGO CON LOS NIVELES DE BIOSEGURIDAD,

LAS PRCTICAS Y EL EQUIPO
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Los laboratorios se clasifican de acuerdo al nivel de bioseguridad basado en una combinacin de las
caractersticas de diseo, medios de contencin, equipo, prcticas y procedimientos de operacin
necesarios para trabajar con agentes patgenos de los distintos grupos de riesgo. En el siguiente cuadro
se relacionan, no se equiparan, los grupos de riesgo con el nivel de bioseguridad de los laboratorios
destinados al trabajo con microorganismos de cada uno de esos grupos.

5. INFORME TCNICO (Ver Anexo 1):

El informe de los resultados se redactara considerando un formato de artculo de investigacin (Ver

Anexo 1).
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6. CUESTIONARIO:

Teniendo en cuenta la informacin presentada en la gua No 1, realice un anlisis sobre el

laboratorio de microbiologa, determine los riesgos que se presentan y la forma de prevenirlos.

Establezca en qu nivel de riesgo y en qu nivel de bioseguridad se encuentra el laboratorio de

microbiologa.

Investigue la diferencia entre desinfeccin y esterilizacin.

Que mtodos de tipo fsico y qumicos se utilizan para realizar una correcta desinfeccin.

Investigue lo que significa desactivacin de baja, mediana y alta eficiencia. En qu casos aplica
cada uno de stos procesos y como se lleva a cabo.
El hipoclorito de sodio o cloro es el desinfectante universal y se presenta en la forma comercial
en una concentracin entre el 4% y el 6%. Si usted desea realizar la desinfeccin de mesones del
laboratorio y limpieza de equipos, se requiere una concentracin entre 0,5% y 1% o sea entre 500
y 1000 ppm. Explique cmo realizara la dilucin para preparar 1 lt de hipoclorito de
concentracin 0,05% o 500 ppm

Tenga en cuenta que esta es la solucin que se va a preparar para todos los laboratorios que se
realicen de microbiologa.

Explique los siguientes mtodos de esterilizacin utilizados en el laboratorio de microbiologa:

Esterilizacin por calor hmedo
Esterilizacin por calor seco

Qu tcnicas de las anteriores se utilizan para esterilizar: vidriera, medios de cultivo, material de
pasta, etc.
De los siguientes equipos de laboratorio, pegue una imagen y describa su funcionalidad en
microbiologa.
Autoclave
Incubadora
Incubadora de anaerobiosis
Cabina de flujo lamina
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7. BIBLIOGRAFA DE APOYO:

GAMAZO, LOPEZ GOI y DAZ. Carlos, Ignacio y Ramn. Manual Prctico de Microbiologa. Masson.
Tercera edicin. Barcelona Espaa 2005. [En Lnea] http://books.google.com.co/books?
id=MfW3TuHLa4gC&pg=PR4&lpg=PP1&hl=es#v=onepage&q&f=false

MINISTERIO DE SALUD. Conductas Bsicas en bioseguridad: Manejo Integral. Santa Fe de Bogot, D.C.
Abril de 1997. [En Lnea] http://www.ecocapitalinternacional-sa.com/descargas/Manual%20de
%20Bioseguridad.pdf

ORGANIZACIN MUNDIAL DE LA SALUD. Manual de Bioseguridad en el Laboratorio. Tercera Edicin.

Ginebra. 2005. [En Lnea] http://www
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ANEXO No 1

INSTRUCCIONES PARA EL REPORTE CO FORMATO DEL ARTICULO (ESTRUCTURA)

El reporte se debe entregar en 6 cuartillas como mximo, a doble columna, con letra Times Romn de tamao 11.
Deber contener las siguientes secciones:

TITULO. EN INGLS Y ESPAOL

Nombre de los autores ( integrantes del equipo)

Resumen. En espaol (opcional en ingls). Indicando importancia del estudio, objetivo, metodologa y
resultados. No mayor de 150 palabras.

INTRODUCCION

Informacin que se proporciona al lector de manera general sealando la importancia del estudio y lo que se
abordara en el reporte.

ANTECEDENTES

Informacin directamente relacionada con lo que se trabaja experimentalmente (propiedades de la materia prima,
efectos reportados de las tecnologas poscosecha aplicadas, etc.). Permite comprender y justificar el fundamento de
los mtodos y procedimientos de trabajo experimental que se sigue y explicar las causas de los resultados
obtenidos.

Como citar en el texto: (Aspinall 1980), (Angulo y Espinoza, 2001), (Grant et al., 2003).

OBJETIVOS
Debe responder a las preguntas

Por qu se hace el trabajo experimental?

Para qu se hace el trabajo experimental?

METODOLOGIA

Descripcin de las caractersticas del material experimental: Materia prima; incluye informacin de la especie con
su nombr cientfico y comn, variedad, fecha de corte, condiciones sanitarias, aspecto (sano, color, frescura,
defectos, etc.).
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TAMAO DE LA MUESTRA Y NUMERO DE REPETICIONES

Grficas, con nmero arbigo consecutivo y con ttulo en la parte superior.

Mtodos analticos utilizados (cualitativo, cuantitativos).
Fundamento de las tcnicas. (incluirlo en la gua).
Procedimiento (esquematizado en diagrama de bloques).
Clculos realizados (cuando proceda). Consulte el Apndice.

RESULTADOS

Los resultados de los parmetros medidos se presentaran en el mismo orden en que se describieron en la
metodologa.
Cuadros con nmero arbigo consecutivo y con ttulo en la parte superior.
Datos de promedios y desviacin estndar. Figuras con nmero arbigo consecutivo y descripcin en la
parte inferior.
Fotografas identificadas.
Grficas, con nmero arbigo consecutivo y con ttulo en la parte superior.
Mtodos analticos utilizados (cualitativo, cuantitativos).
Fundamento de las tcnicas. (incluirlo en la gua).
Procedimiento (esquematizado en diagrama de bloques).
Clculos realizados (cuando proceda). Consulte el Apndice.

DISCUSIN
Anlisis de os resultados con base a los objetivos y a los antecedentes planteados.

CONCLUSIONES
Presentados en orden de importancia.

REFERENCIAS
Se enlistaran en orden alfabtico enlistado con sangra francesa y con el formato siguiente:

Artculos:
Autor(es). Ao. Titulo. Nombre Revista Vol. No. Pp.

Ejemplo:
Watada. A.E., Hemer. R.C., Kader, A.A., Romani, R.J. and Staby, G.L. 1984. Terminology for the
description of developmental of hor- ticultural crops. HortScience 19:20-21

Libros:
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Autor(es). Ao. Titulo. Edicin. Editorial. Lugar de publicacin. Vol. pp.

Ejemplo:
Casp. A, Abril, j. 2003. Procesos de conservacin de alimentos. 2. Edicin. Ediciones Mundi-Prensa. Madrid,
Espaa. pp. 494

Direcciones de internet:
Ttulo del documento consultado. Encontrado en pgina web. Consultado: La fecha de consulta.

Ejemplo:
Poscosecha de Productos Agricolas. Encontrado en:
http://poscosechacombia.blogspot.com.co/2010/02/definicion-y-ambito-de-la-
poscosecha.html. Consultado el 5 de septiembre del 2017.
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PRCTICA No 2

TECNICAS DE ANALISIS PARA LA DTERMINACION DE LA CALIDAD DE LOS PRODUCTOS

HORTOFRUTICOLAS FRESCOS.

1. INTRODUCCIN:

2. OBJETIVOS:

El alumno ser capaz de determinar los parmetros fsicos y qumicos de diferentes frutos en
diferentes estados de madurez.

El alumno ser capaz de clasificar los parmetros determinados en cada producto en objetivos,
subjetivos, destructivos y no destructivos, indicando cuales identifican mejor el estado de
madurez y calidad en cada especie trabajada.

El alumno ser capaz de explicar el fundamento de los instrumentos y tcnicas empleadas en las
determinaciones anteriores.

El alumno ser capaz de analizar y discutir los resultados obtenidos con respecto a la
informacin sobre madurez y calidad reportada por la literatura para las especies trabajadas.

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